Spektrofotometer Tugas Kelompok Instrumentasi Biologi

1. INSTRUMENTASI BIOLOGI
SPEKTROFOTOMETER
KELOMPOK 4
Universitas Diponegoro
Biologi
1. Sinta Nurul Chotimah (24020116120038)
2. Anggi Krisdianto (24020116120039)
3. Dewi Ayu Maryati (24020116120040)
4. Dwi Rahmawati (24020116120042)
5. Yoshita Kirana Devi (24020116120043)
6. Tiffany Destinar Laksita (24020116120046)
7. Hanik Sa’adah (24020116120047)
8. Lia Istianadewi (24020116120048)
9. Atika Mayang Sari (24020116140057)
10. Ardhia Pratiwi Prameswari (24020116140065)
11. Faika Rauda A. (24020116130066)

2. INSTRUMENTASI BIOLOGI
PENGERTIAN SPEKTROFOTOMETER
Spektrofotometer merupakan alat untuk mengukur absorbansi dengan cara melewatkan cahaya dengan
panjang gelombang tertentu pada suatu obyek kaca atau kuarsa yang disebut kuvet. Sebagian dari cahaya tersebut
akan diserap dan sisanya akan dilewatkan. Nilai absorbansi dari cahaya yang dilewatkan akan sebanding
dengan konsentrasi larutan di dalam kuvet.
Spektrofotomer yaitu alat yang terdiri dari spektrometer dan fotometer. Spektrometer menghasilkan sinar dari
spektrum dengan panjang gelombang tertentu. Fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan
atau yang diabsorpsi.
Jadi spektrofotometer digunakan untuk mengukur energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan
atau diemisikan sebagai fungsi dari panjang gelombang.

3. INSTRUMENTASI BIOLOGI
BAGIAN – BAGIAN SPEKTROFOTOMETER

4. INSTRUMENTASI BIOLOGI
SUMBER CAHAYA – MONOKROMATOR – SEL SAMPEL –
DETEKTOR – READ OUT PEMBACA

5. INSTRUMENTASI BIOLOGI
JENIS – JENIS SPEKTROFOTOMETER
SpektrofotometerVis (Visible)
Spektrofotometer UV (UltraViolet)
Spektrofotometer UV-Vis
Spektrofotometer IR (Infra Red)

6. INSTRUMENTASI BIOLOGI
SPEKTROFOTOMETERVIS (VISIBLE)
- Sumber sinar/energy yang digunakan adalah cahaya tampak (visible)
- Cahaya visible termasuk spektrum elektromagnetik yang dapat ditangkap oleh mata manusia, panjang gelombang
sinar tampak adalah 380 sampai 750 nm
- Sumber sinar tampak yang umumnya dipakai pada spektro visible adalah lampu Tungsten
- kelemahan metode spektrofotometri visible adalah sample yang dapat dianalisa hanya sample yang memiliki
warna

7. INSTRUMENTASI BIOLOGI
Contohnya adalah analisa kadar protein terlarut (soluble protein).
 Protein terlarut dalam larutan tidak memiliki warna, oleh
karena itu larutan ini harus dibuat berwarna agar dapat
dianalisa.
 Reagent yang biasa digunakan adalah reagent Folin,
senyawa yang dihasilkan berwarna biru dan dapat dideteksi
pada panjang gelombang sekitar 578 nm.
 Semakin tinggi intensitas warna biru menandakan banyaknya
senyawa kompleks yang terbentuk yang berarti semakin besar
konsentrasi protein terlarut dalam sample.
Gb. SpektrofotometerVis (Visible)

8. INSTRUMENTASI BIOLOGI
SPEKTROFOTOMETER UV (ULTRAVIOLET)
- Sumber energi yang digunakan adalah sinar UV
- Sinar UV memiliki panjang gelombang 190-380 nm, sumber sinarnya adalah lampu deuterium (heavy
hydrogen)
- Sinar UV tidak dapat dideteksi oleh mata, maka senyawa yang dapat menyerap sinar ini merupakan senyawa
yang tidak memiliki warna, bening dan transparan
- Prinsip dasarnya adalah sample harus jernih dan larut sempurna, tidak ada partikel koloid atau suspense
- Contoh pada analisa protein terlarut (soluble protein), bila menggunakan spektrofotometri UV sample dapat
langsung dianalisa
- Ikatan peptide pada protein terlarut akan menyerap sinar UV pada panjang gelombang sekitar 280 nm.
Sehingga semakin banyak sinar yang diserap sample (Absorbansi tinggi), maka konsentrasi protein terlarut
semakin besar

9. INSTRUMENTASI BIOLOGI
Gb. Spektrofotometer UV (Ultraviolet)

10. INSTRUMENTASI BIOLOGI
• Merupakan gabungan antara spektrofotometer UV dan Visible.
• Menggunakan dua buah sumber cahaya berbeda, yaitu sumber
cahaya UV dan sumber cahaya visible (tampak)
• Spektrofotometer UV-Vis dapat digunakan baik untuk sample
berwarna atau sample tak berwarna
• Sumber sinar yang digunakan photodiode yang dilengkapi dengan
monokromator.
Gb. Spektrofotometer UV -Vis
SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

11. INSTRUMENTASI BIOLOGI
SPEKTROFOTOMETER IR (INFRARED)
- Berdasar pada penyerapan panjang gelombang infra merah.
- Infra merah pada spektrofotometri adalah infra merah jauh dan pertengahan
yang mempunyai panjang gelombang 2.5-1000 μm
- Spektrofotometer IR digunakan untuk mengidentifikasi gugus fungsi pada
suatu senyawa, terutama senyawa organik. Setiap serapan pada panjang
gelombang tertentu menggambarkan adanya suatu gugus fungsi spesifik
- Jenis spektrofotometer IR lainnya yang penyerapan sinar IR nya pendek,
disebut Near Infrared Spectropgotometry (NIR).
- Aplikasi NIR banyak digunakan pada industri pakan dan pangan guna analisa
bahan baku yang bersifat rutin dan cepat.
Gb. Spektrofotometer IR (Infra Red)

12. INSTRUMENTASI BIOLOGI
CARA KERJA SPEKTROFOTOMETER
1. Tekan tombol ON/OFF pada belakang alat spektrofotometer dan alat dibiarkan lebih terdahulu selama 30 menit
2. Sebelum kuvet dimasukkan, kuvet blangko ditetesi etanol dan dibersihkan dengan tissue kering atau kertas lensa
3. Isi wadah kuvet dengan larutan blangko misal Aquades
4. Bersihkan permukaan kuvet dengan tissue kering atau kertas lensa
5. Kuvet dimasukkan ke spektrofotometer di sisi Blangko
6. Tutup penutup spektrofotometer
7. Siapkan kuvet sampel misal CuSO4 dan bersihkan permukaan kuvet dengan tissue kering atau kertas lensa
8. Kuvet dimasukkan ke dalam spektrofotometer
9. Tutup penutup spektrofotometer
10. Tekan test -> scanning -> nama diketik sesuai yang diinginkan -> pilih measurement mode -> absorbansi -> start
wavelength (200 nm) -> stop wavelength (400 nm) -> test -> collect baseline -> tunggu sampai 100% -> measure
sampel sampai 100%

13. INSTRUMENTASI BIOLOGI
KALIBRASI ALAT SPEKTROFOTOMETER
1. Alat spektrofotometer dihidupkan
2. Isi kuvet dengan larutan blanko (aquades)
3. Diseting/diatur panjang gelombang untuk kalibrasi.
4. Keterangan: 0%T itu diukur saat kuvet dalam keadaan kosong. 100%T itu diukur saat kuvet dalam keadaan
terisi larutan.
5. Kuvet berisi larutan blanko dimasukkan ke spektrofotometer
6. lalu tekan tombol 0 ABS 100%T, tunggu sampai keluar kondisi setting blank (dalam bentuk teks)

14. INSTRUMENTASI BIOLOGI
1. Sebelum digunakan, biarkan mesin warming-up selama 15-20 menit.
2. Spektrofotometer sebisa mungkin tidak terpapar sinar matahari langsung, karena cahaya dari matahari
akan dapat mengganggu pengukuran.
3. Simpan spektrofotometer di dalam ruangan yang suhunya stabil dan diatas meja yang permanen.
4. Pastikan kompartemen sampel bersih dari bekas sampel.
5. Saat memasukkan kuvet, pastikan kuvet kering.
6. Lakukan kalibrasi panjang gelombang dan absorban secara teratur.
PERAWATAN DAN PENYIMPANAN ALAT

15. INSTRUMENTASI BIOLOGI
Harga : USD 2.481
SPESIFIKASI HARGA SPEKTROFOTOMETER
1. SPEKTROFOTOMETER
VISIBLE

16. INSTRUMENTASI BIOLOGI
2. SPEKTROFOTOMETER
UV-VIS

17. INSTRUMENTASI BIOLOGI
SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

18. INSTRUMENTASI BIOLOGI
• HEALTH® SPECTROPHOTOMETER H-USP-791A
 Spectrophotometer Health H-USP-791A
(NEW) DIGITAL DISPLAY ULTRAVIOLET SPECTROPHOTOMETER
Aplikasi:
 Ini banyak digunakan dalam pengobatan dan kebersihan, pemeriksaan klinis, biokimia,
kimia organik, industri petrokimia, industri bahan makanan dan departemen
pengujian dan pengendalian mutu untuk melakukan analisis kuantitatif terhadap
materi pada ultraviolet, spektrum spektrum yang terlihat.
Fitur:
 Penggunaan kisi holografik pesawat dengan kinerja optik lebih tinggi.
 Tampilan digital
 Dapat membaca dalam mode Absorbansi (A),% Transmiting (% T), Konsentrasi (C)
 Desain menarik, artistik dalam penampilan, nyaman dioperasi, tepat dalam
pengukuran, stabil dalam performa, 4 posisi sel pemegang.
Harga Rp. 26.900.000,-
3. SPEKTROFOTOMETER UV

19. INSTRUMENTASI BIOLOGI
• FITUR:
 Jenis baru fitur cube-sudut michelson interferometer
 Ukuran yang lebih kecil dan struktur lebih kompak,
 Memberikan stabilitas yang lebih tinggi dan kurang sensitif
terhadap getaran
 Jendela untuk silika gel memungkinkan pengamatan yang
lebih mudah.
 Kinerja tinggi, dapat memastikan adaptasi terhadap
lingkungan dan meningkatkan akurasi dan keandalan yang
lebih tinggi dalam operasi.
4. SPEKTROFOTOMETER IR
Scienovo LT- WQF-510A FT-IR Spectrophotometer

20. INSTRUMENTASI BIOLOGI
Super lebar kompartemen sampel memberikan fleksibilitas lebih untuk mengakomodasi berbagai aksesoris.
Menyediakan stabilitas termal yang lebih tinggi.
Penerapan programmable gain amplifier, akurasi tinggi A/D converter dan komputer yang tertanam
meningkatkan akurasi dan keandalan dari seluruh sistem.
Spektrometer menghubungkan ke PC melalui port USB untuk kontrol otomatis dan komunikasi data,
sepenuhnya menyadari operasi plug-and-play.
Kompatibel PC control dengan user friendly, kaya fungsi software memungkinkan mudah, operasi yang
mudah dan fleksibel. Spektrum pengumpulan, spektrum konversi, spektrum pengolahan, spektrum
menganalisis, dan spektrum output fungsi dll dapat dilakukan.
Aksesoris seperti Dijinakkan/Specular Refleksi, ATR, sel cair, Gas sel, dan IR mikroskop dll dapat dipasang di
kompartemen sampel.

21. INSTRUMENTASI BIOLOGI
HACH : DR 2800™
PORTABLE SPECTROPHOTOMETER
SPESIFIKASI:
 Rentang spektral: 7800 untuk 350 cm-1
 resolusi: lebih baik dari 0.85cm-1
 bilangan gelombang Presisi: ± 01cm-1
 Kecepatan Scanning: 5-langkah disesuaikan untuk aplikasi yang berbeda
 sinyal untuk rasio kebisingan: lebih baik dari 15,000: 1 (RMS nilai, di 2100cm-1,
resolusi: 4cm-1, detector: DTGS, 1 menit pengumpulan data)
 Beam splitter: Ge dilapisi KBr
 inframerah Sumber: berpendingin Udara, efisiensi tinggi Reflex Lingkup modul
 Detector: DTGS
 Data sistem: Kompatibel komputer
Harga USD.5.122

22. INSTRUMENTASI BIOLOGI
 Mode Operasi: Transmisi (%), Absorbansi, dan Konsentrasi Sumber Lampu
 Panjang gelombang: ± 1,5 nm
 Resolusi Panjang Gelombang: 1 nm
 Kalibrasi Panjang gelombang: Internal, otomatis pada power-on, umpan balik visual
 Seleksi Panjang gelombang dapat secara manual maupun otomatis.
 Suhu Operasional: 10 sampai 40 ° C (50 sampai 104 ° F)
 Kelembaban Operasi: 80% kelembaban relatif, tidak berkondensasi, maksimum
 Persyaratan Penyimpanan: Suhu: -25 sampai 60 ° C, 13 sampai 140 ° F) Kelembaban: 80% kelembaban relatif, tidak berkondensasi,
maksimal
 Persyaratan Daya: Jalur: 100 sampai 240 V; 47/63 Hz;
 Kabel USB 1.1
 Bahasa: Inggris, Prancis, Jerman, Italia, Spanyol, Portugis, Cina, Jepang, dan Korea
 Koneksi: 1 x USB tipe B (PC) 1 x USB
 Perangkat penyimpanan USB, printer, keyboard)

23. INSTRUMENTASI BIOLOGI
TERIMAKASIH