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第 １
２
６卷 期 中 国 病 毒 学 １ （ ：１ ０—１ ４
６ ２） ７ ７
２ ０ 年 ６月
０ｉ ＶＩ
Ｒ０ＬＯＧＩ Ａ Ｓ ＮＩ Ａ
Ｃ Ｉ Ｃ Ｊｎ
ｕ ２ ０
０ １
杭州地 区发生 的玉米花叶病 由甘蔗花叶病毒引起
程 晔 ， ， 杨建平 陈剑 平
陈炯 一 郑滔 ， ，
（１浙 江 省 农业 科 学 院 病 毒 室 。 江 杭 州
浙 ３０２ ；
１０ １
２ 浙江 太 学 生 物 科 学 与技 术 系 ． 江 杭 州
浙 ３０ ２ ）
１０ ７
Ｍ ａｚ
ｉｅ Ｄｗａ ｆＭ ｏ ａｃ Ｄｉｅ ｓ ｃ ｒ ｅ ｎ Ｈ ａ ｚ ｕ Ｉ ｏ ａ ｅ
ｒ ｓ ｉ ｓ ａ ｅ Ｏｃ ｕ ｒ ｄ ｉ ｎｇ ｈｏ ｓ ｌ ｔ
Ｃａ ｓ ｄ ｂ ｕ ａ ｃ ｎ ｏ ａ ｃ Ｖｉ ｕ
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Ｎ ｉｎ ‘ ＨＥＮＧ Ｔａ ＹＡＮＧ ］ａ —ｉｇ ，Ｃ
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２ Ｄｅａ ｔ ｎ ｉ ｏ ｉ ｌ ｃ ｎ ｅ ｎ ｉ ｅ ｎ ｏ ｙ ｈｊ ｎ ｎ ｖｒｉ 。Ｈ ｎ ｚ ｏ １ ０ ７ ｈ ｎ
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ｓ ｎ ｃ ｐ ａ
ｉａｅ ｇ ｒ ｇ ｔｓ
ｎ ｔｄａ ｇ ｅ ａｅ ．Ｔｈ ｏ ｔｐ ｏ ｅｎｏ ｈ ｉ ｓｗａ ３． Ｄ Ａ ． ｂ ｆａ ｍ ｅ ｔｏ 一ｅｍ ｉｕ ｆ
ｅｃ ａ ｒｔ ｉ ｆｔｅ ｖｒ ｓ３ ６ ｋ
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ｔｅｖｒ
ｈ ｉ ＲＮＡ ｓａ ｐ ｉ ｅ ｙ ＲＴ— ＣＲ，ｃ ｎ ｄ ａ ｄ ｉ ｅ ｕ ｎ ｅ ｗａ ｅ ｅ ｍｉ ｅ
ｌ
ａ ｗａ ｍ ｌ ｄ ｂ
ｉ
ｆ Ｐ ｌ ｅ ｎ ｓ ｓ ｑ ｅ ｃ ｓ ｄ ｔ ｒ ｎ ｄ。Ｓ ｑ ｅ ｃ ｏ ａ —
ｏ ｔ ｅ ｕ ｎ ｅ ｃ ｍｐ ｒ
ｉ ｎ ｈ ｗｅ ｈ ｔ ｔ ｈ ｒ ｄ ７ ５ － ９ ％ ｈ ｍｏｏ ｙ ｗｉ ｌ ｔ ｆ ｕ ａ ｃ ｎ ｓ ｉ ｖ ｒ ｓ ７ ８％
ｓ ｓ ｓ ｏ ｄｔ ａ ａ ｅ １ ％
ｏ ｉｓ ９ １ ｏ ｌｇ ｔ ｉ ａ ｅ ｏ ｇ ｒ ａ ｅｍｏ ａ ｉｕ ．６ 。
ｈ ｓ
ｏ ｓ ｓ ｃ
～
６ ．
８ ５％ ｗｉ ｏ ｇ ｕ ｍｏ ｉ ｖ ｒ ｓａ ｄ ３ ４％ ～ ４ ．
ｔ ｓ ｒ ｈ ｍ ｓ ｃ ｉｕ ｎ ８。
ｈ ａ ８ ４％ ｗｉｈ ｍ ｉ ｗａ ｆｍｏ ｉ ｖ ｒ ｓ ｎ ｉ ｔ ｇ
ｔ ｚ ｄ ｒ ｓ ｃ ｉｕ ，ｉ ｄｃ ｉ
ａ ｅ ａ ａ ｎ
ｔ ａ ｈ ａ ｈ ｇ ｎ ｏ ｈ ｓ ｄｓ ａ ｅｏ ａ ｅ ｉ ｎ ｚ ｏ ｓ ｓ ｇ ｒ ｎ ｓ ｉ ｖ ｒ ｓ ｎ ａ ｄ ｔ ｎ ｔ ｅ
ｈ ｔｔ ｅ ｐ ｔ ｏ ｅ ｆ ｉ ｉ ｓ ｎ ｍ ｉ Ｈａ ｇ ｈ ｕ ｗａ ｕ ａ ｃ ｅ ｍｏ ａ ｉｕ ．Ｉ ｄ ｉｉ ． ｈ
ｔ ｅ ｚ ｎ ａ ｃ ｏ
ｒ ｌ ｔ ｎ ｈ ｐ ｆ ｓ ｇ ｒ ａ ｅ ｍｏ ｉ ｖ ｒ ｓ ｉ ｌｔ ｓ ｆｏ ｄ ｆｅｅ ｔ ｏ ｉ ｉｓ ａｌＯ ｅ ｒ ｒ ｉｃ ｓ ｅ
ｅａ ｉ ｓ ｉ ｓ ｏ ｕ ａ ｃ ｎ ｓ ｃ ｉｕ ｓ ａ ｅ ｒ ｍ ｉ ｒ ｎ ｒ ｎ ｌ Ｖ ｒ ｗｏ ｌ ｗｅ ｅ ｄ ｓ ｕ ｓ ｄ
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ｂ ｓ ｄ ０ ｏ ｔｐ ｏ ｅｎ ｓ ｑ ｅ ｃ
ａ ｅ ｎ ｃ ａ ｒ ｔ ｉ ｅ ｕ ｎ ｅ
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Ｋｅ ｒ ｓ
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ｉｅ ｄ ｒ ｓ ｉ ｉ ｓｅｅ ｔｏ ｅ ｕ ａ ｃ ｎ ｓ ｉ ｉ
ｕ
摘要 ：从杭 州地区呈现玉 米矮 花叶典型症状的玉米病组 织 中提 纯得到大 量线状病 毒粒 子 多数长 度为 ７ ０ｎ
大 ５ ｍ
病组织 中含有大量风轮状 内古体和板状集结体。病 毒外壳蛋 白为 ３ Ｄ
３６ｋ 。病毒 Ｒ Ａ１３ 端 序列（ ８ｋ ）
Ｎ ’ １ ｂ 与甘蔗
花叶病毒 （Ｃ
Ｓ ＭＶ）
同源性 最高． ７ ％～９ ％，
达 １５ ９ １ 与高 粱花叶病毒 （ｒ
ｓ Ｍｖ）
同源性砍之 ， ６ ． ％～６ ％， 玉
为 ７８ ８５ 与
米矮花叶病毒 （
ＭＤＭＶ 同源性 最低 ． 为 ３ ％ ～４ ％．
） 仅 ８４ ８ ４ 从而 初步认 为此病 害 由 Ｓ ＭＶ 引起 。根 据 已发表的
Ｃ
Ｓ ＭＶ外壳 蛋白氯基酸 序列 作亲缘性分析， 明 Ｓ ＭＶ可分 为美国 、
Ｃ 表 Ｃ 南非 、
澳大利 亚 ； 国和中国三大类。
德
关键词 ：
玉米花叶病 ；病原 ；甘蔗花叶病毒
中宙分类号 ： ４ ２ ４
￥ ３ ．１ 文献标识码 ：Ａ 文章 编号 ：１０ ．１５ ２０ ）２０ ７ —５
０ ３５ ２ ［０ １ ０ ．１００
玉米 花叶病 是 世 界 范 围 内普 遍 发生 的病 毒病 。
展到全 国各 玉米主 要产 区 ． 玉米 、
对 高梁 的 生产构 威
我 国 自 １６
９ ８年河 南新 乡地 区大 发生之 后 ．已逐步扩 了严 重 威 胁
“。史 春 霖 等 根 据 生 物 学 反 应 将 北
收 稿 日期 ：ｏ ０— ４—１ ， 回 日 羯 ：０ ｏ ９ ０
２ｏ ０ ７修 ２ ｏ 一０ ７
基金项 目：
浙江省青年科拄人才专项资金 （ Ｃ ６ ４ ；
Ｒ ９ ０ ） 国家 自然科学基金项 目（９ ７ ４ ２ １
３９ ０ ８ ）浙江省 自然科学 基金项 目（９ ４ １ ；
３ ９ ２ ）浙江 省重
点 实 验 室专 项 资助 （ ０ １７ ５ ）
０ １０ ５７
作 者 苘 舟 ： 哗 （９ ９一）女 ． 江 永 康 藉 理 研 究员 ． 士 ， 要从 事植 物病 毒 分 于生 物学 研 究 。
程 １６ ． 浙 助 学 主
幸 通 讯作 者 ： 剑 平 （９ ３ ） 男 ．
＊ 陈 １６ ． 浙江 鄞 县藉 ， 究 员 ， 士。 要 从 事 植物 病 毒 分 子 生 物 学 研 究 Ｃ ｒｅｐ￣ ｅ ｃ ｉｈ ｒ
研 博 主 ｏｒｓｃｄ ｎｅＳｌｏ
ａ ｌ
本 文 报 道 的 甘 蔗花 叶病 毒 ＲＮＡ序 列 已登 录 于 Ｄ Ｉ ／ ｒ Ｖａｋ Ｅ Ｌ数 据库 ．
Ｄ￣ ＧｅＢ ｎ ／ ＭＢ
Ｉ ．
， 登录 号 为 Ａ ２ １８ 。
Ｊ７ ０ ５
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第 ２期 程哗等 ：
抗州地区发 生的 玉米花 叶病 由甘蔗花叶病毒 引起 １１
７
京玉 米 和高 梁矮 花 叶病 株 上 的分 离物 鉴 定为玉米 矮 Ｔ ｉＨＣ，Ｈ８ ３总体 积 为 ５ Ｌ；
ｒ－ ｌｐ ．，
ｓ Ｏ 扩增 程序 为 ９ ℃
４
花 叶病 毒 （ ｉ ｗａ ｓｉ ｖｒｓ ＭＤＭＶ）Ｂ株
Ｍａｚ ｄ ｄ ｍｏａｃ ｉ ，
ｅ ｕ 一 １ ｎ ４ ℃ １ ｉ。 ２ ２ｍｉ， ０个 循 环后 ７ ℃ 延
ｍｉ， ７ ａ
ｒｎ７℃ ｎ３ ２
系。石银 鹿 等 ＿ 从 白 草 花 叶 病 株 上 分 离到 一 个 引
３
伸反 应 １ ｉ， ％琼脂 糖 电泳检 测 Ｐ Ｒ产物 。
０ｍ ｎ１ Ｃ
起矮 花 叶 病 的 新 株 系 ，定名 为 ＭＤＭＶ－
Ｇ株 系。 吴 １６ 克隆 与筛选
建宇等 根 据对 约翰逊 草（ ｏｇ ｕ ｅｐｎ Ｌ）
Ｓｒｈ ｍ ｈｔ ｅ
ｅ 的 基 因克隆 、
连接 、转化 、质粒 提取 、酶切 等 基 因分
致病 性 ，将南 京地 区玉 米 花 叶病 鉴定 为 由 ＭＤＭＶ
Ｂ 子生 物学 方 法 均 参 照 Ｓｍｂｏｋ等 ＿ 的方 法 进 行
ａ ｒｏ ６
株 系 。近 年 来， 州地 区也 普遍发 生 了玉 米病毒病 ，
杭 将杭州玉米病 毒的 Ｒ —ＣＴＰ Ｒ产物克 隆到 ｐ Ｅ Ｔ
Ｇ Ｍ．
表 现 出典 型 的矮 花 叶症 状 ， 造 成 严重 危 害 。我 们
并 载体 （ ｍｍｅａ公 司 产 品 ） 。经 Ｐ Ｒ 扩 增 筛 选 和
Ｐ ｇ 中 Ｃ
对杭 州地 区所 发 生 的玉 米 花 叶 病 ，通过 病 毒 基 因 组 酶 切 鉴定 ，得到重组 质粒 。
序列分 析进行 了病 原 鉴 定， 与 国 内外 同类 病 毒 外
并 １７ 序列 测定和 序列 分析
．
壳蛋 白序列进 行 了 比较 。
采 用 ＡＢ Ｒ Ｓ
Ｉ Ｉ Ｍ ３ ７型 Ｄ
Ｐ ７ ＮＡ 自动 测 序仪 测
定 重组 质粒 的 ＤＮ 序列 。
Ａ
１ 材料与方法
采 用 ＧＣ 序 列 分 析 软件 ］ 所 测 定 的 Ｄ Ａ
Ｇ 对 Ｎ
１１ 病 毒分 离物
． 序列进行 分析 ， 与 国 内外 已发 表 的相近 病 毒 序 列
并
１９ 年 ８月， 集浙 江省农 科 院农场 玉 米 地具
９９ 采 （ １进行 比较 。亲 缘关 系树 采用 Ｐ
表 ） ＨＹＬＰＶｅｓ ｎ
Ｉ ｒｏ
ｉ
有 矮花 叶典 型症状 的玉 米 叶片 ， 存 在 一８ ℃ 冰箱
贮 Ｏ ３ ５２
．７ ｃ软件 制作 ． 利用 ＴＲ Ｅ Ｅ 软 件显 示。
并 Ｅ ＶＩ Ｗ
中备 用 。
１２ 病 组织电 镜 观察
．
２ 结果
具典型症 状 的 感 病 叶 片 ， ２ ５
经 ． ％戊 二醛 预 固 ２ １ 细胞 质内含体观 察
．
定， ％锇酸固定，
１ 系列浓度丙酮脱水后． 包埋于 Ａ
． 取 显症 叶 片进 行 包 埋切 片．电镜 观 察到 细 胞 质
ｇｒ０
ａｌ０树指 （ ａ ｃ ｎｉｃ 司产 品 ） 。包 埋 块
Ａｇｒ ｉ ｔｉ公
Ｓｅ ｆ 中 内存在大量风轮状内含体 、
板状集结体和卷筒体（
图
用超薄切片机切片，
切片铺于喷有碳膜的网上，
经醋 １ 。根据 内轮状 内含体 的形状， Ｅ ｗ Ｍｍ
） 属 ｄ ａ ｎ第 Ⅲ
酸 铀和 柠檬酸 铅双 染色 ，进行 电镜 观察 。
亚组 ， 明此侵 染玉米 的病 毒 为 马 铃薯 Ｙ 病 毒科 成
表
１３ 病毒 提纯
． 员。
根据 Ｇ ｒ 描述 的方 法从 玉米病 叶中提纯病
ａｙ ２２ 病毒粒 子
．
毒 。提纯 病毒 稀释 后， 负染 后作 电镜观察 。
经 病玉米组织经提纯后，
用电镜观察 ，
可见大量线
１４ Ｓ Ｓ聚丙 烯胺 凝胶电 泳
． Ｄ － 状 ， 呈 弯 曲的 病 毒 粒 子 长 度 大 约 为 ７ ０ｈｌ（
略 ５ ｉ 图
ｌ
３ （ ． ｇ 提纯 的病 毒 悬浮 液加 等体 积 的加
Ｏ ０２ ） ２。
）
样 缓 冲 液 （ ． ６ｍｏ Ｌ Ｔｒ． １ｐ ８ 含 Ｓ
０ ０ ｌ ｉＨＣ． Ｈ６ 。
／ ｓ ＤＳ
２ Ｌ 琉基 乙醇 ５ｎ ／ ，
Ｏ ／，
ｇ Ｌ Ｌ 甘氨酸 １ ／
ｒ Ｌ和溴酚
ｍＬ
蓝０２ ／ ）
． ｇ Ｌ 进行电泳。方法参见文献 。
】
１． ＲＴ－
５ ＰＣＲ
按 常规 方法 从病毒 粒子 抽提 ＲＮＡ， Ｍ４ ５．
以 Ｔ［ ’
Ｇｎ＿Ｔ ｃ Ａ ｃ Ｇ
Ｊ ｒ ｃ ｃ ＧＴ Ａｃ Ａｃ（ ｌ—’ 为 引 物 ， 禽
Ｔ） ３ ］
５ 用
源 反转录 酶 （ ａａａ公 司 ） 成 病 毒 第 一链 ｅ ＮＡ。
Ｔ ｒｋ 合 Ｄ
方法 参 见厂 家说 明 。
Ｐ Ｒ反应体系为： ｔ Ｎ
Ｃ １Ａｃ Ａ模板．０ｐ 引物
Ｄ ２ Ｍ
Ｍ４ ５ － ，
（ｌ Ｍ
Ｇ Ｃ Ｃ ＴＣ Ｃ Ａ － ’ ．０ｐ 引 物
Ｃ ＡＧ Ａ Ｇ Ｃ ３ ）２ Ｍ
Ｓ ｒ ｒ ５Ｇ Ａ Ａ ＡＧ ＧＸＣ Ｃ － ，其
ｐｉ （ － ＧＸ ＡＹ ＡＹ ＹＧ
ｍｅ ＡＺ Ｃ ３’
中 Ｘ＝Ａ， Ｃ或 Ｔ；
Ｇ． Ｙ＝Ｔ或 Ｃ； ＝Ａ 或 Ｇ，
ｚ 根据 马
铃薯 Ｙ病毒科成员 Ｎ ｂ基因保守序列设计 ）２ ０
Ｉ ，０
图 Ｉ 感精玉米叶片中酊风鞍状内舍体和板状集结体（ ４００
× ６０ ）
ｖ ＶＬ ｄ Ｐ ２ ５ｕ ｑＤ Ａ 聚 合 酶 （ ｉｏ１。
ｍｏ ＮＴ ． ． Ｔａ Ｎ Ｇｂｏ） Ｆｉ Ｐ ａ ｅ ｌ ｎ ｕ ｉ ｔ ｄ 嘲 喇 ｅ ｎ ｌ ｆ 吐ｅ ｉ ｎ ｅ
ｇ１ ｉ ｗｈ ＊ ａ ｄ ｈ ｎ ｍ ￣
ｔ ａｉ ｎ ｅ ｄ ｍａｚ ｌ ｖ
ｅｅ
１ ５ｍｍ ｌＬ ＭＳ １ ０ ｍｍｏ／ １ １ ｔｏ Ｌ
ｏ／ Ｃ２ ，５ ｌＬ ＫＣ． ０ ｒｏ ｌ
ｅ ／ （× ６０ ）
４ ０ ０
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中 国 病 毒 学
裹 １ ＩＺ基 因组 ３ 端 ｌ ｓｋ
ｔ ’ ｂ序 列 与 巳 发 表 的 ＭＤ Ｖ Ｓ Ｍ～和
Ｍ ，ｃ
ＳＭＶ 同潭 性 比较 ｆ ｝
ｒ ％
Ｔａ ｌ
ｂ ｅ１ ￣ ） ａ ｉｉｎ ｏ ｑ
） ｍｐ ｒｓｏ ｆ … Ｉ３。１ ｒｒ ｒ ｌ １ ｈ ｌ ｒ
０ ￣ ｉ ｔ ８ ｋ ｊ Ｉ ｉ
ｌ ｌＳ
（ ＨＺ
ｐ ｂｉ ｅ Ｄ ＭＶ ｌ ｃ Ｖ ｎ Ｍ Ｖ ｔ ｉ ｅ￣ｌ ｌ ｌ
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ｓ Ｍ
ｓ ａｄ ｗ， ｄｆ ｘ ｌ＿ 、
ｈ ｆ ｒ Ｊ
杭 州埘 －
Ｅ Ｉ
ＭＢ 登录 号 病 毒 琳 系 同源 性 儿车 ¨
＝童１ｎ
Ａ ｍｎ
ｃ Ｖ… Ｓ ｒ ｍ
ｃ
ａ Ｈｏ ｌ ｇ （ －
ｍｏ ｏ ｙ
ＨＺ １ １ ，
ｌ
¨
Ａ１ ０【 ９
０ ６】 Ｍ 】Ｍ Ｖ
） （ ｅ ｍａ ｌ
； ｒ ｖ
ｒ ４８
２
Ｕ ｔ ２【
ｌ ６
７ Ｍ ｒＭ Ｖ
） ４ ４
ｇ
ｓ０ ６
８ ２９ Ｍ ＤＭ Ｖ Ｍ ＤＭ Ｖ
Ａ ３
８
ＤＯ ４９
０９ （ ｃＭＶ’ ＭＤＭ Ｖ
ｓ １ ｎ ７ｌ
５
ＡＨ ）６ ３
０ ７ ６ ｓ Ｖ
【Ｍ ＵＳ １Ａ
Ｓ１ ｌ
Ｕ５ ３ ４
７５ Ｍ Ｖ Ａ ８ｌ
ｌ ｕ
ＡＦ０ ６ ２
０ ７ ８ ＳＣＭ Ｖ Ｉｉ
ｓ吐 ７ ５
９
闭 ２ 拦 地 ｎ ｆ Ｆ（ ５ ０１１
０ 粘 ８１
０
ＡＦｔ ６ ３
１ ７ ５
０ ＳＣＭ Ｖ Ｒｕ ｉ ｂ ｒ
ｎｌ ｅ￣
ａ ７ ｈ
９
ｒ ２ ｝ ｌｉ＇ ｖ
Ｊｒｋｄ 川 ｌ ｔ ｃ （ ５ Ｏ Ｏ
ｉ
Ｌ ｌ ８ ０ ）
ｄ
ＡＦ１ ７３ｌ
ｌ０６ ＳＣＭ Ｖ 】 ７
ｓ ７ ３
９
Ａ Ｆ ０ ７３
０ ６ ４ ＳＣＭ Ｖ Ｂｒ …
ｉ
７ ６
ｑ
２３ 病 毒外 壳蛋 白
ＡＨ ） ６ ３
０ ７ ８ ＳＣＭ Ｖ ＳＡ ７ ７
９
提纯 病 毒经 Ｓ Ｓ 聚丙烯 酰胺 凝胶 电泳，
Ｄ－ 出现 一 ）９
０ ４８ ｓｃＭ Ｖ ＳＣ ８ ｑ
Ｉ
Ａ 卜 ６ ３
１ ７ ７ ｓ ＭＶ
ｃ ＵＳ Ｆ
Ｉ ７ ｌ
９
条很 浓 的病 毒外壳 蛋 白带 ，分子量 约 为 ３ Ｄ
３ ６ｋ Ｕ５ ３ ７
７５ ＳＣＭ Ｖ Ｅ ｌ １
】
２４ 病毒 Ｒ Ａ３端 １８ ｂ区域扩增 及其序列测定
． Ｎ ’ ． ｋ Ｕ５７ ５
３ ５ ＳＣＭ Ｖ １
３ ８
０ ４
Ｕ５７ ５
３６ ＳＣＭ Ｖ Ｄ ８ ｝４
（
以病 玉米组织 总 ＲＸＡ为模板 ． Ｔ为 引物，
Ｍ４ 反 ＡＦ ｎ ７ ２
０ ６ ３ 眦 Ｍ ｖ Ｎ＿１ １
一１ 丁
ｌ１ ２ ８ｌｎ
ｆ
转录 合成 病 毒 ＲＮＡ第 … 链 ｃ ＮＡ，
Ｄ 再 引 物对 Ｍ４ Ａ ｌ７ ３
ｌ ３
６ ＳＣＭ Ｖ Ｎａ ￣ｕ ７
ｍｌ ｒ ８ｌ Ｉ
ｌ
Ｉ
ＡＨ ， ６ ３ 】
Ｕ ７ Ｉ ｓｃＭ Ｖ ｌ ｉ５
，ｓ ８ ５
Ｉ
和 Ｓ ｒ ｒ 行 Ｐ Ｒ扩 增 ． 到 预期 大 小 的病 毒 基
ｐｉ 进
ｍｅ Ｃ 得 ＡＨ Ⅲ ６ ２
７ ９ ｓｃＭ Ｖ Ｉ ｉ２
ｓｓ ８ｉ ３
因组 ３ 末端 序 列 １ ｈ特异 眭扩 增 产物 （ ３ 。
’ ８ｋ 图 ） ＡＪ ０６ ０ｌ
０ ２ ｓＣＭ Ｖ （Ｅ １
； ． Ｈ
Ｈｕ
Ｘ９ １ ６
８６ ＳＣＭ Ｖ （ Ｅ， ｅ ｈ ｕ ｅ ２ ８
Ｓ ｅ ａ ｓｎ ｓ ８ ８
８ ｑ
克隆后 序列 测定表 明， 片段 长 ｌ８ ９个碱 基 ［ ｕｙ
该 ３ Ｐｌ Ｘ９ ６
８】 ５ ＳＣＭ Ｖ Ｇ Ｅ． ｅ ｈ ｕ ｅ ￥ ６
Ｓ ｅ ａ ｓｎ ２ ８
８ ６
（ 不计 ］ 计算机 分析 显示 ，
Ａ） 它具有 一个 长 为１ ８
ｌ
５ ｓ７ ８
７０８ ＳＣＭ Ｖ ｃｈｎ ． ＭｆＭ Ｖ， ）
ｌａ （ ］ ｎ ９ ｌ
９
Ｘ９ ６
８】 ８ ＳＣＭ Ｖ ＧＥ Ｂ ｅ ｚｎ ｅ
ｏ ｔ ｉｇ ｎ ９ ４
４
棱苷酸 的单 一的开 放 阅读 框 架 ，
包括 ＮＩ 因 的 ３
ｂ基 ’ Ｘ９ ６９
８ｌ ｓｃＭ Ｖ ＧＥ Ｈ￣ ｎ ｔ ｄ
ｓｅ ｔ ９ ６
４
端部 分 （ １ ４
第 ～６２碱 基 ）外 壳 蛋 白基 因（ ６ ３
、 第 ４～ Ａ １ ］２ ０
ＪＨ６ ０ ｓｃＭ Ｖ ＧＥ Ｇ９ ２
５ ９ ｌ
２
Ａ０ ２２
Ｊ ０６ ０ ｓｃＭ ｖ ＧＥ－ ６
Ｇ９ ９
２４
１８
ｌ碱基 ）编码 一 个 ３７个氨 基酸 的 多肽， 多 肽
５ ， ２ 该 Ｘ９ ６
８１ ７ ＳＣＭ Ｖ ＧＥ Ｉ Ｔ ｄ ｒ
．３ 州 ｏ ｆ
ｏ ９ ３
４
的第 ２ ４一 １ 具有 蛋 白水解 酶 的特 异性 识 别位
１ －２ ５位 Ａ】 ０ｂ ９
１ １９
） ＳＣＭ Ｖ ＧＥ ； ５１
ｔ９ ９ ｌ
１ １
Ｕ５ ３ ９
７ ５ Ｓ Ｍ Ｖ
ｒ ［
６ ５
８
苣Ｑ／ ．
ｓ 推测 经 切割 产 生 一个分 子 量 为 ３ Ｄ 的
２ ６ｋ
Ｕ５ ３ ０
７ ６ Ｓ Ｍ Ｖ
ｒ Ｍ ６ ４
８
外 壳蛋 白， 和 Ｓ ＳＰ ＧＥ测得 的 外 壳蛋 白分 子量
这 Ｄ －Ａ Ｕ５ ３ ８
７ ５ Ｓ Ｍ Ｖ
ｒ Ｈ ６
８
Ｕ０ １
７２ ０ ｓｒ Ｖ
Ｍ Ｈ ６ ８
７
基 本 相 同 。 图 ４为 此 ＤＮ 片 段 的 序 列 和 推 测 的 氨
Ａ
不确定 Ｈ，
ｚ 杭州病毒分 离物 ； ｆ
Ｍ ） ． 术矮 花叶病 ．ｃ
ＭＶ Ｍ、
甘蔗 花 叶病 毒 ．ｒ ， 梁 托 叶 病 毒
Ｓ ＭＶ 高
ＨＺＩ ｎ ｚ ｏ ｍ …
Ｈａ ｇ ｈ ｕ ｌ … ｉ ａｅ； ＤＭ Ｖ ． ｉｔ ｗａ ｆ ｉ （ ； ｉ
ｍｌ ｔ Ｍ ｍａｚ ｄ ｒ ￣ ｉ １ ｖ ｒ、
ｌ １
Ｌ
ＳＣＭ Ｖ， ｕ ａ ｃ ｎ ｏ ａｃ …
Ｓ ｇ ｒａ ｅｍ ｓｉ ｓ Ｓｒ Ｖ ． ｏｒ ｈ ｍｔ
； Ｍ Ｓ ｇ ｔ ｉ ｖｒ
ｃ ｌｌ
２０
，０
基 酸序 列。序列分 析 表 明此病毒 序 列 与甘蔗 花 ｌ病
】＿
２ ０）
０１
毒 （ ｕ ａｃｎ ｍｏａ ｉ ｓ ｃ
Ｓ ｇ ｒａ ｅ ｓｉ ｖ ｕ，Ｓ ＭＶ）
ｃ ｒ 的 些 分 离物 序
１ ０
ｏ 相 似， 苷 酸 同源 性 为 ７ １ ～９ ． ％， ｒ
核 ９ ％ ９１ 其
赛 吉 庆 等 报 道 的 中 国 玉 米 矮 花 叶 病 毒 （ ｉ
Ｍｍ ｃ
ｚ
】０
０。
ｄ ｒ ｍｏａ ｉ ｓＭＤ
ｗａｆ ｓｉ ｖ ｕ， ＭＶ）
ｃ ｒ Ｂ株 系（ 毒 来豫 不 洋 ）
病
同源 性最 高， ９ ， ％，
达 ９ １ 然而 和国外 报道 的 ＭＤ
ＭＶ
Ｂ株 系序 列 同 源性 仅 为 ７ ５
ｌ ％，与高 梁 花 叶 ｌ
目敲
（ｏ ｈｍ ｍｏ ｉ ｒ ，ＳＭＶ） 源 ’ 较 低 ． ７ ８‰
Ｓｒ ｔ￣ ｓ ｃ ｉ
ｇ ａ ｍｓ ｒ 同 性 为６ ’
～
６ ５ 与 ＭＤ Ｆ 的 同 源 性 最 低． ３ －
８ ％， ￣Ｖ 仅 ８４ ，
图 ３ ＲＩｌ
． 打电 淋 罔
叫
４ ％ （ １ ．从 而 表 明 杭 州 地 区 玉 米 花 叶 ｑ
８４ 表 ）
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ｇ３ （ ・
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１４
７ 中 国 病 毒 学 第 ｌ 卷
６
】 Ｍ Ｖ
Ｏ
轮 体和卷 简 体 ＿
ｌ 。它 们的 外 壳蛋 白氨 基 酸 组 成 及
Ｄｏ Ｏ９
。 ４ 其序 列不 同 ， 中 Ｊ ＭＶ 和 Ｓ ＭＶ 不 同株系外 壳蛋
其 Ｇ Ｃ
白氨基酸 序 列 同源 性 仅 为 ５ ％＿ 血 清 学 不 相 关
４ ｌ ，
或仅 微弱相关 。我 们的研 究表 明杭 州分离 物在 感病
组 织 中形成 只有 Ｓ ＭＶ 才 引起 的板 状 集 结体 ， 和
Ｃ 且
Ｓ ＭＶ 分离 物存 在较 高 的 序列 同源性 ，
Ｃ 而与 其 他病
毒的 亲缘性较 低 。因此 ， 们认 为杭 州 地 区 玉米 花
我
叶病 由甘蔗 花 叶病毒 （Ｃ
Ｓ ＭＶ）引起 ， 吉庆 等ｎ
赛 报
道 的我 国 ＭＤＭＶ—
Ｂ株系 也 可能是 Ｓ ＭＶ。
Ｃ
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ｅ ｙ ｔ
［０ 赛吉庆 ． 良仪．
１］ 康 黄忠． ＭＤ Ｖ 外壳 蛋白基因 的克隆及 其
等 Ｍ
在大 晒杆 茁中 的表达 【 中 国科 学 （
¨ Ｂ辑 ） １９ ， ４ １ ）
，９４ ２ （０ ：
０
１ ∞ 一 １ ６．
０ ０６
［ １ Ｓ ｕ ｌ
１ ］ ｈｋ￣Ｄ Ｄ．Ｔ ￣ ｌ Ｄ ． ｏ Ｉ。ｇ哺 ｍｅ ｃ ｒ Ｍ ］ ＡＡ
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ｓ ｐ ｌ ｆＰｌｎ【 ｒ ｓ ｓ ３ ０．１ ８
９９
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【２ Ｌ ｍ啦ｎＤ Ｅ． ｈ Ｄ Ｄ．Ｔ ｓ
１ ］ 船ｅ ｓｕ ｏｋＭ ．“ ． ｛ 曲ｔ ｏ ｔｅ
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长度均 为约 ７ ０ｎ 含有 一 条 正 义单链 Ｒ Ａ， 小
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［３
１］ Ｓ ｕｌ
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的细胞 质 内含 体不 同。Ｓ ＭＶ 引起 风轮 体 、 简 体
Ｃ 卷 Ａｒ ｈ ｖ
ｃ ｉｅ Ｖｉ ｌｇ ． １ ８ ９ ５ — ７
ｍ￣ ＇
／ ９ ７． ６： ９ ４
和板 状 集结 体 ；ＧＭｖ、
Ｊ ＭＤＭＶ 和 ＳＭＶ 仅 引起 风
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