Dokumen tersebut memberikan instruksi lengkap tentang prosedur pewarnaan Gram untuk mengidentifikasi bakteri, mulai dari persiapan alat dan bahan, proses fiaksasi dan pewarnaan, pembacaan hasil di bawah mikroskop, serta interpretasi hasil untuk menentukan bakteri Gram positif atau negatif.
3. PEWARNAAN GRAM/ SEDIAAN KERING
Alat dan Bahan
1. Sarung tangan
2. Kaca obyek
3. Kaca penutup
4. Lampu spiritus(Bunsen)
5. Penjepit
6. Botol semprot
7. Rak pengecatan
8. Mikroskop
9. Kristal violet ataugentian violet
10. Iodin/Lugol
11. Alkohol 96%
12. Safranin
13. Air bersih
14. Tisu
4. PEWARNAAN GRAM
Prosedur
Sebelum dilakukan pewarnaan Gram, sediaan difiksasi terlebih dahulu dengan cara dilewatkan di
atas api bunsen sebanyak 3 sampai 5 kali.
1.Tuangkan cairan kristal violet pada sediaan dan diamkan selama 30 detik.
2.Buang kristal violet dan cuci sediaan dengan air mengalir perlahan.
3.Tuang larutan iodin atau lugol dan diamkan selama 30 detik.
4.Buang larutan iodin dan cuci sediaan dengan air mengalir perlahan.
5.Tuang alkohol secara merata sampai tampak jernih.Waktu dekolorisasi tergantung dari bahan
kimia yang digunakan dan ketebalan dari sediaan.
6.Cuci sediaan dengan air mengalir perlahan.
7.Tuang safranin pada sediaan dan diamkan selama 1 menit.
8.Cuci sediaan dengan air mengalir perlahan.
9.Keringkan sediaan di udara.
11. INTERPRETASI HASIL
Uretra Anus Serviks
PMN positif Ditemukan 5 PMN/LPB Ditemukan 5 PMN/LPB Ditemukan 30 PMN/LPB
PMN negatif Tidak ditemukan
ditemukan ≤5
PMN/LPB
atau Tidak ditemukan
ditemukan ≤5
PMN/LPB
atau Tidak ditemukan
ditemukan ≤30
PMN/LPB
atau
Diplokokus Gram-
negatif intrasel positif
Ditemukan Diplokokus
Gram-negatif intrasel
Ditemukan Diplokokus
Gram-negatif intrasel
Diplokokus
negatif
negatif
Gram-
intrase
l
Tidak ditemukanDiplokokus
Gram-negatif intrasel
Tidak ditemukan Diplokokus
Gram-negatif intrasel