1. เปรียบเทียบประสิทธิภาพของสารสกัดเคอร์คูมินจาก ขมิ้นชันผงจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน ในการกำจัด เชื้อรา Aspergillus niger กับขมิ้นชันผงตามท้องตลาด และยาปฏิชีวนะ Itraconazole นายพลวรรธก์ ทวีราษฎร์ นายภูมิพิพัฒน์ นวลแขกุล โรงเรียนมหิดลวิทยานุสรณ์ ( องค์การมหาชน )

2. กิตติกรรมประกาศ อ . สุภาวดี ศรีทาหาญ ครูวิชาการประจำสาขาวิชาเคมี โรงเรียนมหิดลวิทยานุสรณ์ ( องค์การมหาชน ) ภาควิชาจุลชีววิทยา คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ อ . ศราวุธ แสงอุไร ผู้ให้คำปรึกษาการใช้อุปกรณ์ทางเคมี อ . เมษสุวัลย์ พงษ์ประมูล และ อ . ศิริมาศ สุขประเสริฐ อาจารย์ประจำห้องทดลอง พ่อ แม่ และเพื่อนๆ

3. ที่มาและความสำคัญ ▪ ขมิ้นเป็นพืชที่มีสรรพคุณในการยับยั้งเชื้อรา ▪ สารเคมีในขมิ้นที่มีฤทธิ์ในการยับยั้งเชื้อรามีชื่อว่าเคอร์คูมิน สารนี้เป็นสารที่ละลายได้ดีในแอลกอฮอล์ จึงสามารถสกัดเพื่อนำมาใช้ประโยชน์ได้ง่าย มีสรรพคุณใน การ ยับยั้งเชื้อรา เพราะมี สารเคอร์คูมิน เป็นตัวยับยั้งเชื้อรา ขมิ้นชัน

4. ที่มาและความสำคัญ ▪ ที่อำเภอบ้านตาขุน จังหวัดสุราษฎร์ธานี มีการปลูกขมิ้นชันพันธุ์พื้นเมือง ซึ่งชาวบ้านเรียกกันว่า ขมิ้นชันทอง เป็นขมิ้นชันที่มีสารเคอร์คูมินสูงถึง 20 % เมื่อเปรียบเทียบ กับขมิ้นชันที่ปลูกในแหล่งปลูกอื่นๆ ที่มีปริมาณสารเคอร์คูมินเฉลี่ยเพียง 6 % ( ปลูกขมิ้นชันรายได้เสริมในสวนยางพารา , 2549) มีสารเคอร์คูมิน สูงมาก ขมิ้นชันจาก แหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน จากการศึกษา ของผู้วิจัย

5. ที่มาและความสำคัญ ▪ เชื้อรา Aspergillus niger ได้สร้างปัญหาแก่เกษตรกรที่ปลูกพืชพวกธัญพืช และสามารถทำให้มนุษย์เป็นโรคทางปอดได้ แต่เชื้อราชนิดนี้สามารถถูกยับยั้งได้ด้วยยาปฏิชีวนะ Itraconazole ซึ่งสามารถละลายได้ในแอลกอฮอล์ (J. Mosquera, 2002) และโดยการศึกษางานวิจัยของ วุฒินันท์ พิมพ์มีธีรวัตร และคณะ (2547) พบว่า สารเคอร์คูมินที่สกัดจากขมิ้นชันผงก็สามารถยับยั้งการเจริญของเชื้อราชนิดนี้ได้เช่นเดียวกัน ผู้วิจัยจึงคิดว่าขมิ้นชันจาก แหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน จะสามารถยับยั้งเชื้อราได้ ดีกว่า ขมิ้นชัน ตามท้องตลาด ทำการศึกษาเปรียบเทียบ ประสิทธิภาพการยับยั้ง เชื้อรา Aspergillus niger ระหว่าง

6. ที่มาและความสำคัญ ▪ เชื้อรา Aspergillus niger ได้สร้างปัญหาแก่เกษตรกรที่ปลูกพืชพวกธัญพืช และสามารถทำให้มนุษย์เป็นโรคทางปอดได้ แต่เชื้อราชนิดนี้สามารถถูกยับยั้งได้ด้วยยาปฏิชีวนะ Itraconazole ซึ่งสามารถละลายได้ในแอลกอฮอล์ (J. Mosquera, 2002) และโดยการศึกษางานวิจัยของ วุฒินันท์ พิมพ์มีธีรวัตร และคณะ (2547) พบว่า สารเคอร์คูมินที่สกัดจากขมิ้นชันผงก็สามารถยับยั้งการเจริญของเชื้อราชนิดนี้ได้เช่นเดียวกัน มาทดสอบกับ ยาปฏิชีวนะ Itraconazole ขมิ้นชันผงจาก แหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน เลือกชนิดที่ยับยั้งดีที่สุด ขมิ้นชัน ผง 2 ยี่ห้อ

7. Aspergillus niger เอกสารที่เกี่ยวข้อง A. Niger conidial head (http://www.aspergillus.org.uk/) A. Niger colony (http://www.aspergillus.org.uk/)

8. เคอร์คูมิน เอกสารที่เกี่ยวข้อง Curcumin Keto Form Curcumin Enol Form Turmeric

9. ขมิ้นชันจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน เอกสารที่เกี่ยวข้อง ผงขมิ้นชันจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน

10. Itraconazole เอกสารที่เกี่ยวข้อง Encapsulated Itraconazole

11. UV/Vis-Spectrophotometer เอกสารที่เกี่ยวข้อง UV/Vis-Spectrophotometer UV/Vis-Spectrophotometer Principle

12. ▪ เพื่อเปรียบเทียบปริมาณสารเคอร์คูมินที่มีอยู่ในผงขมิ้นชันจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน และผงขมิ้นชันตามท้องตลาด ▪ เพื่อศึกษาผลของการใช้สารเคอร์คูมินจากผงขมิ้นชันจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน เทียบกับผงขมิ้นชันตามท้องตลาด และยาปฏิชีวนะ Itraconazole ในการยับยั้งเชื้อรา Aspergillus niger บนอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA วัตถุประสงค์

13. วิธีดำเนินการทดลอง 1. เปรียบเทียบปริมาณเคอร์คูมิน 2. เปรียบเทียบประสิทธิภาพการยับยั้งรา Aspergillus niger ระหว่างผงขมิ้นจาก 3 แหล่ง 3. เปรียบเทียบประสิทธิภาพการยับยั้งรา Aspergillus niger ระหว่างผงขมิ้นจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน กับยาปฏิชีวนะ Itraconazole

14. 1.) เปรียบเทียบปริมาณเคอร์คูมิน วิธีดำเนินการทดลอง ผงขมิ้น สกัดเคอร์คูมิน ด้วยเอทานอล 95% หาค่า Absorbance ด้วยเครื่อง UV/Vis-Spectrophotometer ( λ = 420 nm ) แหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน 1 ตรา หอมไกล 2 ตรา โพธิ์แก้ว 3 Curcumin Standard Solution ละลายด้วยเอทานอล ที่ความเข้มข้นต่างๆ นำมาเข้าเครื่อง UV/Vis-Spectrophotometer เพื่อสร้าง Calibration Curve หาความเข้มข้นของ เคอร์คูมินจาก ผงขมิ้นชันทั้ง 3 ชนิด 2 1 3

15. 2.) เปรียบเทียบประสิทธิภาพการยับยั้งรา Aspergillus niger ระหว่างผงขมิ้นจาก 3 แหล่ง วิธีดำเนินการทดลอง ผงขมิ้น ละลายด้วย เอทานอล 95% นำไปหยดในหลุมบนจานเลี้ยงเชื้อที่เขี่ยไว้แล้ว ดูผลการเจริญเติบโตของเชื้อราบนจานเลี้ยงเชื้อ แหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน 1 ตรา หอมไกล 2 ตรา โพธิ์แก้ว 3 2 1 3 2 1 3

16. 3.) เปรียบเทียบประสิทธิภาพการยับยั้งรา Aspergillus niger ระหว่างผงขมิ้นจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน กับยาปฏิชีวนะ Itraconazole วิธีดำเนินการทดลอง ผงขมิ้นชันจาก แหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน ยาปฏิชีวนะ Itraconazole ละลายด้วยเอทานอล 95% ดูผลการเจริญเติบโตของเชื้อราบนจานเลี้ยงเชื้อ นำไปหยดในหลุมบนจานเลี้ยงเชื้อที่เขี่ยไว้แล้ว

17. ผลการทดลอง 1.) ผลการเตรียม Curcumin Standard Solution โดยใช้เครื่อง UV/Vis-Spectrophotometer

18. ผลการทดลอง 1 .) ผลการหาค่าความเข้มข้นของสารสกัดเคอร์คูมินจากขมิ้นชันผง 3 แหล่ง

19. ผลการทดลอง 2 .) ผลการใช้สารเคอร์คูมินจากขมิ้นชันผงจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน เทียบกับขมิ้นชันผงตามท้องตลาด ในการยับยั้งเชื้อรา Aspegillus niger บนอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA ( ชุด A ) วันที่ 3 ถึงหลุมเอทานอล วันที่ 5 ถึงหลุมขมิ้น ตราโพธิ์แก้ว วันที่ 6 ถึงหลุมขมิ้น ตราหอมไกล วันที่ 8 ถึงหลุมขมิ้น จากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน เวลาที่เชื้อราเจริญจนถึงปากหลุมวุ้น ( วัน )

20. ผลการทดลอง 2 .) ผลการใช้สารเคอร์คูมินจากขมิ้นชันผงจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน เทียบกับขมิ้นชันผงตามท้องตลาด และ ในการยับยั้งเชื้อรา Aspegillus niger บนอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA ( ชุด A ) ตารางแสดงความสามารถในการยับยั้งราของสารเคมีชนิดต่างๆ สารเคมีในหลุมวุ้น เวลาที่เชื้อราเจริญถึงปากหลุมวุ้นโดยเฉลี่ย ( วัน ) ลักษณะการเจริญของรา เอทานอล 95% 2.67 สปอร์รามีสีดำ เจริญสม่ำเสมอ สารสกัดขมิ้นชันผงจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน ( 0.16 g/ml ) 7.67 สปอร์รามีสีดำ เจริญไม่สม่ำเสมอ ยังมองเห็นเส้นใยสีขาวซึ่งเป็นบริเวณที่ไม่มีการสร้างสปอร์ สารสกัดขมิ้นชันผงตราหอมไกล ( 0.16 g/ml ) 5.00 สปอร์รามีสีดำ เจริญไม่สม่ำเสมอ ยังมองเห็นเส้นใยสีขาวซึ่งเป็นบริเวณที่ไม่มีการสร้างสปอร์ สารสกัดขมิ้นชันผงตราโพธิ์แก้ว ( 0.16 g/ml ) 4.33 สปอร์รามีสีดำ เจริญไม่สม่ำเสมอ ยังมองเห็นเส้นใยสีขาวซึ่งเป็นบริเวณที่ไม่มีการสร้างสปอร์

21. ผลการทดลอง 3 .) ผลการใช้สารเคอร์คูมินจากขมิ้นชันผงจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน เทียบกับยาปฏิชีวนะ Itraconazole ในการยับยั้งเชื้อรา Aspegillus niger บนอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA ( ชุด B )

22. ผลการทดลอง ตารางแสดงความสามารถในการยับยั้งราของสารเคมีชนิดต่างๆ 3 .) ผลการใช้สารเคอร์คูมินจากขมิ้นชันผงจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน เทียบกับยาปฏิชีวนะ Itraconazole ในการยับยั้งเชื้อรา Aspegillus niger บนอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA ( ชุด B ) สารเคมีในหลุมวุ้น Inhibition Zone ( mm ) ลักษณะการเจริญของรา เอทานอล 95% 6.35 สปอร์รามีสีดำ เจริญสม่ำเสมอ สารสกัดขมิ้นชันผงจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน (0.094 g/ml) 6.85 สปอร์รามีสีดำ เจริญไม่สม่ำเสมอ ยังมองเห็นเส้นใยสีขาวซึ่งเป็นบริเวณที่ไม่มีการสร้างสปอร์อยู่เป็นบริเวณกว้าง Itraconazole (0.094 g/ml) 28.32 สปอร์รามีสีดำ เจริญสม่ำเสมอ

23. สรุปและวิจารณ์ผลการทดลอง 1.) การหาความเข้มข้น ของสารสกัดเคอร์คูมินจากขมิ้นชันผง 3 แหล่ง ขมิ้นจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน มีปริมาณเคอร์คูมินมากที่สุด ขมิ้นตราหอมไกล ขมิ้นตราโพธิ์แก้ว

24. สรุปและวิจารณ์ผลการทดลอง 2.) การใช้สารเคอร์คูมินจากขมิ้นชันผงจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน เทียบกับขมิ้นชันผงตามท้องตลาด ในการยับยั้งเชื้อรา Aspegillus niger บนอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA ขมิ้นจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน ยับยั้งการเจริญของเส้นใยราดีที่สุด ขมิ้นตราหอมไกล ขมิ้นตราโพธิ์แก้ว เอทานอล

25. สรุปและวิจารณ์ผลการทดลอง 3.) การใช้สารเคอร์คูมินจากขมิ้นชันจากแหล่งปลูกอำเภอบ้านตาขุน เทียบกับยาปฏิชีวนะ Itraconazole ในการยับยั้งเชื้อรา Aspegillus niger บนอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA ยาปฏิชีวนะ Itraconazole ขมิ้นจากแหล่งปลูก อ . บ้านตาขุน ยับยั้งการสร้างสปอร์ได้ดีที่สุด ยับยั้งการเจริญของเส้นใยราดีที่สุด เอทานอล

26. ขอบคุณ