1. Radioimmunoassay (RIA)
Oleh
Ahmad Fadli
96859/2009
Pendidikan Biologi

2. A. Pendahuluan
O Radioimmunoassay pertama kali dikembangkan
oleh Rosalyn Yalow dan Solomon A. Berson dari
amerika serikat, pertama kali mereka bekerja
untuk mempelajari tentang hormon khususnya
insulin yaitu hormon yang mengatur kadar gula
dalam darah

3. O Radioimmunoassay adalah teknik nuklir
yang banyak digunakan untuk mengetahui
konsentrasi hormon.
O Pengujian ini menggunakan antibodi yang
spesifik untuk hormon sebagai protein
terikat

4. B.Prinsip RIA
O Prisip dasaranya dalah reaksi antara
antigen dan antibodi di dalam reaksinya
adalah sifat kekhususannya
O sebuah antigent yang bereaksi dengan
antibody yang spesifik untuknya dan tidak
mengadakan reaksi silang (cross reaction)
dengan tipe antigent yang sama.
O Bahan pereaksi dalam radioimmunoassay
ialah antigen radioaktif dan antibody
spesifik.

5. O Dasar kerja RIA adalah Untuk mengetahui
perbandingan konsentrasi antibody yang
terdapat pada bagian dalam tabung dan
antigen yang terdapat didalam sampel
dengan menggunakan radio aktif.
O Persaingan konsentrasi antigen sampel
dapat ditentukan dari reaksi reduksi
pengikatan konsentrasi antigen dari
antibody yang terdapat pada bagian
dalam tabung.

6. O Prinsip RIA sederhana yaitu: isotop di mix
dengan antibodi kemudian disisipkan pada
sampel darah pasien.
O Substansi non radioaktif dalam darah akan
menggantikan posisi radioaktif pada antibodi
yang mengakibatkan radioktif lepas.
O Radiaoktif yang bebas ini kemudian diukur
untuk menentukan berapa banyak substansi
dalam darah
O Anti serum untuk hormon yang diuji harus
memiliki spesifik yang tinggi

7. Metode radioimmunoassay (RIA)
O Prinsip non kompetitif
O Yang paling banyak di gunakan adalah
sandwich.
O Prinsip dasar dari sandwich adalah reaksi
suatu antibodi dalam konsentrasi yang
terbatas dengan berbagai konsentrasi
antigen

8. O Prinsip Kompetitif
O Sejumlah tertentu antibodi diimobilisasi
(ditempelkan) pada suatu fase padat
misalnya dinding tabung plastik.
O Sampel pasien yang mungkin
mengandung biomolekul (misalnya
patogen) ditambahkan bersama dengan
sejumlah tertentu biomolekul berlabel
radioaktif yang akan berinteraksi dengan
antibodi yang timbul.

10. Keuntungan dan Kerugian
O Keuntungan metode RIA adalah :
O Sensitivitas dan presisi yang tinggi
O Mudah dikerjakan
O Pekerjaannya lebih cepat dan tidak
memerlukan sampel yang besar.
O Kerugian metode RIA adalah :
O Reagen kurang stabil
O Memerlukan proteksi terhadap bahan
radioaktif (radioactive hazardous)

11. Prosedur Kerja RIA
O Darah masing-masing di pipet 100 ul dan di masukkan ke
dalam tabung yang telah di lapisi oleh lapisan
progesteron antibody yang telah diberi label.
O Tambahkan 1 ml radio isotop 125 I Progesteron lalu
kocok dengan menggunakan vortex mixer kemudian
tutup dengan plastic para film dan disimpan selama 24
jam pada suhu kamar.
O Setelah disimpan larutan radio isotop di buang kedalam
botol khusus, tabung dikringkan dengan cara dibalik.
Selanjutnya progesteron di cacah dengan gama coanter.
O Presentase pengikatan progesteron dalam sampel oleh
progesteron antibody spesifik dapat di ketahui dengan
membandingkan hasil cacahan 125 I Pada tabung
berlapis antibody tanpa sampel (control).