Dokumen tersebut memberikan informasi tentang prosedur pemeriksaan Gram dan pewarnaan lain untuk identifikasi bakteri dan jamur pada sampel kulit dan lesi. Terdapat daftar alat, bahan, dan langkah-langkah untuk mengambil sampel, melakukan pewarnaan Gram, Giemsa, dan KOH, serta interpretasi hasilnya dibawah mikroskop.

1. Pemeriksaan Gram
Alat
 Gelas objek
 Kaca penutup
 Kapas lidi steril
 Tabung reaksi
 Api bunsen
 Spuit 3cc,5cc,10cc
 Mikroskop
Bahan
 Gentian violet 2%
 Lugol 1%
 Alkohol 95%
 Karbol fuchsin 0,35%
 Minyak imersi
 Safranin
 Povidon iodin 10%
 NaCI 0,9%
 Kasa
1

2. • Cara pengambilan sampel
krusta- ulkus:
kompres NaCl 0.9% 15 menit
swab dasar lesi dengan swab steril
pulas specimen pada dek glass
lakukan pewarnaan
bula-pustul
Disinfeksi dengan alkohol
aspirasi dengan jarum
letakkan pada dek glass
keringkan spesimen yang basah dengan dianginkan
lakukan pewarnaan

3. Pemeriksaan Gram
3
Kristal violet (30 detik) Bilas (5 detik)

4. Pemeriksaan Gram
4
Iodine (1 menit) Bilas air (5 detik)

5. Pemeriksaan Gram
5
Dekolorisasi (15-30 detik)
Bilas air (5 detik)

6. Pemeriksaan Gram
6
Bilas air (5 detik)
Counterstain dengan safranin
(60-80 detik)

7. Pemeriksaan Gram
7
Pemeriksaan sediaan di bawah
mikroskop (x100)
Keringkan

8. Hasil Pewarnaan Gram
8
Staphylococcus, Streptococcus,
Candida, basil fusiformis
N. Gonorrhoeae, Haemophilus ducreyi,
sel PMN,sel epitel, clue cells,
Campylobacter

9. Pemeriksaan mikroskopik langsung
• tidak dapat membedakan spesies bakteri
 pemeriksaan lanjut guna menentukan identifikasi
9

10. Pewarnaan Giemsa
• Tujuan : identifikasi
morfologi bakteri
dan virus
• Reagen
• Methylene blue 0,3 gr
• Aquades 100 ml
Alat dan Bahan
• Sengkelit
• Gelas objek
• Kaca penutup
• Lampu spritus
• Methylene blue
• Aquades
• Mikroskop
Elenitsas R, Chu EY. Pathology of Skin Lesions. Wolff K, Goldsmith LA, Katz SI, Gilchrest BA, Paller AS, Leffel DJ. Fitzpatrick’s Dermatology in general medicine. 9th ed. New York: McGraw-Hill; 2019.

11. Cara pengambilan spesimen
• bersihkan dengan NaCl 0.9%
• aspirasi dari dasar vesikel dengan jarum
• letakkan pada dek glass
• keringkan spesimen yang basah dengan dianginkan
• lakukan pewarnaan
11

12. Prosedur Pemeriksaan
1. Buat suspensi kuman menggunakan NaCl pada gelas objek dan
keringkan diudara.
2. Panaskan diatas lampu spiritus.
3. Tuangkan bahan warna methylene blue pada gelas objek dan biarkan 3-
4 menit. Buang sisa zat warna dari objek glass.
4. Cuci dengan air biasa
5. Keringkan gelas objek tersebut dengan kertas pengering
6. Tetesi minyak emersi, lihat dibawah mikroskop, pembesaran 100x
Elenitsas R, Chu EY. Pathology of Skin Lesions. Wolff K, Goldsmith LA, Katz SI, Gilchrest BA, Paller AS, Leffel DJ. Fitzpatrick’s Dermatology in general medicine. 9th ed. New York: McGraw-Hill; 2019.

13. Prosedur Pemeriksaan
Elenitsas R, Chu EY. Pathology of Skin Lesions. Wolff K, Goldsmith LA, Katz SI, Gilchrest BA, Paller AS, Leffel DJ. Fitzpatrick’s Dermatology in general medicine. 9th ed. New York: McGraw-Hill; 2019.

14. Interpretasi
• Bakteri berwarna biru, bentuknya akan terlihat jelas
Staphylococcus

15. Interpretasi
Multinucleated giant cell

16. Pemeriksaan KOH
• Pemeriksaan langsung dengan mikroskop diberikan KOH pada
preparat spesimen
• Hasil kerokan kulit diletakkan pada gelas objek
• Teteskan KOH 10% 1 tetes (3 ml)
• Tutup dengan kaca penutup
• Tunggu 10 – 15 menit agar keratin lisis
• Dilihat dibawah mikroskop

17. Cara pengambilan spesimen
 Kulit: kerokan kulit menggunakan skalpel atau selotip pada lesi aktif
 Kuku: kerokan kuku dari daerah antara batas dasar kuku dan
lempeng kuku bagian dalam
 Rambut: rambut harus dicabut bukan dipotong, kerokan kulit
disekitar rambut juga diambil
17

18. Pengambilan Spesimen KOH
Kuypers J, Gaydos CA, Peeling RW. Principles of Laboratori STIs. In: Holmes et. al. Sexually Transmitted Diseases, 4th ed. New York: McGraw-
Hill; 2008. P937-957.
1. Disinfeksi
dengan alkohol
70 %
2.Tempel selotip
pada lesi kulit
3. Tempel
selotip pada
gelas objek
4. Tetes KOH 1 - 2
tetes pada gelas
objek

19. Pengambilan Spesimen KOH
Kuypers J, Gaydos CA, Peeling RW. Principles of Laboratori STIs. In: Holmes et. al. Sexually Transmitted Diseases, 4th ed. New York: McGraw-
Hill; 2008. P937-957.
5. Disinfeksi dengan
alkohol 70 %
6. Kerok dengan pisau bedah
dan arahkan ke gelas objek
7. Tetes KOH 1-
2 tetes
8. Tutup dengan
kaca penutup

20. Pewarnaan KOH
Mempercepat lisis keratin kulit Dilihat dengan pembesaran objek 10X dan
40X
Elenitsas R, Chu EY. Pathology of Skin Lesions. Wolff K, Goldsmith LA, Katz SI, Gilchrest BA, Paller AS, Leffel DJ. Fitzpatrick’s Dermatology in general medicine. 9th ed. New York: McGraw-Hill; 2019.

21. Hasil mikroskopis KOH
Pseudohifa Hifa panjang bersekat Spaghetti and meatball