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胜肽合成原理 圖解
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文档详细介绍了胜肽合成的原理,包括从碳端开始的合成步骤、反应条件及所用试剂。还讨论了在合成中涉及的不同保护基和适合微波加热的聚合物选择。最后提供了合成双硫键的具体案例和策略。
Science
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胜肽合成原理 圖解
1.
胜肽合成原理 圖解 Initiator+ Alstra
2.
合成從碳端 C-termimal 開始 Resin Fmoc為 氨端保護基
3.
Resin Deprotection : 去
Fmoc 然後 wash 去Fmoc Wash : 洗掉Fmoc,洗掉斷開 Fmoc的反應溶液。
4.
Resin Coupling : 加入第二個胺基酸,反應形成胜肽鍵 Peptide
Bond Formation
5.
Resin 所以合成從碳端 C-termimal 往
N-terminal 合成 以此類推往下 合成 . . .
6.
Reactor vial Scale-PEG Based (mmol) Scale- Polystyrene (mmol) Volume added solvent Total
Volume (resin + solvent) 5 ml 0.005 ~ 0.010 0.005 ~ 0.040 0.5 ~ 1.0ml 0.6 ~ 1.2ml 10ml 0.05 ~ 0.40 0.05 ~ 1.0 3.5 ~ 4.5ml 3.5 ~ 10ml 30ml 0.50 ~ 0.75 0.5 ~ 2.0 4.0 ~ 10.0m 10 ~ 20ml 合成量 : 5 μmol – 2 mmol PEG適合微波加熱,適合長鏈胜肽合成。 較不適合微波加熱,適合短鏈 胜肽合成。 ResinResin Resin用量參考 合成越長Protein 越容易folding 阻礙合成。 微波加熱Protein denature 利於長鏈胜肽合成。
7.
Define Sequence N端 C端
Resin 輸入序列
8.
假設案例 : 雙硫鍵 合成策略 Fmoc-Cys(Trt)-OH Trt
: 硫的保護基 點選氨基酸,出現預 設選用藥品。一般胜肽合成,就算沒有要製造雙硫鍵,也會使用的 基本藥品,至於Trt 會於全部程序完成後,用強酸去除, 含最後一個氨基酸上的Fmoc。
9.
N C D
Q R N C S T V Y C H L K Q C 假設案例 : 雙硫鍵 合成策略 假設有兩個雙硫鍵要合成。
10.
N C D
Q R N C S T V Y C H L K Q C 假設案例 : 雙硫鍵 合成策略 tBu TrtTrttBu Fmoc-Cys(tBu)-OH 選用第三種 保護基 CH3 CH3 H3C
11.
tBu N C D
Q R N C S T V Y C H L K Q C tBu TrtTrt 這個Cys也一樣
12.
假設案例 : 雙硫鍵
合成策略 tBu N C D Q R N C S T V Y C H L K Q C tBu TrtTrt 先合成完整胜肽(並非所有案例皆為如此!) tBu N C D Q R N C S T V Y C H L K Q C tBu 加入去除 專用反應劑Trt
13.
加入去除 專用反應劑tBu N C
D Q R N C S T V Y C H L K Q C 第二個雙硫鍵生成 N C D Q R N C S T V Y C H L K Q C tBu N C D Q R N C S T V Y C H L K Q C tBu 第一個雙硫鍵生成
14.
自動微波胜肽合成儀 www.drins.com.tw
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