L'àcid micofenòlic

1. L’ÀCID MICOFENÒLIC, UN
NOU CONTAMINANT
EMERGENT?
CLAUDIA GARCIA TORRECILLAS
AMOR DE DIOS. TURÓ DE LA PEIRA

2. ÍNDEX
- INTRODUCCIÓ AL TEMA
-
- MARC TEÒRIC
1. Els contaminants emergents
2. Els citostàtics
3. L’àcid micofenòlic (MPA)
4.
5.
6.
7.
- MARC PRÀCTIC
- Estructura del treball
1. Part 1
2. Part 2
3. Part 3
4.
- CONCLUSIONS FINALS
- AGRAÏMENTS
-

3. INTRODUCCIÓ AL TEMA
• CITOSTÀTICS
• 132 MEDICAMENTS CONTRA EL CÀNCER (CATALUNYA)
• L’ÀCID MICOFENÒLIC (MPA), 40%
MPA EDAR

4. L’ÀCID MICOFENÒLIC, UN NOU
CONTAMINANT EMERGENT?
HIPÒTESI PRINCIPAL

5. MARC TEÒRIC
els CONTAMINANTS EMERGENTS. ELS CITOSTÀTICS.
L’ÀCID MICOFENÒLIC (MPA). LA DEPURACIÓ. ELS PEIXOS ZEBRA.

6. 1. ELS CONTAMINANTS EMERGENTS
• PRÈVIAMENT DESCONEGUTS
• NO COBERT PER REGULACIOS AMBIENTALS
• EFECTES NEGATIUS SOBRE ÈSSERS VIUS

7. 2. ELS CITOSTÀTICS
• INHIBIR EL CREIXEMENT DE CÈL·LULES
• AUGMENT UTILITZACIÓ AUGMENT RISCOS
• ADMINISTRACIÓ DIVERSA
CICLOFOSFAMIDA

8. 3. L’ÀCID MICOFENÒLIC (MPA)
• IMMUNOSUPRESSOR ‘’PENICILLIUM STOLONIFERUM’’
• TRANSPLANTAMENT I MALALTIA CROHN
• EFECTES SECUNDARIS
ÀCID MICOFENÒLIC, MPA

9. ESTRUCTURACIÓ DEL TREBALL
HIPÒTESIS
I. El MPA és cada vegada més present al
medi ambient, i augmentarà.
II. El MPA no s’elimina totalment en el
procés de depuració de les aigües, es
present a les aigües fluvials.
III. El MPA provoca canvis perjudicials als
éssers vius
PARTS
I. CÀLCUL DELS PECS (2010-2015)
II.DETERMINACIÓ DE LA CONCENTRACIÓ
DE MPA EN AIGÜES FLUVIALS I
AIGÜES EFLUENTS
III. EFECTES DEL MPA EN PEIXOS ZEBRA

10. PART 1
CÀLCUL DELS PECS (2010-2015)

11. OBJECTIUS ESPECÍFICS
I. POSAR DE MANIFEST L’AUGMENT DEL CONSUM DE CITOSTÀTICS
II. CALCULAR LES CONCENTRACIONS TEÒRIQUES DEL MPA DES DEL 2010-
2015
III. PREVEURE QUINA PODRIA SER LA CONCENTRACIÓ EN ELS PRÒXIMS
ANYS

12. 1. PECs
• PREDICTED ENVIRONMENTAL CONCENTRATION
- Concentració ambiental prevista
•
•
•
•
•

13. DADES
• CONSUMPTION: g/dia, mg/dia
• FEXC: 0,63
• FWWTP: 0,41
• 1-FWWTP
•
• WWINHAB: 130,9 L/inhab/dia
• INHAB: aprox. 7.570.908
• DILUTION: 25,9

14. 2. CÀCUL DEL CONSUM DE MPA AL PERÍODE DE
2010-2015
●Farmàcia ●2010 ●2011 ●2012 ●2013 ●2014 ●2015
●Consum
(mg/any)
●1.858.604.0
00
●1.973.844.
000
●2.026.832.
000
●2.026.832.
000
●2.356.292.
000
●2.477.440.
000
●Fexc ●0,63 0,63
●
0,63
●
0,63
●
0,63
●
0,63
●
●Fwwtp ●0,41 0,41
●
0,41
●
0,41
●
0,41
●
0,41
●
●Wwinhab ●130,9 130,9
●
130,9
●
130,9
●
130,9
●
●130,9
●Inhab ●7.570.908 7.570.908
●
7.570.908
●
7.570.908
●
7.570.908
●
7.570.908
●
●Dilution ●25,9 25,9 25,9
●
25,9
●
25,9
●
25,9
●

15. 2. CÀCUL DEL CONSUM DE MPA AL PERÍODE DE
2010-2015
●Hospital ●2010 ●2011 ●2012 ●2013 ●2014
●Consum
(mg/any)
●205 ●75 ●365 ●690 ●270
●Fexc ●0,63 0,63
●
0,63
●
0,63
●
0,63
●
●Fwwtp ●0,41 0,41
●
0,41
●
0,41
●
0,41
●
●Wwinhab ●130,9 130,9
●
130,9
●
130,9
●
130,9
●
●Inhab ●7.570.908 7.570.908
●
7.570.908
●
7.570.908
●
7.570.908
●
●Dilution ●25,9 25,9 25,9
●
25,9
●
25,9
●

16. GRÀFIQUES DEL CONSUM
2010 2011 2012 2013 2014 2015
0
500,000,000
1,000,000,000
1,500,000,000
2,000,000,000
2,500,000,000
3,000,000,000
1858604000
1973844000 2026832000
2163298000
2356292000
2477440000
CONSUM FARMÀCIA MPA en kg
ANYS
CONSUM(kg/any)
2010 2011 2012 2013 2014
0
100
200
300
400
500
600
700
800
205
75
365
690
270
CONSUM HOSPITAL MPA en kg
ANYS
CONSUM(mg/any)

17. FÒRMULA DELS PECs
• PASSEM ELS VALORS DE mg/any  g/dia (÷1000 i ÷365)
•
• SUMEM CONSUMS FARMÀCIA I HOSPITAL
- EX (2010):

18. 3. RESULTATS
4. ANÀLISI DELS RESULTATS
2010 2011 2012 2013 2014 2015
0.000
20.000
40.000
60.000
80.000
100.000
120.000
73.74
78.31 80.41
85.83
93.48
98.29
PECs (ng/L)
ANYS
ng/L

19. 4. ANÀLISI DELS RESULTATS
ü HIPÒTESI 1: DONAT EL GRAN CONSUM DE CITOSTÀTICS A CATALUNYA,
L’ÀCID MICOFENÒLIC ÉS CADA VEGADA MÉS PRESENT AL MEDI AMBIENT, I
CONTINUARÀ AUGMENTAT ALS PRÒXIMS ANYS
ü
ü AUGMENTA CONSUM, AUGMENTA CONCENTRACIÓ TEÒRICA

20. PART 2
DETERMINACIÓ DE LA CONCENTRACIÓ DE MPA EN
AIGÜES FLUVIALS I EN AIGÜES EFLUENTS

21. OBJECTIUS ESPECÍFICS
I. POSAR EN EVIDÈNCIA LA PRESÈNCIA DE MPA EN MOSTRES D’AIGÜES
FLUVIALS DEL RIU BESÓS
II. DETECTAR LA PRESÈNCIA DE MPA PER DEMOSTRAR QUE EL TRACAMENT
DE LES AIGÜES RESIDUALS A LES DEPURADORES NO GARANTEIX
L’ELIMINACIÓ DE MPA
III. QUANTIFICAR LA CONCENTRACIÓ DE MPA

22. DETERMINACIÓ DE L’EXISTÈNCIA DE MPA
1. PREPARACIÓ DE LA MOSTRA
1.1 MOSTREIG
1.2 PURIFICACIÓ
1.3 PRECONCENTRACIÓ
2. CROMATOGRAFIA DE LÍQUIDS ACOBLADA A ESPECTROMETRIA DE MASSES
2.1 SEPARACIÓ DE LÍQUIDS MITJANÇANT CROMATOGRAFIA LÍQUIDA
2.2 ANÀLISI DE MPA MITJANÇANT ESPECTROMETRIA DE MASSES
3. RESULTATS

23. 1. PREPARACIÓ DE LA MOSTRA
1.1 MOSTREIG
- MOSTREIG DEPURADORES
- MOSTREIG BESÓS

24. FITXES DEL BESÓS

25. 1. PREPARACIÓ DE LA MOSTRA
1.2 PURIFICACIÓ DE LA MOSTRA
- ELIMINAR MATÈRIA EN SUSPENSIÓ

26. 1. PREPARACIÓ DE LA MOSTRA
1.3 PRECONCENTRACIÓ DE LA MOSTRA
- EXTRACCIÓ LÍQUID-LÍQUID
(CH3)3COCH3
C4H8O2

27. 1. PREPARACIÓ DE LA MOSTRA
1.3 PRECONCENTRACIÓ DE LA MOSTRA
- EVAPORACIÓ DEL COMPOST

28. 2. CROMATOGRAFIA DE LÍQUIDS ACOBLADA A
ESPECTROMETRIA DE MASSES
2.1 SEPARACIÓ DE LÍQUIDS
MITJANÇANT CROMATOGRAFIA
LÍQUIDA
• SEPARAR FÍSICAMENT ELS
COMPONENTS D’UNA SOLUCIÓ

29. 2. CROMATOGRAFIA DE LÍQUIDS ACOBLADA A
ESPECTROMETRIA DE MASSES
2.2 ANÀLISI DE MPA MITJANÇANT ESPECTROMETRIA DE MASSES
• OBTENIR INFORMACIÓ TANT QUANTITATIVA COM QUALITATIVA DE LA
COMPOSICIÓ
303 207

30. 3. RESULTATS
3.1 OBTENCIÓ DE RESULTATS DEL BESÓS (MTBE)
3.1.1 QUANTIFICACIÓ DEL GRUP CONTROL. OBTENCIÓ DE LA RECTA DE CALIBRATGE

31. 3. RESULTATS
● ●[] mg/L ppm ●321-> 303 ●Temps de retenció
●RC1 ●0,001 ●1731 ●7.44/7.48
●RC2 ●0,005 ●7947 ●7.44/7.48
●RC3 ●0,01 ●16222 ●7,44
●RC4 ●0,02 ●30891 ●7,44
●RC5 ●0,05 ●86337 ●7,44
●RC6 ●0,1 ●131116 ●7,44
●RC7 ●0,2 ●227730 ●7,44
●RC8 ●0,5 ●359201 ●7,44
●RC9 ●1 ●439572 ●7,4
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06
0
20000
40000
60000
80000
100000
f(x) = 1730381.69x - 1136.97
R² = 1
MPA 321-> 303
CONCENTRACIONS (ppm)
AREA
●a ●1.698.069
●b ●-1137
3.1.1 QUANTIFICACIÓ DEL GRUP CONTROL. OBTENCIÓ DE LA RECTA DE CALIBRATGE

32. 3. RESULTATS
3.1.2 MOSTRES DEL RIU BESÓS

33. 3. RESULTATS
MOSTRA 1 RIU BESÓS

34. 3. RESULTATS
●GRÀFICA ●321 303 ●Temps de
retenció
●Conc. En vial
ppm (ng/µl)
●Ng ●ppb en mostra
ng/mL
●ppt en mostra
ng/L
●BESÓS 1
MTBE
●5760 ●7,24 ●0,0033862 ●0,677239958 ●0,033861998 ●33,9
BESÓS 2
MTBE
●6037 ●7,2 ●0,003555215 ●0,711043065 ●0,035552153 ●35,6
BESÓS 3
MTBE
●7873 ●7,24 ●0,004636444 ●0,927288728 ●0,046364436 ●46,4
BESÓS 4
MTBE
●6182 ●7,24 ●0,003640606 ●0.72812129 ●0.036406065 ●36,4
BESÓS 5
MTBE
●6993 ●7.24 ●0.004118208 ●0.823641569 ●0.041182078 ●41,2
BESÓS 6
MTBE
●6737 ●7.24 ●0.003967448 ●0.793489669 ●0.039674483 ●39,7

35. 3. RESULTATS
3.1.4 RECOVERY DE LES MOSTRES

36. 3. RESULTATS

37. 3. RESULTATS
●GRÀFICA ●ppt en mostra ng/L
MTBE
●ppt en mostra real
MTBE
●BESÓS 1 MTBE ●27,2 ●117
●BESÓS 2 MTBE ●35,6 ●123
●BESÓS 3 MTBE ●46,4 ●160
●BESÓS 4 MTBE ●36,4 ●126
●BESÓS 5 MTBE ●41,2 ●142
●BESÓS 6 MTBE ●39,7 ●137

38. 3. RESULTATS
●ppt en mostra
ng/L
●ppt en mostra
real
●A WWTP eff ●101,6743293 ●407
●B WWTP eff ●64,83836464 ●259
●C WWTP eff ●39,69215056 ●159
●D WWTP eff ●52,62448923 ●210
3.2 OBTENCIÓ DE RESULTATS DE DEPURADORES
3.2.1 QUANTIFICACIÓ DEL GRUP CONTROL. RECTA DE CALIBRATGE
3.2.2 CÀLCUL D’UNA CONCENTRACIÓ
3.2.3 RECOVERY DE LES MOSTRES

39. 4. ANÀLISI DELS RESULTATS
ü HIPÒTESI 2: COM L’ÀCID MICOFENÒLIC NO S’ELIMINA TOTALMENT EN EL
PROCÉS DE DEPURACIÓ DE LES AIGÜES, ÉS PRESENT A LES AIGÜES FLUVIALS
ü
2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016
0.000
20.000
40.000
60.000
80.000
100.000
120.000
140.000
160.000
73.74 78.31 80.41
85.83
93.48 98.29
134
PECs (ng/L)
ANYS
ng/L

40. PART 3
ESTUDI DEL COMPORTAMENT DE LARVES DE 6 DIES
INFECTADES PER MPA

41. 1. PREPARACIÓ DE SOLUCIONS DE MPA
MYCOFENOLIC ACID. MOLECULAR WEIGHT: 320,34 g/mol
1) 5µm
100µm+ 19900 µL H2O ZF

42. 2. ADDICCIÓ DE CONCENTRACIONS A LES
LARVES I OBSERVACIÓ
G.C
5µm
1µm
0,8µm
0,5µm
0,3µm
Microscopi nikon smz 1500 acoblat a una càmera digital a
un ordinador

43. 3. PROCÉS D’OBSERVACIÓ (4dpf)
●1 ●2 ●3 ●4 ●5 ●6 ●7 ●8
●A (CN) ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√
●B (5µm) ●√ ●√ ●√
●(deformació)
●√ ●√ ●√ ●√ ●√
●C (1µm) ●√ ●√ ●√ ●X ●√ ●√ ●√ ●√
●D (0,8µm) ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√
●E (0,5µm) ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√
●(edema)
●F (0,3µm) ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√
●(edema)

44.
Larva, Grup Control, A8
Larva, 5 μm, B3
Larva, 0’5 μm, E8, Conclusió 5

45. 3. PROCÉS D’OBSERVACIÓ (6dpf)
●1 ●2 ●3 ●4 ●5 ●6 ●7 ●8
●A (CN) ●√ ●√ ●√ X ●√ ●√ ●√ ●√
●B (5µm) ●√ X
●
X
●
●√ ●√ ●√ ●√ ●√
●C (1µm) ●√ ●√ ●√ ●X ●√ ●√ ●√ ●√
●D (0,8µm) ●√ X
●
●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√
●E (0,5µm) ●√ ●√ X
●
●√ ●√ ●√ ●√ X
●F (0,3µm) X
●
●√ ●√ ●√ ●√ ●√ ●√ √
●(edema)

46. Larva, Grup Control, A8 Larva, 5μm, B6,
Larva, 0’3μm, F8

47. 4. ÀNÀLISI DE DADES
ü HIPÒTESI 3: L’ÀCID MICOFENÒLIC PROVOCA CANVIS PERJUDICIALS
EN EL DESENVOLUPAMENT VITAL DELS ÉSSERS VIUS
- DEDUCCIÓ TOXICITAT ALTA
- CONSCIÈNCIA
-
ü

48. CONCLUSIONS FINALS

49. CONCLUSIONS
• ‘’L’ÀCID MICOFÈNÒLIC, ÉS UN NOU CONTAMINANT EMERGENT?’’
CORROBORADA
• NOUS SISTEMES DE RECICLATGE
• NOVES INSTAL·LACIONS DE DEPURADORS

50. Consejo Superior de
Investigaciones Científicas
Instituto de Diagnóstico
Ambiental y Estudios del Agua
CLAUDIA GARCIA
TORRECILLAS
AMOR DE DIOS. TURÓ
DE LA PEIRA