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[object Object],[object Object],13-3  從基因到蛋白質的合成
蛋白質的合成 ,[object Object],mRNA 轉譯 轉錄 蛋白質 DNA
DNA 的轉錄 : in  細胞核 RNA 聚合酶 3’ 5’ RNA 模板股 非模板股 ( 編碼股 ) DNA 原料 : RNA  聚合酶 , NTP(ATP, UTP, GTP, CTP) G A T C C C G T A C T T C T G DNA 3’ 5’ A U G G G C A U G A A G A C C A T G G G C A T G A A G A C C 3’ 5’
每個基因,只有其中一股的 DNA 會被轉錄 !! 一條 DNA 有多個基因,轉錄時可能由不同股 DNA 轉錄而來
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],RNA 的修飾
[object Object],mRNA 修飾:加上 5‘  端帽及在  3’ 端加上多腺嘌呤尾。 在 5'  端被加了 5'  端 帽,而在 3'  端被加了多腺嘌呤尾, 5'  端帽及 RNA 的前導段,並不轉譯成胺基酸,其 功能在提供核糖體附於此的訊息 。 多腺嘌呤尾可能是 mRNA 分子離開細胞核所必需 ,它並非直接接於終止密碼子,而是接在 mRNA 上不發生轉譯的密碼子之後。
[object Object]
蛋白質之合成 ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
遺傳的密碼 ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],4 4 4 共 64 組
遺傳密碼表 真正有意義的密碼子共有幾組 ?
蛋白質之合成 ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
tRNA 結構圖 請查表,該 tRNA 應該是攜帶哪一種胺基酸 ? Ala mRNA 5’ 3’ 密碼子 G C C 反密碼子 C G G A C C 3’ 5’ 胺基酸
參與轉譯的分子 tRNA mRNA 核糖體 START tRNA 大次單元 小次單元 UAC 5’ 3’ 胺基酸 5’ 3’ AUG CGA UUC UGG GCG ACC UAA 反密碼子 密碼子 P A E P A E
轉  譯 START Met Arg Phe Trp Ala Thr 釋放因子 釋放因子 STOP 肽鏈 tRNA 反密碼子 5’ 3’ AUG CGA UUC UGG GCG ACC UAA mRNA 密碼子 UAC GCU AAG ACC CGC UGG GCU Arg AAG Phe CGC Ala UGG Thr ACC Trp UAC Met
mRNA 的轉譯過程 進入 A 位 形成肽鍵 位移
蛋白質合成的場所 ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
蛋白質的合成與運送途徑 mRNA 核糖體 新合成之蛋白質前段 粗糙型內質網 細胞膜 修飾中之蛋白質 寡醣側鏈 溶體 膜蛋白 分泌性蛋白 高基氏體
多核糖體 ,[object Object],[object Object]
蛋白質如何被修飾? ,[object Object],[object Object],[object Object],新合成的胰島素( 86 個胺基酸) 具活性的胰島素   鏈 ( 21 個胺基酸)  鏈 ( 30 個胺基酸) 雙硫鍵 水解酶
蛋白質的合成與修飾
蛋白質如何被修飾? (2) 與金屬元素結合 ,例如:  需要金屬元素作為輔助因子   A. 碳酸酐酶:鋅   B. 尿素酶 :鎳   C. 細胞氧化酶:銅  需要金屬元素作為成分  血紅素:鐵
蛋白質如何被修飾? ,[object Object],[object Object],[object Object]
[object Object],原核生物 真核生物
[object Object]
基  因  的  表  現 ,[object Object],原核生物基因表現 真核生物基因表現
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],原核生物基因表現
大腸桿菌的乳糖操縱組 DNA 5’ 3’ 調節基因 啟動子 操作子 構造基因 P 無乳糖存在下 ~ 抑制子 ( 可與操作子結合 ) RNA 聚合酶 lac I O lac Y lac Z lac A X 系統關閉 (OFF)
大腸桿菌的乳糖操縱組 DNA 5’ 3’ 調節基因 啟動子 操作子 構造基因 P 有乳糖存在下 ~ 抑制蛋白 Z Y A 進行乳糖吸收及代謝 RNA 聚合酶 lac I O lac Y lac Z lac A 乳糖
沒乳糖 有乳糖
大腸桿菌的色胺酸操縱組 DNA 5’ 3’ 調節基因 啟動子 操作子 構造基因 trp C trp E trp A 無色胺酸存在下 ~ 抑制子 trp D trp B 進行色胺酸合成 P RNA 聚合酶 trp I O E D C B A
大腸桿菌的色胺酸操縱組 DNA 5’ 3’ 調節基因 啟動子 操作子 構造基因 trp C trp E trp A 有色胺酸存在下 ~ 抑制子 trp D trp B P RNA 聚合酶 trp I O 色胺酸 ( 協同抑制子 ) X 系統關閉 (OFF)
大腸桿菌的色胺酸操縱組 無色胺酸 有色胺酸
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],真核生物基因表現
染色體膨鬆
真核生物的基因表現調節 激素、 神經傳遞物質等
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],真核生物基因表現
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],真核生物基因表現
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],真核生物基因表現
 
遺  傳  工  程 應 用 範 圍 基因重組操作過程 基因放大技術 (PCR) 基 因 轉 殖
載體 ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
限制性核酸內切酶 ,[object Object],[object Object],5’-GAATTC-3’ 3’-CTTAAG-5’ AATTC-3’ G-5’ 3’-CTTAA 5’-G 5’-GAATTC-3’ 3’-CTTAAG-5’ AATTC-3’ G-5’ 3’-CTTAA 5’-G
限制酶切割 重組 DNA 送入宿主細胞 篩選含目標蛋白 的菌落 大量培養並 純化目標蛋白 目標基因 分離質體 轉形細胞可生長於 含抗生素的培養基 接合質體與目標基因
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],基因放大技術 (PCR)
2 2 2 3 ,[object Object],[object Object],[object Object]
基因擴增 -- 聚合酶連鎖反應 (PCR) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’
什麼是基因放大?  (2) 應用:   DNA 鹼基序列的分析   DNA  指紋分析   A. 親子鑑定  B. 刑案證據  C. 演化研究
利用基因轉殖細菌生產胰島素及其基因
基因轉殖植物 ,[object Object]
桃莉羊
帶有人類基因的基因轉殖羊 白臉羊的  纖維母細胞 黑臉羊打排卵針 玻莉 植入人類凝血因子基因 植入黑臉羊子宮 取卵子 卵細胞質與纖 維母細胞融合 卵細胞去核
[object Object],圖中兩隻老鼠同齡,左方體型較大者為帶有生長激素基因的轉殖鼠,右方體型較小者為正常型的老鼠。
突 變 突變的定義 基因突變的形成 突變的原因
突變的定義 - 遺傳物質發生變異 ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],基因突變的形成
鐮形血球貧血 ,[object Object],正常 DNA 模板股: 3’-GGACTTCTC-5’ 正常 mRNA 序列: 正常胺基酸序列:脯胺酸 - 麩胺酸 - 麩胺酸 ↓ ↓ 突變 DNA 模板股: 3’-GGACATCTC-5’ 突變 mRNA 序列: 5’-CCUG U AGAG-3’ 突變胺基酸序列:脯胺酸 - 纈 胺酸 - 麩胺酸 ↓ ↓ 5’-CCUGAAGAG-3’ A
[object Object],正常人 鐮形 血球性 貧血
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],突變的原因
物理因子引起突變 ,[object Object],或 T T T T
胸腺嘧啶雙體的修補過程 胸腺嘧啶雙體 造成 DNA 分子扭曲 核酸分解酶 移除受損部位 DNA 聚合酶 修補缺口 DNA 連接酶 封閉空隙
化學因子引起突變 ,[object Object],[object Object],HNO 2 脲嘧啶 胞嘧啶
亞硝酸引起點突變 胞嘧啶 (C) 脲嘧啶 (U) DNA  複製 DNA  複製 DNA  複製 + + 亞硝酸處理
萃取 DNA 實驗 加入洗碗精目的? 加入 5M NaCl 目的? 加入鳳梨汁目的? 加入 95% 冰酒精目的? 奇異果利用果菜汁機打碎 加入洗碗精,利用玻棒輕攪 加入 5M NaCl 並攪拌 加入鳳梨汁,並攪拌 紗布過濾 加入 95% 冰酒精 捲出白色物質 破壞細胞膜及核膜 使 DNA 呈溶解狀態 利用鳳梨汁中的蛋白酶分解染色體中蛋白質,及細胞質中蛋白質 使 DNA 凝聚析出 5M

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