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高山茶與地瓜葉的抑癌效果和抗氧化能力的探討
                                 長榮大學生物科技學系-100學年度專題實習
                                   實習單位:南台科技大學生物科學系
                                      指導老師:陳健祺老師
                                        學生:胡嘉珊
            摘要:                                                                                                               HeLa
                                                                                                                                                                             高溫萃取高山茶
                                                                                                                                                                             低溫萃取高山茶

              氧氣雖然對於維持生命來說不可或                                           100
                                                                         90
                                                                                            87    83
                                                                                                                         83
                                                                                                                                                                             高溫萃取地瓜葉
                                                                                                                                                                             低溫萃取地瓜葉


            缺,卻也會形成一種稱為自由基的反應                                            80                                                     68
                                                                                                                                                        67




                                                             存活率百分比 %
                                                                         70                                                                                                            51

            物質,傷害體內的細胞,展開緩慢的破
                                                                                                                                                              56                            54
                                                                         60
                                                                         50

            壞連鎖反應,導致退化性疾病和癌症發                                            40
                                                                         30                                                                                            24    23

            生。而抗氧化物對於細胞經歷正常卻對
                                                                                                                                          17   16
                                                                         20    11                        14   13
                                                                                    11
                                                                         10

            自身帶來危害的「氧化壓力」這種生理                                             0
                                                                                     1.25                          2.5                              5                             10

            過程具有保護作用。因此本實驗利用高                                                                                                                                                 濃度〈mg/ml〉


            山茶葉和地瓜葉來研究抗氧化和抑制癌                             圖一、不同濃度之高溫萃取高山茶、低溫萃取高
            症的功效,將二者做為比較。                                 山茶、高溫萃取地瓜葉與地溫萃取地瓜葉對HeLa
                                                          細胞增生的影響。樣品處理HeLa細胞72小時後以
                                                          MTT測存活率。
            介紹:                                                                                                                                                               高溫萃取高山茶
                                                                                                                          MCF-7
              茶樹的葉子含有許多不同成分,統
                                                                                                                                                                              低溫萃取高山茶
                                                                                                                                                                              高溫萃取地瓜葉
                                                                        160
                                                                                                                                                                              低溫萃取地瓜葉
            稱為多酚。多酚是強效抗氧化物也具有                                           140

                                                                        120   99         111
                                                                                                                    125
                                                                                                                                                        121

                                                                                                                                                              99
                                                                                                                                                                                       97


            抗癌作用,可以阻止自由基對細胞的傷
                                                                                    96           104                           104
                                                           存活率百分比 %




                                                                        100                                                                                                                 80


            害,也有助於癌細胞凋亡。                                                80

                                                                        60
                                                                                                              47



              地瓜葉則是營養的蔬菜,可降低氧                                           40

                                                                        20
                                                                                                         24
                                                                                                                                          18   23
                                                                                                                                                                       27    25



            化壓力和自由基的傷害,降低心血管疾                                             0
                                                                                     1.25                      2.5                                  5                             10

            病的風險,以及抑制癌細胞的成長,這                                                                                                                                                 濃度〈mg/ml〉


            些對於人體的健康非常重要可促進健康                             圖二、不同濃度之高溫萃取高山茶、低溫萃取高
            和預防疾病。                                        山茶、高溫萃取地瓜葉與地溫萃取地瓜葉對
                                                          MCF-7細胞增生的影響。樣品處理MCF-7細胞
                                                          72小時後以MTT測存活率。
            方法:
                            高山茶、地瓜葉                                            C     PMA 1.25          2.5    5           10         (mg/ml)                       C   PMA 1.25 2.5              5   10   (mg/ml)
                             (水萃物)
                                                          MMP-9                                                                                MMP-9

            抑癌試驗                           抗氧化試驗          MMP-2
                                                                                                                                               MMP-2


                                                          圖三、不同濃度之高溫萃取高 圖四、不同濃度之低溫萃取高
  增生                轉移            DPPH Assay   螯合亞鐵能力測定
                                                          山茶水萃物對HT-1080細胞分 山茶水萃物對HT-1080細胞分
                                                          泌MMP-2與MMP-9的影響。 泌MMP-2與MMP-9的影響。
                 SDS-PAGE                                                     C     PMA 1.25 2.5              5               10     (mg/ml)                       C        PMA 1.25 2.5         5   10   (mg/ml)
MTT Assay
               Electrophoresis
                                                          MMP-9                                                                                MMP-9

                   MMP- 2
                                                          MMP-2
                   MMP- 9                                                                                                                      MMP-2

                                                          圖五、不同濃度之高溫萃取地 圖六、不同濃度之低溫萃取地
            結果:                                           瓜葉水萃物對HT-1080細胞分 瓜葉水萃物對HT-1080細胞分
                                                          泌MMP-2與MMP-9的影響。 泌MMP-2與MMP-9的影響。
                結果顯示,高山茶葉的抑癌效果高
            於地瓜葉,常溫萃取的地瓜葉抑癌效果                             致謝
            也會比高溫萃取的地瓜葉效果好。高山                               暑假二個月的實習時間過的好快,讓我學習到好多知識,
                                                          不僅在實驗上受益良多,也讓我學習到獨立實驗的責任感和
            茶葉在濃度5 mg/ml能有效地抑制HT-                         經驗,不僅要規劃好實驗進度也要集中精神做實驗。
            1080細胞分泌(MMP-2與-9),但地瓜葉則                        讓我有這麼充實的暑假實習,要特別感謝南台科技大學
            沒有抑制力。而抗氧化的測驗結果顯示                             的陳健祺教授讓我有這個學習的機會,平常老師也總會不厭
            0.625 mg/ml高山茶相當於10.37 μg/ml                  其煩的細心指導我和幫助我。在實驗室的日子裡也要特別感
                                                          謝宏聖學長、西母學長、琇敏學姐、瑀玟學姊、乙召學姐們
            維他命C的清除能力,高山茶抗氧化能力                            以及蕙雯、意雯大四的專題生在實驗上的指導和幫助,感謝
            相對於地瓜葉也較好。                                    他們在實驗上的熱心幫忙和指導,讓我能順利完成實驗。

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  • 1. 高山茶與地瓜葉的抑癌效果和抗氧化能力的探討 長榮大學生物科技學系-100學年度專題實習 實習單位:南台科技大學生物科學系 指導老師:陳健祺老師 學生:胡嘉珊 摘要: HeLa 高溫萃取高山茶 低溫萃取高山茶 氧氣雖然對於維持生命來說不可或 100 90 87 83 83 高溫萃取地瓜葉 低溫萃取地瓜葉 缺,卻也會形成一種稱為自由基的反應 80 68 67 存活率百分比 % 70 51 物質,傷害體內的細胞,展開緩慢的破 56 54 60 50 壞連鎖反應,導致退化性疾病和癌症發 40 30 24 23 生。而抗氧化物對於細胞經歷正常卻對 17 16 20 11 14 13 11 10 自身帶來危害的「氧化壓力」這種生理 0 1.25 2.5 5 10 過程具有保護作用。因此本實驗利用高 濃度〈mg/ml〉 山茶葉和地瓜葉來研究抗氧化和抑制癌 圖一、不同濃度之高溫萃取高山茶、低溫萃取高 症的功效,將二者做為比較。 山茶、高溫萃取地瓜葉與地溫萃取地瓜葉對HeLa 細胞增生的影響。樣品處理HeLa細胞72小時後以 MTT測存活率。 介紹: 高溫萃取高山茶 MCF-7 茶樹的葉子含有許多不同成分,統 低溫萃取高山茶 高溫萃取地瓜葉 160 低溫萃取地瓜葉 稱為多酚。多酚是強效抗氧化物也具有 140 120 99 111 125 121 99 97 抗癌作用,可以阻止自由基對細胞的傷 96 104 104 存活率百分比 % 100 80 害,也有助於癌細胞凋亡。 80 60 47 地瓜葉則是營養的蔬菜,可降低氧 40 20 24 18 23 27 25 化壓力和自由基的傷害,降低心血管疾 0 1.25 2.5 5 10 病的風險,以及抑制癌細胞的成長,這 濃度〈mg/ml〉 些對於人體的健康非常重要可促進健康 圖二、不同濃度之高溫萃取高山茶、低溫萃取高 和預防疾病。 山茶、高溫萃取地瓜葉與地溫萃取地瓜葉對 MCF-7細胞增生的影響。樣品處理MCF-7細胞 72小時後以MTT測存活率。 方法: 高山茶、地瓜葉 C PMA 1.25 2.5 5 10 (mg/ml) C PMA 1.25 2.5 5 10 (mg/ml) (水萃物) MMP-9 MMP-9 抑癌試驗 抗氧化試驗 MMP-2 MMP-2 圖三、不同濃度之高溫萃取高 圖四、不同濃度之低溫萃取高 增生 轉移 DPPH Assay 螯合亞鐵能力測定 山茶水萃物對HT-1080細胞分 山茶水萃物對HT-1080細胞分 泌MMP-2與MMP-9的影響。 泌MMP-2與MMP-9的影響。 SDS-PAGE C PMA 1.25 2.5 5 10 (mg/ml) C PMA 1.25 2.5 5 10 (mg/ml) MTT Assay Electrophoresis MMP-9 MMP-9 MMP- 2 MMP-2 MMP- 9 MMP-2 圖五、不同濃度之高溫萃取地 圖六、不同濃度之低溫萃取地 結果: 瓜葉水萃物對HT-1080細胞分 瓜葉水萃物對HT-1080細胞分 泌MMP-2與MMP-9的影響。 泌MMP-2與MMP-9的影響。 結果顯示,高山茶葉的抑癌效果高 於地瓜葉,常溫萃取的地瓜葉抑癌效果 致謝 也會比高溫萃取的地瓜葉效果好。高山 暑假二個月的實習時間過的好快,讓我學習到好多知識, 不僅在實驗上受益良多,也讓我學習到獨立實驗的責任感和 茶葉在濃度5 mg/ml能有效地抑制HT- 經驗,不僅要規劃好實驗進度也要集中精神做實驗。 1080細胞分泌(MMP-2與-9),但地瓜葉則 讓我有這麼充實的暑假實習,要特別感謝南台科技大學 沒有抑制力。而抗氧化的測驗結果顯示 的陳健祺教授讓我有這個學習的機會,平常老師也總會不厭 0.625 mg/ml高山茶相當於10.37 μg/ml 其煩的細心指導我和幫助我。在實驗室的日子裡也要特別感 謝宏聖學長、西母學長、琇敏學姐、瑀玟學姊、乙召學姐們 維他命C的清除能力,高山茶抗氧化能力 以及蕙雯、意雯大四的專題生在實驗上的指導和幫助,感謝 相對於地瓜葉也較好。 他們在實驗上的熱心幫忙和指導,讓我能順利完成實驗。