Slides presentate dalla dr.ssa Andrea Dardis, responsabile del Laboratorio del Centro Malattie Rare di Udine, al corso "La malattia di Fabry: conoscere per riconoscere", Udine, 17 giugno 2015.

1. Aspetti biochimici e molecolari della
malattia di Fabry
Andrea Dardis, PhD
Centro di Coordinamento Regionale per le Malattie Rare
University Hospital “Santa Maria della Misericordia”
Udine, Italy

2. Malattia di Fabry
• Malattia da accumulo lisosomiale
• 1:40.000 maschi
• Causa: deficit dell’enzima alfa-galattosidasi A (AGAL-A)
• Deputata alla degradazione di Globotriaosilceramide
(Gb3) e Globotriaosilsfingosina (LysoGb3) nei lisosomi

3. Lisosoma
Sfingosine
Sfingosine
Globotriaosylsphingosine (LysoGb3)
Lactosylsphingosine

4. Sintesi e trasporto di AGAL-A

5. X linked: Gene GLA (Xq22.1)
XY
Donne portatrici in eterozigosi, come conseguenza
dell’inattivazione casuale del X, possono essere asintomatiche o
sviluppare sintomi.
XX
Maschi emizigoti sono affetti

6. Diagnosi enzimatica
Determinazione dell’attività dell’enzima AGAL-A nelle cellule del paziente
affidabile e rapida
Non informativa nelle femmine
XY Maschi emizigoti presentano un’attività della AGAL-A chiaramente
patologica (<5%)
XX Come conseguenza dell’inattivazione casuale dell’ X, l’
attività enzimatica può risultare alterata o nella norma.

7. Diagnosi molecolare
Conferma diagnostica nei maschi
Diagnostica nelle femmine
Consulenza genetica
Gene GLA
gDNA: 13 kb; 7 esoni
cDNA: 1290 pb
Proteina: 429 aa (31 aa signal peptide)
Circa 700 varianti nel gene GLA!!
La maggior parte puntiformi
Delezione o duplicazione

8. Mutazioni patogenetiche:
Mutazioni missenso- Analisi funzionale (p.C52, p.G183A, p.Y216C,
p.C172G, pD264Y)
Mutazioni non senso
Frameshift
Polimorfismi: p.D313Y
p.E66Q
Mutazioni missenso non riportate in letteratura:
Analisi di 100 alleli normali
Analisi in silico
Funzionale.
Le varianti del gene GLA

9. Criteri proposti per definire la diagnosi di malattia di
Fabry classica
Van der Tol et al, J Med Genet , 2014

10. Variati atipiche
Segni clinici aspecifici
Attività residua della AGAL-A in leucociti >5%
Varianti genetiche di significato incerto (GVUS):
p.A143T
p.R112H
p.R118C
ecc
Non trovati in pazienti con la forma classica di Fabry
Dati controversi
Attività residua in vitro 30-40%
Dosaggio in plasma di LysoGb3 Suggestivo di FD
N Non esclude FD però
in maschi, FD altamente improbabile
Imaging e prove funzionali
Biopsia dell’organo affetto

11. X Y X X
XY XX XXXY
Gene GLA (Xq22.1)
Padre Madre portatrice
Figlio sano
(25%)
Figlia sana
(25%)
Figlio Affetto
(25%)
Figlia portatrice
(25%)

12. X Y X X
XY XX XXXY
Padre affetto Madre
Gene GLA (Xq22.1)
Tutti i figli maschi saranno sani
Tutte le figlie femmine saranno portatrici

13. Diagnosi prenatale
E’ possibile quando c’è un paziente diagnosticato in famiglia
Malattie X linked: le donne portatrici hanno una probabilità ½ di
trasmettere il gene mutato ai figli
50% dei maschi affetti 50% delle femmine portatrici
Diagnosi prenatale solo nei maschi