1. RU 2319486 C1
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (19) (11) (13)
(51) МПК
A61K31/702 (2006.01)
A61K31/194 (2006.01)
A61K31/375 (2006.01)
A61P35/00 (2006.01)
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ
Статус: по данным на 17.11.2011 - прекратил действие
Пошлина:
(21), (22) Заявка: 2006128442/15, 07.08.2006 (72) Автор(ы):
Щербатюк Татьяна Григорьевна (RU),
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: Московцева Ольга Михайловна (RU),
07.08.2006 Иванова Нина Леонидовна (RU)
(45) Опубликовано: 20.03.2008 (73) Патентообладатель(и):
Государственное образовательное учреждение высшего профес
(56) Список документов, цитированных в отчете о
государственная медицинская академия Федерального агентст
поиске: Олигохит актив - ТУ-9289-004-57184729-03.
(ГОУ ВПО НижГМА Росздрава) (RU)
RU 2271813 C1, 20.03.2006. RU 2250106 С1, 20.04.2005.
RU 2165253 C1, 20.04.2001.
Адрес для переписки:
603005, г.Нижний Новгород, ул. Алексеевская, 1,
Нижегородская медицинская академия, патентный
отдел, пат. пов. И.Н. Балишиной
(54) СРЕДСТВО ДЛЯ ДЕСТРУКЦИИ ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ И КОРРЕКЦИИ ЭНДОГЕННОЙ
ИНТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА - ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЯ И СПОСОБ ДЕСТРУКЦИИ
ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ И КОРРЕКЦИИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА -
ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЯ
(57) Реферат:
Изобретение относится к экспериментальной медицине и биологии и может использоваться в медико-биологических
экспериментах с целью разработки новых способов лечения онкологических заболеваний. Изобретение заключается в том, что
животным ежедневно дают препарат «олигохит актив» per os из расчета 90-100 мг/кг веса животного, общим курсом не менее 7
дней. Способ позволяет вызвать деструкцию опухолевой ткани, которая выражается в увеличении количества погибающих
клеток и уменьшении числа активных клеток опухоли животных и провести коррекцию эндогенной интоксикации организма-
опухоленосителя. Способ не вызывает патологических изменений в тканях, не подверженных злокачественной трансформации,
и улучшает состояние организма-опухоленосителя. 3 н.п. ф-лы, 2 табл.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и биологии и может использоваться в
медико-биологических экспериментах с целью поиска новых способов лечения онкологических
заболеваний.
Поиск новых подходов к терапии злокачественных новообразований остается актуальной медико-
биологическим задачей.
Основными способами лечения онкологических заболеваний, приводящих к деструкции (лат.
destructio - разрушение) опухолевой ткани, являются лучевая терапия [29], фотодинамическая терапия
[11], а также химиотерапия, основанная на использовании различных фармакологических веществ
(цитостатики, антиметаболиты, противоопухолевые антибиотики и ферменты [19]). Однако

2. большинство из них, наряду с деструкцией опухолевых клеток, вызывают опосредованные
патологические изменения в других органах и системах организма.
Известен способ повышения эффективности химиопрепарата за счет снижения общей токсичности,
посредством стимулирования процессов лимфообразования в физиологическом режиме с
использованием биофизических (электромагнитное поле, гипербарическая оксигенация и др.),
фармакологических (глюкоза, реополиглюкин, манитол, аскорбиновая кислота, прозерин и др.) и
биомолекулярных (группа эндогенных морфинов и др.) факторов [8].
Известны способы тепловой деструкции раковых клеток посредством воздействия на патологически
измененный участок биоткани: СВЧ электромагнитным полем неинвазивным излучателем [26];
ультразвуковыми волнами с помощью многоканальной антенной решетки путем сканирования [4];
лазерным излучением с плотностью мощности 0,5-2 Вт/см2, с длиной волны (1,264±0,01)мкм и с
частотой следования импульсов (22,5±1) кГц [5].
Ограничением широкого применения данных способов деструкции опухоли является, во-первых,
необходимость в специализированном и высокотехнологичном оборудовании, а во-вторых,
вероятность повышения интоксикации организма в результате действия этих физико-химических
факторов на ткани, не подверженные злокачественной трансформации.
В связи с чем существует необходимость в разработке способов деструкции опухолевой ткани, не
вызывающих патологических изменений в тканях, не подверженных злокачественной трансформации,
но и способствующих улучшению состояния организма-опухоленосителя.
В задачу предлагаемого изобретения положено расширение арсенала средств для деструкции
опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма-опухоленосителя, а также
разработка способа применения нового средства.
Поставленная задача достигается тем, что предлагается:
1. Применение препарата «олигохит актив» в качестве средства для деструкции опухолевой ткани.
2. Применение препарата «олигохит актив» в качестве средства для коррекции эндогенной
интоксикации организма-опухоленосителя.
3. Способ деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма
опухоленосителя, включающий введение лекарственного средства, отличающийся тем, что
опухоленосителю per os ежедневно в дозе 90-100 мг/кг веса вводят препарат «олигохит актив» общим
курсом не менее 7 дней.
«Олигохит актив» (иногда употребляют синоним - олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбат) (ТУ
9289-004-57184729-03) представляет собой водорастворимый продукт, в котором олигосахарид
хитозана (олигохит) (70%), сукцинат (15%) и аскорбат (15%) находятся в ионной связи друг с другом.
В физиологических условиях янтарная кислота диссоциирована, поэтому название ее аниона -
сукцинат часто применяют как синоним термина «янтарная кислота», а аскорбат - как синоним
термина «аскорбиновая кислота». Исследования последних лет показали наличие у сукцината
биологической активности с уникальным сочетанием проявлений: по отношению к здоровому
организму он выступает в роли адаптогена, а при наличии патологических проявлений демонстрирует
нетипично высокий для адаптогенов терапевтический эффект [28]. Сукцинат является нормальным
клеточным метаболитом, играет большую роль в обеспечении энергетического баланса в клетке [2, 9,
15], обладает антигипоксическим [12, 28, 30], антиоксидантным [6, 28], радиопротекторным [10] и
детоксицирующим действиями [28]. Известны несколько работ, в которых сообщается о результатах
применения янтарной кислоты (ЯК) при опухолевом росте: T.Kamata с сотр. (1970) наблюдали
торможение роста саркомы М-1 у крыс после введения ЯК [15], А.Л.Коваленко и М.Г.Романцов (1999)
показали, что в результате введения ЯК наблюдается существенное уменьшение частоты спонтанных
опухолей мышей и увеличение максимальной продолжительности их жизни [6]; Е.В.Козырева (1997)
выявила снижение показателя смертности онкологических больных на фоне комплексного применения
янтарной, лимонной и -кетоглутаровой кислот с витаминами и травами [7]. И.А.Помыткин и
С.П.Соловьев предложили в комплексе с изотопологами использовать соль ЯК как дополнительное
средство в лечении новообразований [17]. Однако в работе В.Н.Анисимова и М.Н.Кондрашовой

3. показано, что подкожные введения животным сукцината натрия в дозе 50 и 250 мг/кг в течение 10
дней, начиная с 3-го дня после трансплантации опухолей, мало влияли на рост перевиваемых опухолей
у мышей и крыс [1].
В настоящее время аскорбиновая кислота (АК) применяется в комплексной терапии
злокачественных новообразований. Однако данные литературы о влиянии АК на рост опухолей
противоречивы. Л.С.Трухановой (1987) на модели канцерогенеза, индуцированного 1,2-
диметилгидразином и эстрадиолдипропионатом, показано, что при введени мышам линии СВА
растворов АК в концентрациях 0,3; 0,75; и 1,5% наблюдается отчетливая тенденция к уменьшению
массы опухоли с увеличением концентрации АК [22]. В работе М.Polydock et al. показано увеличение
продолжительности жизни (в 2 раза) мышей с асцидной карциномой Эрлиха на фоне введения АК в
дозе 10 мг/кг [31], а по наблюдениям Т.Shingu et al. - ускорение роста опухоли (доза 25 мг/сутки) [32].
В эксперименте Н.А.Харьковской с сотр. введение морским свинкам АК в дозе 0,3 мг/кг массы
приводило к полному рассасыванию саркомы, а в дозе 1 г/кг - ускорение роста опухоли [24].
Следовательно, вопрос о возможностях применения этого витамина в онкологии остается открытым.
В последние годы в различных областях медицины широко применяется хитозан и его
производные. Хитозан получают путем переработки морских ракообразных, а после ферментативного
расщепления высокомолекулярного хитозана образуется новый, водорастворимый продукт -
олигосахарид хитозана. В таком виде он легко абсорбируется в кишечнике и быстро попадает в
системный кровоток, а затем с током крови доносится к «органам-мишеням». Одно из новых
направлений использования его в качестве носителя для лекарственных форм [25]. К.А.Трескуновым и
Б.А.Комаровым предложено применять хитозан в виде солевой формы с L-глутаминовой кислотой в
сочетании со специальными фитосборами параллельно с лучевой терапией и комплексной
химиотерапией до и после операции при лечении онкозаболеваний [21].
Возможность применения препарата «олигохит актив» в качестве средства деструкции опухолевой
ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма опухоленосителя была показана на
экспериментальной модели лимфосаркомы Плисса.
Злокачественных опухоли, независимо от вызвавшей их причины, локализации и гистогенеза
характеризуются морфологическим атипизмом, проявляющемся в нарушении структуры ткани или
клеток [14]. Так, выбранная нами модель экспериментальной опухоли лимфосаркома Плисса (ЛФС),
полученная в 1958 году после подкожной перевивки опухоли, возникшей у крысы, получавшей 3,3
дихлорбензидин, характеризуется следующими особенностями: состоит из мягких, округлой формы
клеток, большая часть которых занята крупным ядром; хроматин располагается главным образом в
периферической зоне ядра; ядрышки крупные, гиперхромные; цитоплазма отличается умеренной
базофилией. Опухоль обладает ярко выраженным инфильтративным ростом в пограничные
соединительную и жировую ткань, а также мышцы; метастазирует [16].
Способ деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации был разработан на
модели лимфосаркома Плисса; он заключается в том, что животному - опухоленосителю ежедневно per
os дают раствор «олигохит актив» концентрацией 90-100 мг/кг веса, общим курсом не менее 7 дней.
Выбор дозы и курса введения обоснован как теоретическими данными, так и собственными
экспериментальными исследованиями. В статье М.В.Васина с сотр. показано, что максимальный
антитоксический и антиоксидантный эффект достигается при дозе ЯК 100 мг/кг веса [3]; а
Н.И.Федотчева с сотр. выявили, что в гипометаболических состояниях эффективными дозами при
введении сукцината перорально являются 50-100 мг/кг веса [23]. Срок введения веществ выбран как
минимальный и соответствующий однократному введению для человека [18]. В наших исследованиях
показано, что использование препарата «олигохит актив» в концентрации 90-100 мг/кг веса, общим
курсом 7 дней, эффективно для коррекции морфологического состояния печени [27] и
свободнорадикального баланса организма опухоленосителя.
Для сравнения были введены группы животных, получавших отдельно янтарную кислоту,
олигосахарид хитозана и олугосахарид хитозанасукцинат по той же схеме.
Эксперимент выполнен на 60 белых беспородных крысах, которые были разделены на группы:
1 группа - интактная (n=10). Здоровые животные, не подвергавшиеся каким-либо воздействиям.

4. 2 группа - контрольная (n=10). Животные с ЛФС, без воздействия, получавшие чистую воду.
3 группа - опытная-1 (n=10) (животные с ЛФС, получавшие с 6 дня роста опухоли раствор янтарной
кислоты, 7 дней).
4 группа - опытная-2 (n=10) (животные с ЛФС, получавшие с 6 дня роста опухоли раствор
олигосахарида хитозана, 7 дней).
5 группа - опытная-3 (n=10) (животные с ЛФС, получавшие с 6 дня роста опухоли раствор
олигосахарида хитозана сукцината, 7 дней).
6 группа - опытная-4 (n=10) (животные с ЛФС, получавшие с 6 дня роста опухоли раствор
«олигохит актив», 7 дней).
1) На гистологических срезах, окрашенных гематоксилином и эозином, наряду с визуальным
описанием ткани ЛФС Плисса, для объективной оценки эффекта вводимых препаратов проводили
количественное изучение методом морфометрического анализа, основанного на принципах
стереологии с использованием окулярной морфометрической сетки Стефанова С.Б., содержащей 25
узлов, при увеличении микроскопа 10×40×1.5 [20]. На площади препарата, ограниченной сеткой,
подсчитывали общее количество клеток опухоли, количество активных клеток и погибающих клеток
опухоли. К погибающим клеткам относили клетки с лизирующимися ядрами, а также в состоянии
пикноза и кариорексиса [16]. Полученные данные были обработаны на IBM PC/AT с помощью пакетов
прикладных программ Statistica-6.0 (Windows ХР). Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1
Морфометрические показатели ткани лимфосаркомы Плисса
Группы животных общее количество клеток количество активных клеток количество погибающих клеток
контрольная 36,5±2,4 33,6±2,3 2,9±0,7
опытная-1 37,2±3,7 35,3±3,6 1,9±0,6
опытная-2 34,4±3,3 28,8±1,7* 5,6±1,2*
опытная-3 39,9±3,9 37,7±4,1 2,2±0,4
опытная-4 31,4±2,0* 17,8±1,5* 13,6±1,3*
*
- различия достоверны при р 0,05 по сравнению с контрольной группой.
Гистологическое исследование ЛФС Плисса контрольной группы показало: опухоль состоит из
тесно прилегающих друг к другу лимфоидных клеток мелкой округлой формы с круглыми ядрами,
занимающими почти целиком базофильную цитоплазму. В отдельных участках опухоли небольшие
зоны некроза со слабовыраженной лимфоцитарно-макрофагальной инфильтрацией.
Введение сукцината животным с ЛФС Плисса приводит к замедлению прорастания опухоли в
жировую клетчатку, хотя строение опухолевой ткани со стороны опухоли не изменено.
Применение олигосахарида хитозана приводит к фрагментации опухолевой ткани с признаками
полнокровия и отека, дискомплексации и вакуолизации клеток, склерозированию сосудов. В то же
время выраженного некроза опухоли нет, отмечена лишь дистрофия отдельных опухолевых клеток.
После применения олигосахарида хитозана сукцината наблюдалась дискомплексация и небольшой
некроз опухоли с сохранившимися участками опухолевой ткани.
У крыс-опухоленосителей применение комплекса «олигохит актив» вызвало обширные очаги
некроза, с обильной инфильтрацией соединительно тканых элементов, в которых опухолевые клетки
характеризовались выраженными дистрофическими изменениями.
Морфологические исследования позволили количественно оценить изменения, происходящие в
опухоли крыс при введении исследуемых веществ.
Под влиянием янтарной кислоты общее количество клеток в опухоли, по сравнению с контролем
(36,5±2,4) достоверно не изменилось (37,2±3,7), но уменьшилось число гибнущих на 35% (1,9±0,6), а
количество активных клеток имеет тенденцию к росту (35,3±3,6) и (33,6±2,3 - в контроле). По-
видимому, ЯК - неспецифический стимулятор пролиферации клеток.
На фоне введения олигосахарида хитозана общее число клеток опухоли снизилось незначительно
(34,4±3,3), при достоверном увеличении количества гибнущих клеток в 1,9 раза (5,6±1,2) и снижении
количества активных клеток на 15% (28,8±1,7), по сравнению с контролем.
Введение олигосахарида хитозана сукцината не вызвало достоверных изменений в ткани ЛФС
Плисса.

5. «Олигохит актив» достоверно снизил общее количество опухолевых клеток (31,4±2,0), в результате
увеличения в 4,7 раза количества дегенерирующих опухолевых клеток (13,6±1,3), и уменьшения числа
активных клеток опухоли в 1,9 раза (17,8±1,5), по сравнению с аналогичными показателями животных
контрольной группы (таблица 1).
2) Уровень эндогенной интоксикации оценивали по методу М.Я.Малаховой (1995) путем
определения веществ низкой и средней молекулярной массы (ВСНММ) в плазме крови
экспериментальных животных [13]. Регистрация спектра исследуемого раствора в зоне ультрафиолета
на СФ позволяет произвести комплексную оценку токсических повреждающих факторов и более 200
наименований веществ нормального и патологического метаболизма. Суть метода состоит в осаждении
крупномолекулярных частиц плазмы крови и эритроцитов 15%-м раствором трихлоруксусной кислоты
с последующей спектрофотометрией водного раствора супернатанта при длине волны 238-298 нм. Шаг
длины волны 4 нм. Расчет количества веществ низкой и средней молекулярной массы производится по
формуле:
ВНСММ=(Е238+Е242+Е246+...+Е298)*4 (у.е.).
Полученные данные были обработаны на IBM PC/AT с помощью пакетов прикладных программ
Statistica-6.0 (Windows XP). Результаты представлены в таблице 2.
Таблица 2
Уровень эндогенной интоксикации плазмы крови экспериментальных животных
Группы животных Уровень эндогенной интоксикации (у.е.), М±m
интактная 9,13±0,13
контрольная 12,64±0,25**
опытная-1 10,42±0,17*
опытная-2 11,61±0,31*
опытная-3 12,08±0,13*
опытная-4 9,35±0,17*
**
- различия достоверны при р 0,05 по сравнению с группой интактных животных.
*
- различия достоверны при р 0,05 по сравнению с группой животных-опухоленосителей «без воздействия».
Как видно из таблицы 2 через 14 дней после перевивки ЛФС Плисса в плазме крови животных
контрольной группы уровень эндогенной интоксикации вырос в среднем на 38% (12,64±0,25 у.е.) по
сравнению с показателями интактных животных (9,13±0,13 у.е.).
Наибольшая коррекция уровня эндогенной интоксикации в плазме крови животных-
опухоленосителей наблюдалась на фоне введения препарата «олигохит актив» (9,35±0,17 у.е.) - на 26%
ниже уровня эндогенной интоксикации в плазме крови животных контрольной группы (12,64±0,25
у.е.).
В группе крыс с ЛФС Плисса, получавших водный раствор янтарной кислоты, содержание ВНСММ
(10,42±0,17 у.е.) в плазме крови на 18% ниже, чем в контрольной группе (12,64±0,25 у.е.).
В то время, как введение растворов олигосахарида хитозана и олигосахарида хитозана сукцината
незначительно повлияло на развитие эндогенной интоксикации у крыс с перевитой ЛФС Плисса (на
8% и 4%, соответственно).
Таким образом, сравнительное изучение биологического действия различных веществ на
экспериментальной модели перевивной опухоли выявило, что применение комплекса «олигохит актив»
приводит к деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма
опухоленосителя, что позволяет предложить данный способ для использования в медико-
биологических экспериментах с целью поиска новых способов лечения онкологических заболеваний, а
также применения этого способа в ветеринарной практике.
Пример 1 (Серия экспериментов, иллюстрирующая эффективность препарата «олигохит актив» в
отношении деструкции опухолевой ткани)
На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса (на 8 день после начала введения
веществ) проведена декапитация всех подопытных животных под эфирным наркозом.
Морфометрическое описание гистологических срезов, окрашенных гематоксилином и эозином,
заключалось в подсчете общего количества клеток опухоли, количества активных)1 погибающих
клеток опухоли на площади, ограниченной окулярной морфометри ческой сеткой Стефанова С.Б. К

6. погибающим клеткам относили клетки с лизирующимися ядрами, а также в состоянии пикноза и
кариорексиса.
1) Крысе №22, весом 260 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма лимфосаркомы (ЛФС) Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. На 14 день
после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса проведена декапитация животного №22 под
эфирным наркозом. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани опухоли животного №22
показал, что общее количество клеток опухоли равно 37, количество активных клеток - 34, количество
погибающих клеток опухоли - 3.
2) Крысе №32, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
янтарной кислоты в концентрации 90-100 мг/кг веса. По сравнению с контролем, достоверных
изменений морфометрических показателей ткани ЛФС Плисса не было: общее количество клеток
опухоли - 37, количество активных опухолевых клеток - 35 и погибающих клеток опухоли - 2.
3) Крысе №45, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
олигосахарида хитозана в концентрации 90-100 мг/кг веса. Морфометрический анализ гистологических
срезов ткани опухоли животного №45 выявил снижение общего количества клеток на 11% (33) и
количества активных опухолевых клеток на 17% (28), по сравнению с контролем. Число погибающих
клеток опухоли увеличилось до 5.
4) Крысе №4, весом 245 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
олигосахарида хитозана сукцината в концентрации 90-100 мг/кг веса. Морфометрический анализ
гистологических срезов ткани опухоли животного №4 показал, что общее количество клеток опухоли -
40, количество активных опухолевых клеток - 38, число погибающих клеток опухоли - 2.
5) Крысе №12, весом 255 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
препарата «олигохит актив» в концентрации 90-100 мг/кг веса. Общее количество клеток ЛФС Плисса
на площади препарата, ограниченной сеткой, изменилось, по сравнению с контролем, незначительно
(33). В то время как количество активных клеток опухоли снизилось на 44% (19), а число гибнущих
клеток опухоли в 4,7 раза (14).
Пример №2 (Серия экспериментов, иллюстрирующая эффективность препарата «олигохит актив» в
отношении коррекции эндогенной интоксикации организма опухоленосителя).
На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса (на 8 день после начала введения
веществ) проведена декапитация всех подопытных животных под эфирным наркозом. Измерение
уровня эндогенной интоксикации организма проводили по содержанию веществ низкой и средней
молекулярной массы (ВНСММ) в плазме крови экспериментальных животных.
1) Крыса №51, весом 265 г не подвергалась каким-либо воздействиям, содержалась в стандартных
условиях. Уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №51 составил 9,00 у.е.
2) Крысе №22 (контроль), весом 260 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь
клеток опухолевого штамма лимфосаркомы (ЛФС) Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. На 14
день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса уровень эндогенной интоксикации в плазме
крови крысы №22 составил 12,83 у.е. Эндогенная интоксикация увеличилась на 42% по сравнению с
показателем животного №51.
3) Крысе №32, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
янтарной кислоты в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8

7. день после начала введения раствора янтарной кислоты) уровень эндогенной интоксикации в плазме
крови крысы №32 составил 10,34 у.е. Эндогенная интоксикация ниже на 19% по сравнению с
контролем.
4) Крысе №45, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
олигосахарида хитозана в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли
(на 8 день после начала введения раствора олигосахарида хитозана) уровень эндогенной интоксикации
в плазме крови крысы №45 составил 11,65 у.е. Эндогенная интоксикация ниже аналогичного
показателя животного контрольной группы на 9%.
5) Крысе №4, весом 245 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
олигосахарида хитозана сукцината в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации
опухоли (на 8 день после начала введения раствора олигосахарида хитозана сукцината) уровень
эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №4 составил 12,15 у.е. Эндогенная интоксикация
ниже аналогичного показателя животного контрольной группы на 5%.
6) Крысе №12, весом 255 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
препарата (олигохит актив» в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации
опухоли (на 8 день после начала введения раствора препарата «олигохит актив») уровень эндогенной
интоксикации в плазме крови крысы №12 составил 9,47 у.е. Эндогенная интоксикация ниже
аналогичного показателя животного контрольной группы на 26%.
Пример №3 (Серия экспериментов, иллюстрирующая способ деструкции опухолевой ткани и
коррекции эндогенной интоксикации организма опухоленосителя).
На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса (на 8 день после начала введения
веществ) проведена декапитация всех подопытных животных под эфирным наркозом.
Измерение уровня эндогенной интоксикации организма проводили по содержанию веществ низкой
и средней молекулярной массы (ВНСММ) в плазме крови экспериментальных животных.
Морфометрическое описание гистологических срезов, окрашенных гематоксилином и эозином,
заключилось в подсчете общего количества клеток опухоли, количества активных и погибающих
клеток опухоли на площади, ограниченной окулярной морфометрическои сечкой Стефанова С.Б. К
погибающим клеткам относили клетки с лизирующимися ядрами, а также в состоянии пикноза и
кариорексиса.
1) Крыса №51 весом 265 г не подвергалась каким-либо воздействиям, содержалась в стандартных
условиях. Уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №51 составил 9,00 у.е.
2) Крысе №22 (контроль), весом 260 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь
клеток опухолевого штамма лимфосаркомы (ЛФС) Плисса в 0,5 мл физиологическою раствора. На 14
день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса уровень эндогенной интоксикации в плазме
крови крысы №22 составил 12,83 у.е., что на 42% выше по сравнению с показателем здорового
животного №51. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани опухоли животного №22
показал, что общее количество клеток опухоли равно 37, количество активных клеток - 34, количество
погибающих клеток опухоли - 3.
3) Крысе №32, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
янтарной кислоты в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8
день после начала введения раствора янтарной кислоты) уровень эндогенной интоксикации в плазме
крови крысы №32 составил 10,34 у.е., что на 19% ниже, чем в контроле. Достоверных изменений
морфометрических показателей ткани ЛФС Плисса, по сравнению с контролем, не было: общее

8. количество клеток опухоли - 37, количество активных опухолевых клеток - 35 и погибающих клеток
опухоли - 2.
4) Крысе №45, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
олигосахарида хитозана в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли
(на 8 день после начала введения раствора олигосахарида хиптозана) уровень эндогенной
интоксикации в плазме крови крысы №45 составил 11,65 у.е., ниже аналогичного показателя
животного контрольной группы на 9%. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани
опухоли животного №45 выявил снижение общего количества клеток на 11% (33) и количества
активных опухолевых клеток на 17% (28), по сравнению с контролем. Число погибающих клеток
опухоли увеличилось до 5.
5) Крысе №4, весом 245 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
олигосахарида хитозана сукцината в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации
опухоли (на 8 день после начала введения раствора олигосахарида хитозана сукцината) уровень
эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №4 составил 12,15 у.е., что на 5% ниже аналогичного
показателя животного контрольной группы. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани
опухоли животного №4 показал, что общее количество клеток опухоли - 40, количество активных
опухолевых клеток - 38, число погибающих клеток опухоли - 2.
6) Крысе №12, весом 255 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток
опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после
трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора
препарата «олигохит актив» в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации
опухоли (на 8 день после начала введения раствора препарата «олигохит актив») уровень эндогенной
интоксикации в плазме крови крысы №12 составил 9,47 у.е., что ниже аналогичного показателя
животного контрольной группы на 26%. Общее количество клеток ЛФС Плисса на площади препарата,
ограниченной сеткой, изменилось, по сравнению с контролем, незначительно (33). В то время как
количество активных клеток опухоли снизилось на 44% (19), а число гибнущих клеток опухоли в 4,7
раза (14).
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1. Анисимов В.Н., Кондрашова М.Н. Влияние янтарной кислоты на частоту спонтанных опухолей и
продолжительность жизни мышей. // Докл. АН СССР; 1979; 5: 1242-1245.
2. Афанасьев В.В. Клиническая фармакология реамберина (очерк): Пособие для врачей. - СПб.,
2005: 44 с.
3. Васин М.В., Ушаков И.Б., Ковтун В.Ю. и др. Влияние мелатонина, аскорбиновой и янтарной
кислот на кумуляцию токсического эффекта гаммафоса (амифостина) при его повторном применении.
// Фармакология и токсикология; 2004; 137(5): 515-518.
4. Загускин С.Л. и др. Способ селективной деструкции раковых клеток. Патент RU №2147848.
5. Загускин С.Л. и др. Способ избирательной деструкции раковых клеток. Патент RU №2147847.
6. Коваленко А.Л., Романцов М.Г. Реамберин 1,5% для инфузий: от эксперимента в клинику. - СПб.:
«СП Минимакс»; 1999: 112 с.
7. Козырева Е.В. Использование янтарной кислоты и других компонентов энергетического обмена в
лечении онкологических больных. / сб. науч. статей «Янтарная кислота в медицине, пищевой
промышленности, сельском хозяйстве». - Пущино: ОНТИ ПНЦРАН; 1997: 113-117.
8. Колганов А.С. Способ усиления эффективности действия противоопухолевого химиопрепарата.
Патент RU №2112983.
9. Кондрашова М.Н. Выясненные и наметившиеся вопросы на пути исследования регуляции
физиологического состояния янтарной кислотой. // Терапевтическое действие янтарной кислоты. -
Пущино; 1976: 4-12.

9. 10. Косенко Е.А., Каминский Ю.Г. Янтарнокислый натрий-радиопротектор. // сб. науч. статей
«Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве». - Пущино: ОНТИ
ПНЦРАН; 1997: 128-133.
11. Куценюк В.В., Гамалея Н.Ф. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей. //
Онкология; 2003; 5(1): 69-72.
12. Лукьянова Л.Д. Новые подходы к созданию антигипоксантов метаболического действия. //
Вестник РАМН; 1999; 3: 18-25.
13. Малахова М.Я. Метод регистрации эндогенной интоксикации. - СПб.: М.А.П.О; 1995: 35 с.
14. Молотков О.В., Ефременков С.В., Решедько В.В. Патофизиология в вопросах и ответах: учебное
пособие. / Под ред. О.В.Молоткова. - Смоленск: САУ; 1999: 271-273.
15. Морозкина Т.С. Энергетический обмен и питание при злокачественных новообразованиях. /
Под. ред. В.С.Шапота. - Мн.: Беларусь; 1989: 191 с.
16. Плисе Г.Б. Онкологическая характеристика нового штамма лимфосаркомы крысы. // Бюллетень
экспериментальной биологии и медицины; 1961; 2: 95-99.
17. Помыткин И.А., Соловьев С.П. Способ лечения новообразований. Патент RU №2275920.
18. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических
веществ. / Ред. В.П.Фисенко и др. - М.: ЗАО «ИИА «Ремедиум»; 2000: с.21.
19. Соколов Н.Н., Занин В.А., Александрова С.С.Бактериальные L-аспарагиназы и
глутамин(аспарагин)азыя: некоторые свойства, строение и противоопухолевая активность. // Вопросы
медицинской химии; 2000; 46(6): 531-548.
20. Солопаева И.М., Стефанов С.Б., Жданова Т.Ф. Количественная морфология биоктатов органов
пищеварения. / Методич. рекомендации. -Горький; 1982: 16 с.
21. Трескунов К.А., Комаров Б.А. Способ лечения онкозаболеваний. Патент RU №2165253.
22. Труханова Л.С. Влияние аскорбиновой кислоты на индукцию сарком матки у мышей. // Вопросы
онкологии; 1987; 33(11): С.53-57.
23. Федотчева Н.И., Игнатьев Д.А., Лукоянова Н.А., Кондрашова М.Н. Роль янтарной кислоты в
активации гипометаболических состояний. // сб. науч. статей «Янтарная кислота в медицине, пищевой
промышленности, сельском хозяйстве». - Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН: 1997: 70-74.
24. Харьковская Н.А., Фарон Р.А., Хрусталев С.А. Экспериментальное изучение влияния
аскорбиновой кислоты на спонтанный бластомогенез. Рук. деп. В ВИНИТИ 26.01.87. Рег. №570-В87.
25. Хитозан per os. Пер. с англ. / Под ред. Риккардо А.А. Муццарелли. - Н.Новгород.: изд-во
«Вектор-ТиС»; 2001: 372 с.
26. Шафранов В.В. и др. Способ деструкции сосудистых опухолей у детей. Патент RU №2157134.
27. Щербатюк Т.Г. и др. Способ коррекции морфологического состояния печени опухоленосителей.
Патент RU №2271813.
28. Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве: сб. науч. статей.
/ Под ред. М.Н. Кондрашовой - Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН; 1997: 300 с.
29. Ярмоненко С.П., Вайнсон А.А. Радиобиология человека и животных: Учеб. Пособие. / Под. ред.
С.П.Ярмоненко. - М.: Высш. шк.; 2004: 549 с.
30. Chance, B.C. Hollunger G. The interaction of energy and electron transfer reactions in mitochondria / J.
Biol. Chem.; 1961; 236(5): 1534-1584.
31. Polydock M.E., Rice D.R.J., Aleandri L. Inhibiting effect of dehydroascorbic acid on cell division in
ascites tumors in mice // Exp. Cell. Biol.; 1982; 50(1): 34-38.
32. Shingu M., Sumi Т., Araki Y. Et al. Влияние аскорбиновой кислоты на мышей с асцидной
опухолью Эрлиха. // J. Kurume Med. Assoc.; 1975; 38(10): 1009-1013.
Формула изобретения
1. Применение препарата «олигохит актив» в качестве средства для деструкции опухолевой ткани.
2. Применение препарата «олигохит актив» в качестве средства для коррекции эндогенной

10. интоксикации организма-опухоленосителя.
3. Способ деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма-
опухоленосителя, включающий введение лекарственного средства, отличающийся тем, что
опухоленосителю per os ежедневно в дозе 90-100 мг/кг веса вводят препарат «олигохит актив» общим
курсом не менее 7 дней.
MM4A - Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за
неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 08.08.2008
Извещение опубликовано: 10.07.2010 БИ: 19/2010