1. 尋找癌細胞轉移時fibronectin與肺臟血管內皮細胞DPP IV
的結合位置
長榮大學生物科技學系 100學年度專題實習
實習單位:國立成功大學醫學院生物化學兼分子生物學研究所
指導老師:鄭宏祺老師
指導學長：李明澤學長
Abstract 報告者：曾律萍
本實驗室鄭宏祺老師之前已經研究出來在癌細胞轉移的時候癌細胞上的fibronectin(FN)會有聚集堆疊的現象，且FN 之
一片段(FN X)會與肺臟血管內皮細胞DPP IV(dipeptidyl peptidase IV) 結合，而造成癌細胞轉移到肺臟，如果找出確
切結合位置，並設法阻斷FN X和DPP IV的黏著反應，就有可能使癌細胞的轉移能力下降。
Introduction
癌症一直是國人死亡的主要原因，目前為止人類對於癌症的致病機制或確切原因仍然不是很清楚。而惡性腫瘤可怕的一
部份就是它容易轉移，就算盡早切除腫瘤，還是會有復發甚至轉移到其他器官的風險，因此研究癌症的致病機轉及其轉
移機制，對人類來說都是非常重要的課題。經由本實驗以序列刪除(serial deletion)的方式進行affinity test，試著縮短FN X
與DPP IV 的結合位置的胺基酸範圍，而後找出FN X與DPP IV的binding site，並設法阻斷FN X和DPP IV的結合，或許
可以減少癌症轉移的可能，更能幫助病人能更有效地進行治療。
Method
•分別製造出
需要的 • Bam HI check
insert和 •前後分別接
Constr • Insert check Affinity 上 MBP與HA
vector Check • Protein taq
uction •Ligation induction test • Pull down
•tansformati check
on
Results
Pull down Before pull down
Primer:Xa21(96)
圖二、 FN X affinity test A片段(全長) & B片段
圖一、 FN X affinity test A片段(全長) & B片段(半長) (半長)第二次DPP IV pull down後的結果。這次
第一次DPP IV pull down後的結果。在全長的部分有 加入沒有pull down過原始sample的對照組。
訊號，但此次實驗並沒有做沒有pull down過的原始 但是沒有pull down過的原始sample的組別訊號量
sample的組別來做比較，造成我們沒辦法確定它的位 卻差異很大
置和定量是否正確。
Pull down Before pull down Discussion
本實驗是以serial deletion的方式，慢慢縮短FN X與DPP IV 結合位置
的胺基酸範圍，以上實驗證明了FN X的B片段可能真的無法與DPP IV
binding，所以我們之後要再製造出不同長度的FN X片段,以serial
deletion的方式繼續進行下一輪的affinity test。
誌謝
感謝成功大學醫學院生物化學兼分子生物學研究所
鄭宏祺老師、李明澤學長用心指導；
較短曝光時間
感謝明敏學姐、依珊學姐、馨慧學姐、錦雲學姐、子偉學長、宥全學
長、昭旻學長以及實驗室碩一班學長和其他實習生們的陪伴與幫助；
圖三、最後又小心重做了一次DPP IV pull down 感謝我的父母一路支持我、鼓勵我、安慰我；
此圖可以看出FN X B片段可能真的無法與DPP IV 還有感謝宋瑩珠老師、黃惠蘭老師及許鴻猷老師擔任我們這兩個月暑
binding 。 期專題實習的老師。