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Encuentro 10. Biotecnología de
Saccharomyces cerevisiae.
Introducción. Características.
Aislamiento y selección de
Saccharomyces cerevisiae.
TEMA 2. Aplicaciones biotecnológicas de microorganismos,
sistemas biológicos para resolver problemas agroindustriales.
Biotecnología Agroindustrial II
Profesor: Manuel Pérez Quintana.
Objetivo
Profundizar en la biotecnología de
Saccharomyces cerevisiae, sus
características, aislamiento y
selección de cultivos.
• Levadura: agrupa a una variedad de hongos.
• Patógenas para plantas y animales.
• Especies no solamente inocuas sino de gran utilidad.
Candida albicans Cryptococcus neoformans Candida ciferrii
Candida utilis
Saccharomyces cerevisiae
Introducción
Especie Saccharomyces
cerevisiae:
• Proceso de fermentación.
• Producción de pan y de bebidas
alcohólicas.
• Científico, modelo biológico para
elucidar los procesos básicos de
la fisiología celular.
Levaduras:
Microorganismos mas íntimamente asociado al
progreso y bienestar de la humanidad.
• Fines del siglo XIX se reconocieron
algunas de las ventajas que ofrece el uso de
la levadura de pan, Saccharomyces
cerevisiae.
• Facilidad con la que se obtienen grandes
cantidades de este microorganismo.
• Posee un ciclo de vida con una fase sexual.
• Permite abordar estudios con las
herramientas que provee la genética
molecular.
Algunas características de S. cerevisiae
• Existen unas 600
especies agrupadas en
60 géneros.
• Saccharomyces es el
que ofrece mayor
interés industrial.
• Consta de 41 especies.
• Saccharomyces
cerevisiae brinda una
mayor aplicación
(Schreuder et al, 1996).
Son capaces de sobrevivir en condiciones muy adversas,
comportándose como anaerobios facultativos.
• Poseen bajas exigencias nutricionales, fáciles de cultivar, tanto
en el laboratorio como a escala industrial.
• Medio de cultivo que contenga azúcares, sales minerales y
una pequeña cantidad de extracto de levaduras o peptona.
Agar Sabouraud
g/L de agua destilada:
• Peptonas 1%
• Glucosa 4%
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Reproducción
• Haploide (fase sexual)
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• Figura 7. Ciclo de vida de Saccharomyces cerevisiae. Las células haploides y diploides pueden
tener diferentes vías de desarrollo. El gen KSS1 codifica para una MAP cinasa implicada en la
diferenciación tanto hacia el crecimiento pseudohifal como al invasivo.
Gemación en S. cerevisiae
Durante la fase vegetativa, la levadura se divide
por gemación.
La célula hija inicia su crecimiento formando una
yema en la célula madre, posteriormente ocurre
la división nuclear, la síntesis de la pared y
finalmente la separación de las dos células.
Composición química S. cerevisiae:
• 40% de proteínas.
• 15% de ácidos nucleicos.
• 25% de carbohidratos.
• 15% de lípidos.
• 5% de compuestos hidrosolubles como
nucleótidos, aminoácidos, vitaminas y
minerales.
• Muy productoras de proteínas de alto
valor biológico y vitaminas del complejo B.
• Células vivas de la levaduras Saccharomyces Boulardii.
• Control de bacterias enteropatógenos, prevención de
desórdenes digestivos en el hombre (Kung et al, 1997).
Efecto probiótico.
Saccharomyces Boulardii
• La mayoría de las levaduras son
mesófilas.
• Temperatura de crecimiento entre 24 y
48 0C.
• Unas pocas son psicrófilas.
• No hay levaduras que puedan crecer a
50 0C.
• Solamente unas pocas pueden
desarrollarse cerca de 0 0C.
Características de cultivo de Saccharomyces:
Aislamiento y selección de Saccharomyces cerevisiae
TOMA DE LA MUESTRA
CREACIÓN COLECCION DE CULTIVO
SELECCIÓN DE CULTIVOS
CONSERVACIÓN
CUÑAS DE AGAR-EXTRACTO DE MALTA O
AGAR-SABOUROUD
LIOFILIZADOS
Estudios a las cepas aisladas
• Tolerancia a anhídrido sulfuroso y
etanol.
• Tolerancia al fenotipo killer.
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seleccionadas mediante PCR.

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  • 2. Objetivo Profundizar en la biotecnología de Saccharomyces cerevisiae, sus características, aislamiento y selección de cultivos.
  • 3. • Levadura: agrupa a una variedad de hongos. • Patógenas para plantas y animales. • Especies no solamente inocuas sino de gran utilidad. Candida albicans Cryptococcus neoformans Candida ciferrii Candida utilis Saccharomyces cerevisiae Introducción
  • 4. Especie Saccharomyces cerevisiae: • Proceso de fermentación. • Producción de pan y de bebidas alcohólicas. • Científico, modelo biológico para elucidar los procesos básicos de la fisiología celular.
  • 5. Levaduras: Microorganismos mas íntimamente asociado al progreso y bienestar de la humanidad.
  • 6. • Fines del siglo XIX se reconocieron algunas de las ventajas que ofrece el uso de la levadura de pan, Saccharomyces cerevisiae. • Facilidad con la que se obtienen grandes cantidades de este microorganismo. • Posee un ciclo de vida con una fase sexual. • Permite abordar estudios con las herramientas que provee la genética molecular.
  • 7. Algunas características de S. cerevisiae • Existen unas 600 especies agrupadas en 60 géneros. • Saccharomyces es el que ofrece mayor interés industrial. • Consta de 41 especies. • Saccharomyces cerevisiae brinda una mayor aplicación (Schreuder et al, 1996).
  • 8.
  • 9. Son capaces de sobrevivir en condiciones muy adversas, comportándose como anaerobios facultativos.
  • 10. • Poseen bajas exigencias nutricionales, fáciles de cultivar, tanto en el laboratorio como a escala industrial. • Medio de cultivo que contenga azúcares, sales minerales y una pequeña cantidad de extracto de levaduras o peptona. Agar Sabouraud g/L de agua destilada: • Peptonas 1% • Glucosa 4% • Agar 17 %
  • 11. Reproducción • Haploide (fase sexual) • Diploide (fase asexual)
  • 12.
  • 13. • Figura 7. Ciclo de vida de Saccharomyces cerevisiae. Las células haploides y diploides pueden tener diferentes vías de desarrollo. El gen KSS1 codifica para una MAP cinasa implicada en la diferenciación tanto hacia el crecimiento pseudohifal como al invasivo.
  • 14. Gemación en S. cerevisiae Durante la fase vegetativa, la levadura se divide por gemación. La célula hija inicia su crecimiento formando una yema en la célula madre, posteriormente ocurre la división nuclear, la síntesis de la pared y finalmente la separación de las dos células.
  • 15. Composición química S. cerevisiae: • 40% de proteínas. • 15% de ácidos nucleicos. • 25% de carbohidratos. • 15% de lípidos. • 5% de compuestos hidrosolubles como nucleótidos, aminoácidos, vitaminas y minerales. • Muy productoras de proteínas de alto valor biológico y vitaminas del complejo B.
  • 16. • Células vivas de la levaduras Saccharomyces Boulardii. • Control de bacterias enteropatógenos, prevención de desórdenes digestivos en el hombre (Kung et al, 1997). Efecto probiótico. Saccharomyces Boulardii
  • 17. • La mayoría de las levaduras son mesófilas. • Temperatura de crecimiento entre 24 y 48 0C. • Unas pocas son psicrófilas. • No hay levaduras que puedan crecer a 50 0C. • Solamente unas pocas pueden desarrollarse cerca de 0 0C. Características de cultivo de Saccharomyces:
  • 18. Aislamiento y selección de Saccharomyces cerevisiae TOMA DE LA MUESTRA CREACIÓN COLECCION DE CULTIVO SELECCIÓN DE CULTIVOS CONSERVACIÓN CUÑAS DE AGAR-EXTRACTO DE MALTA O AGAR-SABOUROUD LIOFILIZADOS
  • 19.
  • 20. Estudios a las cepas aisladas • Tolerancia a anhídrido sulfuroso y etanol. • Tolerancia al fenotipo killer. • Prueba de tolerancia. • Pruebas de microvinificación. • Identificación de las levaduras seleccionadas mediante PCR.