Isolation and characterization

1. Isolasi dan Karakterisasi
2-(3, 4-dihidroksifenil)-3, 5, 7-trihidroksi-4H-kromen-
4-on (kuersetin) dari Chenopoidum Album L.
Disusun Oleh :
Faryanti Eka Mulyawan
14021017033
Dosen Pengampu : Dr. Darwati M.Si

2. Etnofarmakologi :
• Antioksidan
• Antiinflamasi
• Antikanker
• Antirematik
Chenopodium L., (C. album) (famili: Chenopodiaceae) adalah semak tahunan yang banyak
ditanam di Asia, Afrika, Eropa dan Utara Amerika. Umumnya dikenal sebagai Bathua
(dalam bahasa Hindi)
Chenopodium Album L.

3. Taksonomi tumbuhan
Chenopoidum Album L.
Kingdom : Plantae
Divisi : Tracheophyta
Class : Magnoliopsida
Ordo : Caryophyllales
Famili : Amaranthaceae
Genus : Chenopodium L.
Spesies : Chenopodium album L.
(National Plant Data Center, NRCS, USDA. Baton Rouge, LA
70874-4490 USA. http://plants.usda.gov )

4. Bahan Baku bubuk 1 kg
- Diekstraksi dengan etil asetat, aseton, dan metanol
- Dimaserasi dingin (7 hari) 50% methanol
- Dipekatkan dengan rotatory evaporator
Ekstrak etil asetat
(EACA) 3,9% b/b
Ekstrak Aseton
(ACCA) 4,79%
b/b
Ekstrak metanol
(MECA) 13,58% b/b
Ekstrak 50%
metanol (HACA)
12,76% b/b
ISOLASI

5. 4 Ekstrak
- Dilakukan uji fitokimia dengan metode KLT
- Pelarut ea : MeOH : air (100 : 13,5 : 10)
- Pelarut ea : as. Format : as.asetat : air (100 : 10 : 10 : 11 : 26)
- Pelarut kloroform : MeOH : air ( 70 : 30 : 4 )
- Pelarut toluene : ea : dietilamin ( 70 : 20 : 10 )
- Pelarut ea : MeOH : air : as. Asetat ( 65 : 15 : 15 : 10)
- Divisualisasi di bawah sinar tampak dan UV 366 nm
- Dikeringkan
- Disemprot reagen AlCl3
Ke-empat ekstrak positif flavonoid
Uji Fitokimia

6. Penentuan Kandungan Flavonoid dengan
metode Aluminium Klorida
1 ml larutan uji (1mg/ml)
- Ditambahkan 1,5 ml 95% alcohol
- Ditambah 0,1 ml aluminium klorida Heksahidrat 10% (AlCl3,6H2O)
- Ditambahkan 0,1 ml natrium asetat 1M (CH3COONa)
- Ditambahkan 2,3 ml air suling
- Diinkubasi suhu ruangan 40 menit
- Diukur absorbansi pada ƛ 435 nm
- Dihitung dengan regresi linear
Kandungan flavonoid mg/g ACCA > HACA > EACA > MECA.

7. Pemurnian
Ekstrak ACCA
- Dilakukan uji kemurnian dengan titik leleh
Titik leleh rentang 312-315 °C

8. Gambar 1. Spektrum UV isolate ACCA (Arora & Prakash,2018)
Dihasilkan puncak pada
373 nm n ∏*
256 nm = ∏ ∏*
ƛmax 376
Spektrum UV

9. Peak (cm-1) Gugus Fungsi
3290,58 O-H starching fenol
1668,24 C=O Aryl keton
1612,16 C- - - C aromatik
1516,26 C=O aromatik
1429,54 C=C aromatic
1359,37 O-H bending of fenol
1315,58 C-H bond aromatik
1240,55 C-O s. of aryl ether
1210,97 C-O s. of fenol
1163,60 C-CO-C s.b in keton
932,70
C-H bending of
aromatic
hydrocarbons
815,46
705,65
596,88
Gambar 2. Spektrum FT-IR senyawa kuersetin (Sambandam,2016)
Spektrum FT-IR

10. Spektrum H-NMR
Gambar 3 . Spektrum 1H NMR isolate ACCA (Arora & Prakash,2018)
Sinyal ∂(ppm) Ket.
5,1 pelarut
6,20 H6,s
6,40 H8,s
6,89 H5’,d
6,91 H5’,d
7,59-7,66 H2’ H6’

11. Gambar 4. Spektrum 13C NMR isolate ACCA
Spektrum C-NMR
Sinyal (ppm) Posisi
175,92 C-4
164,14 C-7
161,08 C-5
156,80 C-4’
158,30 C-3’
147,35 C-2’
146,60 C-6’
135,85 C-3
122,73 C-1 dari flavonol
114,82 C-1
114,58 C-1’
103,11 C-10
97,83 C-6
93,06 C-8

12. Gambar 5. Spektrum Massa dari isolate senyawa ACCA
Spektrum Massa

13. Gambar 6. Skema fragmen senyawa ACCA
(Arora & Prakash,2018)
Rumus Molekul
C15H10O7
DBE = 11
(3 siklik, 7 ikatan
rangkap, 1 karbonil

14. TERIMA KASIH

15. Daftar Pustaka
Arora, S & Prakash Itankar. 2018. Extraction, isolation and identification of flavonoid from
Chenopodium album aerial parts. Journal of Traditional and
Complementary Medicine. (8) :476-482
(National Plant Data Center, NRCS, USDA. Baton Rouge, LA 70874-4490 USA.
http://plants.usda.gov )
Sambandam, B., Devasena T., Arivarasan A dan Pachaiappan R. 2016. Extraction and
Isolation of Flavonoid Quercetin from The Leaves of Trigonella Foenum
Graecum and Their Anti-oxidant Activity.. International Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Science. Vol 8. Issue 6 :120-124