吳岱穎
- 1. 十字花科蔬菜花藥培養之培養基研究
(A)
長榮大學生物科技學系-100學年度專題實習
實習單位:鳳山熱帶園藝試驗分所
指導老師:邱金春老師
摘要 結果
影響花藥生成癒合組織的因子有花藥 表(一) 誘導率/% = 花藥胚狀體或愈傷組織數/ 接種花藥數×100%
本身的基因型、外在環境中的溫度、
表(一) 不同誘導培養基濃度下花藥癒傷組織的生成
培養基、生長激素及日照長度等都會
影響花藥癒合組織的形成。 濃度編號 接種花藥數 Callus數 誘導率/%
(a)1.0 mg/L 2,4-D
這次所做的實驗是經由參考 + 0.5mg/L KT
42 2 4.8
文獻,發覺大部分的濃度都只做到 (b)2.0 mg/L 2,4-D
2 4.8
+ 1.0mg/L KT
42
2.0 mg/L 2,4-D就沒有繼續往上實驗,
(c)3.0 mg/L 2,4-D
2, 4-D的使用可促進花粉分裂,形成
+ 1.5mg/L KT
34 5 17.7
癒傷組織,而Kinetin(KT)可以幫助
(d)4.0 mg/L 2,4-D
花藥誘導成植株,抑制癒傷組織的生 + 2.0mg/L KT
33 3 9.1
成,因此將2.0 mg/L 2,4-D+
1.0mg/L Kinetin當做對照組,在設 (A) (B)
計3種不同的生長激素濃度,尋找出
最適合誘導出callus的濃度。
步驟
取花蕾2~3mm後,
將花蕾放入4℃冰箱 (A) 4.0 mg/L 2,4-D + 2.0mg/L KT誘導出
(C)
預處理3天 的擬胚,圈起來的即擬胚,在擬胚下方的
用75%酒精浸泡10~15秒,在進入0.1%NaOCl 是Callus(正面)
(B) 2.0 mgL 2,4-D + 1.0mg/L KT誘導出
(展著劑)溶液中,用無菌水清洗3~4次。 植物的器官,圈起來的即分化出來的植物
器官 (葉子)
在用鑷子在顯微鏡下撥開花蕾, (C)這是分化後擬胚或植物若生長順利則會
變成植株的樣子(是由實驗室提供的照片)
取出花藥,移到三角瓶中培養。
結論
此次實驗觀察到3.0 mg/L 2,4-D + 1.5mg/L KT誘導率最高,但是
接種完將花藥放入30℃生長箱中培養 沒有分化出擬胚或器官,其次是4.0 mg/L 2,4-D + 2.0mg/L KT,
3天後 最後才是1.0 mg/L 2,4-D + 0.5mg/L KT和2.0 mg/L 2,4-D +
將花藥移至25℃暗處理下培養 1.0mg/L KT,此兩種濃度的誘導率相同。3.0 mg/L 2,4-D +
1.5mg/L KT和對照組相比誘導率更好,但4.0 mg/L 2,4-D +
1天後 2.0mg/L KT誘導率卻不如3.0 mg/L 2,4-D + 1.5mg/L KT,但濃度
在25℃弱光下培養並且觀察變化。 比對照組高的誘導率也有較高的趨勢。
此次實驗中設計的激素濃度確實會分化出擬胚及植物器官,而
能直接長成植株,代表已找到適合此植物的生長因子,有更進一步
致謝 研究的空間。
這次暑假實習很感謝鳳山熱帶園藝試驗分所的照顧,讓我度過一個特別的暑假,也謝謝蔬菜系主任讓我有這
個機會和邱金春老師學習植物組織培養的知識。
在試驗所實習期間,讓我覺得就算是一個實習生,而不是真正在裡面研究工作的人員,試驗所的各位老師或
職員也不會對實習生有不同的對待,而主任和各位老師也會教導我們不同的知識,若是有任何關於植物的問題
詢問主任或老師,也總是不吝嗇的為我們解答疑問,甚至會在補充更多關於植物的學問知識讓我們知道,而我
的指導老師也非常鼓勵實習生旁聽試驗所舉辦的演講會,而不單單只有植物組織培養方面的知識,也希望我們
能從演講的內容中啟發不一樣的靈感,學到更淵博的知識,當我在無菌台上笨手笨腳的切割蔬菜或是移植花藥
的癒傷組織時,研究助理員會教導我如何使蔬菜更不容易污染的小訣竅,也謝謝老師當我有不懂的問題時,總
是不厭其煩的和我講解,並且讓我知道每個步驟,都有它們各自的道理存在,讓我學到了很多植物組織培養的
知識。