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臨床に直結して役立つグラム染色【ADVANCED】
- 2. アウトライン • グラム染色の方法，撮影 • 検体評価 Geckler分類 • グラム染色所見と推定される細菌 • アトラス（良好検体，GPC，GPR，GNC，GNR，関節液） • 推定菌と抗菌薬の選択
- 3. • 塗抹は竹串・爪楊枝で可能． • 純粋培養ではないので白金耳や焼灼は必要ない． • 喀痰は樹枝状になるだけ薄く引き伸ばし，振って乾燥固定． • 尿は少量を数滴付ける． スライドガラスの下から温風で乾燥固定． グラム染色の方法① 塗抹
- 4. グラム染色の方法② 塗抹 • 染色は20秒，脱色は10秒でOK． • これで臨床的に十分使える． ①染色 ②染色 ③脱色 ④染色 20秒 20秒 10秒 20秒 軽く揺らし て脱色する 洗浄 洗浄 洗浄 洗浄 洗浄はスライドガ ラスの裏側から 検鏡
- 5. 喀痰の検体評価 Geckler分類 群 好中球 （1視野あたりの数） 上皮細胞 （1視野あたりの数） １ ＜１０ ＞２５ 不良検体 （上皮が多い） ２ １０～２５ ＞２５ ３ ＞２５ ＞２５ 誤嚥 ４ ＞２５ １０～２５ 良好検体 （上皮が少ない） ５ ＞２５ ＜１０ ※100倍視野（弱拡大） 要は，白血球が多い・ 上皮が少ない検体で見る． 上皮が多いのは唾液． 1･2群は検体取り直し！
- 7. スマホで撮影可能 • スマートフォンでグラム染色の撮影が可能． • カメラレンズを，接眼レンズから数mm離して撮影 する事が上手く撮影するコツ． • 環指，小指で固定すると良い． • 慣れるまでは何度もチャレンジする事が上達への道． 数mm離して撮影 環指，小指で固定
- 8. グラム染色で想定される一般的細菌 （頻度高いものに限定） グラム陽性 グラム陰性 球菌 集塊 ブドウ球菌 連鎖 肺炎球菌 ペプトストレプトコッカス 溶連菌 桿菌 柵状 コリネバクテリウム 球菌 双球 モラクセラ・カタラーリス 桿菌 大型 大腸菌 クレブシエラ 短稈菌 インフルエンザ桿菌 小型 緑膿菌
- 9. グラム染色アトラス グラム陽性球菌 染色・撮影：高橋 • グラム陽性球菌 • やや楕円形の双球菌． • 莢膜により周囲の非染色部 位がある． • 白血球貪食像あり． • 肺炎球菌
- 10. グラム染色アトラス グラム陽性桿菌 染色・撮影：高橋 • グラム陽性桿菌 • 柵状に並ぶ • コリネバクテリウム （口腔内常在菌）と推定
- 11. グラム染色アトラス グラム陰性球菌 染色・撮影：高橋 • グラム陰性球菌 • 双球菌． • 短軸状に並ぶ． • 白血球貪食像あり． • モラクセラ
- 12. グラム染色アトラス グラム陰性桿菌 染色・撮影：高橋 • グラム陰性桿菌 • 中型～大型． • 周囲に莢膜あり． • クレブシエラ・ ニューモニア • グラム陰性桿菌 • 小型 • ムコイド形成あり． • 緑膿菌 • グラム陰性桿菌 • 短稈菌 • 小型 • 貪食像あり • インフルエンザ桿菌
- 13. グラム染色アトラス 関節液のピロリン酸結晶 採取・染色・撮影：高橋 • ガラス片のような多角形の結晶． • 白血球貪食像あり． • 細菌なし． • 膝関節偽痛風 • 関節炎の鑑別に活用．