Recommended
More Related Content
What's hot
What's hot (20)
Isolasi Bakteri
- 1. KHAIRIL ANWAR NIM: I2D020002 ISOLASI SALMONELLA PULLORUM MAGISTER MANAJEMEN SUMBER DAYA PETERNAKAN FAKULTAS PETERNAKAN UNIVERSITAS MATARAM
- 2. DAFTAR ISI 1 KARAKTERISTIK SALMONELLA PULLORUM 2 METODE ISOLASI 3 IDENTIFIKASI ATAU KARAKTERISASI BAKTERI 4 5
- 3. KARAKTERISTIK SALMONELLA PULLORUM Merupakan salah satu penyebab penyakti berak kapur pada unggas Salmonella Pullorum 01 Termasuk genus Enterobacteriacea Bentuk batang (bacil), gram negatif, tidak berspora, aerob/ fakultatif Ciri-Ciri Umum 02 Bergerak dengan flagela (peritrichous) mereduksi nitrat menjadi nitrit, Memfermentasi glukosa dengan atau tanpa menghasilkan gas. Ciri-Ciri Khusus 03 Katalase positif, oksidasi negatif Tidak memfermentasi sukrosa Tidak membentuk indol Ciri-ciri Khusus 04
- 4. Salmonella Pullorum Gambar 1) Bentuk Koloni Salmonella Pullorum , 2) Bentuk Sel Salmonella Pullorum
- 5. METODE ISOLASI BAKTERI Isolasi bakteri → pengambilan bakteri dari alam dan ditumbuhkan pada media buatan Apa itu Isolasi ??? Morfologi Biokimia Molekuler Identifikasi Saluran Pencernaan, air, tanah, hewan, tumbuhan, susu, daging Sumber Untuk memperoleh biakan murni sehingga mempermudah proses pengamatan Tujuan Isolasi B D C A
- 6. Persiapan Medium Padat Media SSA (Salmonella Shigella Agar) Media selektif untuk bakteri salmonella dan shigella 6,3 g bubuk media SSA dilarutkan menggunakan 100 mL aquades Media dalam erlenmeyer dihomogenkan pada hot plate selama 15 menit Media disterilkan menggunakan autoclave pada suhu 121 ºC dengan tekanan basah Media dituang pada plate steril 15-20 mL/plate Media didinginkan sampai memadat Media siap untuk digunakan
- 7. Persiapan Medium Cair Media LB (Lysogeny Broth) yang terdiri dari 1% NaCl, 1% Trypton dan 0,5% Yeast Ekstrak Dilarutkan menggunakan 100 mL aqu ades Media dalam erlenmeyer dihomogenkan pada hot plate selama 15 menit Dimasukan ke dalam tabung reaksi masing-masing 5 mL/tabung Media disterilkan menggunakan autoclave pada suhu 121 ºC dengan tekanan basah Media didinginkan Media siap untuk digunakan
- 8. ISOLASI BAKTERI Mengambil 1 g cairan usus/feses ayam yang terinfeksi pullorum Diencerkan pada 9 mL NaCl fisiologis dan divortex sampai homogen untuk mendapatkan 1 × 10-1 Seri pengenceran yang digunakan adalah 10-1 – 10-5 Masing-masing dari seri pengenceran diambil 0,1 mL dan dimasukan ke plate Sampel diratakan menggunakan spreader Inkubasi pada suhu 37 ºC selama 24 jam Pengamatan secara morfologi pada colony yang tumbuh Masing-masing colony yang berbeda diambil untuk dimurnikan
- 10. Permurnian Bakteri Masing-masing koloni bakteri yang berbeda diambil menggunakan ose (0,5 ose) Satu koloni dimasukan ke dalam 1 tube yang berbeda (yang mengandung media LB cair) Biakan murni (hanya mengandung 1 spesies bakteri)
- 11. Identifikasi dan Karakterisasi Pewarnaan gram Menggunakan pewarna karbol gentian violet, lugol, alkohol dan air fuchsin Merah (Gram Negatif) dan berbentuk batang Uji Katalase Bakteri diletakan diatas kaca objek dan ditetesi larutan H2O2 Bergelembung (Katalase positif) Uji gula (glukosa) Mengamati perubahan warna pada Tabung dari biru ke kuning Kuning (+) Uji gula (Laktosa) Mengamati perubahan warna pada Tabung dari biru ke kuning Biru (-)
- 12. Identifikasi dan Karakterisasi Uji Indol Bakteri dikultur pada tripton/pepton Steril, diberikan 5 tetes reagen Kovac Merah atau merah ungu (+), Kuning (-) Uji Urease Uji untuk mengetahui kemampuan bakteri menghasilkan enzim urease shingga dapat menghasilkan amonia Merah atau merah muda (+), Orange (-) Uji Motilitas Menggunakan media sulfide indole motiliy (SIM), bakteri ditanaman dengan cara menusukan ose ke media SIM. Tumbuh menyebar ( motil), Non motil (tidak menyebar) Uji TSIA (triple sugar iron agar) Untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam memfermnetasi glukosa, laktosa, sukrosa dan pembentukan H2S Warna merah pada permukaan, kuning dibawah dan ada rongg-rongga dibawah agar
- 13. Identifikasi dan Karakterisasi Uji KCN Bakteri diuji apakah mampu menggunakan sianida sebagai sumber karbon dan nitrogen Kekeruhan (+) Bening (-) Uji oksidase Isolat bakteri diinokulasikan ke oxidase strip, perubahan warna biru pada kertas oksidase strip, Biru violet (+), Tidak ada perubahan warna (-) Semua urutan uji biokimia pada isolat yang diperoleh dari usus ayam tersebut dilakukan berdasarkan referensi dari “Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology”
- 14. Simpulan No. Uji Hasil 1 Pewarnaan Gram Merah dan Berbentuk Batang 2 Katalase Negatif (-) 3 Uji glukosa Kuning (+) 4 Uji laktosa Biru (-) 5 Uji indol Kuning (-) 6 Uji urease Orange (-) 7 Uji motilitas Tumbuh menyebar (motil) 8 Uji TSIA Permukaan (merah), bawah (kuning) dan ada rongga-rongga 9 Uji KCN Bening (Negatif) Kesimpulan
- 15. Thank you