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Patologia clinica - Ematologia, emocromo
- 1. PROGRAMMA LEZIONE 1 (09/11) •Concetti generali di patologia clinica • L'esame di laboratorio • Ematologia di laboratorio • Le anemie LEZIONE 2 (10/11) • Emostasi e rischio trombotico • Medicina trasfusionale • Test di istocompatibilità e per i trapianti 1
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- 3. EMATOLOGIA DI LABORATORIO •EMATOLOGIA • IL SANGUE • Plasma e siero • Elementi corpuscolati • ESAME EMOCROMOCITOMETRICO • Globuli rossi • Emoglobina • Indici eritrocitari • Reticolociti • Piastrine • Globuli bianchi • PROFILO MARZIALE • Sideremia (ferro) • Ferritina • Transferrina 3
- 4. Ematologia 4 Studiare il sangue ei tessuti ematopoietici Esami quantitativi Conteggio e dimensionamento di particelle Esami qualitativi Morfometria Citochimica Citofluorimetria
- 5. Il sangue 5 È ilmateriale biologico sul quale viene effettuata la maggior parte delle analisi biochimico-cliniche. È un tessuto connettivo liquido ed è chiamato anche tessuto ematico, che consente: • L’ossigenazione dei tessuti, grazie al trasporto dell’ossigeno da parte dei globuli rossi; • Le difese immunitarie, mediante i globuli bianchi; • L’emostasi, per la presenza di piastrine e fattori della coagulazione; • Il trasporto di nutrienti, metaboliti, enzimi, ormoni, elettroliti e gas disciolti In un soggetto adulto di circa 70Kg, il volume totale di sangue si aggira intorno a 5-6 litri: questo valore varia in rapporto a età, sesso, peso e stato di idratazione.
- 6. Il sangue 6 Prelievo di sangue Venoso: da1-2 ml a 10-20 ml, da vena periferica, con vacutainer; per indagini chimico-cliniche di routine. Capillare: da qualche μl a 1 ml, da polpastrello, lobo dell’orecchio, con capillari; utile per l’equilibrio acido- base. Arterioso: circa 5 ml, da arteria radiale, con vacutainer; per lo studio dei parametri dell’equilibrio acido-base e dei gas nel sangue.
- 7. Il sangue 7 Sangue: • Partecorpuscolata • Globuli rossi • Globuli bianchi • Piastrine • Parte liquida • Plasma • Siero: ciò che si ottiene dopo attivazione del processo coagulativo
- 8. Plasma e Siero 8 PLASMA:componente fluida del sangue, cioè il sangue deprivato delle cellule, ma che contiene i fattori della coagulazione. SIERO: identifica quel liquido normalmente chiaro che si separa dal sangue quando questo viene lasciato coagulare. Quindi il siero è la componente liquida del sangue che rimane dopo la rimozione degli elementi cellulari e del coagulo di fibrina.
- 9. Plasma Il plasma èun fluido leggermente alcalino (pH 7,4), con caratteristico colore giallino, costituito per il 90% da acqua e per il 10 % da sostanza secca. La sostanza secca è formata al 90% da sostanze organiche: • glucidi (glucosio) • lipidi (colesterolo, trigliceridi, fosfolipidi, lecitina, grassi) • proteine (globuline, albumine, fibrinogeno) • glicoproteine • ormoni (gonadotropine, eritropoietina, trombopoietina) • amminoacidi • Vitamine Il 10% è costituita da minerali, dissolti sotto forma ionica, cioè dissociati in ioni positivi e negativi. 9
- 10. Plasma Il plasma contribuisceal mantenimento del volume del sangue (VOLEMIA). In diverse condizioni fisiologiche (invecchiamento, gravidanza, posizione del corpo, ecc.) o patologiche (ustioni, epatopatie, nefropatie, malattie del metabolismo, ecc.) si possono riscontrare variazioni del volume plasmatico: • Normovolemia • Ipovolemia o oligoemia • Pletora o ipervolemia 10
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- 12. Esame emocromocitometrico 12 Con iltermine esame emocromocitometrico con formula leucocitaria, o con quello più noto di emocromo o emogramma, si indica una serie di valutazioni qualitative e quantitative relative alle diverse popolazioni di elementi corpuscolati presenti nel sangue periferico. I principali parametri ematologici valutati dall’esame emocromocitometrico sono i seguenti: • conta e dimensionamento dei globuli rossi (eritrociti, ematocrito) • conta delle piastrine (trombociti) • conta differenziale dei globuli bianchi (leucociti) • concentrazione di emoglobina (Hb) • striscio su vetrino per potenziali anomalie morfologiche
- 13. Esame emocromocitometrico 13 Parametro NomeValori di riferimento Cause di anormalità HCT Hematocrit 40-50% 35-45% anemie; emoconcentrazione RBC Red Blood Cells 4.5-5.5x106/l 4-5x106/l anemie; leucemie MCV Mean Corpuscular Volume 80-97 fl -talassemia; sideropenia; deficit B12/folato RDW Red Cell Distribution Width 11-16% Anemia sideropenica e megaloblastica HGB Hemoglobin 12-15 g/dl anemie MCH Mean Corpuscular Hemogl. 25-34 pg Anemie ipocromiche WBC White Blood Cells 4-11x103/l; 60% neutr.; 30% linf.; 5% mono; 4%eosino.;1% basof. infezioni; leucemie; processi infiammatori PLT Platelets 150-400x103/l Aplasia, leucemie, CID MPV Mean Platelet Vol. 7-10 fL piastrinopatie
- 14. Globuli rossi 14 La grandemaggioranza degli elementi figurati è rappresentata dagli ERITROCITI: • Cellule prive di nucleo ed organelli • Superficie biconcava a forma di ciambella con diametro di 7 micron → maggior superficie di scambio • Notevole elasticità per sopportare le sollecitazioni meccaniche subite nel passaggio attraverso i capillari • Ambiente interno costante per mantenere l’emoglobina in forma ridotta per gli scambi respiratori (O2↔CO2) • Vita media di 120 giorni • Composto per il 66% di acqua e per il restante 33% di proteine, tra cui quella maggiormente rappresentata è l’Emoglobina (95%)
- 15. Emoglobina 15 • Indicata conHb • Solubile e di colore rosso (cromoproteina, 540 nm) • Proteina tetramerica che lega l’ossigeno e lo cede ai tessuti • Costituita da due coppie di catene polipetidiche (alfa e beta) ciascuna collegata con un radicale di eme • Valori di riferimento: uomo 13,5-17 g/dl, donna 12,5-16 g/dl disidratazione, enfisema, policitemia, poliglobulia, shock, ustioni, da trasfusioni ripetute deficit di ferro, deficit di vitamina B12, emorragie, epatopatie, infezioni gravi, insufficienza renale cronica, leucemie, da neoplasie maligne
- 16. Indici eritrocitari 16 Ematocrito (Hct) •quantità percentuale dei globuli rossi rispetto alla frazione liquida del sangue • VR 38-50% uomo, 36-45% donna Volume Corpuscolare Medio (VCM) (Mean Corpuscular Volume, MCV) • Volume medio dei globuli rossi • È importante nel classificare le anemie come: normocitiche, microcitiche, macrocitiche • Viene calcolato sulla distribuzione dell’istogramma di distribuzione degli eritrociti • VR ♀80.8-100/♂80.5-99.7 fl Ampiezza di distribuzione (Red cell Distribution Width, RDW) • Fornisce informazioni sulla variazione delle dimensioni eritrocitarie, o anisocitosi • Viene calcolato sulla distribuzione dell’istogramma di distribuzione degli eritrociti e rappresenta il coefficiente di variazione (deviazione standard) • VR ♀/♂ <15%
- 17. Indici eritrocitari Emoglobina corpuscolaremedia • Mean Corpuscolar Haemoglobin (MCH) • contenuto medio di emoglobina in un singolo globulo rosso • Hb/n° globuli rossi per mm3 • VR 26-32 picogrammi Concentrazione corpuscolare media di emoglobina • Mean Corpuscolar Haemoglobin Concentration (MCHC) • In percentuale il volume della massa eritrocitaria rispetto al volume totale del campione di sangue • VR 32-36% 17
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- 19. Reticolociti • Precursori direttidei globuli rossi • Presenti sia a livello midollare sia nel sangue periferico • 0,5-2% dei globuli rossi totali • Contengono mitocondri e ribosomi, ma non il nucleo • Vita di 3-4 giorni e forse 24h in circolo • La percentuale di reticolociti può essere utilizzata come un indicatore della eritropoiesi ed è spesso utilizzata per valutare i pazienti anemici • In paziente anemico: • Un numero = o ↓ di reticolociti (≤2%) può indicare scarsa eritropoiesi da parte del midollo osseo, come per un deficit di Fe, folati o vitB12 • Una reticolocitosi (>2%) può indicare emolisi o emorragia 19
- 20. Piastrine • piccoli elementicorpuscolati del sangue periferico (di 2-4 µm) • privi di sostanza nucleare • 200.000-400.000 per mmc • vita media: 8-10 giorni • prodotte nel midollo osseo per frammentazione di grandi elementi cellulari detti megacariociti • ruolo importante nel processo emostatico: favoriscono l’attivazione del processo coagulativo • 70% nel sangue circolante, 30% nella milza 20
- 21. Piastrine Platelets (PLT) Conteggio dellepiastrine (o trombociti) per unità di volume di sangue periferico anticoagulato Piastrinopenia Diminuzione del tasso di piastrine circolanti nel sangue periferico <400000 piastrine/mm3 Piastrinosi: Aumento del numero delle piastrine circolanti 21
- 22. Globuli bianchi • Illoro numero globale varia da 5.000 a 9.000 per mm3 (ml) di sangue • Sono detti così perché quando il sangue viene posto in una provetta a sedimentare si collocano in uno strato biancastro posto superiormente agli eritrociti (buffy coat) • Svolgono la loro funzione nel connettivo e perciò utilizzano il sangue per migrare dal midollo osseo ai tessuti • Possono essere distinti a seconda della presenza o meno di granulazioni citoplasmatiche in: • Granulociti • Agranulociti 22
- 23. Globuli bianchi: formulaleucocitaria 23 Granulociti Neutrofili 40-75% Eosinofili 0-7% Basofili <1% Agranulociti Linfociti 20-45% Monociti 0-8% Formula al microscopio ottico Formula automatica basata su parametri • Morfologici: dimensione e/o complessità cellulare • Citochimici: contenuto in mieloperossidasi
- 24. Profilo marziale 24 • Sideremia(ferro) • Ferritina • Transferrina
- 25. Sideremia (ferro) • Indispensabileper formare l’emoglobina, la mioglobina, etc. • VN uomo 75-160 ug/dL, donna 60-150 ug/dL • In un individuo adulto sono presenti circa 4000 mg di ferro • emoglobina 2500 mg • mioglobina ed enzimi 300 mg • deposito (ferritina) 1000 mg • plasma 4 mg • Assorbimento 1-2 mg/die • Perdite 1-2 mg/die, mestruazione 20 mg, gravidanza 700 mg • Nel plasma il ferro è legato alla transferrina e viene trasportato al midollo e nei depositi • Sideremia = ferro di trasporto 25
- 26. Sideremia (ferro) Diminuzione • Perdite:emorragie croniche gastrointestinali, mestruazioni • Ridotto apporto alimentare • Aumentata richiesta: gravidanza, allattamento, crescita • Ridotto assorbimento: resezione gastrica, celiachia • Malattie infiammatorie croniche Aumento • Trasfusioni: talassemia, sindromi mielodisplastiche, aplasia • Epatopatie croniche, Etilismo cronico, Cirrosi epatica • Sindromi emolitiche • Emocromomatosi primitiva 26
- 27. Ferritina Proteina intracellulare dicirca 500kDa di forma globulare con cavità interna utilizzata per il sequestro del ferro in forma non tossica per l’organismo • VN uomo 20-250 ng/ml, donna 20-120 ng/ml • Rappresenta il ferro dei depositi dell’organismo • È utilizzato anche come indice di infiammazione e marker tumorale Aumento • Epatopatie, cirrosi, etilismo cronico • Emocromatosi primitiva e secondaria (post trasfusioni) • Neoplasie solide ed ematologiche • Infezioni acute ecroniche • Malattie autoimmunitarie: LES, Artrite reumatoide Diminuzione: Carenza di ferro 27
- 28. Transferrina • Beta globulinaprodotta dal fegato con funzione di trasporto del ferro • Presente nel plasma in forma libera (t. insatura 2/3 del totale) ed in forma legata (t. satura 1/3 del totale, lega 2 molecole di Fe+++). • Total iron binding capacity, TIBC • VN 200-300 mg/dl Aumenta • Gravidanza • Anemia sideropenica • Emocromatosi Diminuisce • Età senile • Età neonatale • Ipoprotidemia 28