2. # 유산균 집락 검사란?
1922년 Hadley에 의해 고안된 방법으로 타액 sample을 선택 배지에
감작시켜 생성된 colony의 수를 세어 환자의 타액 내 Lactobacillus의
수를 정략적으로 평가하는 방법
(1) 원리
LBS agar에서의 총 세균 집락수는 타액 내의 산성세균의 비율을 말
해준다.
(2) 장비
타액 수집용기, 파라핀 왁스, 식염수 9ml가 들어있는 시험관 2개, 유
리막대 2개, 배양장비(incubator), Quebec Counter와 피펫
3. (3) 과정
- 타액은 아침식사 전에 파라핀 왁스를 이용하여 자극성 타액을
받는다.
- 타액 1ml와 멸균된 시겹수 9ml를 혼합하여 1:10으로 희석한다.
- 이 희석타액 1ml에 다시 멸균된 식염수 9ml를 혼합하여 1:100
희석타액을 만든다.
- 이 1:100 희석타액을 잘 섞은 다음, 각 희석액의 0.4ml를 유리
막대로 agar plate에 바른다.
- 그 plate에 표를 붙이고 4일(96hr)동안 37도에서 배양한다.
- 그 세균 집락의 수는 Quebec Counter를 이용하여 측정한다.
4. (4) 결과
Activity None or
little
slight moderate marked
1mg 타액당
colony 수
1,000> 1,000-
10,000
10,000-
100,000
>100,000
6. (1) 원리
지표 입자인 diazoresorcinol이 청색에서 적색으로, 다시 적색에서 무
색이나 흰색으로 여러가지 타액 내 세균들에 의해 환원되어 가는 비
율을 보는 것이다.
(2) 장비
환원효소검사는 한 개의 kit로 할 수 있는데, 그 kit는 눈금이 있는 타액
수집 시험관과 그 시험관 마개 안 쪽의 시약, 향이 있는 파라핀 왁스로
이루어져 있다.
(3) 과정
- 향이 있는 파라핀 자극 타액을 수집 시험관에 직접 뱉어 타액이
5ml눈금까지 오면 시약이 있는 시험관 마개를 닫는다.
- 그것을 환원효소가 반응할 수 있는 시약인 diazoresorcinol 일정량과
혼합한다.
- 30초 후의 색 변화와 15분 후의 색 변화로 치아우식활성도를 측정한
다.
7. (4) 판정
Color time score Caries activity
Blue 15min 1 Non conductive
Orchid 15min 2 Slightly
conductive
Red 15min 3 Moderately
conductive
Red Immediately 4 Highly conductive
Pink or white immediately 5 Extremely
conductive
9. (1) 원리
구강세균의 환원성을 이용해서 resazurin disc의 색조의 변화
로 우식활성을 측정한다. 다른 검사의 경우 24-72시간의 배양
이 필요하나 RD test는 15분 정도의 시간이 소요되며 청색-청
자색-홍자색의 색조변화로 충치의 발병성을 예측한다.
(2) 장비
Resazurin Disc(0.0275% resazurin, 10% sucrose, 0.2% PVA
를 포함한 직경 8m의 원형 배지판), 타액수집용기
(3) 과정
- 타액을 채취한다.
- RD배지판에 떨어뜨려 film으로 꽉 눌러 혐기상태로 한다.
- 이것을 상박내측에 접촉시켜 체온(32-37도)로 15분간 접촉 후,
색조변화로 측정한다.
10. (4) 판정
score 색조 판정
- 무변화 Low
+ 약간 홍색으로 Middle
++ 담홍색-적색으로 Middle
+++ 홍색-백색 high