Presentación seminario correspondiente

1. SILVIA F. RODRIGUEZ PITRE
THIRD SEMESTER
2020-1
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2. INTRODUCTION
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Hemotropic mycoplasmas
(hemoplasmas)
Are uncultivable bacterias that
parasitize the red blood cell surface of a
large number of vertebrates, they are
usually characterized by hemolytic
anemia in susceptible species.
In whom?
• Hematophagous arthropods
• Hematophagous bats
• In wild animals as:
canids, felids, and non-human
primates.

3. INTRODUCTION
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In Cats: Mycoplasma haemofelis (Mhf), Candidatus M.
haemominutum (CMhm) y Ca. M. turicensis (CMt)
In Dogs: M. haemocanis (Mhc) y Ca. M. haematoparvum
(CMhp).
In bats: Mycoplasma sp, Sturnira lilium, Eptesicus spp,
Eumops auripendulus, Myotisnigricans , Glossophaga
soricina, Molossus rufus, Candidatus Mycoplasma
hemohominis.
Clinical Picture:
• Anemia
• Febrile syndrome
• Lymphadenohaties
• Hepatomegaly
• Jaundice

4. OBJECTIVE
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This study aimed to
evaluate the presence of
hemotropic mycoplasma
species in free-ranging bats
from this area using a
universal PCR protocol for
hemoplasmas

5. MATERIALES Y METODOS
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Por puncion
intracardiaca
MUESTREO X8: Machos
La captura se realizó con una red de niebla
colocada en las salidas de la cueva de las rutas de
vuelo de murciélagos, de 6 pm a 9 pm.
La captura se dio en dos cuevas en la ciudad de Rio Branco do
Sul, estado de Paraná.
Fue parte del programa de monitoreo de la rabia en
herbívoros.
x6: Desmodus rotundus; Familia Phyllostomidae
x2: Diphylla ecaudata; Familia Phyllostomidae
Murcielagos no
hemofagos
Finalmente los murcielagos fueron
eutanasiados con cloruro de potasio
intracardiaco.
X10
Molossus spp; Familia Molossidae
Para vigilancia de la rabia
X2: Hembras

6. MATERIALES Y METODOS
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DETECCION MICROSCOPICA
Fundamento: utilizan microscopios opticos
o electronicos que usan lentes, para enfocar y
agrandar los rayos de luz que pasan a través
de un espécimen. Pueden utilizarse diversas
coloraciones, en el presente estudio se utiliza
Giemsa (azul de metileno, azure y eosina).
Utilidad: para aumentar las imágenes de
objetos, tejidos y demas, no visibles a simple
vista. En este caso el extendido de sangre.
PCR (reaccion en cadena de polimerasa)
Fundamento: reaccion enzimatica por medio de
una polimerasa que Su objetivo es obtener un
gran número de copias de un fragmento
de ADN particular, partiendo de una única copia
de ese fragmento original, o molde.
Utilidad: En este caso
- 200 μL de sangre Gliceraldehido-3-
fosfato deshidrogenasa
- A Temperaturas y tiempos adecuados.
- Se sometieron a electroforesis y se
observaron bajo un transiluminador de luz
UV de 312 nm

7. MATERIALES Y METODOS
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SECUENCIACION DEL GEN 16S DNAr DE MYCOPLASMA SP.
Fundamento: El proceso que determina la secuencia de bases de los nucleótidos (As, Ts, Cs y Gs) de un
fragmento de ADN. Requiere romper el ADN del genoma en muchos pedazos más pequeños, secuenciar
dichos pedazos y ensamblar las secuencias.
Utilidad:
Se secuenciaron los genes
utilizando cebadores
universales.
Los productos de la PCR se
purificaron utilizando perlas
magneticas
Se evaluaron mediante
espectofotometria
(concentracion y
pureza)
Se secuanciaron
por el metodo
de Sanger

8. 1
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3
4
RESULTS
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A total of eight (8/10) blood samples were positive by the
conventional pan-hemoplasma PCR targeting the 16S
rDNA gene.
One (1/2) non-hematophagous Molossus sp. female bat
was positive.
All samples were tested negative for rabies virus

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4
5
RESULTS
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The PCR amplicons from all positive samples were
sequenced in both forward and reverse directions, with
approximately 700–900 base pair quality.
The hemoplasma infection was detected in seven male
hematophagous bats, five (5/6) Desmodus rotundus, and
two (2/2) Diphylla ecaudata.

10. The Power of PowerPoint | thepopp.com 10

11. DISCUSSION
The Power of PowerPoint | thepopp.com 11
R.C. Woese et al.
(1987)
B. Willi
F.S. Boretti,
S. Tasker
J.L.N. Wood,
M. Leach,
L. Waldman
l The use of “universal” primers for the detection of
bacterial species and differentiation based on
sequencing is possible due to the presence of highly
conserved and hypervariable nucleic acid
sequences, respec- tively, such as the regions in the
16S ribosomal RNA (rRNA)
l The role of hematophagous and non-
hematophagous bats in the transmission of
hemoplasmas in rural and urban areas, respectively,
should be further investigated mainly due to the
close contact of bats with other wild and domestic
animals and human beings.
l There are no such studies using bats. In
addition, there is a possibility of interspecies
transmission based on the fact that
hemoplasmas phylogenetically similar are
present in different host species.

12. CONCLUSIONS
The Power of PowerPoint | thepopp.com 12
I believe that this same study, wich is just as
satisfactory, should also be carried out on
other species of animals, different from
those already mentioned, so that there is no
contagion between them and avoid
morbidity.
Although the study is in another country and the
affected animals are there, this study should be
carried out in Colombia, since here there are
also those species of bats and other types of
animals that remain close to the inhabitants,
which can be infected.

13. The Power of PowerPoint | thepopp.com 13
MICOPLASMAS
HEMOTROPICOS
(HEMOPLASMAS)
¿QUE SON?
Bacterias Gram negativas
incultivables que parasitan la
superficie de los eritrocitos de
los vertebrados.
¿DONDE SE
ENCUENTRAN?
- Artrópodos
hematopófagos
- Murciélagos
hematopófagos
- Caninos, felinos,
primates.
TIPOS
- Mycoplasma
haemofelis (Mhf)
- Candidatus M.
haemominutum (CMhm)
- Ca. M. turicensis (CMt)
- M. haemocanis (Mhc)
- Ca. M. haematoparvum
(CMhp).
- Mycoplasma sp
- Sturnira lilium
- Eptesicus spp
- Eumops auripendulus
- Myotisnigricans
-Glossophaga soricina
-Molossus rufus
-CandidatusMycoplasmahemohominis.
¿COMO
DETECTARLOS?
PCR
Deteccion
microscopica con
frotis sanguineo
Secuenciacion de
Genes
¿COMO SE
OBSERVAN ?
Transimision mecanica
(por vectores) o directa.
En forma de cocos,
bacilos o en forma de
discos
¿DONDE?
En la membrana
de los globulos
rojos
¿QUE GENERA?
- Anemia
- Sindrome febril
-Hepatomegalia
-Linfadenopatias
-Ictericia