Principi i mjerenje kapilarnom elektroforezom

1. Princip i performanse kapilarne elektroforeze
Ljubica Glavaš-Obrovac
Uvod
Kapilarna elektroforeza (CE) je relativno nova i vrlo svestran tehnika (također poznat kaoKapilarna elektroforeza (CE) je relativno nova i vrlo svestran tehnika (također poznat kao
high-performance kapilarna elektroforeza) za odvajanje i analizu različitih molekula - od malih anorganskih iona
do ogromnih biopolimera. U usporedbi s visokodjelotvornom tekućinskom kromatografijom, a plinska
kromatografija CE nudi nekoliko prednosti, uključujući vrlo učinkovit i brz razdvajanja, relativno jeftin i dugotrajan
kapilarnim kolonama, malim zahtjevima veličine uzorka i niske potrošnje reagensa. To se može koristiti za
analizu polarnog ionskog, polarna neionskih i nepolarnih neionskih spojeva, kao i biomolekula visoke
molekulske mase i kiralnih spojeva. Nadalje, CE odvajanja su vrlo učinkovit (N> 10 5 do 10 6) osjetljiva u pogledumolekulske mase i kiralnih spojeva. Nadalje, CE odvajanja su vrlo učinkovit (N> 10 5 do 10 6) osjetljiva u pogledumolekulske mase i kiralnih spojeva. Nadalje, CE odvajanja su vrlo učinkovit (N> 10 5 do 10 6) osjetljiva u pogledumolekulske mase i kiralnih spojeva. Nadalje, CE odvajanja su vrlo učinkovit (N> 10 5 do 10 6) osjetljiva u pogledumolekulske mase i kiralnih spojeva. Nadalje, CE odvajanja su vrlo učinkovit (N> 10 5 do 10 6) osjetljiva u pogledu
mase i koncentracije, brzo (obično manje od 30 minuta), jednostavno, i zahtijevaju vrlo male količine otapala i
ostalih potrošnog materijala. Ovaj vrlo sofisticiran, user friendly i vrlo učinkovito CE postao komercijalno
dostupan po povoljnim cijenama ( Slide 2 ).dostupan po povoljnim cijenama ( Slide 2 ).dostupan po povoljnim cijenama ( Slide 2 ).
Teorija kapilarna elektroforeza
Kada je uzorak se ubrizgava u kapilarnu cijev i električno polje se primjenjuje preko kapilarne cijevi,
dijelovi uzorka je migrirati kao rezultat dvije vrste djelovanja: pokretljivosti i elektroosmotskog mobilnosti. pokretljivostidijelovi uzorka je migrirati kao rezultat dvije vrste djelovanja: pokretljivosti i elektroosmotskog mobilnosti. pokretljivosti
je otopljenog odgovor na primijenjenog električnog polja. Kationi pomaknuti prema negativno nabijenom katode,
aniona pomaknuti prema pozitivno nabijenom anode i neutralni vrste ostaju na mjestu. Drugi doprinos migracije
otopljene tvari jest elektroosmotskog protoka, što se događa kada tampon kreće kroz kapilare odgovor naotopljene tvari jest elektroosmotskog protoka, što se događa kada tampon kreće kroz kapilare odgovor naotopljene tvari jest elektroosmotskog protoka, što se događa kada tampon kreće kroz kapilare odgovor na
primijenjene električno polje. Pod normalnim uvjetima tampon kreće prema katodi, brišući većinu otopljene tvari,
uključujući i aniona i neutralnih vrsta, prema negativno nabijenom katode 1 ( Slide 3 ).uključujući i aniona i neutralnih vrsta, prema negativno nabijenom katode 1 ( Slide 3 ).uključujući i aniona i neutralnih vrsta, prema negativno nabijenom katode 1 ( Slide 3 ).uključujući i aniona i neutralnih vrsta, prema negativno nabijenom katode 1 ( Slide 3 ).
pokretljivosti
Brzina kojom otopljene tvari seli u odgovoru na primijenjenu električnog polja ( Slide 4 ) naziva svojim elektroforezomBrzina kojom otopljene tvari seli u odgovoru na primijenjenu električnog polja ( Slide 4 ) naziva svojim elektroforezomBrzina kojom otopljene tvari seli u odgovoru na primijenjenu električnog polja ( Slide 4 ) naziva svojim elektroforezomBrzina kojom otopljene tvari seli u odgovoru na primijenjenu električnog polja ( Slide 4 ) naziva svojim elektroforezomBrzina kojom otopljene tvari seli u odgovoru na primijenjenu električnog polja ( Slide 4 ) naziva svojim elektroforezom
brzina, ν eP; je definiran kaobrzina, ν eP; je definiran kaobrzina, ν eP; je definiran kaobrzina, ν eP; je definiran kao
v EP = μ EP Ev EP = μ EP Ev EP = μ EP Ev EP = μ EP Ev EP = μ EP E
gdje jj EP je je otopljena je elektroforezom mobilnost i E je magnituda primjenjene električnog polja. Otopljene tvari jegdje jj EP je je otopljena je elektroforezom mobilnost i E je magnituda primjenjene električnog polja. Otopljene tvari jegdje jj EP je je otopljena je elektroforezom mobilnost i E je magnituda primjenjene električnog polja. Otopljene tvari jegdje jj EP je je otopljena je elektroforezom mobilnost i E je magnituda primjenjene električnog polja. Otopljene tvari jegdje jj EP je je otopljena je elektroforezom mobilnost i E je magnituda primjenjene električnog polja. Otopljene tvari je
elektroforetska pokretljivost je definiran kao
μ EP = q 6 πηrμ EP = q 6 πηrμ EP = q 6 πηrμ EP = q 6 πηrμ EP = q 6 πηr
gdje je q je otopljena je naboj, η je pufer viskoznost, a r je radius u otopljene tvari.

2. Pokretljivosti, a time i elektroforezom brzina, povećava za više visoko nabijenim otopljenih tvari i otopljenih tvari
iz manje veličine. Jer q pozitivna za kationa i negativne za anionom, ove vrste migriraju u suprotnim smjerovima.iz manje veličine. Jer q pozitivna za kationa i negativne za anionom, ove vrste migriraju u suprotnim smjerovima.iz manje veličine. Jer q pozitivna za kationa i negativne za anionom, ove vrste migriraju u suprotnim smjerovima.
Neutralni vrsta, za koje q je nula, imaju elektroforetski brzina nula.Neutralni vrsta, za koje q je nula, imaju elektroforetski brzina nula.Neutralni vrsta, za koje q je nula, imaju elektroforetski brzina nula.
Elektroosmotskog protoka (EOF)
EOF je uzrokovana primjenom visokih napona na elektrolita ispunjen kapilare ( Slide 5 ).EOF je uzrokovana primjenom visokih napona na elektrolita ispunjen kapilare ( Slide 5 ).EOF je uzrokovana primjenom visokih napona na elektrolita ispunjen kapilare ( Slide 5 ).
To se događa kada protok pufer prolazi kroz silika kapilare ima pH veći od 3, a silanol (SiOH) skupina izgubiti
proton postati silanate (SiO-) ioni. Kapilarno zid tada ima negativan naboj, koji se razvija jedan dvostruki sloj od
kationa privlači njega. Unutarnji sloj kation miruje, a vanjski sloj je slobodno kretati duž kapilare. Primijenjeni
električno polje uzrokuje besplatne kationa pomaknuti prema katode stvarajući snažan bulk toka. Stopa po kojoj
se tampon kreće kroz kapilare, njegova elektroosmotskog brzina strujanja, ν EOF, je funkcija primijenjenogse tampon kreće kroz kapilare, njegova elektroosmotskog brzina strujanja, ν EOF, je funkcija primijenjenogse tampon kreće kroz kapilare, njegova elektroosmotskog brzina strujanja, ν EOF, je funkcija primijenjenogse tampon kreće kroz kapilare, njegova elektroosmotskog brzina strujanja, ν EOF, je funkcija primijenjenogse tampon kreće kroz kapilare, njegova elektroosmotskog brzina strujanja, ν EOF, je funkcija primijenjenog
električnog polja, E, a pufer je elektroosmotskog mobilnost, μ EOF.električnog polja, E, a pufer je elektroosmotskog mobilnost, μ EOF.električnog polja, E, a pufer je elektroosmotskog mobilnost, μ EOF.električnog polja, E, a pufer je elektroosmotskog mobilnost, μ EOF.električnog polja, E, a pufer je elektroosmotskog mobilnost, μ EOF.električnog polja, E, a pufer je elektroosmotskog mobilnost, μ EOF.
ν EOF = μ EOF Eν EOF = μ EOF Eν EOF = μ EOF Eν EOF = μ EOF Eν EOF = μ EOF E
Elektroosmotskog mobilnosti je definiran kao
Μ EOF = εζ 4 πηΜ EOF = εζ 4 πηΜ EOF = εζ 4 πηΜ EOF = εζ 4 πηΜ EOF = εζ 4 πη
Elektroosmotskog protoka je definiran kao
μEOF = ε 4 πηEζμEOF = ε 4 πηEζμEOF = ε 4 πηEζμEOF = ε 4 πηEζμEOF = ε 4 πηEζ
gdje ε je dielektrična konstanta rješenje, η je viskoznost otopine, E je jakost polja, a ζ je zeta potencijal.
Budući da je elektroforezom mobilnosti veći od EOF, negativno nabijene čestice, koje su, naravno,
privlači pozitivno nabijena anoda, odvojite će se kao dobro. EOF najbolje radi s velikim zeta potencijal između
kationskih slojeva, veliki difuzni sloj kationa povući više molekula prema katodi, nizak otpor od okolnog otopine,
te pufer od pH 9, tako da se svi SiOH skupine ioniziranog. Glavna korist od EOF je odvajanje u jednoj vožnji,
oba aniona i kationa, kao i razdvajanje iona s posve različitih punjenja-to-veličine omjera u razumnu duljinu
vremena, kao dobro.
Kapilarna elektroforeza instrumentacija
Kapilarna elektroforeza Instrument 1, 2 ( Slide 6 ) sastoji se od:Kapilarna elektroforeza Instrument 1, 2 ( Slide 6 ) sastoji se od:Kapilarna elektroforeza Instrument 1, 2 ( Slide 6 ) sastoji se od:Kapilarna elektroforeza Instrument 1, 2 ( Slide 6 ) sastoji se od:Kapilarna elektroforeza Instrument 1, 2 ( Slide 6 ) sastoji se od:Kapilarna elektroforeza Instrument 1, 2 ( Slide 6 ) sastoji se od:
1. kapilarna1. kapilarna
2. Sustavi za ubrizgavanje2. Sustavi za ubrizgavanje
3. izvor visokog napona3. izvor visokog napona
4. Elektrode i elektroda staklenke4. Elektrode i elektroda staklenke

3. 5. Detektor5. Detektor
1. kapilarna1. kapilarna
U CE, razdvajanje događa u kapilari i to je također odjeljak u kojem uvođenje i otkrivanje odvija. Idealno
kapilarna treba biti kemijski i fizički otporni precizno strojno s uskim unutarnja promjera (d = 20-100 um; duljina
20-100
cm), ne adsorbira otopljene tvari, transparentan UV-vidljivo zračenje, s visoke toplinske provodljivosti i niske
cijene. Spojeni silicijev dioksid kapilare s vanjskim zaštitnim slojem poliimida zadovoljiti gotovo sve ove zahtjeve
te su ovoga standardni izbor u CE. Kapilare može biti interno „uncoated”, ima unutarnju površinu silicijevog
dioksida u izravnom kontaktu s odbojnika i otopljenih tvari, ali pod nekim eksperimentalnim uvjetima, to može
adsorbirati analita. Alternativno, kapilare se mogu iznutra obložena tankim slojem polimera (adsorbiranih ili
kemijski vezanog) zaštite silika površine od interakcije s otopljenim tvarima. Kapilare se također ispunjen gelova,
oponašajući pločastog gel elektroforeze, i čestice koje nose stacionarna faza, reprodukciju kromatografskog
sustava. Najčešće premazi su poliakrilamid, celuloza,
(PVA), aminokiseline, amini, surfaktanti, i poli (vinylpyrrolidinone) ili
polietileniminom. Polimeri poznati kao tekuće kromatografije (C2, Cs, C1g) ili plinskom kromatografijom
stacionarne faze (polietilen glikol (PEG), fenil-metil silikonsku) može se koristiti u tu svrhu također ( Slide 7 ).stacionarne faze (polietilen glikol (PEG), fenil-metil silikonsku) može se koristiti u tu svrhu također ( Slide 7 ).stacionarne faze (polietilen glikol (PEG), fenil-metil silikonsku) može se koristiti u tu svrhu također ( Slide 7 ).
2. Sustavi za ubrizgavanje2. Sustavi za ubrizgavanje
Moderna instrumentacija koristi dva principa ubrizgavanja: hidrodinamički ili elektrokinetićkom. U prvom
slučaju, razlika pritiska generira između dva kraja kapilare, a kraj injekcija umoči se u bočici uzorka.
Alternativno, razlika napona se uspostavlja između uzoraka i suprotne bočice, a uzorci se ubrizgava. Iako je
hidrodinamički injekcija nije selektivan, elektrokinetički ubrizgavanje (potencijalni pogon) je selektivno. To je zato
što uzorak komponente ulaze u kapilaru prema njihovoj pokretljivosti, pokretljivosti i koncentracija ukupnih iona
u uzorku i EOF. Elektrokinetički ubrizgavanje omogućava polja amplificiran uzorak slaganja, odnosno na vrlo
učinkovit postupak za povećanje osjetljivosti analitičku (u smislu koncentracije), koje treba postići ( Slide 8 ).učinkovit postupak za povećanje osjetljivosti analitičku (u smislu koncentracije), koje treba postići ( Slide 8 ).učinkovit postupak za povećanje osjetljivosti analitičku (u smislu koncentracije), koje treba postići ( Slide 8 ).
3. izvor visokog napona3. izvor visokog napona
U napajanje visokim naponom koji se koriste za CE općenito u mogućnosti dati napone do 20-30 kV i struja
do 200-300 uA. Rastavljanje se općenito provodi pod konstantnog potencijala, ali napona gradijenti ili koraka; i
konstantnom strujom odvajanje ponekad koristi. EOF jer u kondenzirane silika kapilarama obično je usmjeren
prema katodi, zajednički polarnost na kapilarnu electropherograph je s anode na kraju ubrizgavanja kapilare i
katode na suprotnom kraju, u blizini detektor; Međutim, pod određenim analitičkim uvjetima, polaritet je obrnut ( Slidekatode na suprotnom kraju, u blizini detektor; Međutim, pod određenim analitičkim uvjetima, polaritet je obrnut ( Slide
8 ).8 ).
4. Elektrode i elektroda staklenke4. Elektrode i elektroda staklenke

4. Svaka strana visokog napona napajanja spojen na elektrode. Te elektrode pomoći da se inducira električno
polje pokrenuti migraciju uzorku od anode na katodu kroz kapilarnu cijev ( Slide 8 ).polje pokrenuti migraciju uzorku od anode na katodu kroz kapilarnu cijev ( Slide 8 ).polje pokrenuti migraciju uzorku od anode na katodu kroz kapilarnu cijev ( Slide 8 ).
5. Detektor5. Detektor
U cilju da se dobije korisne informacije iz tehnike razdvajanja, potrebno je otkriti i izmjeriti analita. Detekcija
može biti kvalitativno i / ili kvantitativna. Dok sama kapilarne je otkrivanje stanica koja je povezana s uređaja za
detekciju. Također je moguće da se par do detektora koji se nalaze izvan kapilare razdvajanja, iako to ne
zahtijeva specijalizirani sučelje. Metoda detekcije najčešće koristi uključuje apsorpciju energije kao analiti kretati
kroz fokusirane zrake svjetlosti. CE otkrivanje, najčešće na osnovi apsorpciju UV-vidljivo, se provodi u kapilari-,
kako bi se izbjegle eventualne nakon separacije dodane količine. To može uzrokovati neprihvatljive bend širi ( Slidekako bi se izbjegle eventualne nakon separacije dodane količine. To može uzrokovati neprihvatljive bend širi ( Slide
9 ). Doista, stijenka kondenzirana silika kapilara, nakon uklanjanja premaz poliimid, vrlo prozirna. Tako, lug9 ). Doista, stijenka kondenzirana silika kapilara, nakon uklanjanja premaz poliimid, vrlo prozirna. Tako, lug9 ). Doista, stijenka kondenzirana silika kapilara, nakon uklanjanja premaz poliimid, vrlo prozirna. Tako, lug
količine analita može se lako otkriti i UV apsorpcijom, ali zbog ograničenja u volumenu uzorka (NL) koji se
ubrizgava koncentracija osjetljivost UV detektora je ograničen na 10- 5 M. Međutim, ovo ograničenje uubrizgava koncentracija osjetljivost UV detektora je ograničen na 10- 5 M. Međutim, ovo ograničenje uubrizgava koncentracija osjetljivost UV detektora je ograničen na 10- 5 M. Međutim, ovo ograničenje u
osjetljivosti može se riješiti korištenjem druge tehnike otkrivanja, npr laserski inducirane fluorescencije
(osjetljivost do 10- 12 M) ili elektrokemijskom detekcijom (osjetljivost do 10- 8 M) i / ili donošenjem visoke uzorak(osjetljivost do 10- 12 M) ili elektrokemijskom detekcijom (osjetljivost do 10- 8 M) i / ili donošenjem visoke uzorak(osjetljivost do 10- 12 M) ili elektrokemijskom detekcijom (osjetljivost do 10- 8 M) i / ili donošenjem visoke uzorak(osjetljivost do 10- 12 M) ili elektrokemijskom detekcijom (osjetljivost do 10- 8 M) i / ili donošenjem visoke uzorak(osjetljivost do 10- 12 M) ili elektrokemijskom detekcijom (osjetljivost do 10- 8 M) i / ili donošenjem visoke uzorak
učinkovitost slaganje metode, koja se može osigurati napredak u osjetljivosti 2-3 reda veličine. Provedbom
poljem dioda ili brzo skeniranje UV detektora omogućuje on-line snimanje UV spektra od vrhova povećavaju
sadržaj informacija o CE analize. Laserom inducirana fluorescencija, konduktometrijska otkrivanje i masene
spektrometrije s načinima otkrivanja elektro ionizacije Odnedavno su komercijalno dostupni.
Neizravno otkrivanje temelji se dodavanjem u tekućem puferu jednog ionskog aditiva koji se može detektiratiNeizravno otkrivanje temelji se dodavanjem u tekućem puferu jednog ionskog aditiva koji se može detektirati
tragovima detektorom. Ovaj ionski spoj, koji ima isti naboj i sličan mobilnost analita (a) interesa, pomaknuta iz
zona u kojima je analit (e) migriraju sačuvati električnu, a to pomak dovodi do „obrnuta vrhova”, područje koja je
proporcionalna koncentraciji danog analita (s). Nedostaci ovog načina detekcije su osjetljivost, što je obično
niža nego s odgovarajućim „izravnog” način, a uži raspon linearnosti
Tehnike kapilarna electroseparation
Tehnike separacije najčešći CE 1, 2,3, 4 ( Klizanje 10, klizanje 11 ) su:Tehnike separacije najčešći CE 1, 2,3, 4 ( Klizanje 10, klizanje 11 ) su:Tehnike separacije najčešći CE 1, 2,3, 4 ( Klizanje 10, klizanje 11 ) su:Tehnike separacije najčešći CE 1, 2,3, 4 ( Klizanje 10, klizanje 11 ) su:Tehnike separacije najčešći CE 1, 2,3, 4 ( Klizanje 10, klizanje 11 ) su:
1. Kapilarne elektroforeze (CZE)1. Kapilarne elektroforeze (CZE)
2. Micelarna elektrokinetički kapilarne kromatografijom (MECC ili MEKC)2. Micelarna elektrokinetički kapilarne kromatografijom (MECC ili MEKC)
3. Kapilarni electrochromatography (CEC)3. Kapilarni electrochromatography (CEC)
4. Kapilarno izoelektrično fokusiranje (cIEF)4. Kapilarno izoelektrično fokusiranje (cIEF)

5. 5. Kapilarnom elektroforezom na gelu (CGE)5. Kapilarnom elektroforezom na gelu (CGE)
6. Kapilarni isotachophoresis (CITP)6. Kapilarni isotachophoresis (CITP)
7. Kapilarne elektroforeze imunotest (CEIA)7. Kapilarne elektroforeze imunotest (CEIA)
1. Kapilarne elektroforeze (CZE)1. Kapilarne elektroforeze (CZE)
CZE, također poznat kao slobodan rješenje kapilarna elektroforeza, vrlo brzo, lako i način najčešće koristi
CE ( Slide 12 ). Tehnika odvajanja zasniva se na razlikama u elektroforetskoj pokretljivosti koja je usmjerenaCE ( Slide 12 ). Tehnika odvajanja zasniva se na razlikama u elektroforetskoj pokretljivosti koja je usmjerenaCE ( Slide 12 ). Tehnika odvajanja zasniva se na razlikama u elektroforetskoj pokretljivosti koja je usmjerenaCE ( Slide 12 ). Tehnika odvajanja zasniva se na razlikama u elektroforetskoj pokretljivosti koja je usmjerena
proporcionalan naboja na molekuli, i obrnuto proporcionalno viskoznosti otapala i radijusa atoma. Obično kraj
kapilare sadrži uzorak je anoda i otopljene tvari migrirati prema katodi na brzini određuje njihovu pokretljivosti i
EOF. U CZE, osim rastvora, pufer otopina obično također prolazi kroz kapilaru pod utjecajem električnog polja.
Oblaganje kapilari u zidove neionskog reagensa eliminira EOF. U ovom obliku CZE kationa seliti iz anode na
katodu. Anioni eluirati u izvorni rezervoar i neutralne vrste ostaju na mjestu. CZE pruža djelotvorne separacije
nabijenih vrsta,
2. Kapilarnom elektroforezom na gelu (CGE)2. Kapilarnom elektroforezom na gelu (CGE)
U CGE kapilarna napunjen s polimernim gela kao što su unakrsno umreženi poliakrilamid agaroza, ili
otopine linearnih polimera ( Slide 13 ). Dok je gel porozan, otopljenu migrira preko silikagela s brzine određuje iotopine linearnih polimera ( Slide 13 ). Dok je gel porozan, otopljenu migrira preko silikagela s brzine određuje iotopine linearnih polimera ( Slide 13 ). Dok je gel porozan, otopljenu migrira preko silikagela s brzine određuje iotopine linearnih polimera ( Slide 13 ). Dok je gel porozan, otopljenu migrira preko silikagela s brzine određuje i
po pokretljivosti i po svojoj veličini. Sposobnost da se izvrši razdvajanje pomoću veličine je korisno kada su
otopljene tvari imaju slične elektroforetskih mobilnosti. Na primjer, fragmenti DNA različite dužine imaju slične
punjenja-to-veličine omjera, što je njihova odvojenost s CZE teško. Jer su fragmenti DNA su različitih veličina
mogu se razdvojiti u CGE. Kapilarno koristi za CGE obično tretira eliminirati EOF, sprečavanje izbacivanje gela,
a iz kapilarne cijevi. Uzorci se ubrizgava electrokinetically jer se gel pruža previše otpora za hidrodinamičkog
uzorkovanja. Primarni primjena CGE je razdvajanje velikih biomolekula, uključujući DNA fragmenata, proteina i
oligonukleotide.
3. Kapilarno izoelektrično fokusiranje (cIEF)3. Kapilarno izoelektrično fokusiranje (cIEF)
CIEF se koristi za razdvajanje molekula uglavnom proteina biološki na temelju razlike između izoelektričnim
točkama (pI). Ova tehnika se izvodi punjenje kapilare smjesom amfolita i uzorka, a zatim formiranje gradijent pH
( Slide 14 ). Primjenom električnog polja kroz kapilaru s bazičnom otopinom na katodu i kisele otopine u anode,( Slide 14 ). Primjenom električnog polja kroz kapilaru s bazičnom otopinom na katodu i kisele otopine u anode,( Slide 14 ). Primjenom električnog polja kroz kapilaru s bazičnom otopinom na katodu i kisele otopine u anode,( Slide 14 ). Primjenom električnog polja kroz kapilaru s bazičnom otopinom na katodu i kisele otopine u anode,
amfolitima i otapala migrirati dok ne postigne područje gdje je njihov ukupni naboj je neutralan (pH pl). Amfolita i
otopljene zone ostati iznimno uzak, jer difuzije

6. u zoni različitim pH rezultata u generaciji naboja i naknadne migracije natrag na odgovarajuću zonu.
4. Micelarna elektrokinetički kromatografijom (MEKC)4. Micelarna elektrokinetički kromatografijom (MEKC)
Do MEKC je moguće odvojiti neutralnih i nabijenih otopljene tvari, kao dobro. Natrij dodecilsulfat ili SDS ima
hidrofobni rep dugog lanca i negativno nabijen ionske funkcionalne grupe na glavi ( Slide 15 ). Kada jehidrofobni rep dugog lanca i negativno nabijen ionske funkcionalne grupe na glavi ( Slide 15 ). Kada jehidrofobni rep dugog lanca i negativno nabijen ionske funkcionalne grupe na glavi ( Slide 15 ). Kada jehidrofobni rep dugog lanca i negativno nabijen ionske funkcionalne grupe na glavi ( Slide 15 ). Kada je
koncentracija SDS dovoljno veliki micele, s hidrofobnim dijelovima od surfaktanta u unutrašnjosti i nabijenih
čestica na vanjskom, nastaju. Micele imaju. Odvajanje neutralnim molekulama temelji se na hidrofobne
interakcije s otopljenim tvarima micela. MEKC Selektivnost se može kontrolirati izborom surfaktanta i dodatkom
modifikatora u puferu. Budući da micele imaju negativan naboj, oni migriraju prema katodi s brzinom manjom od
brzine EOF. Neutralnih vrsta se razdjeljuju između čestice i puferske otopine, na način sličan podjela otopljenih
tvari između dvije faze na HPLC. Hidrofilni neutralne su netopljivi u micela u hidrofobnim unutarnjeg okoliša i
isprati kao jedan bend, kao što bi u CZE. Neutralni otopljene tvari koje su vrlo hidrofobni su potpuno topljivi u
micela i isprati s micela kao jedan bend. One neutralnih vrsta koje postoje u pregradnom ravnoteže između
otopine pufera i micela eluira između potpuno hidrofilnih i hidrofobnih potpuno neutralnih vrsta. Meck se koristi
za odvajanje raznih uzoraka, uključujući i mješavine farmaceutskih spojeva, vitamini i eksploziva.
5. Isotachophoresis (ITP)5. Isotachophoresis (ITP)
ITP koristi dva različita tampon sustava u kojem se otopljene tvari u sendviču između vodećih i pratećih
elektrolite, stvaranje stabilnog stanja u kojem su otopljene zone migriraju u padajućem nizu prema pokretljivosti.
Dva jedinstveni aspekti ITP su da su sve otopljene zone migrirati na istom brzinom i da su svi usvojiti
koncentraciju vodećih elektrolita. Potonji aspekt čini ITP vrlo korisna tehnika za analizu razrijeđenim otopinama.
Uzorci mogu biti koncentrirana na nekoliko redova veličine.
6. Kapilarni electrochromatography (CEC)6. Kapilarni electrochromatography (CEC)
U CIK-kapilarna je pakiran sa stacionarnom fazom, a kada se primjenjuje električnom polju, EOF pomiče
mobilne faze pakirani stupac ( slajd 16 ). Selektivnost razdvajanja zavisi razdvajač stacionarne i mobilne faze. Tomobilne faze pakirani stupac ( slajd 16 ). Selektivnost razdvajanja zavisi razdvajač stacionarne i mobilne faze. Tomobilne faze pakirani stupac ( slajd 16 ). Selektivnost razdvajanja zavisi razdvajač stacionarne i mobilne faze. Tomobilne faze pakirani stupac ( slajd 16 ). Selektivnost razdvajanja zavisi razdvajač stacionarne i mobilne faze. To
omogućuje visoku razdvajanje učinkovitost neutralnih spojeva u vrlo kratkom vremenu analize. SIP je
omogućeno odvajanje usko povezanih spojeva, kraće puta pokrenuti, i povećan uzorak prolaznost. Kao i tekuće
kromatografije, SIP odvajanja provode podjele otopljene tvari između pokretne i stacionarne faze. Dodatno
Odvajanje motilities rješava napunjena i neutralne komponente.

7. 7. kapilarna elektroforetski imunotest (CEIA)7. kapilarna elektroforetski imunotest (CEIA)7. kapilarna elektroforetski imunotest (CEIA)
Kuka za kompetitivna imuno s CE-driven vezanog / bez odvajanja frakcija je nedavno dobila značajnu
pozornost, osobito kad god se koriste fluorescentne obilježivača. Oboje, CZE ili MECC, može se koristiti za
odvajanje vezanih od slobodnog djeliću crtač u konkurentnom imuno testom, čime neizravno, ali vrlo osjetljivo
kvantifikaciju nekoliko analita u različitim biološkim uzorcima. Osim toga, budući da su različiti tragač može lako
uočena u jednom elektroferograma višekomponentnih imunološki testovi se mogu istovremeno provoditi u istom
eksperimentu. Mnogi komercijalni reagensi imuno mogu se prilagoditi CEIA.
Primjena kapilarne elektroforeze
Kapilarna elektroforeza je imao veliko primjenu u raznim područjima, uključujući znanstvenih kemije, biokemije,
farmakologije, toksikologije, forenzička toksikologije forenzička biologije / biokemije (DNA profiliranje, analiza
proteina i ostalih bioloških spojeva), a kao biomedicinskog 5, 6, 7, 8,proteina i ostalih bioloških spojeva), a kao biomedicinskog 5, 6, 7, 8,
Reference
1 Whatley H. Osnovni principi kapilarne elektroforeze. U kliničke i sudske Primjena kapilarne elektroforeze.1 Whatley H. Osnovni principi kapilarne elektroforeze. U kliničke i sudske Primjena kapilarne elektroforeze.
Petersen, J., Mohammad, AA (ur.), Humana Press Inc., str 21-58 (2001).
2 Harstad, RK, Johnson, klima, Weisenberger, MM, Bowser, MT kapilarne elektroforeze.2 Harstad, RK, Johnson, klima, Weisenberger, MM, Bowser, MT kapilarne elektroforeze.
Analni. Chem., 88, 299-319 (2016) DOI: 10,1021 / acs.analchem.5b04125Analni. Chem., 88, 299-319 (2016) DOI: 10,1021 / acs.analchem.5b04125Analni. Chem., 88, 299-319 (2016) DOI: 10,1021 / acs.analchem.5b04125
3 Karger, BL Guttman, A. DNA sekvenciranje kapilarnom elektroforezom. Elektroforeza. 30,3 Karger, BL Guttman, A. DNA sekvenciranje kapilarnom elektroforezom. Elektroforeza. 30,3 Karger, BL Guttman, A. DNA sekvenciranje kapilarnom elektroforezom. Elektroforeza. 30,3 Karger, BL Guttman, A. DNA sekvenciranje kapilarnom elektroforezom. Elektroforeza. 30,
S196-S202. (2009) doi: 10,1002 / elps.200900218
4 Wuethrich, A., Quirino JP Izvođenje razdvajanja i detekcije u kapilarna elektroforeza (2015-2017). Elektroforeza.4 Wuethrich, A., Quirino JP Izvođenje razdvajanja i detekcije u kapilarna elektroforeza (2015-2017). Elektroforeza.4 Wuethrich, A., Quirino JP Izvođenje razdvajanja i detekcije u kapilarna elektroforeza (2015-2017). Elektroforeza.
39, 82-96 (2018), doi: 10,1002 / elps.201700252.39, 82-96 (2018), doi: 10,1002 / elps.201700252.
5 Tavares, MFM, Jager A., ​​da Silva, CL; Morales EP Prijave od kapilarna elektroforeza za analizu spojeva5 Tavares, MFM, Jager A., ​​da Silva, CL; Morales EP Prijave od kapilarna elektroforeza za analizu spojeva5 Tavares, MFM, Jager A., ​​da Silva, CL; Morales EP Prijave od kapilarna elektroforeza za analizu spojeva5 Tavares, MFM, Jager A., ​​da Silva, CL; Morales EP Prijave od kapilarna elektroforeza za analizu spojeva5 Tavares, MFM, Jager A., ​​da Silva, CL; Morales EP Prijave od kapilarna elektroforeza za analizu spojeva
kliničko forenzička, cosmetological, okoline, ishrane i farmaceutskoj važnost. J. Braz. Chem. Soc. 14, 281-290kliničko forenzička, cosmetological, okoline, ishrane i farmaceutskoj važnost. J. Braz. Chem. Soc. 14, 281-290kliničko forenzička, cosmetological, okoline, ishrane i farmaceutskoj važnost. J. Braz. Chem. Soc. 14, 281-290kliničko forenzička, cosmetological, okoline, ishrane i farmaceutskoj važnost. J. Braz. Chem. Soc. 14, 281-290kliničko forenzička, cosmetological, okoline, ishrane i farmaceutskoj važnost. J. Braz. Chem. Soc. 14, 281-290
(2003).
6 Thormann W. et al. Klinički i sudsku Toxicology Drug. U kliničke i sudske Primjena kapilarne elektroforeze.6 Thormann W. et al. Klinički i sudsku Toxicology Drug. U kliničke i sudske Primjena kapilarne elektroforeze.6 Thormann W. et al. Klinički i sudsku Toxicology Drug. U kliničke i sudske Primjena kapilarne elektroforeze.6 Thormann W. et al. Klinički i sudsku Toxicology Drug. U kliničke i sudske Primjena kapilarne elektroforeze.
Petersen, J., Mohammad, A. (ur.), Humana Press Inc. 397-422 (2001).Petersen, J., Mohammad, A. (ur.), Humana Press Inc. 397-422 (2001).Petersen, J., Mohammad, A. (ur.), Humana Press Inc. 397-422 (2001).
7 Sarr, SO, i sur. ( 2016) Validaciji Kapilarna elektroforeza metoda za analizu droga chlorphena- mina maleatne7 Sarr, SO, i sur. ( 2016) Validaciji Kapilarna elektroforeza metoda za analizu droga chlorphena- mina maleatne7 Sarr, SO, i sur. ( 2016) Validaciji Kapilarna elektroforeza metoda za analizu droga chlorphena- mina maleatne7 Sarr, SO, i sur. ( 2016) Validaciji Kapilarna elektroforeza metoda za analizu droga chlorphena- mina maleatne7 Sarr, SO, i sur. ( 2016) Validaciji Kapilarna elektroforeza metoda za analizu droga chlorphena- mina maleatne
bazi pomoću točnost profila pristup. Am. J Anal. Chem.,bazi pomoću točnost profila pristup. Am. J Anal. Chem.,
7. 452-459 (2016).7. 452-459 (2016).
8 Ticova A., Prikryl J. Reproduktivno priprema nanospray savjeta za kapilarnu elektroforezu u kombinaciji s masenom8 Ticova A., Prikryl J. Reproduktivno priprema nanospray savjeta za kapilarnu elektroforezu u kombinaciji s masenom
spektrometrijom pomoću 3D tiskani uređaj za brušenje, elektroforeza, 37, 924-930 (2016).spektrometrijom pomoću 3D tiskani uređaj za brušenje, elektroforeza, 37, 924-930 (2016).spektrometrijom pomoću 3D tiskani uređaj za brušenje, elektroforeza, 37, 924-930 (2016).spektrometrijom pomoću 3D tiskani uređaj za brušenje, elektroforeza, 37, 924-930 (2016).