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十字花科蔬菜花藥培養之培養基研究
   (A)
                     長榮大學生物科技學系-100學年度專題實習
                       實習單位:鳳山熱帶園藝試驗分所
                         指導老師:邱金春老師
摘要                        結果
影響花藥生成癒合組織的因子有花藥               表(一)     誘導率/% = 花藥胚狀體或愈傷組織數/ 接種花藥數×100%
本身的基因型、外在環境中的溫度、
                                表(一)            不同誘導培養基濃度下花藥癒傷組織的生成
培養基、生長激素及日照長度等都會
影響花藥癒合組織的形成。                    濃度編號              接種花藥數  Callus數 誘導率/%
                                (a)1.0 mg/L 2,4-D
       這次所做的實驗是經由參考               + 0.5mg/L KT
                                                    42           2        4.8
文獻,發覺大部分的濃度都只做到                 (b)2.0 mg/L 2,4-D
                                                                 2        4.8
                                  + 1.0mg/L KT
                                                    42
2.0 mg/L 2,4-D就沒有繼續往上實驗,
                                (c)3.0 mg/L 2,4-D
2, 4-D的使用可促進花粉分裂,形成
                                  + 1.5mg/L KT
                                                    34           5       17.7
癒傷組織,而Kinetin(KT)可以幫助
                                (d)4.0 mg/L 2,4-D
花藥誘導成植株,抑制癒傷組織的生                  + 2.0mg/L KT
                                                    33           3        9.1
成,因此將2.0 mg/L 2,4-D+
1.0mg/L Kinetin當做對照組,在設  (A)                               (B)
計3種不同的生長激素濃度,尋找出
最適合誘導出callus的濃度。

步驟
         取花蕾2~3mm後,
         將花蕾放入4℃冰箱                                   (A) 4.0 mg/L 2,4-D + 2.0mg/L KT誘導出
                          (C)
             預處理3天                                   的擬胚,圈起來的即擬胚,在擬胚下方的
用75%酒精浸泡10~15秒,在進入0.1%NaOCl                          是Callus(正面)
                                                     (B) 2.0 mgL 2,4-D + 1.0mg/L KT誘導出
(展著劑)溶液中,用無菌水清洗3~4次。                                 植物的器官,圈起來的即分化出來的植物
                                                     器官 (葉子)
 在用鑷子在顯微鏡下撥開花蕾,                                       (C)這是分化後擬胚或植物若生長順利則會
                                                      變成植株的樣子(是由實驗室提供的照片)
 取出花藥,移到三角瓶中培養。
                                結論
                                此次實驗觀察到3.0 mg/L 2,4-D + 1.5mg/L KT誘導率最高,但是
 接種完將花藥放入30℃生長箱中培養              沒有分化出擬胚或器官,其次是4.0 mg/L 2,4-D + 2.0mg/L KT,
          3天後                   最後才是1.0 mg/L 2,4-D + 0.5mg/L KT和2.0 mg/L 2,4-D +
  將花藥移至25℃暗處理下培養                1.0mg/L KT,此兩種濃度的誘導率相同。3.0 mg/L 2,4-D +
                                1.5mg/L KT和對照組相比誘導率更好,但4.0 mg/L 2,4-D +
               1天後              2.0mg/L KT誘導率卻不如3.0 mg/L 2,4-D + 1.5mg/L KT,但濃度
 在25℃弱光下培養並且觀察變化。               比對照組高的誘導率也有較高的趨勢。
                                    此次實驗中設計的激素濃度確實會分化出擬胚及植物器官,而
                                能直接長成植株,代表已找到適合此植物的生長因子,有更進一步
致謝                              研究的空間。
  這次暑假實習很感謝鳳山熱帶園藝試驗分所的照顧,讓我度過一個特別的暑假,也謝謝蔬菜系主任讓我有這
個機會和邱金春老師學習植物組織培養的知識。
 在試驗所實習期間,讓我覺得就算是一個實習生,而不是真正在裡面研究工作的人員,試驗所的各位老師或
職員也不會對實習生有不同的對待,而主任和各位老師也會教導我們不同的知識,若是有任何關於植物的問題
詢問主任或老師,也總是不吝嗇的為我們解答疑問,甚至會在補充更多關於植物的學問知識讓我們知道,而我
的指導老師也非常鼓勵實習生旁聽試驗所舉辦的演講會,而不單單只有植物組織培養方面的知識,也希望我們
能從演講的內容中啟發不一樣的靈感,學到更淵博的知識,當我在無菌台上笨手笨腳的切割蔬菜或是移植花藥
的癒傷組織時,研究助理員會教導我如何使蔬菜更不容易污染的小訣竅,也謝謝老師當我有不懂的問題時,總
是不厭其煩的和我講解,並且讓我知道每個步驟,都有它們各自的道理存在,讓我學到了很多植物組織培養的
知識。

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