송혜민 타액완충능검사

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송혜민 타액완충능검사

  1. 1. 폴리클 3조 36번 송혜민우식활성검사 :타액완충능 검사,유산균 집락 검사,스나이더 테스트
  2. 2. 타액완충능 검사(A) 구강 내 타액에 산이 첨가됨에 따라 산도의 변화에 저항하는능력 타액의 산도를 특정범위로 낮추는데 필요한 산을 ml단위로측정 산도 측정기(pH meter)또는 색 지표를 이용해 측정 산도측정기, 적정장치(titration equipment) 0.05N lactic acid, 0.05N base, 파라핀왁스, 소량의 기름을함유하고 있는 멸균된 유리병완 충 능원 리장 비 및 재 료
  3. 3. ① 자극타액 10ml를 식사 후 최소한 1시간 뒤에 기름 아래에 수집한다.② 이 중 5ml는 비이커내에서 측정한다.③ 실내온도에 산도 측정기를 보정한 후에 타액의 산도를 유산 또는 염기를첨가하여 7.0으로 맞춘다.④ 실린더내의 유산의 양을 재측정한다.산도를 7.0에서 6.0 으로 낮추는데 필요한 유산을 ml단위로 하여 완충능을측정한다. 이 수치를 liter당 miliequivalent로 환산할 수 있다.0.1 N 유산 소비량 우식활성0.615ml 이상 -0.614~0.484ml +0.484~0.353ml ++0.353ml +++타액완충능 검사(A)과 정 및 평 가
  4. 4.  산 첨가에 따라 생길 수 있는 pH의 변화에 저항할 수 있는능력 한계: 10방울 이상이면 완충능 충분10방울 이하이면 완충능 부족 기구: Burett, butett stand, Slider 재료: paraffin wax, color standard(pH 5.0) 시약(BCG+BCP)acetic buffer(or pH 5.0 0.1N lactic acid)타액완충능 검사(B)완 충 능원 리장 비 및 재 료
  5. 5. ① 음료수로 양치② 파라핀을 저작시키며 4-5ml의 타액을 채취③ 정확히 2ml의 타액과 BCG와 BCP 혼합지시약 3방울 첨가④ Calibtated Dropper로 0.1N유산용액을 한방울씩 첨가 (pH 5.0이 될 때까지)⑤ 남은 2ml의 타액으로 위의 과정 반복하여 평균값으로 타액 완충능 산출0.1 N 유산 소비량 우식활성14 방울 이상 충분10~14 방울 보통6~10 방울 부족6방울 이하 매우 주의 요함 10방울 이하로 나타난 경우 과일이나 야채를 많이 섭취 6방울 이하인 경우 탄산소다를 사용하여 일시적으로나마부족한 완충능을 보충타액완충능 검사(B)과 정 및 평 가
  6. 6.  목적 : 구강 내 산 생성균의 양과 그 활성을 측정실 험 목 적실 험 원 리 원리 : 색지표 (Color indicator)로서 BCG(bromcresol green)를 함유하고산도가 4.7~5.0으로 맞추어져 있는 배지에 자극성 타액을 주입하여산생성 속도를 측정하는 방법으로 구강 내 산생성능을 비색적으로측정하는 검사법Snyder Test
  7. 7.  근거 : 타액 중의 세균이 산을 생성하여 치아우식증을 유발시킨다는 근거→ 함수탄소 배양기에서 타액 중의 세균이 산을 형성실 험 근 거실 험 장 비 타액수집용기, 파라핀왁스, 스나이더 배지, 피펫, 배양 장비,Union-screw cap test tubeSnyder Test
  8. 8. 1) 재료 준비 (증류수, agar, Dextrose, BCG,beef extract, lactic acid)2) 중탕기에 증류수를 넣고 중탕시키면서낮은 온도에서 Beef extract를 넣고 끓인다.3) 지시약 (0.04% BCG)을 넣는다.배지 제조 과정Snyder Test
  9. 9. 4) Dextrose와 Agar를 소량씩 넣으면서 엉겨붙지않게 한다.5) 0.1N Lactic acid로 pH 5.0이 되도록 조절한다.배지 제조 과정Snyder Test
  10. 10. 1) 정규 식사 전이나 칫솔질을 하기 전에 약 3분 동안 1.0mg 정도의 파라핀조각을 저작하여 자극성 타액을 추출한다.2) 실험시 medium이 든 test tube를 65℃의 중탕기에서 melting 시킨 뒤 수집한타액 0.2ml를 pipetting하여 잘 흔들어 준다.3) 시험관의 agar가 굳으면 37℃에서 72시간 배양한다.실 험 과 정Snyder Test
  11. 11. 실 험 결 과24hr 48hr 72hrcolor yellowYellowgreenGreen BlueactivityMarked(고도)Definite(중증도)Limited(경도)Inactivate(불활성)① 대조군② Inactivate (blue)③ Limited (green)④ Definite (yellow green)⑤ Marked (yellow)SnyderTestSnyder Test
  12. 12. Lactobacillus colony count 구강 내 산 생성균, 산 내성균으로 치아 우식의 직접적인 원인균은 아니지만상당히 관련되어 있으며 치아우식 와동이 있는 부위에서 잘 발견됨→ 우식 발생을 예견하는데 많은 참고 자료가 됨Lactobacillus 란?실 험 목 적 목적 : 타액(침)에서 유산균 같은 호기성 산성 세균을 알아내는 슬라이드배양법으로 유산균의 농도는 충치 위험도를 나타냄→ Dentocult LB
  13. 13.  원리 : LBS agar (Rogasa) 에서의 총 세균 집락수는 타액내 산생성균의비율을 말해줌→ Dentocult LB는 슬라이드 양쪽에 유산균 배양을 위한 Rogasa 배지가존재실 험 원 리실 험 장 비 타액수집용기, 파라핀왁스, 식염수 9m가 들어있는 시험관 2개,유리막대 2개, 배양장비(incubator), Quebec Counter, 피펫Lactobacillus colony count
  14. 14. 1) 타액은 아침식사 전에 파라핀 왁스를 이용하여자극성 타액을 받는다.→ 파라핀 왁스는 5분 정도 씹는다.(타액분비속도 검사 동시 진행 가능)2) 타액 1ml와 멸균된 식염수 9ml를 혼합하여1:10으로 희석한다.3) 위 희석타액 1ml에 다시 멸균된 식염수9ml를 혼합하여 1:100희석타액을 만든다.실 험 과 정Lactobacillus colony count
  15. 15. 4) 1:100 희석타액을 잘 섞은 다음,각 희석액의 0.4ml를 유리막대로agar plate에 바른다.5) 그 plate에 표를 붙이고 4일(96hr) 동안37℃에서 배양한다.→ 튜브 배양기에 바로 세워서 배양실 험 과 정Lactobacillus colony count
  16. 16. 6) 세균집락의 수는 Quebec Counter를이용하여 측정한다.실 험 과 정Lactobacillus colony count
  17. 17. 실 험 결 과Activity1mg 타액당Colony 수None orLittle<1000Slight 1000~10,000Moderate10,000~100,000Marked >100,000Lactobacillus colony count

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