Transformasi genetik adalah proses dimana DNA asing masuk ke dalam sel penerima, menghasilkan sel rekombinan. Metode transformasi yang umum digunakan pada prokariot adalah heat shock, sedangkan untuk eukariot diperlukan metode lain karena struktur dinding selnya lebih kompleks. Tujuan transformasi adalah memasukkan plasmid ke dalam sel target dengan membuka dinding sel sesaat.

1. Teknik Transformasi
Memasukkan Plasmid ke dalam Mikroorganisme Induk

2. Transformasi
 Transformasi genetik adalah proses pengambilan
DNA asing oleh sel penerima, yang menghasilkan
sel transforman atau sel rekombinan. DNA asing
merupakan DNA yang dilepaskan oleh sel donor,
baik berupa fragmen DNA bebas atau fragmen DNA
yang disisipkan dalam suatu vektor (L. Snyder & W.
Champness, 1997).

3. Pengertian lain dari Transformasi
 Transformasi adalah
ekspresi materi genetik
asing yang masuk melalui
dinding sel. Pada
dasarnya dinding sel
berfungsi melindungi sel
dari masuknya benda-benda
asing termasuk
DNA,tapi dalam kondisi
tertentu,dinding sel ini bisa
memiliki semacam celah
atau lubang yang bisa
dimasuki DNA.

4. Faktor Penentu
 Jenis mikroba penerima
 Prokariot
 Eukariot
 Jenis energi
 Waktu

5. Goal
 Membuka dinding sel mikroba
sesaat (kurang dari satu
detik)
 Dinding sel harus kembali
bersatu, kalau tidak mikroba
mati
 Plasmid masuk pada saat
dinding sel terbuka

6. Sekilas tentang Dinding sel
 Struktur fosfolipid bilayer
pada membran plasma
mempunyai sisi luar yang
bersifat hidrofobik dan sisi
dalam yang hidrofobik.
Gugus hidrofobik
berinteraksi dengan gugus
hidrofobik lainnya untuk
memperkuat struktur
membran. Struktur ini
menyebabkan berbagai
molekul polar, termasuk
DNA dan protein, tidak
dapat melewati membran
tersebut.

7. Metoda Transformasi
 Terdapat perbedaan metoda untuk prokariot dan
eukariot
 Heat shock adalah metoda yang paling umum
dipakai untuk prokariot
 Karena eukariot lebih kompleks sruktur dinding sel
yang artinya lebih keras, maka lebih banyak metoda
yang dapat dipakai

8. Jenis-jenis transformasi
 Heat shock
(kejutan panas)
 Mendinginkan 
memanaskan
dan
mendinginkan
kembali–
bakteri,maka DNA
dapat masuk ke
dalam sel.
 Teknik ini ditemukan oleh
trio peneliti Stanley
Cohen,Annie Chang,Leslie
Hsu pada tahun 1972.

9. Jenis-jenis transformasi
 Elektroforasi
mengejutkan sel
bakteri dengan
medan listrik
berkekuatan tinggi
(10-20 kV/cm).
Saking
terkejutnya,akan
terbentuk lubang-lubang
pada dinding
sel yang bisa
diterobos DNA
plasmid berukuran
besar dan kemudian
lubang tersebut
akan tertutup
dengan sendirinya.

10. Metoda Lain
 protoplas-polietilenglikol/PEG
 mediasi Agrobacterium
 mikropresipisitat,
 fusi DNA dalam liposom,
 vektor biologis maupun metode tranformasi balistik
menggunakan gene gun.
 Transformasi biolistik (microprojectile bombardment)

11. Mari kita lihat video berikut