The document describes a study on determining fungi present in Rumex acetocella and improving it for treating mining waste. The primary objectives were to determine the presence of endomycorrhizae in R. acetocella and characterize them through simple staining. Secondary objectives were to obtain suitable culture media to later improve an environmental liability and verify metabolic activity under anaerobic conditions. The document outlines the microbial groups involved in anaerobic digestion including hydrolytic, acetogenic, and methanogenic bacteria. It also summarizes the results of the study which identified endomycorrhizae and various methanogenic bacteria through culturing and microscopy techniques. Suggestions for improving the process include using iron filings

1. FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE
 ESCUELA PROFESIONAL INGENIERIA
AMBIENTAL
DETERMINACIÓN DE HONGOS EN LA RUMEX ACETOCELLA Y SU
MEJORAMIENTO PARA EL TRATAMIENTO DE PASIVOS MINEROS
AUTORES:-
 PEREZ MORALEZ VENANCIO
 MINAYA HUERTA WUAGNER
 OSORIO OBREGON LINDERMAN
 VILLAVICIENCIO GUILLEN EDUARDO

2.  En el trascurso del curso de microbiología hemos visto lo que implica
los hongos en determinados

3.  Primarios:
 Determinar la presencia de endomicorrizas presente
en las rumex acetocellapara.
 Caracterizar las endomicorrisas mediante la coloracion
simple )
 Secundarios:
 Obtener el medio de cultivo adecuado para luego
pasar ala mejora de un pasivo anbiental Verificar la
actividad metabolica en condiciones anaerobias, lo
cual es el fundamento de los biodigestores.
 Desarrollar los aprendizajes del curso de microbiología
ambiental, como las técnicas de siembra y conteo,
coloraciones, etc


4.  Las bacterias que participan en esta etapa son las
Hidrolíticas, que producen:
 ácido acético, compuestos monocarbonados,
ácidos grasos orgánicos y otros compuestos
policarbonados.
 Ejemplos: Las enterobacterias (E.coli: tienen una
enzima formiato liasa responsable de la generación de
hidrógeno a partir de formiato), bacterias
aerotolerantes como las bacterias del ácido láctico, y
bacterias anaerobias estrictas (Clostridium),
Bacteroides, Propionibacterium y Selenomonas. Las
bacterias del ácido láctico producen a partir del azúcar
ácido láctico y etanol dependiendo si son homo o
heterofermentativas.

5. Las moléculas orgánicas solubles son fermentadas la función de
estos microorganismos en el proceso de la digestión anaerobia es
ser donantes de hidrógeno, CO2 y acetato para las bacterias
metanogénicas. Existen dos tipos de microorganismos:
o Las bacterias Homoacetogénicas; producen acetato, las
cuales fermentan el acetato como único metabolito.
 Las bacterias Acetogénicas; las que metabolizan los productos
terminales de la etapa acetogénica y necesitan asociarse
estrechamente a microorganismos consumidores de hidrógeno.
 Las bacterias sulfato reductoras, este tipo de
microorganismos se da por oxidación de compuestos orgánicos,
y reducción de sulfato a sulfuro. Se subdividen en dos grupos:
 Oxidadores completos; que producen CO2, H2O y
sulfuro.
 oxidadores incompletos; cuyos productos son acetato,
CO2 y sulfuro.

6.  La metanogénesis es el punto final del proceso, donde actúan
las bacterias metanogénicas, pertenecen al Reino de las
Arquebacterias, y de acuerdo a los sustratos que pueden
degradar, se dividen en:
 Hidrogenotróficos: Estas bacterias son capaces de producir
metano a partir de hidrógeno como dador de electrones y
anhídrido carbónico como fuente de materia orgánica.
Ejemplo (Methanobacterium, Methanospirilum,
Methanobrevibacter.)
 Metilótrofos: Metabolizan compuestos como metilaminas y
metilsulfuros.
 Acetoclásticos: Producen metano y anhídrido carbónico a
partir de acetato.
 Relación carbono/ nitrógeno:

7.  La temperatura:
Tabla 1. Relación entre el periodo de fermentación y la temperatura
 Control PH
Tabla 3. pH óptimo en la producción de biogás.
 1.-Preparacion del biodigestor
 2.-Recoleccion de la muestra
 3.-Aislamiento de los microorganismos
 4.-Identificacion de los microorganismos
 5.-Determinacion de coliformes
Temperatura °C 8 10 15 20 27 37
Tiempo (días) 120 90 60 45 38 30
Valor de pH Etapa hidrolítica Etapa metanogénica
Valor típico 5.0 - 6.0 6.5 - 7.5
Valor óptimo 5.5 - 5.7 6.8 - 7.2

8.  DETERMINACION DE ENDOMICORRSAS:
 Interpretacion: Entendemos que en nuestra muestra
aun hay presencia de coliformes en una proporción de
1100 x 104 NMP coliformes /100ml esto debido a que
para la elaboración del biogás utilizamos estiércol. Estos
microorganismos sirven de alimento para las bacterias
formadoras de metano.
Numero de
dilución
-1 -2 -3 -4 -5
Numero de
tubos positivos
3 3 3 3 2

9.  SIEMBRA POR DILUCIONES:
 COLORACIONECOLORACION SIMPLE: (montaje
húmedo)
 Montaje: Húmedo
 Observación: Penicillium

 Montaje: Húmedo
 Observación: Trichodermo
MUESTRA RESULTADO
𝟏𝟎−𝟓
(primera siembra) 360 X0105
ufc
𝟏𝟎−𝟓
(segunda siembra) 368. X0105
ufc

10.  Observación:
 Sarcinas - Gram + (cuatro)
 Sthapylos - Gram + (racimos de uva)
 Sthapylos - Gram + (cadenas)
 Cocos - Gram –

 Observación:
 Bacilos - Gram + (Metano bacilos)
 Observación:
 Bacilos - Gram +
 Observación:
 Bacilos - Gram +
 Cocos - Gram +
 COLORACION GRAM: ( montaje seco)

11.  Observación:
 Cocos - Gram +
 Observación:
 Bacilos - Gram +
 Cocos - Gram +
 Observación:
 Bacilos - Gram +
(Methanobacterium)

12.  Metanobacteriaceae: La mayoría son Gram positivos,Bacilos
largos o cortos( H2,CO2 y algunas formato o alcoholes como
substratos),cocos (que utilizan sólo H2 o metanol).
 Metanotermaceae: Son Gram positivos, termofílicos
extremos, Bacilos(H2 y CO2).
 Metanococcaceae: Gram negativos; Cocos irregulares, (H2 +
CO2 y formato).
 Metanomicrobiaceae: Gram negativos, Bacilos, espirilos,
placas o cocos irregulares, (H2 y CO2 y algunas formato o
alcoholes)
 Metanocorpusculaceae: Gram negativos, cocos irregulares;
(H2 y CO2 y algunas formato o alcoholes)
 Metanosarcinaceae: Gram positivos o negativos,
Pseudosarcina, cocos irregulares; (H2 y CO2, acetato,
compuestos metílicos Y nunca formato); cocos (H2 o
metanol)

13.  Al obtenerselas endomicorrisas se paso
metano comprobamos que se desarrollaron
colonias de bacterias metanogénicas.
 Comprobamos que al ser aislada la muestra
se obtuvieron bacterias metano génicas Gram
+
 Se obtuvieron coliformes ya que estas son
eliminadas completamente en un tiempo más
prolongado

14.  Se puede utilizar limaduras de fierro para
mejorar la descomposición.
 Se puede utilizar un medio de cultivo como
el medio de tioglicolato enriquecido que se
utiliza para el cultivo y aislamiento de
bacteria anaeróbicas obligadas o de
crecimiento lento.
 El estiércol es secado al medio ambiente, se
pierde alrededor de un 50% del nitrógeno es
recomendable utilizar el estiércol fresco.