SlideShare a Scribd company logo
‫الرحيم‬‫الرحمن‬ ‫هللا‬ ‫بسم‬
‫آن‬‫از‬‫هستي‬‫دم‬‫اي‬‫گفتي‬‫هرچه‬
‫بدان‬‫بستي‬‫آن‬ ‫بر‬‫ديگر‬‫اي‬ ‫پرده‬
‫انسان‬ ‫يوتايپينگ‬‫ر‬‫كا‬
‫فرد‬ ‫فرخی‬ ‫ف‬‫ر‬‫عا‬
aarreeff@ymail.com
•‫نمونه‬
•‫كشت‬
•‫ست‬‫و‬‫هار‬
•‫اساليد‬ ‫تهيه‬
•‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬
•‫نهايي‬ ‫مرحله‬
.
‫تعريف‬
‫كار‬‫مراحل‬
‫هدف‬
‫تعريف‬
‫سا‬‫نتيك‬‫ژ‬‫يتو‬:‫سلولي‬‫سطح‬ ‫در‬‫آن‬ ‫انتقال‬‫نحوه‬‫و‬‫عملكرد‬ ،‫نتيكي‬‫ژ‬‫ماده‬‫مطالعه‬.
‫اط‬ ‫ي‬‫ر‬‫نو‬‫سكوپ‬‫و‬‫ميكر‬ ‫از‬‫استفاده‬‫با‬‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫ي‬‫مطالعه‬ ‫به‬‫اغلب‬ ‫انساني‬‫نتيك‬‫ژ‬‫سيتو‬‫مي‬‫الق‬
‫گردد‬.
‫يوتايپينگ‬‫ر‬‫كا‬:‫شك‬ ‫به‬‫و‬ ‫ه‬‫ز‬‫اندا‬‫ترتيب‬‫به‬ ‫جاندار‬‫يك‬‫ي‬‫متافاز‬ ‫هاي‬‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬‫كردن‬‫مرتب‬‫و‬ ‫لي‬‫و‬‫نز‬‫ل‬
‫جفت‬ ‫جفت‬.
‫است‬ ‫ي‬‫ز‬‫و‬‫امر‬‫نتيك‬‫ژ‬‫سيتو‬‫اساس‬ ‫انساني‬‫ل‬‫سلو‬‫يوتايپنگ‬‫ر‬‫كا‬.
‫هدف‬
•‫تولد‬ ‫از‬‫قبل‬‫ها‬‫ي‬‫ناهنجار‬‫تشخيص‬
•‫ايي‬‫ز‬‫مرده‬ ‫يا‬‫سقط‬‫علل‬ ‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬
•‫ي‬ ‫جنس‬‫ابهامات‬
•‫ها‬ ‫بدخيمي‬‫برخي‬‫تشخيص‬
•‫ايي‬‫ز‬‫نا‬‫علل‬ ‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬
•‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫نقايص‬ ‫علل‬ ‫با‬‫هاي‬ ‫ي‬‫بيمار‬ ‫وجود‬ ‫از‬‫اطمينان‬
6
The "Philadelphia chromosome"
‫انجام‬ ‫مراحل‬
•‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫اساليد‬ ‫ي‬‫تهيه‬
1-‫فيكساتيو‬
2-‫الم‬‫بودن‬‫تميز‬
‫ها‬‫الم‬‫كردن‬ ‫تمييز‬ ‫هاي‬ ‫روش‬
3-‫ها‬ ‫الم‬ ‫دماي‬ ‫و‬‫نسبي‬ ‫طوبت‬‫ر‬
‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬
‫ها‬ ‫روش‬‫انواع‬
‫نهایی‬‫مرحله‬
•‫ي‬‫گير‬‫نمونه‬
•‫كشت‬
•‫استفاده‬ ‫قابل‬ ‫هاي‬ ‫ل‬‫سلو‬
•‫استفاده‬ ‫مورد‬ ‫هاي‬‫محيط‬
•‫ها‬‫ميتوژن‬
•‫كشت‬ ‫نحوه‬
•‫ست‬‫و‬‫هار‬
•‫تعريف‬
•‫ووسايل‬‫مواد‬
•‫انجام‬‫روش‬
‫نمونه‬
•‫ن‬‫خو‬
•‫استخوان‬ ‫مغز‬
•‫ر‬‫تومو‬
•‫آمنيوتيك‬ ‫مايع‬
•‫يونيك‬‫ر‬‫كو‬ ‫هاي‬ ‫ز‬‫پر‬
•‫ناف‬ ‫بند‬ ‫خوني‬ ‫ي‬ ‫ها‬ ‫رگ‬(‫دوسنتز‬‫ر‬‫كو‬)
•‫پوست‬
‫كشت‬
‫ها‬ ‫ل‬‫سلو‬ ‫ايط‬‫ر‬‫ش‬
‫داشتن‬ ‫تكثير‬ ‫قابليت‬
‫ها‬ ‫آن‬‫ن‬‫ژ‬‫ميتو‬ ‫بودن‬‫دسترس‬ ‫در‬
‫كشت‬ ‫سهولت‬
‫استفاده‬‫د‬‫ر‬‫مو‬‫ايج‬‫ر‬ ‫هاي‬ ‫ل‬‫سلو‬:
‫محيطي‬ ‫ن‬‫خو‬ ‫هاي‬ ‫ليمفوسايت‬
‫جنيني‬ ‫هاي‬ ‫ل‬‫سلو‬
‫استفاده‬ ‫د‬‫ر‬‫مو‬‫محيط‬
(RPMI 1640/100 ml) + (F.B.S 20-30%) + L – Glutamin +
(Penicilin – Streptomycin 10000 units/ml) + NaCO3 7.5%
PH‫خنثي‬ ‫بايد‬‫محيط‬ ‫اين‬(‫حدود‬7)‫باشد‬.
RPMI : Roswell Park Memorial Institute
‫ها‬ ‫ن‬‫ژ‬‫ميتو‬
•‫ل‬‫سلو‬ ‫تكثير‬‫جي‬‫ر‬‫خا‬ ‫هاي‬ ‫محرك‬(‫ز‬‫ميتو‬ ‫كننده‬ ‫القا‬)‫گويند‬ ‫ن‬‫ژ‬‫ميتو‬‫ا‬‫ر‬.‫مي‬ ‫جمله‬‫ز‬‫ا‬‫ها‬ ‫ن‬‫ژ‬‫تو‬:
•‫اي‬‫ر‬‫ب‬:T -Cells
•‫فيتوهماگلوتينين‬(PHA)
•‫اي‬‫ر‬‫ب‬B-Cells:
•‫پاكويد‬(Pakeweed)
•‫آ‬‫كانكاناوالين‬(Cancanavalin A)
•EBV
‫كشت‬ ‫انجام‬‫ش‬‫و‬‫ر‬
•45‫كشت‬ ‫محيط‬‫از‬ ‫ي‬ ‫س‬ ‫ي‬ ‫س‬37‫و‬ ‫يخته‬‫ر‬‫استريل‬ ‫لوله‬‫در‬ ‫ا‬‫ر‬ ‫اد‬‫ر‬‫سانتيگ‬ ‫جه‬‫ر‬‫د‬20-15‫ن‬‫خو‬‫قطره‬
‫اه‬‫ر‬‫هم‬ ‫به‬ ،‫كامل‬0.1‫ي‬ ‫س‬ ‫ي‬ ‫س‬PHA‫اييم‬‫ز‬‫اف‬ ‫مي‬‫آن‬ ‫به‬.
•72-70‫در‬‫ساعت‬37‫نماييم‬‫مي‬ ‫اينكوبه‬‫جه‬‫ر‬‫د‬.
‫ست‬‫و‬‫هار‬
•‫ي‬‫لغو‬‫معني‬:‫ل‬‫محصو‬ ‫برداشت‬
•‫نياز‬ ‫د‬‫ر‬‫مو‬ ‫مواد‬:
•‫كشت‬‫محيط‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫ي‬‫حاو‬‫فالسك‬
•‫سين‬ ‫ي‬ ‫كولش‬ ‫يا‬ ‫كولسميد‬(‫ها‬ ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫توقف‬‫عامل‬)
•‫پتاسيم‬ ‫كلريد‬(KCL)
•‫فيكساتيو‬(1‫اسيد‬ ‫استيك‬ ‫قسمت‬+3‫ل‬‫متانو‬ ‫قسمت‬)‫سرد‬ ‫و‬‫ه‬‫ز‬‫تا‬
‫كولسميد‬
• Colcemid is a microtubule-
depolymerizing drug.
• At very low concentration it
binds to microtubule plus end
to suppress microtubule
dynamics
• at higher concentration can
promote microtubule
detachment from microtubule
organizing center
‫سين‬ ‫ي‬ ‫كولش‬
•‫نوع‬‫ي‬‫از‬ ‫مانع‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫آلکالوئید‬
‫این‬‫ر‬‫ف‬‫در‬‫متافاز‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫احل‬‫ر‬‫م‬ ‫انجام‬‫د‬
‫میگردد‬ ‫ز‬‫میتو‬.
•‫بردن‬‫بين‬‫از‬ ‫با‬‫سين‬ ‫ی‬ ‫کلش‬
‫تشک‬‫از‬ ‫ی‬‫جلوگير‬ ‫و‬ ‫ل‬‫توبو‬‫و‬‫میکر‬‫یل‬
‫میکند‬ ‫عمل‬ ‫دوک‬.
‫ست‬‫و‬‫هار‬‫انجام‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬
0.2 CC Colcemid + 10 CC Culture medium
45-120 minut in 37c
Centrifugation (800-500rpm and 8-10 minut)
5-7 cc KCL (0.075 M) 37c
15-20 minute in 37c
Centrifugation
Fixative(5-7 cc)
Centrifugation
‫اساليد‬ ‫ي‬ ‫تهيه‬
•‫آل‬‫ايده‬ ‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫پخش‬‫ل‬‫حصو‬ ‫جهت‬‫مهم‬ ‫هاي‬ ‫ر‬‫فاكتو‬:
1-‫فيكساتيو‬
•‫شود‬‫اضافه‬ ‫آهستگي‬ ‫به‬
•‫ر‬‫فريز‬ ‫و‬‫يخچال‬‫از‬‫استفاده‬‫ت‬‫ر‬‫صو‬‫در‬ ‫ن‬‫فيكساسيو‬ ‫تسهيل‬
2-‫ها‬ ‫الم‬ ‫تمييزبودن‬
•‫ها‬ ‫الم‬ ‫نوع‬
•‫ها‬ ‫الم‬ ‫كردن‬ ‫تمييز‬
‫الكل‬ ‫اسيد‬ ‫روش‬
‫كروميك‬ ‫اسيد‬ ‫روش‬
‫اساليد‬‫ي‬ ‫تهيه‬‫ش‬‫و‬‫ر‬
•‫تاب‬‫ر‬‫پ‬3-2‫فاصله‬ ‫از‬‫سلولي‬‫ن‬‫سوسپانسيو‬ ‫از‬‫قطره‬30‫تميي‬‫الم‬‫ي‬‫و‬‫ر‬‫ر‬‫پاستو‬ ‫پيپ‬‫از‬‫استفاده‬‫با‬ ‫ي‬‫متر‬‫سانتي‬‫ز‬
‫سرد‬.
•‫متافاز‬‫هاي‬‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫پخش‬‫و‬‫سلولي‬ ‫دانسيته‬‫نظر‬‫ز‬‫ا‬‫است‬‫ر‬‫فازكنت‬‫سكوپ‬‫و‬‫ميكر‬‫ير‬‫ز‬ ‫ها‬‫الم‬ ‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬‫ي‬.
‫بود‬ ‫كم‬ ‫سلولي‬ ‫اكم‬‫ر‬‫ت‬ ‫اگر‬
‫بود‬ ‫ياد‬‫ز‬‫سلولي‬ ‫اكم‬‫ر‬‫ت‬ ‫اگر‬
‫فيكساتيو‬ ‫ي‬‫كمتر‬ ‫مقدار‬‫و‬ ‫سانتريفيوژ‬
‫فيكساتيو‬ ‫افزودن‬
‫كروموزومها‬‫اطراف‬‫در‬‫سيتوپالسم‬‫وجود‬ ‫هايپوتونيك‬‫با‬ ‫تيمار‬ ‫مان‬‫ز‬ ‫ايش‬‫ز‬‫اف‬
‫ي‬‫متافاز‬ ‫هاي‬ ‫كروموزوم‬‫ياد‬‫ز‬‫پخش‬ ‫هايپوتونيك‬‫با‬ ‫تيمار‬ ‫مان‬‫ز‬ ‫كاهش‬
‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫هاي‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬‫انواع‬
1-‫يكنواخت‬ ‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬
‫سئين‬‫ر‬‫او‬ ‫استو‬(Acetoorcein)
‫مينگ‬‫ر‬‫استئوكا‬(Acetocarming)
‫هماتوكسيلين‬(Hematoxilin)
‫ليشمن‬(Lishman)
‫ايت‬‫ر‬(Wright)
‫فولگن‬(Fulgen)
2-‫باندي‬‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬
‫هاي‬ ‫باندينگ‬N,G,Q,C,R,T
‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬‫يكنواخت‬ ‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬‫هاي‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬‫هاي‬ ‫برد‬‫ر‬‫كا‬
•‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫ش‬‫ر‬‫شما‬
•‫سنترومر‬ ‫محل‬ ‫تعيين‬
•‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫هاي‬‫و‬‫باز‬ ‫نسبت‬
•‫ها‬ ‫حذف‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫شكست‬
•‫ه‬‫ر‬‫ماهوا‬ ‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬
•‫سانتريك‬ ‫دي‬ ‫هاي‬ ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫وجود‬
•‫ي‬‫حلقو‬‫هاي‬ ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫وجود‬
•...
‫يكنواخت‬ ‫آميزي‬ ‫رنگ‬ ‫از‬ ‫هايي‬ ‫نمونه‬
‫ليشمن‬
•1‫در‬ ‫ليشمن‬‫قسمت‬4‫فسفات‬‫بافر‬‫قسمت‬
•PH‫ابر‬‫ر‬‫ب‬6/8
•5-3‫نگ‬‫ر‬ ‫ير‬‫ز‬ ‫دقيقه‬
•‫فسفات‬‫بافر‬ ‫با‬‫شستشو‬
•‫كردن‬‫خشك‬
•‫گزيلن‬‫در‬‫ي‬‫ر‬‫و‬‫غوطه‬ ‫سپس‬
•‫ي‬‫گذار‬‫المل‬‫و‬ ‫مجدد‬‫كردن‬‫خشك‬
‫گيمسا‬
•‫ي‬‫كار‬‫ل‬‫محلو‬:
•cc4‫گيمسا‬
•cc96‫با‬‫فسفات‬‫بافر‬PH‫ابر‬‫ر‬‫ب‬6/8
•‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫مدت‬:10-7‫دقيقه‬
•‫ي‬‫گذار‬‫المل‬ ‫و‬‫كردن‬‫خشك‬‫و‬‫شستشو‬
‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫باندينگ‬ ‫هاي‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬‫انواع‬
• G-banding
• Q-banding
• C-banding
• R-banding
• T-banding
• N-banding
‫گيمسا‬
‫كويناكرين‬
‫سنترومر‬
‫معكوس‬
‫تلومر‬
‫هستك‬
‫الم‬‫كردن‬ ‫پير‬
•‫ي‬‫مرحله‬‫ها‬‫الم‬ ‫بايد‬ ‫بندي‬‫ر‬‫نوا‬‫مناسب‬‫ي‬‫الگو‬‫يك‬‫به‬‫دستيابي‬‫جهت‬Aging‫ند‬‫ر‬‫گذا‬‫سر‬ ‫پشت‬‫ا‬‫ر‬.
•‫كنند‬ ‫مي‬‫پير‬‫طريق‬‫چندين‬‫به‬‫ا‬‫ر‬‫ها‬‫الم‬:
•24‫در‬ ‫ساعت‬60‫اد‬‫ر‬‫گ‬‫سانتي‬‫جه‬‫ر‬‫د‬
•2-1‫در‬‫ساعت‬75‫اد‬‫ر‬‫گ‬‫سانتي‬‫جه‬‫ر‬‫د‬
•20‫در‬‫دقيقه‬95-90‫اد‬‫ر‬‫گ‬‫سانتي‬‫جه‬‫ر‬‫د‬
•10‫تا‬14‫مايشگاه‬‫ز‬‫آ‬ ‫دماي‬‫در‬‫ز‬‫و‬‫ر‬
•‫از‬ ‫قبل‬ ‫است‬‫بهتر‬‫همچنين‬G-banding‫از‬‫وپس‬‫شده‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫يكنواخت‬‫گيمسا‬‫با‬ ‫ابتدا‬2‫گردد‬ ‫ي‬‫بر‬‫نگ‬‫ر‬‫ز‬‫و‬‫ر‬
.
‫گيمسا‬ ‫بندي‬‫ر‬‫نوا‬
‫نامشخص‬‫مكانيسم‬
‫نياز‬‫د‬‫ر‬‫مو‬ ‫مواد‬:
‫سالين‬ ‫نرمال‬
‫تريپسين‬‫ل‬‫محلو‬(0.4 gr/60cc Normal salin)
‫سالين‬‫سيترات‬(SSC:)17.63‫گرم‬NaCL+8.82‫در‬‫سديم‬‫سيترات‬‫گرم‬1000‫آب‬‫ليتر‬‫ميلي‬
‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬‫ل‬‫محلو‬:1‫گيمسا‬ ‫قسمت‬+3‫قسمت‬PBS
‫گيمسا‬‫بندي‬‫ر‬‫نوا‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬
‫ا‬‫ر‬ ‫ها‬ ‫الم‬2‫در‬ ‫ساعت‬SSC‫ي‬‫مار‬‫بن‬ ‫در‬37
‫هاي‬‫الكل‬ ‫در‬ ‫ها‬ ‫الم‬‫ي‬‫گير‬‫آب‬50%‫و‬70%‫و‬90%‫و‬100%‫يك‬ ‫هر‬2‫دقيقه‬
‫تريپسين‬ ‫در‬ ‫ها‬ ‫الم‬ ‫بردن‬ ‫فرو‬48-45‫مدت‬‫به‬‫اد‬‫ر‬‫سانتيگ‬ ‫جه‬‫ر‬‫د‬2-10 S
‫مقطر‬ ‫وآب‬ ‫نرمال‬ ‫سالين‬ ‫در‬ ‫فوري‬ ‫ود‬‫ر‬‫و‬
،‫كردن‬ ‫خشك‬10‫كردن‬‫خشك‬ ‫و‬ ‫مقطر‬‫آب‬ ‫با‬‫شستشو‬ ،‫ي‬‫آميز‬‫نگ‬‫ر‬ ‫دقيقه‬
‫اد‬‫ز‬‫آ‬ ‫هواي‬ ‫در‬
‫نهايي‬ ‫مرحله‬
•‫ميكنيم‬‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬‫غني‬‫و‬‫ر‬‫ي‬ ‫عدس‬ ‫با‬‫چسبانده‬‫المل‬‫ها‬‫الم‬‫ي‬‫و‬‫ر‬.
•‫ميكنيم‬‫تهيه‬ ‫باال‬‫ولوشن‬‫ز‬‫ر‬‫با‬‫گراف‬‫و‬‫فتوميكر‬ ‫آن‬ ‫از‬‫و‬ ‫نموده‬ ‫ي‬‫بردار‬‫عكس‬ ‫ا‬‫ر‬‫مناسب‬‫متافاز‬ ‫يك‬.
•‫ص‬‫به‬ ‫باندينگ‬‫ي‬‫الگو‬‫و‬ ‫ه‬‫ز‬‫انذا‬‫حسب‬‫بر‬‫ي‬‫كامپيوتر‬ ‫افزار‬‫نرم‬‫با‬ ‫يا‬‫دستي‬‫ت‬‫ر‬‫صو‬‫به‬ ‫ا‬‫ر‬‫ها‬‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬‫لي‬‫و‬‫نز‬‫ت‬‫ر‬‫و‬
‫نماييم‬‫مي‬ ‫مرتب‬ ‫جفت‬ ‫وجفت‬.
•‫ميكنيم‬ ‫يابي‬‫ز‬‫ار‬ ‫احتمالي‬‫هاي‬‫ي‬‫هنجار‬‫نا‬ ‫وجود‬‫نظر‬ ‫از‬ ‫ا‬‫ر‬‫حاصله‬‫يوتايپ‬‫ر‬‫كا‬.
Genetic Disorder
Down's Syndrome Turner's Syndrome Klinefelter Syndrome Cri du Chat Syndrome
karyotype change 3 copies of chromosome
21
one X only for chromosome
23
XXY for chromosome 23 deleted part of
chromosome 5
How often does it
occur? 1 in 800 1 in 2000 1 in 750 1 in 50,000
Physical
Symptoms
mental retardation, eyes
slant upwards,
prone to heart
defects and
respiratory
problems.
normal female in childhood,
normal intelligence,
fails to fully undergo
puberty and will
remain infertile
male, normal in appearance
and intelligence, sterile,
may show some female
characteristics (breast
development, feminine
body shape)
distinctive cat-like cry in
babies, respiratory
problems,
shortened life
span is possible
Genetic Disorder
Triple X Syndrome Edward's Syndrome Patau Syndrome Trisomy 23
karyotype change XXX for chromosome 23 3 copies of chromosome 18 3 copies of chromosome 13 XYY for chromosome 23
How often does it
occur? 1 in 700 1 in 6,000 1 in 15,000 1 in 2,000
Physical
Symptoms
female with normal
intelligence and
appearance, may
be sterile
feeding and breathing
difficulties,
developmental delays,
deformation of head
and face, cardiac
defects, often results
in early death
mental retardation, cleft
palate, extra fingers and
toes, incomplete
development of internal
organs, often results in
early death
male with low mental
ability, normal in
appearance
‫منابع‬
1-‫مولكولي‬‫و‬‫سلولي‬‫ي‬ ‫شناس‬ ‫يست‬‫ز‬‫عملي‬‫اهنماي‬‫ر‬-‫اده‬‫ز‬ ‫شريعت‬‫محمدعلي‬‫سيد‬‫دكتر‬‫و‬‫مجد‬‫احمد‬‫دكتر‬–‫ا‬‫ات‬‫ر‬‫نتشا‬
‫اك‬‫ر‬‫ا‬‫دانشگاه‬-1388
2-‫تجربي‬‫نتيك‬‫ژ‬‫در‬‫كاوش‬–‫همتا‬‫احمد‬‫دكتر‬–‫اك‬‫ر‬‫ا‬‫دانشگاه‬‫ات‬‫ر‬‫انتشا‬-1390
3-‫ی‬‫یر‬‫ز‬‫و‬‫بزرگمهر‬‫دکتر‬ ‫ل‬‫او‬‫جلد‬ ‫ی‬ ‫شناس‬‫یست‬‫ز‬ ‫فرهنگ‬
4-www.geneticlab.ir
•...

More Related Content

Similar to كاريوتايپينگ انسان

Drosophila melanogaster
Drosophila melanogasterDrosophila melanogaster
Drosophila melanogaster
Muhammad Elsobky
 
الجهاز المناعي - جهااز فوق العادة للأستاذ الدكتور محمد لبيب سالم أستاذ المناع...
الجهاز المناعي - جهااز فوق العادة للأستاذ الدكتور محمد لبيب سالم أستاذ المناع...الجهاز المناعي - جهااز فوق العادة للأستاذ الدكتور محمد لبيب سالم أستاذ المناع...
الجهاز المناعي - جهااز فوق العادة للأستاذ الدكتور محمد لبيب سالم أستاذ المناع...
Prof. Mohamed Labib Salem
 
تركيب وصبغ الخلية
تركيب وصبغ الخليةتركيب وصبغ الخلية
تركيب وصبغ الخلية
Univ. of Tripoli
 
ssyt_sHb.pdf
ssyt_sHb.pdfssyt_sHb.pdf
ssyt_sHb.pdf
Roma5467
 
1 علم الخلية الم.pdf............................................................
1 علم الخلية الم.pdf............................................................1 علم الخلية الم.pdf............................................................
1 علم الخلية الم.pdf............................................................
hakim hassan
 
4 apoptosis and gan. inno
4  apoptosis and gan. inno4  apoptosis and gan. inno
4 apoptosis and gan. inno
sallamahmed1
 
Sistem Ekonomi Islam Pembentangan 2024.pptx
Sistem Ekonomi Islam Pembentangan 2024.pptxSistem Ekonomi Islam Pembentangan 2024.pptx
Sistem Ekonomi Islam Pembentangan 2024.pptx
g40542450
 

Similar to كاريوتايپينگ انسان (8)

Drosophila melanogaster
Drosophila melanogasterDrosophila melanogaster
Drosophila melanogaster
 
الجهاز المناعي - جهااز فوق العادة للأستاذ الدكتور محمد لبيب سالم أستاذ المناع...
الجهاز المناعي - جهااز فوق العادة للأستاذ الدكتور محمد لبيب سالم أستاذ المناع...الجهاز المناعي - جهااز فوق العادة للأستاذ الدكتور محمد لبيب سالم أستاذ المناع...
الجهاز المناعي - جهااز فوق العادة للأستاذ الدكتور محمد لبيب سالم أستاذ المناع...
 
Infgen
InfgenInfgen
Infgen
 
تركيب وصبغ الخلية
تركيب وصبغ الخليةتركيب وصبغ الخلية
تركيب وصبغ الخلية
 
ssyt_sHb.pdf
ssyt_sHb.pdfssyt_sHb.pdf
ssyt_sHb.pdf
 
1 علم الخلية الم.pdf............................................................
1 علم الخلية الم.pdf............................................................1 علم الخلية الم.pdf............................................................
1 علم الخلية الم.pdf............................................................
 
4 apoptosis and gan. inno
4  apoptosis and gan. inno4  apoptosis and gan. inno
4 apoptosis and gan. inno
 
Sistem Ekonomi Islam Pembentangan 2024.pptx
Sistem Ekonomi Islam Pembentangan 2024.pptxSistem Ekonomi Islam Pembentangan 2024.pptx
Sistem Ekonomi Islam Pembentangan 2024.pptx
 

More from Aref Farokhi Fard

CPP-Mediated Delivery of Cas9 RNP
 CPP-Mediated Delivery of Cas9 RNP CPP-Mediated Delivery of Cas9 RNP
CPP-Mediated Delivery of Cas9 RNP
Aref Farokhi Fard
 
Genome editing by PNA
Genome editing by PNAGenome editing by PNA
Genome editing by PNA
Aref Farokhi Fard
 
Poly glutamic acide
Poly glutamic acidePoly glutamic acide
Poly glutamic acide
Aref Farokhi Fard
 
Genome editing delivery systems
Genome editing delivery systemsGenome editing delivery systems
Genome editing delivery systems
Aref Farokhi Fard
 
Biofilm reactors
Biofilm reactorsBiofilm reactors
Biofilm reactors
Aref Farokhi Fard
 
Infliximab
InfliximabInfliximab
Infliximab
Aref Farokhi Fard
 
Enzyme inhibition
Enzyme inhibitionEnzyme inhibition
Enzyme inhibition
Aref Farokhi Fard
 
Expression of N-terminal seven amino acids peptide of fibrin (β–peptide) on...
Expression of  N-terminal  seven amino acids peptide of fibrin (β–peptide) on...Expression of  N-terminal  seven amino acids peptide of fibrin (β–peptide) on...
Expression of N-terminal seven amino acids peptide of fibrin (β–peptide) on...
Aref Farokhi Fard
 
Peptide nucleic acid
Peptide nucleic acidPeptide nucleic acid
Peptide nucleic acid
Aref Farokhi Fard
 
Adenosine deaminase (ADA) immunodeficiency
Adenosine deaminase (ADA) immunodeficiencyAdenosine deaminase (ADA) immunodeficiency
Adenosine deaminase (ADA) immunodeficiency
Aref Farokhi Fard
 
Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of tetanus vaccines
Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of tetanus vaccines Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of tetanus vaccines
Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of tetanus vaccines
Aref Farokhi Fard
 
Isothermal Nucleic Acid Amplification Techniques
Isothermal Nucleic Acid Amplification TechniquesIsothermal Nucleic Acid Amplification Techniques
Isothermal Nucleic Acid Amplification Techniques
Aref Farokhi Fard
 

More from Aref Farokhi Fard (12)

CPP-Mediated Delivery of Cas9 RNP
 CPP-Mediated Delivery of Cas9 RNP CPP-Mediated Delivery of Cas9 RNP
CPP-Mediated Delivery of Cas9 RNP
 
Genome editing by PNA
Genome editing by PNAGenome editing by PNA
Genome editing by PNA
 
Poly glutamic acide
Poly glutamic acidePoly glutamic acide
Poly glutamic acide
 
Genome editing delivery systems
Genome editing delivery systemsGenome editing delivery systems
Genome editing delivery systems
 
Biofilm reactors
Biofilm reactorsBiofilm reactors
Biofilm reactors
 
Infliximab
InfliximabInfliximab
Infliximab
 
Enzyme inhibition
Enzyme inhibitionEnzyme inhibition
Enzyme inhibition
 
Expression of N-terminal seven amino acids peptide of fibrin (β–peptide) on...
Expression of  N-terminal  seven amino acids peptide of fibrin (β–peptide) on...Expression of  N-terminal  seven amino acids peptide of fibrin (β–peptide) on...
Expression of N-terminal seven amino acids peptide of fibrin (β–peptide) on...
 
Peptide nucleic acid
Peptide nucleic acidPeptide nucleic acid
Peptide nucleic acid
 
Adenosine deaminase (ADA) immunodeficiency
Adenosine deaminase (ADA) immunodeficiencyAdenosine deaminase (ADA) immunodeficiency
Adenosine deaminase (ADA) immunodeficiency
 
Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of tetanus vaccines
Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of tetanus vaccines Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of tetanus vaccines
Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of tetanus vaccines
 
Isothermal Nucleic Acid Amplification Techniques
Isothermal Nucleic Acid Amplification TechniquesIsothermal Nucleic Acid Amplification Techniques
Isothermal Nucleic Acid Amplification Techniques
 

Recently uploaded

مجلة الفصل الدراسي الثاني لعام 1444 هـ.pdf
مجلة الفصل الدراسي الثاني لعام 1444 هـ.pdfمجلة الفصل الدراسي الثاني لعام 1444 هـ.pdf
مجلة الفصل الدراسي الثاني لعام 1444 هـ.pdf
ssuserd7724c
 
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1444هـ.pdf
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1444هـ.pdfمجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1444هـ.pdf
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1444هـ.pdf
ssuserd7724c
 
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1445.pdf
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1445.pdfمجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1445.pdf
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1445.pdf
ssuserd7724c
 
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdfكتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
ssuserd7724c
 
أعمال الفصل الدراسي الثالثاث للعام 1444 هـ.pdf
أعمال الفصل الدراسي الثالثاث للعام 1444 هـ.pdfأعمال الفصل الدراسي الثالثاث للعام 1444 هـ.pdf
أعمال الفصل الدراسي الثالثاث للعام 1444 هـ.pdf
ssuserd7724c
 
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdfكتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
ssuserd7724c
 
اليوم الوطني للعام الدراسي 1444 هـ - 1445 هـ.pdf
اليوم الوطني للعام الدراسي 1444 هـ - 1445 هـ.pdfاليوم الوطني للعام الدراسي 1444 هـ - 1445 هـ.pdf
اليوم الوطني للعام الدراسي 1444 هـ - 1445 هـ.pdf
ssuserd7724c
 

Recently uploaded (7)

مجلة الفصل الدراسي الثاني لعام 1444 هـ.pdf
مجلة الفصل الدراسي الثاني لعام 1444 هـ.pdfمجلة الفصل الدراسي الثاني لعام 1444 هـ.pdf
مجلة الفصل الدراسي الثاني لعام 1444 هـ.pdf
 
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1444هـ.pdf
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1444هـ.pdfمجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1444هـ.pdf
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1444هـ.pdf
 
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1445.pdf
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1445.pdfمجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1445.pdf
مجلة الفصل الدراسي الأول للعام الدراسي 1445.pdf
 
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdfكتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
 
أعمال الفصل الدراسي الثالثاث للعام 1444 هـ.pdf
أعمال الفصل الدراسي الثالثاث للعام 1444 هـ.pdfأعمال الفصل الدراسي الثالثاث للعام 1444 هـ.pdf
أعمال الفصل الدراسي الثالثاث للعام 1444 هـ.pdf
 
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdfكتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
كتيب يوم التأسيس ثانوية شرحبيل بن حسنة.pdf
 
اليوم الوطني للعام الدراسي 1444 هـ - 1445 هـ.pdf
اليوم الوطني للعام الدراسي 1444 هـ - 1445 هـ.pdfاليوم الوطني للعام الدراسي 1444 هـ - 1445 هـ.pdf
اليوم الوطني للعام الدراسي 1444 هـ - 1445 هـ.pdf
 

كاريوتايپينگ انسان

  • 4. ‫تعريف‬ ‫سا‬‫نتيك‬‫ژ‬‫يتو‬:‫سلولي‬‫سطح‬ ‫در‬‫آن‬ ‫انتقال‬‫نحوه‬‫و‬‫عملكرد‬ ،‫نتيكي‬‫ژ‬‫ماده‬‫مطالعه‬. ‫اط‬ ‫ي‬‫ر‬‫نو‬‫سكوپ‬‫و‬‫ميكر‬ ‫از‬‫استفاده‬‫با‬‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫ي‬‫مطالعه‬ ‫به‬‫اغلب‬ ‫انساني‬‫نتيك‬‫ژ‬‫سيتو‬‫مي‬‫الق‬ ‫گردد‬. ‫يوتايپينگ‬‫ر‬‫كا‬:‫شك‬ ‫به‬‫و‬ ‫ه‬‫ز‬‫اندا‬‫ترتيب‬‫به‬ ‫جاندار‬‫يك‬‫ي‬‫متافاز‬ ‫هاي‬‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬‫كردن‬‫مرتب‬‫و‬ ‫لي‬‫و‬‫نز‬‫ل‬ ‫جفت‬ ‫جفت‬. ‫است‬ ‫ي‬‫ز‬‫و‬‫امر‬‫نتيك‬‫ژ‬‫سيتو‬‫اساس‬ ‫انساني‬‫ل‬‫سلو‬‫يوتايپنگ‬‫ر‬‫كا‬.
  • 5. ‫هدف‬ •‫تولد‬ ‫از‬‫قبل‬‫ها‬‫ي‬‫ناهنجار‬‫تشخيص‬ •‫ايي‬‫ز‬‫مرده‬ ‫يا‬‫سقط‬‫علل‬ ‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬ •‫ي‬ ‫جنس‬‫ابهامات‬ •‫ها‬ ‫بدخيمي‬‫برخي‬‫تشخيص‬ •‫ايي‬‫ز‬‫نا‬‫علل‬ ‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬ •‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫نقايص‬ ‫علل‬ ‫با‬‫هاي‬ ‫ي‬‫بيمار‬ ‫وجود‬ ‫از‬‫اطمينان‬
  • 7. ‫انجام‬ ‫مراحل‬ •‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫اساليد‬ ‫ي‬‫تهيه‬ 1-‫فيكساتيو‬ 2-‫الم‬‫بودن‬‫تميز‬ ‫ها‬‫الم‬‫كردن‬ ‫تمييز‬ ‫هاي‬ ‫روش‬ 3-‫ها‬ ‫الم‬ ‫دماي‬ ‫و‬‫نسبي‬ ‫طوبت‬‫ر‬ ‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫ها‬ ‫روش‬‫انواع‬ ‫نهایی‬‫مرحله‬ •‫ي‬‫گير‬‫نمونه‬ •‫كشت‬ •‫استفاده‬ ‫قابل‬ ‫هاي‬ ‫ل‬‫سلو‬ •‫استفاده‬ ‫مورد‬ ‫هاي‬‫محيط‬ •‫ها‬‫ميتوژن‬ •‫كشت‬ ‫نحوه‬ •‫ست‬‫و‬‫هار‬ •‫تعريف‬ •‫ووسايل‬‫مواد‬ •‫انجام‬‫روش‬
  • 8.
  • 9. ‫نمونه‬ •‫ن‬‫خو‬ •‫استخوان‬ ‫مغز‬ •‫ر‬‫تومو‬ •‫آمنيوتيك‬ ‫مايع‬ •‫يونيك‬‫ر‬‫كو‬ ‫هاي‬ ‫ز‬‫پر‬ •‫ناف‬ ‫بند‬ ‫خوني‬ ‫ي‬ ‫ها‬ ‫رگ‬(‫دوسنتز‬‫ر‬‫كو‬) •‫پوست‬
  • 10. ‫كشت‬ ‫ها‬ ‫ل‬‫سلو‬ ‫ايط‬‫ر‬‫ش‬ ‫داشتن‬ ‫تكثير‬ ‫قابليت‬ ‫ها‬ ‫آن‬‫ن‬‫ژ‬‫ميتو‬ ‫بودن‬‫دسترس‬ ‫در‬ ‫كشت‬ ‫سهولت‬ ‫استفاده‬‫د‬‫ر‬‫مو‬‫ايج‬‫ر‬ ‫هاي‬ ‫ل‬‫سلو‬: ‫محيطي‬ ‫ن‬‫خو‬ ‫هاي‬ ‫ليمفوسايت‬ ‫جنيني‬ ‫هاي‬ ‫ل‬‫سلو‬
  • 11. ‫استفاده‬ ‫د‬‫ر‬‫مو‬‫محيط‬ (RPMI 1640/100 ml) + (F.B.S 20-30%) + L – Glutamin + (Penicilin – Streptomycin 10000 units/ml) + NaCO3 7.5% PH‫خنثي‬ ‫بايد‬‫محيط‬ ‫اين‬(‫حدود‬7)‫باشد‬. RPMI : Roswell Park Memorial Institute
  • 12. ‫ها‬ ‫ن‬‫ژ‬‫ميتو‬ •‫ل‬‫سلو‬ ‫تكثير‬‫جي‬‫ر‬‫خا‬ ‫هاي‬ ‫محرك‬(‫ز‬‫ميتو‬ ‫كننده‬ ‫القا‬)‫گويند‬ ‫ن‬‫ژ‬‫ميتو‬‫ا‬‫ر‬.‫مي‬ ‫جمله‬‫ز‬‫ا‬‫ها‬ ‫ن‬‫ژ‬‫تو‬: •‫اي‬‫ر‬‫ب‬:T -Cells •‫فيتوهماگلوتينين‬(PHA) •‫اي‬‫ر‬‫ب‬B-Cells: •‫پاكويد‬(Pakeweed) •‫آ‬‫كانكاناوالين‬(Cancanavalin A) •EBV
  • 13. ‫كشت‬ ‫انجام‬‫ش‬‫و‬‫ر‬ •45‫كشت‬ ‫محيط‬‫از‬ ‫ي‬ ‫س‬ ‫ي‬ ‫س‬37‫و‬ ‫يخته‬‫ر‬‫استريل‬ ‫لوله‬‫در‬ ‫ا‬‫ر‬ ‫اد‬‫ر‬‫سانتيگ‬ ‫جه‬‫ر‬‫د‬20-15‫ن‬‫خو‬‫قطره‬ ‫اه‬‫ر‬‫هم‬ ‫به‬ ،‫كامل‬0.1‫ي‬ ‫س‬ ‫ي‬ ‫س‬PHA‫اييم‬‫ز‬‫اف‬ ‫مي‬‫آن‬ ‫به‬. •72-70‫در‬‫ساعت‬37‫نماييم‬‫مي‬ ‫اينكوبه‬‫جه‬‫ر‬‫د‬.
  • 14. ‫ست‬‫و‬‫هار‬ •‫ي‬‫لغو‬‫معني‬:‫ل‬‫محصو‬ ‫برداشت‬ •‫نياز‬ ‫د‬‫ر‬‫مو‬ ‫مواد‬: •‫كشت‬‫محيط‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫ي‬‫حاو‬‫فالسك‬ •‫سين‬ ‫ي‬ ‫كولش‬ ‫يا‬ ‫كولسميد‬(‫ها‬ ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫توقف‬‫عامل‬) •‫پتاسيم‬ ‫كلريد‬(KCL) •‫فيكساتيو‬(1‫اسيد‬ ‫استيك‬ ‫قسمت‬+3‫ل‬‫متانو‬ ‫قسمت‬)‫سرد‬ ‫و‬‫ه‬‫ز‬‫تا‬
  • 15. ‫كولسميد‬ • Colcemid is a microtubule- depolymerizing drug. • At very low concentration it binds to microtubule plus end to suppress microtubule dynamics • at higher concentration can promote microtubule detachment from microtubule organizing center ‫سين‬ ‫ي‬ ‫كولش‬ •‫نوع‬‫ي‬‫از‬ ‫مانع‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫آلکالوئید‬ ‫این‬‫ر‬‫ف‬‫در‬‫متافاز‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫احل‬‫ر‬‫م‬ ‫انجام‬‫د‬ ‫میگردد‬ ‫ز‬‫میتو‬. •‫بردن‬‫بين‬‫از‬ ‫با‬‫سين‬ ‫ی‬ ‫کلش‬ ‫تشک‬‫از‬ ‫ی‬‫جلوگير‬ ‫و‬ ‫ل‬‫توبو‬‫و‬‫میکر‬‫یل‬ ‫میکند‬ ‫عمل‬ ‫دوک‬.
  • 16. ‫ست‬‫و‬‫هار‬‫انجام‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬ 0.2 CC Colcemid + 10 CC Culture medium 45-120 minut in 37c Centrifugation (800-500rpm and 8-10 minut) 5-7 cc KCL (0.075 M) 37c 15-20 minute in 37c Centrifugation Fixative(5-7 cc) Centrifugation
  • 17. ‫اساليد‬ ‫ي‬ ‫تهيه‬ •‫آل‬‫ايده‬ ‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫پخش‬‫ل‬‫حصو‬ ‫جهت‬‫مهم‬ ‫هاي‬ ‫ر‬‫فاكتو‬: 1-‫فيكساتيو‬ •‫شود‬‫اضافه‬ ‫آهستگي‬ ‫به‬ •‫ر‬‫فريز‬ ‫و‬‫يخچال‬‫از‬‫استفاده‬‫ت‬‫ر‬‫صو‬‫در‬ ‫ن‬‫فيكساسيو‬ ‫تسهيل‬ 2-‫ها‬ ‫الم‬ ‫تمييزبودن‬ •‫ها‬ ‫الم‬ ‫نوع‬ •‫ها‬ ‫الم‬ ‫كردن‬ ‫تمييز‬ ‫الكل‬ ‫اسيد‬ ‫روش‬ ‫كروميك‬ ‫اسيد‬ ‫روش‬
  • 18. ‫اساليد‬‫ي‬ ‫تهيه‬‫ش‬‫و‬‫ر‬ •‫تاب‬‫ر‬‫پ‬3-2‫فاصله‬ ‫از‬‫سلولي‬‫ن‬‫سوسپانسيو‬ ‫از‬‫قطره‬30‫تميي‬‫الم‬‫ي‬‫و‬‫ر‬‫ر‬‫پاستو‬ ‫پيپ‬‫از‬‫استفاده‬‫با‬ ‫ي‬‫متر‬‫سانتي‬‫ز‬ ‫سرد‬. •‫متافاز‬‫هاي‬‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫پخش‬‫و‬‫سلولي‬ ‫دانسيته‬‫نظر‬‫ز‬‫ا‬‫است‬‫ر‬‫فازكنت‬‫سكوپ‬‫و‬‫ميكر‬‫ير‬‫ز‬ ‫ها‬‫الم‬ ‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬‫ي‬. ‫بود‬ ‫كم‬ ‫سلولي‬ ‫اكم‬‫ر‬‫ت‬ ‫اگر‬ ‫بود‬ ‫ياد‬‫ز‬‫سلولي‬ ‫اكم‬‫ر‬‫ت‬ ‫اگر‬ ‫فيكساتيو‬ ‫ي‬‫كمتر‬ ‫مقدار‬‫و‬ ‫سانتريفيوژ‬ ‫فيكساتيو‬ ‫افزودن‬ ‫كروموزومها‬‫اطراف‬‫در‬‫سيتوپالسم‬‫وجود‬ ‫هايپوتونيك‬‫با‬ ‫تيمار‬ ‫مان‬‫ز‬ ‫ايش‬‫ز‬‫اف‬ ‫ي‬‫متافاز‬ ‫هاي‬ ‫كروموزوم‬‫ياد‬‫ز‬‫پخش‬ ‫هايپوتونيك‬‫با‬ ‫تيمار‬ ‫مان‬‫ز‬ ‫كاهش‬
  • 19. ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫هاي‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬‫انواع‬ 1-‫يكنواخت‬ ‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫سئين‬‫ر‬‫او‬ ‫استو‬(Acetoorcein) ‫مينگ‬‫ر‬‫استئوكا‬(Acetocarming) ‫هماتوكسيلين‬(Hematoxilin) ‫ليشمن‬(Lishman) ‫ايت‬‫ر‬(Wright) ‫فولگن‬(Fulgen) 2-‫باندي‬‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫هاي‬ ‫باندينگ‬N,G,Q,C,R,T
  • 20. ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬‫يكنواخت‬ ‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬‫هاي‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬‫هاي‬ ‫برد‬‫ر‬‫كا‬ •‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫ش‬‫ر‬‫شما‬ •‫سنترومر‬ ‫محل‬ ‫تعيين‬ •‫ومي‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫هاي‬‫و‬‫باز‬ ‫نسبت‬ •‫ها‬ ‫حذف‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫شكست‬ •‫ه‬‫ر‬‫ماهوا‬ ‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬ •‫سانتريك‬ ‫دي‬ ‫هاي‬ ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫وجود‬ •‫ي‬‫حلقو‬‫هاي‬ ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫وجود‬ •...
  • 21. ‫يكنواخت‬ ‫آميزي‬ ‫رنگ‬ ‫از‬ ‫هايي‬ ‫نمونه‬ ‫ليشمن‬ •1‫در‬ ‫ليشمن‬‫قسمت‬4‫فسفات‬‫بافر‬‫قسمت‬ •PH‫ابر‬‫ر‬‫ب‬6/8 •5-3‫نگ‬‫ر‬ ‫ير‬‫ز‬ ‫دقيقه‬ •‫فسفات‬‫بافر‬ ‫با‬‫شستشو‬ •‫كردن‬‫خشك‬ •‫گزيلن‬‫در‬‫ي‬‫ر‬‫و‬‫غوطه‬ ‫سپس‬ •‫ي‬‫گذار‬‫المل‬‫و‬ ‫مجدد‬‫كردن‬‫خشك‬ ‫گيمسا‬ •‫ي‬‫كار‬‫ل‬‫محلو‬: •cc4‫گيمسا‬ •cc96‫با‬‫فسفات‬‫بافر‬PH‫ابر‬‫ر‬‫ب‬6/8 •‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫مدت‬:10-7‫دقيقه‬ •‫ي‬‫گذار‬‫المل‬ ‫و‬‫كردن‬‫خشك‬‫و‬‫شستشو‬
  • 22. ‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬ ‫باندينگ‬ ‫هاي‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬‫انواع‬ • G-banding • Q-banding • C-banding • R-banding • T-banding • N-banding ‫گيمسا‬ ‫كويناكرين‬ ‫سنترومر‬ ‫معكوس‬ ‫تلومر‬ ‫هستك‬
  • 23.
  • 24.
  • 25. ‫الم‬‫كردن‬ ‫پير‬ •‫ي‬‫مرحله‬‫ها‬‫الم‬ ‫بايد‬ ‫بندي‬‫ر‬‫نوا‬‫مناسب‬‫ي‬‫الگو‬‫يك‬‫به‬‫دستيابي‬‫جهت‬Aging‫ند‬‫ر‬‫گذا‬‫سر‬ ‫پشت‬‫ا‬‫ر‬. •‫كنند‬ ‫مي‬‫پير‬‫طريق‬‫چندين‬‫به‬‫ا‬‫ر‬‫ها‬‫الم‬: •24‫در‬ ‫ساعت‬60‫اد‬‫ر‬‫گ‬‫سانتي‬‫جه‬‫ر‬‫د‬ •2-1‫در‬‫ساعت‬75‫اد‬‫ر‬‫گ‬‫سانتي‬‫جه‬‫ر‬‫د‬ •20‫در‬‫دقيقه‬95-90‫اد‬‫ر‬‫گ‬‫سانتي‬‫جه‬‫ر‬‫د‬ •10‫تا‬14‫مايشگاه‬‫ز‬‫آ‬ ‫دماي‬‫در‬‫ز‬‫و‬‫ر‬ •‫از‬ ‫قبل‬ ‫است‬‫بهتر‬‫همچنين‬G-banding‫از‬‫وپس‬‫شده‬ ‫نگ‬‫ر‬ ‫يكنواخت‬‫گيمسا‬‫با‬ ‫ابتدا‬2‫گردد‬ ‫ي‬‫بر‬‫نگ‬‫ر‬‫ز‬‫و‬‫ر‬ .
  • 26. ‫گيمسا‬ ‫بندي‬‫ر‬‫نوا‬ ‫نامشخص‬‫مكانيسم‬ ‫نياز‬‫د‬‫ر‬‫مو‬ ‫مواد‬: ‫سالين‬ ‫نرمال‬ ‫تريپسين‬‫ل‬‫محلو‬(0.4 gr/60cc Normal salin) ‫سالين‬‫سيترات‬(SSC:)17.63‫گرم‬NaCL+8.82‫در‬‫سديم‬‫سيترات‬‫گرم‬1000‫آب‬‫ليتر‬‫ميلي‬ ‫ي‬‫آميز‬ ‫نگ‬‫ر‬‫ل‬‫محلو‬:1‫گيمسا‬ ‫قسمت‬+3‫قسمت‬PBS
  • 27. ‫گيمسا‬‫بندي‬‫ر‬‫نوا‬ ‫ش‬‫و‬‫ر‬ ‫ا‬‫ر‬ ‫ها‬ ‫الم‬2‫در‬ ‫ساعت‬SSC‫ي‬‫مار‬‫بن‬ ‫در‬37 ‫هاي‬‫الكل‬ ‫در‬ ‫ها‬ ‫الم‬‫ي‬‫گير‬‫آب‬50%‫و‬70%‫و‬90%‫و‬100%‫يك‬ ‫هر‬2‫دقيقه‬ ‫تريپسين‬ ‫در‬ ‫ها‬ ‫الم‬ ‫بردن‬ ‫فرو‬48-45‫مدت‬‫به‬‫اد‬‫ر‬‫سانتيگ‬ ‫جه‬‫ر‬‫د‬2-10 S ‫مقطر‬ ‫وآب‬ ‫نرمال‬ ‫سالين‬ ‫در‬ ‫فوري‬ ‫ود‬‫ر‬‫و‬ ،‫كردن‬ ‫خشك‬10‫كردن‬‫خشك‬ ‫و‬ ‫مقطر‬‫آب‬ ‫با‬‫شستشو‬ ،‫ي‬‫آميز‬‫نگ‬‫ر‬ ‫دقيقه‬ ‫اد‬‫ز‬‫آ‬ ‫هواي‬ ‫در‬
  • 28. ‫نهايي‬ ‫مرحله‬ •‫ميكنيم‬‫ي‬ ‫س‬‫ر‬‫بر‬‫غني‬‫و‬‫ر‬‫ي‬ ‫عدس‬ ‫با‬‫چسبانده‬‫المل‬‫ها‬‫الم‬‫ي‬‫و‬‫ر‬. •‫ميكنيم‬‫تهيه‬ ‫باال‬‫ولوشن‬‫ز‬‫ر‬‫با‬‫گراف‬‫و‬‫فتوميكر‬ ‫آن‬ ‫از‬‫و‬ ‫نموده‬ ‫ي‬‫بردار‬‫عكس‬ ‫ا‬‫ر‬‫مناسب‬‫متافاز‬ ‫يك‬. •‫ص‬‫به‬ ‫باندينگ‬‫ي‬‫الگو‬‫و‬ ‫ه‬‫ز‬‫انذا‬‫حسب‬‫بر‬‫ي‬‫كامپيوتر‬ ‫افزار‬‫نرم‬‫با‬ ‫يا‬‫دستي‬‫ت‬‫ر‬‫صو‬‫به‬ ‫ا‬‫ر‬‫ها‬‫وم‬‫ز‬‫مو‬‫و‬‫كر‬‫لي‬‫و‬‫نز‬‫ت‬‫ر‬‫و‬ ‫نماييم‬‫مي‬ ‫مرتب‬ ‫جفت‬ ‫وجفت‬. •‫ميكنيم‬ ‫يابي‬‫ز‬‫ار‬ ‫احتمالي‬‫هاي‬‫ي‬‫هنجار‬‫نا‬ ‫وجود‬‫نظر‬ ‫از‬ ‫ا‬‫ر‬‫حاصله‬‫يوتايپ‬‫ر‬‫كا‬.
  • 29.
  • 30.
  • 31.
  • 32. Genetic Disorder Down's Syndrome Turner's Syndrome Klinefelter Syndrome Cri du Chat Syndrome karyotype change 3 copies of chromosome 21 one X only for chromosome 23 XXY for chromosome 23 deleted part of chromosome 5 How often does it occur? 1 in 800 1 in 2000 1 in 750 1 in 50,000 Physical Symptoms mental retardation, eyes slant upwards, prone to heart defects and respiratory problems. normal female in childhood, normal intelligence, fails to fully undergo puberty and will remain infertile male, normal in appearance and intelligence, sterile, may show some female characteristics (breast development, feminine body shape) distinctive cat-like cry in babies, respiratory problems, shortened life span is possible Genetic Disorder Triple X Syndrome Edward's Syndrome Patau Syndrome Trisomy 23 karyotype change XXX for chromosome 23 3 copies of chromosome 18 3 copies of chromosome 13 XYY for chromosome 23 How often does it occur? 1 in 700 1 in 6,000 1 in 15,000 1 in 2,000 Physical Symptoms female with normal intelligence and appearance, may be sterile feeding and breathing difficulties, developmental delays, deformation of head and face, cardiac defects, often results in early death mental retardation, cleft palate, extra fingers and toes, incomplete development of internal organs, often results in early death male with low mental ability, normal in appearance
  • 33.
  • 34. ‫منابع‬ 1-‫مولكولي‬‫و‬‫سلولي‬‫ي‬ ‫شناس‬ ‫يست‬‫ز‬‫عملي‬‫اهنماي‬‫ر‬-‫اده‬‫ز‬ ‫شريعت‬‫محمدعلي‬‫سيد‬‫دكتر‬‫و‬‫مجد‬‫احمد‬‫دكتر‬–‫ا‬‫ات‬‫ر‬‫نتشا‬ ‫اك‬‫ر‬‫ا‬‫دانشگاه‬-1388 2-‫تجربي‬‫نتيك‬‫ژ‬‫در‬‫كاوش‬–‫همتا‬‫احمد‬‫دكتر‬–‫اك‬‫ر‬‫ا‬‫دانشگاه‬‫ات‬‫ر‬‫انتشا‬-1390 3-‫ی‬‫یر‬‫ز‬‫و‬‫بزرگمهر‬‫دکتر‬ ‫ل‬‫او‬‫جلد‬ ‫ی‬ ‫شناس‬‫یست‬‫ز‬ ‫فرهنگ‬ 4-www.geneticlab.ir •...