SlideShare a Scribd company logo
‫لی‬‫ا‬‫تع‬‫باسمه‬
‫آزمایشگاهی‬ ‫های‬ ‫دستگاه‬ ‫کار‬ ‫اصول‬
‫بذری‬ ‫فرزاد‬ ‫محمد‬
‫نیا‬ ‫حسن‬ ‫دکتر‬ ‫از‬ ‫تشکر‬ ‫با‬
‫زمستان‬
۹۹
‫مطالب‬ ‫فهرست‬
.1
‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫کاربرد‬
.2
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اصول‬
.3
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬
.4
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫انواع‬
.5
‫جرقه‬ ‫شمارنده‬
.6
‫مویینه‬ ‫الکتروفورز‬
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬
‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫کاربرد‬
‫زیستی‬ ‫حوزه‬ ‫در‬ ‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫اطالعات‬
‫مولکولی‬ ‫وزن‬
‫توالی‬ ‫تعیین‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫واحد‬ ‫زیر‬
‫بعدی‬ ‫سه‬ ‫ساختار‬
(
‫ای‬ ‫رایانه‬ ‫تحلیل‬ ‫تجزیه‬ ‫بعد‬
)
‫ترکیبات‬ ‫شناسایی‬
‫نمونه‬ ‫یک‬ ‫دهنده‬ ‫تشکیل‬ ‫مواد‬ ‫درصد‬
‫ها‬ ‫بیومولکول‬ ‫کمی‬ ‫شمارش‬
‫استیالسیون‬، ‫فسفریالسیون‬ ‫مثل‬ ‫ترجمه‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫تغییرات‬ ‫میزان‬
‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫بالینی‬ ‫کاربرد‬
•
‫مس‬ ‫روی‬ ‫پالتین‬ ‫مثل‬ ‫بافت‬ ‫در‬ ‫پایین‬ ‫غلظت‬ ‫با‬ ‫فلزات‬ ‫دقیق‬ ‫مقدار‬
(Endogenous Metal Ions)
•
‫پروتئینی‬ ‫ارتباطات‬ ‫نقشه‬ ‫اوردن‬ ‫بدست‬
(protein interaction map)
‫دارویی‬ ‫اهداف‬ ‫برای‬ ‫مواردی‬ ‫در‬
•
‫ها‬ ‫میکروارگانیسم‬ ‫شناسایی‬
•
‫بیمار‬ ‫بدن‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫دارویی‬ ‫دوز‬ ‫و‬ ‫شناسی‬ ‫سم‬
(
‫با‬ ‫نداشته‬ ‫وجود‬ ‫ایمونواسی‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫ان‬ ‫برای‬ ‫که‬ ‫مواردی‬ ‫در‬
‫شد‬
)
•
‫شناسی‬ ‫هورمون‬
(
‫بعد‬ ‫صفحه‬ ‫جدول‬
)
•
‫امینواسید‬ ‫و‬ ‫چرب‬، ‫آلی‬ ‫های‬ ‫اسید‬ ‫متابولیسم‬ ‫مثل‬ ‫نوزادان‬ ‫متابولیتی‬ ‫اختالالت‬ ‫غربالگری‬ ‫و‬ ‫سنجش‬
‫و‬ ‫ها‬ ‫پورین‬، ‫ها‬
‫ها‬ ‫پیرمیدین‬
•
‫و‬
.....
‫جای‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫آن‬ ‫های‬ ‫متابولیت‬ ‫و‬ ‫استروئیدی‬ ‫های‬ ‫هورمون‬ ‫برای‬ ‫غالبا‬
‫ی‬
‫دارند‬ ‫کاذب‬ ‫های‬ ‫جواب‬ ‫موارد‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫ایمونواسی‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫که‬
.
Clinical Applications of Mass Spectrometry in Biomolecular Analysis Methods and Protocols
Edited by Uttam Garg
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اصول‬
•
‫نمونه‬ ‫ابتدا‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫در‬
(
‫آنالیت‬
)
‫ام‬ ‫میشکند‬ ‫گازی‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫خال‬ ‫تحت‬
‫گاهی‬ ‫ا‬
‫الکتریکی‬ ‫میدان‬ ‫معرض‬ ‫در‬ ‫گازی‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫این‬ ‫سپس‬ ‫ندهد‬ ‫رخ‬ ‫میتواند‬ ‫شدن‬ ‫شکسته‬ ‫این‬
‫یا‬
‫بارشان‬ ‫به‬ ‫جرم‬ ‫نسبت‬ ‫از‬ ‫تابعی‬ ‫حرکتشان‬ ‫مسیر‬ ‫که‬ ‫میگیرند‬ ‫قرار‬ ‫مغناطیسی‬
m/z
‫است‬
(
‫چون‬ ‫غالبا‬
‫میشوند‬ ‫تفکیک‬ ‫جرمشان‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫میگوییم‬ ‫است‬ ‫یک‬ ‫بار‬
)
‫ش‬ ‫شمارش‬ ‫ذرات‬ ‫این‬ ‫سپس‬
‫از‬ ‫و‬ ‫ده‬
‫ط‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫آورد‬ ‫بدست‬ ‫را‬ ‫مولکول‬ ‫ویژه‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ‫میتوان‬ ‫گیری‬ ‫اندازه‬ ‫قابل‬ ‫خصوصیت‬ ‫این‬
‫جرمی‬ ‫یف‬
‫کنیم‬ ‫شناسایی‬ ‫را‬ ‫نمونه‬ ‫تا‬ ‫مقایسه‬ ‫موجود‬ ‫اطالعاتی‬ ‫بانک‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫مجهول‬ ‫نمونه‬
•
‫تناوب‬ ‫جدول‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫عناصر‬ ‫تمام‬ ‫شناسایی‬ ‫برای‬ ‫تقریبا‬ ‫ای‬ ‫گسترده‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫روش‬ ‫این‬
‫کاربرد‬ ‫ی‬
‫دارد‬
.
‫ب‬ ‫داشته‬ ‫را‬ ‫گازی‬ ‫فاز‬ ‫به‬ ‫انتقال‬ ‫و‬ ‫شدن‬ ‫یونیزه‬ ‫توانایی‬ ‫که‬ ‫مولکولی‬ ‫یا‬ ‫اتم‬ ‫هر‬ ‫اساسا‬
‫میتواند‬ ،‫اشد‬
‫گیرد‬ ‫قرار‬ ‫تجزیه‬ ‫مورد‬ ‫تکنیک‬ ‫این‬ ‫توسط‬
.
‫جرمی‬ ‫سنج‬‫طیف‬ ‫اصلی‬ ‫اجزای‬
•
،‫نمونه‬ ‫ورودی‬ ‫شامل‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬‫طیف‬ ‫اصلی‬ ‫اجزای‬
‫یون‬ ‫منبع‬
،
‫گیری‬‫اندازه‬ ‫سیستم‬
‫و‬
‫یون‬ ‫آشکارساز‬
‫ی‬
‫تحت‬
‫است‬ ‫خالء‬
.
‫دهد‬‫می‬ ‫انجام‬ ‫را‬ ‫اساسی‬ ‫عمل‬ ‫سه‬ ‫جرمی‬ ‫طیفسنج‬ ،‫ساده‬ ‫بیان‬ ‫به‬
:
•
‫یونی‬ ‫منبع‬
:
‫مولکول‬ ‫از‬ ‫بعضی‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫بمباران‬ ‫پرانرژی‬ ‫الکترونهای‬ ‫از‬ ‫جرایاناتی‬ ‫توسط‬ ‫مولکولها‬
‫یونهای‬ ‫به‬ ‫ها‬
‫گردند‬‫می‬ ‫تبدیل‬ ‫مربوطه‬
.
•
‫ا‬
‫نالیزور‬
‫جرمی‬
:
‫سپس‬
‫شوند‬‫می‬ ‫داده‬ ‫شتاب‬ ‫الکتریکی‬ ‫میدان‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫یونها‬
.
‫شده‬ ‫داده‬ ‫شتاب‬ ‫یونهای‬
‫به‬ ‫بسته‬
‫بار‬ ‫نسبت‬
/
‫گردند‬‫می‬ ‫جدا‬ ‫الکتریکی‬ ‫یا‬ ‫مغناطیسی‬ ‫میدان‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫آنها‬ ‫جرم‬
.
•
‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬
:
‫یونهای‬
‫بار‬ ‫نسبت‬ ‫دارای‬
/
‫ا‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫دستگاه‬ ‫از‬ ‫بخشی‬ ‫توسط‬ ‫معین‬ ‫و‬ ‫مشخص‬ ‫جرم‬
‫برخورد‬ ‫ثر‬
‫گردند‬‫می‬ ‫آشکار‬ ،‫است‬ ‫آنها‬ ‫شمارش‬ ‫به‬ ‫قادر‬ ،‫آن‬ ‫به‬ ‫یونها‬
.
‫نتایج‬
‫آشکارکنند‬ ‫توسط‬ ‫خروجی‬ ‫شده‬ ‫داده‬
‫بزرگ‬ ‫ه‬
‫شوند‬‫می‬ ‫داده‬ ‫ثبات‬ ‫به‬ ‫و‬ ‫شده‬
.
•
‫ش‬ ‫آشکار‬ ‫ذرات‬ ‫تعداد‬ ‫از‬ ‫نموداری‬ ،‫است‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ‫یک‬ ‫گردد‬‫می‬ ‫حاصل‬ ‫ثبات‬ ‫از‬ ‫که‬ ‫نقشی‬ ‫یا‬ ‫عالمت‬
‫بر‬ ‫ده‬
‫بار‬ ‫نسبت‬ ‫از‬ ‫تابعی‬ ‫حسب‬
/
‫جرم‬
m/z).
)
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬
‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬
۳
‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬
(
۲
‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬
)
‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬
‫یونی‬ ‫منبع‬
‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬
‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬
‫نهایی‬ ‫نمودار‬
۱
۲
۳
Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector
Mass
spectrum
System
‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬
•
‫کلیاتی‬ ‫اما‬ ‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫جدا‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫منبع‬ ‫به‬ ‫بستگی‬ ‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬
‫گفته‬ ‫که‬ ‫دارد‬
‫شود‬ ‫می‬
:
‫ایمن‬ ‫رسوبات‬ ، ‫محلول‬ ‫درون‬ ‫های‬ ‫پروتئین‬ ، ‫شده‬ ‫رنگ‬ ‫ژل‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫های‬ ‫باند‬ ‫میتوانند‬ ‫ما‬ ‫های‬ ‫نمونه‬ ‫اوال‬
‫ی‬
‫و‬ ‫کشت‬ ‫محیط‬ ‫ترکیبات‬ ، ‫بیولوژیکی‬ ‫مایعات‬ ، ‫بافتی‬ ‫نمونه‬ ، ‫شناسی‬
...
‫باشند‬
‫مح‬ ‫یا‬ ‫ماتریکس‬ ‫در‬ ‫است‬ ‫قرار‬ ‫اگر‬ ‫و‬ ‫باشد‬ ‫داشته‬ ‫را‬ ‫تخلیص‬ ‫حداکثر‬ ‫ما‬ ‫ی‬ ‫نمونه‬ ‫باید‬ ‫کلی‬ ‫طور‬ ‫به‬
‫شود‬ ‫حل‬ ‫لولی‬
‫شود‬ ‫حل‬ ‫آن‬ ‫در‬ ‫یا‬ ‫ندهد‬ ‫واکنش‬ ‫آن‬ ‫با‬، ‫شود‬ ‫ترکیب‬ ‫گازی‬ ‫با‬ ‫یا‬
‫دن‬ ‫موارد‬ ‫بیشتر‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫آلودگی‬ ‫پاکسازی‬ ‫عامل‬ ‫دومین‬ ‫میباشد‬ ‫نمونه‬ ‫فیزیکی‬ ‫حالت‬ ‫عامل‬ ‫مهمترین‬
‫کردن‬ ‫اتوره‬
‫گ‬ ‫سایر‬ ‫حذف‬ ‫ترجمه‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫تغییرات‬ ‫برسسی‬ ‫برای‬ ‫یا‬ ‫سولفیدی‬ ‫دی‬ ‫های‬ ‫پیوند‬ ‫حذف‬ ‫ها‬ ‫پروتئین‬
‫و‬ ‫ها‬ ‫روه‬
‫دترجنت‬ ‫باید‬ ‫بعد‬ ‫و‬ ‫داد‬ ‫واکنش‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫باید‬ ‫پروتئاز‬ ‫چند‬ ‫یا‬ ‫یک‬ ‫با‬ ‫بعد‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫کردن‬ ‫متیله‬
‫و‬ ‫ها‬
‫گذاشت‬ ‫نظر‬ ‫مورد‬ ‫پروب‬ ‫روی‬ ‫بررسی‬ ‫برای‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫پپتید‬ ‫و‬ ‫نمود‬ ‫حذف‬ ‫را‬ ‫مواد‬ ‫سایر‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫پروتئاز‬
‫است‬ ‫مهم‬ ‫بسیار‬ ‫نیز‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫های‬ ‫واکنش‬ ‫و‬ ‫ماتریکس‬ ‫یا‬ ‫حالل‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫مقدار‬ ‫و‬ ‫انحالل‬ ‫میزان‬
•
‫جر‬ ‫اسپکترومتری‬ ‫دستگاه‬ ‫با‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫دستگاه‬ ‫یک‬ ‫کردن‬ ‫جفت‬ ‫توسط‬ ‫اکثرا‬ ‫اکنون‬ ‫هم‬
‫بسیار‬ ‫دقت‬ ‫می‬
‫است‬ ‫رفته‬ ‫باالتر‬
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬
‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬
۳
‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬
(
۲
‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬
)
‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬
‫یونی‬ ‫منبع‬
‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬
‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬
‫جرمی‬ ‫طیف‬
۱
۲
۳
Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector
Mass
spectrum
System
‫یونیزاسیون‬ ‫مولد‬ ‫واحد‬
(
‫یونی‬ ‫منبع‬
)
‫دارد‬ ‫خال‬ ‫شرایط‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫دمای‬ ‫بخش‬ ‫این‬
‫اجزای‬
‫الکترون‬ ‫توسط‬ ‫بمباران‬ ‫با‬ ‫نمونه‬
‫فوتون‬ ،‫ها‬
‫یون‬ ،‫ها‬
‫یون‬ ‫به‬ ‫ها‬‫مولکول‬ ‫یا‬ ‫ها‬
‫می‬ ‫تبدیل‬ ‫گازی‬ ‫های‬
‫انرژی‬ ‫وسیله‬ ‫به‬ ‫یونش‬ ‫اینکه‬ ‫یا‬ ‫شود‬
‫میشود‬ ‫تامین‬ ‫الکتریکی‬ ‫یا‬ ‫گرمایی‬
.
‫مثبت‬ ‫گازی‬ ‫یونهای‬ ‫از‬ ‫جریانی‬ ‫یون‬ ‫منبع‬ ‫خروجی‬
(
‫اوقات‬ ‫اکثر‬
)
‫ج‬ ‫انرژی‬ ‫با‬ ‫منفی‬ ‫یا‬
‫است‬ ‫متفاوت‬ ‫نبشی‬
‫میشود‬ ‫داده‬ ‫شتاب‬ ‫جرمی‬ ‫گر‬ ‫تجزیه‬ ‫درون‬ ‫به‬ ‫سپس‬ ‫که‬
.
‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫آنالیت‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫برای‬ ‫روش‬ ‫چندین‬
‫دارد‬ ‫آن‬ ‫حالت‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بستگی‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫برای‬ ‫مناسب‬ ‫روش‬ ‫انتخاب‬
‫آخر‬ ‫حالت‬ ‫سه‬ ‫مایع‬ ‫و‬ ‫جامد‬ ‫حالت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫اول‬ ‫روش‬ ‫سه‬ ‫گازی‬ ‫حالت‬ ‫در‬ ‫مثال‬
‫اولویت‬
‫دارند‬
EI ‫الکترون‬ ‫تاثیر‬ ‫تحت‬ ‫یونیزاسیون‬ electron-impact ionization
CI ‫شیمیایی‬ ‫یونیزاسیون‬ Chemical Ionization
FAB ‫سریع‬ ‫اتمی‬ ‫بمباران‬ Fast Atom Bombardment
ICP ‫القایی‬ ‫شده‬‫جفت‬ ‫پالسمای‬ Inductively Coupled Plasma
ESI ‫الکترواسپری‬ ‫یونیزاسیون‬ Electro Spray Ionization
MALDI ‫ماتریکس‬ ‫کمک‬ ‫به‬ ‫لیزری‬ ‫دفع‬ ‫یونیزاسیون‬ Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization
SELDI ‫یونیزاسیون‬
‫سطح‬ ‫تقویت‬ ‫با‬ ‫لیزری‬ ‫دفع‬ Surface-Enhanced Laser Desorption Ionization
‫گازی‬ ‫حالت‬ ‫به‬ ‫باال‬ ‫دمای‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫خال‬ ‫محفظه‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫ابتدا‬
‫با‬
‫باید‬ ‫ماده‬ ‫پایداری‬ ‫به‬ ‫این‬ ‫بنابر‬ ، ‫آید‬ ‫می‬ ‫در‬ ‫باال‬ ‫فشار‬
‫توجه‬
‫کرد‬
.
‫انرژی‬ ‫با‬ ‫الکترونی‬ ‫اگر‬
70eV
‫حالت‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫به‬
‫الکت‬ ‫شدن‬ ‫برانگیخته‬ ‫به‬ ‫منجر‬ ‫انرژی‬ ‫این‬ ‫برسد‬ ‫گازی‬
‫های‬ ‫رون‬
‫ر‬ ‫الکترون‬ ‫فرد‬ ‫تعداد‬ ‫با‬ ‫مثبت‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫آنالیت‬
‫ایجاد‬ ‫ا‬
‫روش‬ ‫این‬ ‫گویند‬ ‫می‬ ‫کاتیون‬ ‫رادیکال‬ ‫آن‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫کند‬ ‫می‬
‫می‬ ‫نمونه‬ ‫فراوان‬ ‫شدن‬ ‫قطعه‬ ‫قطعه‬ ‫به‬ ‫منجر‬ ‫یونیزاسیون‬
‫شود‬
‫باشد‬ ‫می‬ ‫سخت‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫از‬ ‫بنابراین‬
.
‫نمونه‬
‫در‬ ‫پایدار‬ ، ‫فرار‬ ،‫کوچک‬ ‫مولکولی‬ ‫باید‬ ‫نظر‬ ‫مورد‬
‫دمای‬
‫حالت‬ ‫به‬ ‫و‬ ‫باال‬
‫گازی‬
‫باشد‬
Electron-Impact Ionization ( EI )
‫میشود‬ ‫جفت‬ ‫گازی‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫با‬ ‫معموال‬
GC-EI-MS
‫ح‬ ‫ترین‬ ‫پایدار‬ ، ‫پیک‬ ‫بلندترین‬ ‫معموال‬
‫الت‬
‫را‬ ‫آن‬ ‫و‬ ‫میدهد‬ ‫نشان‬ ‫را‬ ‫مولکول‬
۱۰۰
‫نظر‬ ‫در‬
‫میگیرند‬
‫آ‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫قطعات‬ ‫بقیه‬ ‫فراوانی‬ ‫و‬
‫ن‬
‫میکنند‬ ‫مقایسه‬
‫نزد‬ ‫های‬ ‫پیک‬ ‫تا‬ ‫پیک‬ ‫یک‬ ‫بین‬ ‫فاصله‬
‫یک‬
‫بدهد‬ ‫را‬ ‫شکست‬ ‫های‬ ‫الگو‬ ‫میتواند‬
•
‫با‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫پیک‬ ‫بین‬ ‫فاصله‬
ΔM
‫میدهند‬ ‫نشان‬
‫اعداد‬ ‫معموال‬ ‫آلی‬ ‫ترکیبات‬ ‫مورد‬ ‫در‬ ‫که‬
‫ب‬ ‫شده‬ ‫جدا‬ ‫ترکیب‬ ‫دهنده‬ ‫نشان‬ ‫میتواند‬
‫اشد‬
•
‫شکست‬ ‫های‬ ‫الگو‬
Chemical Ionization ( CI )
‫روش‬ ‫که‬ ‫جایی‬ ‫آن‬ ‫از‬
EI
‫م‬ ‫اصلی‬ ‫مولکول‬ ‫یون‬ ‫از‬ ‫اثری‬ ‫و‬ ، ‫میشد‬ ‫نمونه‬ ‫شدید‬ ‫شدن‬ ‫قطعه‬ ‫قطعه‬ ‫به‬ ‫منجر‬ ‫که‬ ‫بود‬ ‫روشی‬
‫شاهده‬
‫نی‬ ‫نمونه‬ ‫گازی‬ ‫فرم‬ ‫به‬ ‫همچنان‬ ‫اما‬ ‫میشود‬ ‫محسوب‬ ‫نرم‬ ‫های‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫جزو‬ ‫که‬ ‫شد‬ ‫آن‬ ‫جایگزین‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫شد‬ ‫نمی‬
‫دارد‬ ‫از‬
‫الکتر‬ ‫جفت‬ ‫گذاشتن‬ ‫اختیار‬ ‫در‬ ‫با‬ ‫آنالیت‬ ‫و‬ ‫داده‬ ‫رخ‬ ‫گازی‬ ‫فاز‬ ‫در‬ ‫برونستد‬ ‫باز‬ ‫و‬ ‫اسید‬ ‫واکنش‬ ‫یک‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬
‫به‬ ‫خود‬ ‫ون‬
‫شناساگر‬ ‫گاز‬ ‫الکتروفیل‬ ‫قسمت‬
(
‫گازی‬ ‫حالت‬ ‫در‬ ‫برونستد‬ ‫اسید‬
)
‫میگردد‬ ‫ترکیب‬ ‫داتیو‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫با‬
.
‫کرد‬ ‫ایجاد‬ ‫را‬ ‫شناساگر‬ ‫گاز‬ ‫باید‬ ‫ابتدا‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬
‫مثال‬
:
‫الکترون‬ ‫تاثیر‬ ‫تحت‬ ‫را‬ ‫متان‬
(EI)
‫برانگیخته‬ ‫حالت‬ ‫به‬ ‫تا‬ ‫داده‬ ‫قرار‬
‫گاز‬ ‫تا‬ ‫کرده‬ ‫ترکیب‬ ‫اولیه‬ ‫متان‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫سپس‬ ‫درآمده‬
CH5
+
‫یا‬ ‫معرف‬ ‫گاز‬ ‫عنوان‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫گاز‬ ‫این‬ ‫کنیم‬ ‫ایجاد‬ ‫را‬
Reagent Gase
‫میشناسیم‬
.
‫ایزوبو‬ ‫متان‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫ترین‬ ‫رایج‬ ‫اما‬ ‫دارند‬ ‫را‬ ‫خود‬ ‫خاص‬ ‫کارایی‬ ‫کدام‬ ‫هر‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫شناساگر‬ ‫های‬ ‫گاز‬ ‫از‬ ‫مختلفی‬ ‫انواع‬
‫و‬ ‫تان‬
‫باشند‬ ‫می‬ ‫آمونیاک‬
.
‫دارد‬ ‫بر‬ ‫در‬ ‫را‬ ‫آنالیت‬ ‫کمتر‬ ‫شکنندگی‬ ‫امونیاک‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫ها‬ ‫مثال‬ ‫همین‬ ‫در‬ ‫مثال‬
Chemical Ionization ( CI )
Chemical Ionization ( CI )
‫برخالف‬ ‫نمونه‬
EI
‫میتواند‬
‫همچنا‬ ‫اما‬ ‫باشد‬ ‫بزرگ‬ ‫مولکولی‬
‫ن‬
‫و‬ ‫باال‬ ‫دمای‬ ‫در‬ ‫پایدار‬ ‫فرار‬ ‫باید‬
‫به‬
‫باشد‬ ‫گازی‬ ‫حالت‬
‫میشود‬ ‫جفت‬ ‫گازی‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫با‬ ‫معموال‬
GC-CI-MS
Fast Atom Bombardment ( FAB )
‫میشو‬ ‫استفاده‬ ‫ارگون‬ ‫یا‬ ‫زنون‬ ‫از‬ ‫معموال‬ ‫باال‬ ‫جنبشی‬ ‫انرژی‬ ‫دارای‬ ‫اما‬ ‫خنثی‬ ‫نجیب‬ ‫گاز‬ ‫با‬ ‫اتمی‬ ‫بمباران‬
‫د‬
‫گلیسرول‬ ‫مثل‬ ، ‫شود‬ ‫حل‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫مایع‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫باید‬ ‫نمونه‬ ‫ابتدا‬
۱
‫میگذاریم‬ ‫پروب‬ ‫روی‬ ‫الندا‬
‫متوسط‬ ‫تا‬ ‫کم‬ ‫مولکولی‬ ‫وزن‬ ‫با‬ ‫دما‬ ‫به‬ ‫حساس‬ ‫و‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫قطبی‬ ‫ترکیبات‬ ‫برای‬ ‫مناسب‬
(
‫بر‬ ‫بیشتر‬
‫جامد‬ ‫اجسام‬ ‫ای‬
)
‫میشود‬ ‫محسوب‬ ‫نرم‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫از‬
‫نمونه‬ ‫مورد‬ ‫در‬ ‫نکاتی‬
:
‫اگ‬ ‫چون‬ ‫شود‬ ‫حل‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫حالل‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫باید‬ ‫نمونه‬
‫ر‬
‫نمیگی‬ ‫صورت‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫شود‬ ‫تبخیر‬ ‫حالل‬
‫اگر‬ ، ‫رد‬
‫مثل‬ ‫موایدی‬ ‫از‬ ‫باید‬ ‫نمیگیرد‬ ‫صورت‬ ‫انحالل‬
Triton-
x100
‫کرد‬ ‫استفاده‬
‫نظر‬ ‫در‬ ‫باید‬ ‫میدهد‬ ‫اگر‬ ‫یا‬ ‫ندهد‬ ‫واکنش‬ ‫آن‬ ‫با‬ ‫دوما‬
‫شود‬ ‫گرفته‬
‫واکنش‬ ‫عدم‬ ‫و‬ ‫انحالل‬ ‫بر‬ ‫عالوه‬ ‫حالت‬ ‫بهترین‬ ‫در‬
‫معرض‬ ‫در‬ ‫تا‬ ‫آمده‬ ‫حالل‬ ‫سطح‬ ‫روی‬ ‫به‬ ‫پذیری‬
‫بگیرد‬ ‫قرار‬ ‫نجیب‬ ‫گاز‬ ‫های‬ ‫اتم‬ ‫با‬ ‫برخورد‬
Fast Atom Bombardment ( FAB )
Inductively Coupled Plasma ( ICP )
•
‫در‬
ICP-MS
‫تا‬ ‫باال‬ ‫دماهای‬ ‫با‬ ‫آرگون‬ ‫پالسمای‬ ،‫یون‬ ‫تولید‬ ‫منبع‬
۸۰۰۰
‫است‬ ‫کلوین‬
.
‫کوره‬ ‫در‬ ‫پالسما‬ ،‫نخست‬
‫ب‬ ‫نتیجه‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫شود‬‫می‬ ‫مهپاشی‬ ‫پالسما‬ ‫داخل‬ ‫به‬ ‫نمونه‬ ‫سپس‬ ‫و‬ ‫تشکیل‬ ‫کوارتز‬ ‫جنس‬ ‫از‬ ‫مشعلی‬ ‫یا‬
‫دمای‬ ‫اثر‬ ‫ر‬
‫شود‬‫می‬ ‫یونیزه‬ ‫و‬ ‫تبخیر‬ ،‫پالسما‬ ‫باالی‬
..
‫کوآدروپول‬ ‫با‬ ‫معموال‬
•
‫در‬ ‫بخش‬ ‫اندکی‬ ‫به‬ ‫هایی‬‫غلظت‬ ‫تا‬ ‫نافلزها‬ ‫برخی‬ ‫و‬ ‫فلزها‬ ‫شناسایی‬ ‫و‬ ‫ارزیابی‬ ‫برای‬
۱۰۱۵
‫پالسما‬ ‫دمای‬ ‫چون‬
‫کند‬ ‫می‬ ‫یونیزه‬ ‫را‬ ‫تناوبی‬ ‫جدول‬ ‫عناصر‬ ‫تمام‬ ‫تقریبا‬
•
‫ه‬ ‫میدهد‬ ‫را‬ ‫بدن‬ ‫در‬ ‫خاص‬ ‫عنصر‬ ‫یک‬ ‫تشخیص‬ ‫درخواست‬ ‫پزشک‬ ‫که‬ ‫مواردی‬ ‫در‬ ‫بیشتر‬ ‫پزشکی‬ ‫در‬
‫مانند‬
، ‫سرم‬ ، ‫ادرار‬ ‫از‬ ‫میتواند‬ ‫نمونه‬ ‫شود‬ ‫می‬ ‫استفاده‬ ‫کبدی‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫متابولیسمی‬ ‫مشکالت‬ ‫شناسی‬ ‫سم‬
‫و‬ ‫پالسما‬
...
•
‫فلوسایتومتری‬ ‫در‬ ‫جدیدا‬
‫به‬
‫ال‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫بادی‬ ‫انتی‬ ‫لیبلینگ‬ ‫برای‬ ‫ها‬ ‫فلئوروکروم‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫جای‬
‫های‬ ‫نتانید‬
‫توسط‬ ‫باالیی‬ ‫بسیار‬ ‫دقت‬ ‫با‬ ‫تا‬ ‫میشود‬ ‫استفاده‬ ‫بادی‬ ‫آنتی‬ ‫به‬ ‫یافته‬ ‫اتصال‬
ICP-MS
‫شوند‬ ‫گیری‬ ‫اندازه‬
•
‫سال‬ ‫در‬
۲۰۰۷
‫سی‬ ‫یک‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫ها‬ ‫وپپتید‬ ‫ها‬ ‫پروتئین‬ ‫شناسایی‬ ‫برای‬ ‫جدید‬ ‫ابدائی‬ ‫روش‬ ‫یک‬
‫ستم‬
‫رو‬ ‫با‬ ‫آن‬ ‫کمیت‬ ‫تعیین‬ ‫سپس‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫النتانید‬ ‫با‬ ‫ها‬ ‫پپتید‬ ‫سیستئین‬ ‫پیوند‬ ‫میزان‬ ‫کدگذاری‬
‫ش‬
ICP-MS
‫ابدا‬
‫دقت‬ ‫با‬ ‫میتواند‬ ‫که‬ ‫گردید‬
۳
‫دهد‬ ‫انجام‬ ‫را‬ ‫شناسایی‬ ‫دیگر‬ ‫روش‬ ‫هر‬ ‫برابر‬
• Metal-Coded Affinity Tags (MeCAT)
Inductively Coupled Plasma ( ICP )
Electrospray Ionization ( ESI )
‫فرار‬ ‫حالل‬
‫میا‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫آنالیت‬ ‫حاوی‬ ‫اسید‬ ‫استیک‬ ‫یا‬ ‫اسید‬ ‫فرمیک‬ ‫مثل‬ ‫ضعیف‬ ‫اسید‬ ‫یک‬ ‫و‬ ‫استونیتریل‬ ‫یا‬ ‫متانول‬ ‫مثل‬
‫سوزن‬ ‫سر‬ ‫یک‬ ‫ن‬
‫بخاری‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫محلول‬ ‫که‬ ‫طوری‬ ‫به‬ ، ‫کرده‬ ‫عبور‬ ‫دارد‬ ‫باالیی‬ ‫الکتریکی‬ ‫پتانسیل‬ ‫که‬ ‫باردار‬
(
‫آیروسول‬
)
‫م‬ ‫قطرات‬ ‫از‬
‫باردار‬ ‫یکرونی‬
‫میشود‬ ‫پخش‬
.
‫ب‬ ‫گازی‬ ‫فاز‬ ‫داخل‬ ‫در‬ ‫میشوند‬ ‫ایجاد‬ ‫که‬ ‫بارداری‬ ‫بسیار‬ ‫ماکرومولکولی‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫بخار‬ ‫مرور‬ ‫به‬ ‫حالل‬
‫می‬ ‫اقی‬
‫میشود‬ ‫محسوب‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫نرم‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫جمله‬ ‫از‬ ‫مانند‬
‫ندارد‬ ‫خال‬ ‫به‬ ‫نیاز‬
‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫از‬ ‫معموال‬ ‫آن‬ ‫ورودی‬
LC
‫یا‬
HPLC
‫است‬
‫روش‬ ‫همراه‬ ‫به‬
MALDI
‫اند‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫باب‬ ‫در‬ ‫پزشکی‬ ‫و‬ ‫بیولوژی‬ ‫در‬ ‫کاربرد‬ ‫پر‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫جمله‬ ‫از‬
Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization ( MALDI )
‫در‬ ‫که‬ ‫جاذب‬ ‫ی‬ ‫ماده‬ ‫یک‬ ‫سپس‬، ‫کرده‬ ‫حل‬ ‫مناسب‬ ‫حالل‬ ‫کمی‬ ‫مقدار‬ ‫در‬ ‫را‬ ‫نمونه‬ ‫ابتدا‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬
‫موج‬ ‫طول‬
UV
(
‫حدود‬
۳۴۰
‫نانومتر‬
)
‫حدودی‬ ‫نسبت‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫دارد‬ ‫حداکثری‬ ‫جذب‬
۵۰۰۰
‫به‬
۱
‫استفاده‬
‫کرده‬
.
‫اند‬ ‫متفاوت‬ ‫نمونه‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بسته‬ ‫که‬ ‫اند‬ ‫آروماتیک‬ ‫های‬ ‫اسید‬ ‫غالبا‬ ‫ها‬ ‫ماتریکس‬
(
‫صف‬ ‫جدول‬
‫حه‬
۲۲
)
۱
‫ت‬ ‫حالل‬ ‫خال‬ ‫محفظه‬ ‫داخل‬ ‫بعد‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫گذاشته‬ ‫نمونه‬ ‫پلیت‬ ‫روی‬ ‫را‬ ‫نهایی‬ ‫مخلوط‬ ‫از‬ ‫الندا‬
‫بخیر‬
‫میگیرد‬ ‫بلوری‬ ‫و‬ ‫جامد‬ ‫حالت‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫پراکنده‬ ‫جاذب‬ ‫ماده‬ ‫از‬ ‫ماریکسی‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫فقط‬ ‫و‬ ‫میشود‬
‫ب‬ ‫تمایل‬ ‫عادی‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫پلیمری‬ ‫خال‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫فرابنفش‬ ‫لیزر‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬ ‫سپس‬
‫نداشت‬ ‫تبخیر‬ ‫ه‬
‫ماتریکس‬ ‫های‬ ‫مولکول‬ ‫همراه‬ ‫به‬ ‫اجرام‬ ‫از‬ ‫طیفی‬ ‫در‬ ‫انرژی‬ ‫جذب‬ ‫از‬ ‫بعد‬،
‫گردد‬ ‫می‬ ‫دفع‬ ‫یا‬ ‫تبخیر‬
‫باردار‬ ‫ذراتی‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫بعد‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫و‬
(
‫است‬ ‫ناشناخته‬ ‫ذرات‬ ‫شدن‬ ‫باردار‬ ‫مکانیسم‬
)
‫آ‬ ‫می‬ ‫در‬
‫ید‬
‫پروتئین‬ ‫ها‬ ‫اولیگومر‬ ‫ها‬ ‫پلیمر‬ ‫مثل‬ ‫دما‬ ‫به‬ ‫حساس‬ ‫و‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫ترکیباتی‬ ‫برای‬ ‫مناسب‬
‫ها‬
Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization ( MALDI )
‫های‬ ‫کاربرد‬ ‫از‬ ‫دیگر‬ ‫یکی‬
MALDI/MS
‫شناسایی‬
‫چ‬ ‫هاست‬ ‫میکروارگانیسم‬
‫ون‬
‫طیف‬ ‫میکروارگانیسم‬ ‫هر‬
‫میکن‬ ‫تولید‬ ‫را‬ ‫خود‬ ‫ویژه‬
‫د‬
‫نمونه‬ ‫کردن‬ ‫آماده‬
:
‫در‬ ، ‫باشد‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫نباید‬ ‫اولیه‬ ‫حالل‬
‫در‬ ‫مثال‬ ‫شود‬ ‫دقت‬ ‫باید‬ ‫ماتریکس‬ ‫انتخاب‬
‫باز‬ ‫ماتریکس‬ ‫از‬ ‫باید‬ ‫اسیدی‬ ‫های‬ ‫پپتید‬
‫ی‬
‫ماتریکس‬ ‫از‬ ‫بازی‬ ‫های‬ ‫پپتید‬ ‫در‬ ‫و‬
‫شود‬ ‫استفاده‬ ‫اسیدی‬
‫هم‬ ‫با‬ ‫خوب‬ ‫نمونه‬ ‫و‬ ‫ماتریکس‬ ‫اگر‬
‫و‬ ‫بلوری‬ ‫رو‬ ‫دو‬ ‫هر‬ ‫باید‬ ‫نمیشوند‬ ‫ترکیب‬
‫نمود‬ ‫ترکیب‬ ‫یکنواخت‬ ‫طور‬ ‫به‬
Surface-Enhanced Laser Desorption Ionization ( SELDI )
‫سطح‬ ‫تقویت‬ ‫با‬ ‫لیزری‬ ‫دفع‬ ‫یونیزاسیون‬
‫روش‬ ‫مشابه‬ ‫کامال‬
MALDI
‫که‬ ‫تفاوت‬ ‫این‬ ‫با‬ ‫است‬
:
‫س‬ ‫یا‬ ‫ادرار‬ ‫یا‬ ‫سرم‬ ‫مثل‬ ‫است‬ ‫دیگر‬ ‫مواد‬ ‫یا‬ ‫پروتئین‬ ‫نوع‬ ‫چند‬ ‫از‬ ‫ترکیبی‬ ‫که‬ ‫بیولوژیکی‬ ‫مایع‬ ‫یک‬ ‫اول‬ ‫مرحله‬ ‫در‬
‫لیز‬ ‫های‬ ‫لول‬
‫روی‬ ‫بر‬ ‫شده‬
۸
‫ویژگ‬ ‫که‬ ‫اند‬ ‫شده‬ ‫طراحی‬ ‫طوری‬ ‫کدام‬ ‫هر‬ ‫ها‬ ‫پلیت‬ ‫این‬ ‫که‬ ‫میشود‬ ‫ریخته‬ ‫ستون‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫مختلف‬ ‫پلیت‬
‫اتصال‬ ‫ی‬
‫خ‬ ‫های‬ ‫واحد‬ ‫زیر‬ ‫با‬ ‫پیوند‬ ‫ایجاد‬ ‫به‬ ‫تمایل‬ ‫و‬ ‫اند‬ ‫شده‬ ‫کوت‬ ‫ای‬ ‫ویژه‬ ‫شیمیایی‬ ‫ماده‬ ‫با‬ ‫یعنی‬ ‫دارند‬ ‫مجزایی‬ ‫پیوند‬ ‫و‬
‫دارند‬ ‫را‬ ‫اصی‬
‫اتصال‬ ‫های‬ ‫قسمت‬ ‫تا‬ ‫داد‬ ‫شستشو‬ ‫بار‬ ‫چند‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫میتوان‬ ‫کردن‬ ‫انکوبه‬ ‫و‬ ‫پیپتاژ‬ ‫و‬ ‫آن‬ ‫روی‬ ‫نمونه‬ ‫ریختن‬ ‫از‬ ‫بعد‬
‫آلودگی‬ ‫و‬ ‫نیافته‬
‫برا‬ ‫و‬ ‫نمود‬ ‫اضافه‬ ‫شد‬ ‫بحث‬ ‫قبل‬ ‫مبحث‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫اند‬ ‫فرابنفش‬ ‫پرتو‬ ‫جاذب‬ ‫که‬ ‫هایی‬ ‫ماترکس‬ ‫با‬ ‫بعد‬ ‫و‬ ‫شوند‬ ‫جدا‬ ‫ها‬
‫یونیزاسیون‬ ‫ی‬
‫کامپیو‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫را‬ ‫خود‬ ‫خاص‬ ‫اسپکت‬ ‫پلیت‬ ‫هشت‬ ‫هر‬ ‫شوند‬ ‫یونیزه‬ ‫و‬ ‫دفع‬ ‫لیزر‬ ‫نور‬ ‫با‬ ‫تا‬ ‫داد‬ ‫قرار‬ ‫دستگاه‬ ‫درون‬
‫تحلیل‬ ‫تر‬
‫میشود‬
‫ج‬ ‫است‬ ‫موجود‬ ‫شده‬ ‫خریداری‬ ‫بسته‬ ‫در‬ ‫مخصوصی‬ ‫های‬ ‫بافر‬ ‫از‬ ‫توان‬ ‫می‬ ‫مصرف‬ ‫بار‬ ‫هر‬ ‫از‬ ‫بعد‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫ذکر‬ ‫به‬ ‫الزم‬
‫هت‬
‫نمود‬ ‫استفاده‬ ‫شستشو‬
‫تعدا‬ ‫در‬ ‫محدودیت‬ ‫همچون‬ ‫معایبی‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫ما‬ ‫کرد‬ ‫اشاره‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫به‬ ‫نیاز‬ ‫عدم‬ ‫به‬ ‫میتوان‬ ‫آن‬ ‫های‬ ‫ویژگی‬ ‫از‬
‫استفاده‬ ‫د‬
‫دارد‬ ‫کیت‬ ‫کننده‬ ‫تولید‬ ‫شرکت‬ ‫در‬ ‫تفاوت‬ ‫علت‬ ‫به‬ ‫متفاوت‬ ‫اعداد‬ ‫و‬ ‫مجدد‬
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬
‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬
۳
‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬
(
۲
‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬
)
‫نمونه‬ ‫تهیه‬
‫یونی‬ ‫منبع‬
‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬
‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬
‫نهایی‬ ‫نمودار‬
۱
۲
۳
Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector
Mass
spectrum
System
‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬ ‫انواع‬
‫ها‬ ‫یون‬ ‫میخواهیم‬ ‫حال‬ ‫شدیم‬ ‫اشنا‬ ‫ها‬ ‫روش‬ ‫انواع‬ ‫با‬ ‫منفی‬ ‫و‬ ‫مثبت‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫ایجاد‬ ‫با‬ ‫ما‬ ‫اول‬ ‫قسمت‬ ‫در‬
‫بر‬ ‫را‬
‫کنیم‬ ‫جدا‬ ‫است‬ ‫بار‬ ‫به‬ ‫جرم‬ ‫نسبت‬ ‫همان‬ ‫که‬ ‫دسترسشان‬ ‫در‬ ‫ویژگی‬ ‫اساس‬
‫پرواز‬ ‫زمان‬ Time of flight (TOF) ‫جنبشی‬ ‫انرژی‬
‫چهار‬
‫قطبی‬ Quadrupole (Q) ‫تکانه‬
‫به‬
‫یونی‬ ‫اندازنده‬ ‫دام‬ Ion trap (IT) ‫جرم‬
‫مغناطیسی‬ ‫قطاع‬ Magnetic sector (B) ‫جرم‬
‫شوند‬ ‫می‬ ‫داده‬ ‫شتاب‬ ‫الکتریکی‬ ‫میدان‬ ‫یک‬ ‫ی‬ ‫وسیله‬ ‫به‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬
.
‫میشوند‬ ‫تفکیک‬ ‫شدن‬ ‫شناسایی‬ ‫زمان‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫و‬
‫ا‬ ‫بار‬ ‫موارد‬ ‫اکثر‬ ‫در‬ ‫دانیم‬ ‫می‬ ‫برد‬ ‫باال‬ ‫را‬ ‫کار‬ ‫رزولوشن‬ ‫میتوان‬ ‫مسیر‬ ‫طول‬ ‫افزایش‬ ‫با‬ ‫رفلکتور‬ ‫دادن‬ ‫قرار‬ ‫با‬ ‫البته‬
‫لکتریکی‬
۱
‫است‬
‫گیرد‬ ‫می‬ ‫صورت‬ ‫جرم‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫فقط‬ ‫غالبا‬ ‫تفکیک‬ ‫پس‬
E=qV V1 = V2 E1 = E2 E=1/2 Mv2 M 1/v2
Time of flight ( TOF )
MALDI-TOF MS
‫رفلکتور‬
•
‫ب‬ ‫دو‬ ‫که‬ ‫میله‬ ‫چهار‬ ‫از‬ ‫سیستم‬ ‫این‬
‫ه‬
‫ش‬ ‫تشکیل‬ ‫هستند‬ ‫جفت‬ ‫هم‬ ‫با‬ ‫دو‬
‫ده‬
•
‫امواج‬ ‫فرکانس‬ ‫در‬ ‫متغیر‬ ‫ولتاژی‬
‫و‬ ‫میشود‬ ‫ایجاد‬ ‫آن‬ ‫در‬ ‫رادیویی‬
‫الکتریکی‬ ‫یا‬ ‫مغناطیسی‬ ‫میدان‬
‫موجب‬ ‫میتواند‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫حاصل‬
‫تنظ‬ ‫با‬ ‫شود‬ ‫باردار‬ ‫ذرات‬ ‫انحراف‬
‫یم‬
‫بازه‬ ‫در‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫میتوان‬ ‫ولتاژ‬
‫مرک‬ ‫از‬ ‫تا‬ ‫کرد‬ ‫فیلتر‬ ‫خاص‬ ‫جرمی‬
‫ز‬
‫بر‬ ‫با‬ ‫مابقی‬ ‫و‬ ‫بیایند‬ ‫بیرون‬
‫به‬ ‫خورد‬
‫میشوند‬ ‫حذف‬ ‫حاشیه‬
Quadrupole ( Q )
Ion trap
‫بین‬ ‫در‬ ‫میدان‬
۳
‫و‬ ‫مرکز‬ ‫در‬ ‫حلقوی‬ ‫الکترود‬ ‫یک‬ ‫میشود‬ ‫ایجاد‬ ‫الکترود‬
۲
‫هایپربولیک‬ ‫الکترود‬
‫جریان‬ ‫وجود‬ ‫علت‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫سر‬ ‫دو‬ ‫هر‬ ‫انتهای‬ ‫در‬ ‫کالهک‬ ‫دو‬ ‫با‬ ‫پایین‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫در‬
RF
‫الکترود‬ ‫در‬
‫ب‬ ‫سمت‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫عبور‬ ‫مسئول‬ ‫الکترود‬ ‫این‬ ‫و‬ ‫افتند‬ ‫می‬ ‫دام‬ ‫به‬ ‫مدتی‬ ‫برای‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫مرکزی‬
‫و‬ ‫اال‬
‫و‬ ‫است‬ ‫پایین‬
۲
‫ی‬ ‫در‬ ‫برابر‬ ‫جرم‬ ‫با‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫خروج‬ ‫باعث‬ ‫مستقیم‬ ‫جریان‬ ‫با‬ ‫دیگر‬ ‫الکترود‬
‫ک‬
‫میشوند‬ ‫افقی‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫خط‬
.
‫هر‬ ‫های‬ ‫جریان‬ ‫ای‬ ‫رایانه‬ ‫تنظیمات‬ ‫با‬
۳
‫یون‬ ‫فقط‬ ‫میتوان‬ ‫الکترود‬
‫های‬ ‫مزیت‬ ‫از‬ ‫کرد‬ ‫هدایت‬ ‫دکتور‬ ‫یا‬ ‫دیگر‬ ‫آنالیزور‬ ‫یک‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫دستگاه‬ ‫از‬ ‫را‬ ‫خاصی‬ ‫های‬
‫این‬
‫دستگاه‬
:
‫من‬ ‫عنوان‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫کم‬ ‫غلظت‬ ‫در‬ ‫حتی‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ‫گیری‬ ‫اندازه‬
‫بع‬
‫است‬ ‫یون‬
.
‫است‬ ‫مشاهده‬ ‫قابل‬ ‫بعدی‬ ‫اسالید‬ ‫در‬ ‫آن‬ ‫تکاملی‬ ‫سیر‬
•
‫به‬ ‫شده‬ ‫هدایت‬ ‫های‬ ‫یون‬
‫مغناطیسی‬ ‫میدان‬ ‫یک‬ ‫سمت‬
‫میزان‬ ‫شوند‬ ‫می‬ ‫هدایت‬ ‫قوی‬
‫به‬ ‫باردار‬ ‫ذره‬ ‫یک‬ ‫انحنای‬
‫اندازه‬ ‫و‬ ‫بار‬ ‫و‬ ‫جرم‬
‫میدان‬
(
‫ولتاژ‬
)
‫دارد‬ ‫بستگی‬
‫که‬
‫معن‬ ‫به‬ ‫خود‬ ‫انحنا‬ ‫میزان‬ ‫این‬
‫ای‬
‫از‬ ‫خاص‬ ‫جرم‬ ‫با‬ ‫عبور‬ ‫اجازه‬
‫است‬ ‫مرحله‬ ‫این‬
Magnetic sector
Orbitrap
•
‫بین‬ ‫در‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫های‬ ‫آنالیزور‬ ‫ترین‬ ‫پرقدرت‬ ‫و‬ ‫ترین‬ ‫جدید‬ ‫از‬ ‫یکی‬
۲
‫می‬ ‫دام‬ ‫به‬ ‫الکترود‬
‫اس‬ ‫مرکزی‬ ‫الکترود‬ ‫دور‬ ‫و‬ ‫الکترود‬ ‫دو‬ ‫بین‬ ‫در‬ ‫ها‬ ‫الکترون‬ ‫گردش‬ ‫واسطه‬ ‫به‬ ‫جریانی‬ ‫تولید‬ ‫آن‬ ‫اساس‬ ‫و‬ ‫اندازد‬
‫ت‬
•
‫شود‬ ‫می‬ ‫تحلیل‬ ‫کامپیوتر‬ ‫توسط‬ ‫بعدا‬ ‫جریان‬ ‫این‬
•
‫میشوند‬ ‫خارج‬ ‫آنالیزور‬ ‫داخل‬ ‫از‬ ‫میدان‬ ‫اندازه‬ ‫تغییر‬ ‫با‬ ‫خودکار‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫ها‬ ‫الکترون‬
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬
‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬
۳
‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬
(
۲
‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬
)
‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬
‫یونی‬ ‫منبع‬
‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬
‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬
‫جرمی‬ ‫طیف‬
۱
۲
۳
Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector
Mass
spectrum
System
‫آشکار‬ ‫انواع‬
‫ساز‬
‫یونی‬
‫ا‬ ‫بنابر‬ ‫میکنند‬ ‫ضعیفی‬ ‫جریان‬ ‫ایجاد‬ ‫تنهایی‬ ‫به‬ ‫میرسند‬ ‫شناساگر‬ ‫به‬ ‫یه‬ ‫هایی‬ ‫یون‬
‫مناسب‬ ‫ین‬
‫نیستند‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫حساس‬ ‫دستگاه‬
‫ک‬ ‫تقویت‬ ‫فرم‬ ‫دو‬ ‫دارند‬ ‫تقویت‬ ‫به‬ ‫نیاز‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫جریان‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫ها‬ ‫دستگاه‬ ‫این‬ ‫در‬
‫ننده‬
‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫غالبا‬ ‫ها‬ ‫دستگاه‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫جریان‬
۱
.
‫تکثیرگر‬
‫الکترون‬
Electron multiplier
۲
.
‫فوتون‬ ‫یون‬ ‫تبدیل‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬
ion–photon conversion detector
Electron multiplier
‫میکند‬ ‫تکثیر‬ ‫الکترون‬ ‫ها‬ ‫میلیون‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫الکترون‬ ‫هر‬ ‫و‬ ‫افتد‬ ‫می‬ ‫اتفاق‬ ‫لوله‬ ‫یک‬ ‫در‬
ion–photon conversion detector (IPD)
‫آ‬ ‫ترکیبات‬ ‫آن‬ ‫روی‬ ‫که‬ ‫شده‬ ‫تشکیل‬ ‫دستگاه‬ ‫انتهای‬ ‫در‬ ‫کننده‬ ‫تبدیل‬ ‫سطح‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫شناساگر‬
‫فلوئورسنت‬ ‫لی‬
‫ش‬ ‫تقویت‬ ‫نور‬ ‫تکثیرگر‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫سپس‬ ‫نور‬ ‫این‬ ‫و‬ ‫میکند‬ ‫آزاد‬ ‫فوتون‬ ‫یک‬ ‫یون‬ ‫هر‬ ‫ازای‬ ‫به‬ ‫دارد‬ ‫قرار‬
‫و‬ ‫ده‬
‫شود‬ ‫می‬ ‫منتقل‬ ‫رایانه‬ ‫به‬ ‫اطالعات‬
‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬
‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬
۳
‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬
(
۲
‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬
)
‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬
‫یونی‬ ‫منبع‬
‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬
‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬
‫جرمی‬ ‫طیف‬
۱
۲
۳
Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector
Mass
spectrum
System
•
‫آن‬ ‫روی‬ ‫از‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫جرمی‬ ‫ویژه‬ ‫طیف‬ ‫یک‬ ‫مولکول‬ ‫هر‬
‫را‬ ‫نمونه‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫های‬ ‫مولکول‬ ‫نوع‬ ‫توان‬ ‫می‬
‫ه‬ ‫جایگاه‬ ‫در‬ ‫غالبا‬ ‫ها‬ ‫شکست‬ ‫چون‬ ‫بدهیم‬ ‫تشخیص‬
‫ای‬
‫میدهد‬ ‫رخ‬ ‫مشخص‬
•
‫تشخیص‬ ‫اتومات‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫غالبا‬ ‫دستگاه‬ ‫که‬
‫میدهد‬
•
‫ط‬ ‫میتوان‬ ‫زیر‬ ‫عنوان‬ ‫تحت‬ ‫گوگل‬ ‫سرچ‬ ‫با‬ ‫همچنین‬
‫یف‬
‫آورد‬ ‫بدست‬ ‫را‬ ‫ترکیبات‬ ‫اکثر‬
“[chemical name] NIST EI Spectra”
‫جرمی‬ ‫طیف‬
Peptide Mass Fingerprint (PMF)
‫پپت‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫تبدیل‬ ‫و‬ ‫پروتثین‬ ‫انزیمی‬ ‫هضم‬ ‫از‬ ‫بعد‬
‫استفاده‬ ‫و‬ ‫ید‬
‫غالبا‬ ‫که‬ ‫معمول‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ‫از‬
MALDI-TOF
‫به‬ ‫پپتید‬ ‫خالص‬ ‫جرم‬ ‫داشتن‬ ‫با‬ ‫تنها‬ ‫میتوان‬ ، ‫است‬
‫بانک‬
‫اطالعاتی‬
PMF
‫اطالعات‬ ‫وجود‬ ‫صورت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫شد‬ ‫متصل‬
‫آورد‬ ‫بدست‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫توالی‬ ‫آن‬ ‫در‬
‫ا‬ ‫بر‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫دسترسی‬ ‫نیز‬ ‫ژنومی‬ ‫اطالعات‬ ‫به‬ ‫بانک‬ ‫این‬
‫ساس‬
‫نی‬ ‫ترجمه‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫تغییرات‬ ‫یا‬ ‫گرفته‬ ‫صورت‬ ‫ترجمه‬
‫توالی‬ ‫ز‬
‫میدهد‬ ‫را‬ ‫پپتید‬
‫ی‬ ‫توالی‬ ‫روش‬ ‫از‬ ‫باید‬ ‫نشد‬ ‫پیدا‬ ‫نظر‬ ‫مورد‬ ‫توالی‬ ‫اگر‬
‫دنوو‬ ‫ابی‬
De NOVO
‫میش‬ ‫داده‬ ‫توضیح‬ ‫که‬ ‫کرد‬ ‫استفاده‬ ‫باید‬
‫ود‬
Tendem MS (MS/MS)
‫نی‬ ‫ما‬ ‫ترکیبات‬ ‫تر‬ ‫دقیق‬ ‫بررسی‬ ‫یا‬ ‫پروتئین‬ ‫ساختار‬ ‫یابی‬ ‫توالی‬ ‫برای‬ ‫مخصوصا‬ ‫اوقات‬ ‫گاهی‬
‫مراحل‬ ‫که‬ ‫داریم‬ ‫از‬
‫د‬ ‫را‬ ‫جرم‬ ‫آنالیزوری‬ ‫مرحله‬ ‫تا‬ ‫است‬ ‫نیاز‬ ‫کار‬ ‫این‬ ‫برای‬ ‫دهیم‬ ‫انجام‬ ‫متوالی‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬
‫مرتبه‬ ‫و‬
‫آن‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫کنیم‬ ‫تکرار‬
MS1
‫و‬
MS2
‫آنالیزور‬ ‫از‬ ‫اول‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫اگر‬ ‫مثال‬ ‫میگویند‬
TOF
‫ار‬ ‫دوم‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫و‬
‫آنالیزور‬
Quadrpole
‫آن‬ ‫به‬ ‫کنیم‬ ‫استفاده‬
Quadrpole-TOF MS
‫میگویند‬
•
‫مثال‬
:
•
TOF-TOF MS
•
Triple Quadrupole MS
•
Quadupole-TOF MS
•
‫بیشتر‬ ‫توضیح‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫کاربرد‬ ‫حال‬
Triple Quadrupole MS
‫یا‬
QqQ/MS
‫خواهیم‬ ‫متوجه‬
‫شد‬
Triple Quadrupole MS
‫میوگ‬ ‫توالی‬ ‫تعیین‬ ‫میخواهیم‬ ‫ما‬ ‫کنید‬ ‫فرض‬
‫را‬ ‫لوبین‬
‫دهیم‬ ‫انجام‬
)
‫روش‬
( De novo
‫ابتدا‬ ‫در‬
‫سپس‬ ‫و‬ ‫میکنیم‬ ‫جدا‬ ‫ژل‬ ‫روی‬ ‫از‬ ‫را‬ ‫میوگلوبین‬
‫سازی‬ ‫خطی‬ ‫مراحل‬
(
SDS
)
‫های‬ ‫پیوند‬ ‫حذف‬ ‫و‬
‫سولفیدی‬ ‫دی‬
(
‫احیاء‬
)
‫میدهیم‬ ‫انجام‬ ‫را‬
‫دترجنت‬ ‫مثل‬ ‫اضافی‬ ‫ترکیبات‬ ‫بعد‬ ‫مرحله‬ ‫در‬
‫یا‬ ‫و‬
‫ریورس‬ ‫مثل‬ ‫هایی‬ ‫روش‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫دیگر‬ ‫عوامل‬
‫کروماتوگرافی‬
C18
‫میکنیم‬ ‫حذف‬
‫پروتئاز‬ ‫تاثیر‬ ‫تحت‬ ‫را‬ ‫پروتئین‬
۱۲
‫قرار‬ ‫ساعت‬
‫ک‬ ‫میشود‬ ‫استفاده‬ ‫تریپسین‬ ‫از‬ ‫قالبا‬ ‫میدهیم‬
‫توالی‬ ‫ه‬
‫آمینواسی‬ ‫نواحی‬ ‫در‬ ‫اسیدی‬ ‫آمینو‬ ‫ده‬ ‫کوتاه‬ ‫های‬
‫د‬
‫میکند‬ ‫ایجاد‬ ‫آرژنین‬ ‫و‬ ‫الیزین‬
‫دستگاه‬ ‫یک‬ ‫نمونه‬ ‫پروب‬ ‫در‬ ‫حاصل‬ ‫مخلوط‬ ‫سپس‬
MS/MS
‫غالبا‬ ‫میدهیم‬ ‫قرار‬
ESI
‫پپتی‬ ‫مخلوط‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫اولین‬ ‫در‬
‫دی‬
‫گر‬ ‫کار‬ ‫به‬ ‫طوری‬ ‫شده‬ ‫یونیزه‬ ‫قطعات‬ ‫و‬ ‫میشود‬ ‫بندی‬ ‫طبقه‬
‫فته‬
‫خ‬ ‫اول‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫پپتید‬ ‫انواع‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ‫تنها‬ ‫که‬ ‫میشوند‬
‫ارج‬
‫از‬ ‫پپتید‬ ‫ترین‬ ‫سبک‬ ‫کنیم‬ ‫فرض‬ ‫میشود‬
۵۰
‫سپس‬ ‫موجود‬ ‫پپتید‬
‫خال‬ ‫اتاقک‬ ‫از‬ ‫منتخب‬ ‫پپتید‬ ‫باردار‬ ‫های‬ ‫مولکول‬ ‫حاوی‬ ‫نمونه‬
‫بین‬
‫میکند‬ ‫عبور‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دو‬
.
‫در‬ ، ‫تصادم‬ ‫محفظه‬ ‫این‬ ‫در‬
‫اثر‬
‫غالب‬ ‫پپتید‬ ‫محفظه‬ ‫دراین‬ ‫موجود‬ ‫گاز‬ ‫با‬ ‫انرژی‬ ‫پر‬ ‫برخورد‬
‫در‬ ‫ا‬
‫سن‬ ‫طیف‬ ‫سپس‬ ‫میشود‬ ‫شکسته‬ ‫پپتیدی‬ ‫پیوند‬ ‫قسمت‬
‫دوم‬ ‫جرمی‬ ‫ج‬
‫نسبت‬
M/Z
‫میک‬ ‫رسم‬ ‫هایی‬ ‫پیک‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫قطعات‬ ‫تمامی‬
‫ند‬
‫مورد‬ ‫پپتید‬ ‫میتوان‬ ‫متوالی‬ ‫پیک‬ ‫دو‬ ‫جرم‬ ‫تفاوت‬ ‫از‬ ‫سپس‬
‫را‬ ‫نظر‬
‫کرد‬ ‫توالی‬ ‫تععین‬
‫میک‬ ‫توال‬ ‫تعیین‬ ‫را‬ ‫پپتید‬ ‫دومین‬ ‫اتومات‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫دستگاه‬
‫پپتید‬ ‫تا‬ ‫ند‬
‫پنجاهم‬
‫پوش‬ ‫هم‬ ‫از‬ ‫و‬ ‫تکرار‬ ‫دیگر‬ ‫پروتئاز‬ ‫چند‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫فوق‬ ‫مراحل‬ ‫تمام‬
‫انی‬
‫یافت‬ ‫دست‬ ‫میوگلوبین‬ ‫اول‬ ‫ساختار‬ ‫به‬ ‫میتوان‬ ‫ها‬ ‫آن‬
‫میگی‬ ‫کمک‬ ‫اطالعات‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫بعدی‬ ‫سه‬ ‫ساختار‬ ‫برای‬ ‫بعدا‬ ‫که‬
‫رند‬
Triple Quadrupole MS
‫جرقه‬ ‫شمارنده‬
•
‫دستگاه‬ ‫این‬ ‫کاربرد‬
‫وجود‬ ‫بررسی‬
‫از‬ ‫خاصی‬ ‫طیف‬
‫باردار‬ ‫ذرات‬ ‫و‬ ‫الکترومغناطیس‬ ‫امواج‬
‫یا‬ ‫مرئی‬ ‫نور‬ ‫به‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫تبدیل‬ ‫با‬
‫و‬ ‫فرابنفش‬
‫است‬ ‫شناسایی‬ ‫برای‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫الکتریکی‬ ‫جریان‬ ‫ایجاد‬ ‫و‬ ‫نور‬ ‫این‬ ‫تقویت‬ ‫سپس‬
.
•
، ‫پروتئین‬ ‫های‬ ‫بررسی‬ ‫در‬ ‫دستگاه‬ ‫این‬ ‫های‬ ‫کاربرد‬ ‫ازجمله‬
DNA
‫اند‬ ‫شده‬ ‫گذاری‬ ‫نشانه‬ ‫رادیواکتیو‬ ‫مواد‬ ‫با‬ ‫که‬ ‫هایی‬ ‫بیومولکول‬ ‫و‬
‫ایمونواسی‬ ‫رادیو‬ ‫مثل‬
(RIA)
‫استفاد‬ ‫حساس‬ ‫فیلم‬ ‫از‬ ‫ژل‬ ‫در‬ ‫پخش‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫چون‬ ‫باشند‬ ‫محلول‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫وقتی‬ ‫میباشد‬
‫میشود‬ ‫ه‬
‫گاما‬
+
‫باردار‬ ‫ذرات‬
‫جاذب‬ ‫ماده‬
(
‫سینتیالتور‬
)
‫نور‬ ‫جرقه‬ ‫ایجاد‬
(
‫سینتیالسیون‬
)
‫ب‬ ‫جذبی‬ ‫انرژی‬ ‫از‬ ‫بخشی‬
‫صورت‬ ‫ه‬
‫میشود‬ ‫آزاد‬ ‫فرابنفش‬ ‫نزدیک‬ ‫یا‬ ‫مرئی‬ ‫نور‬ ‫از‬ ‫پالسی‬
‫نورتوسط‬ ‫دریافت‬
‫به‬ ‫پالیر‬ ‫فتومالتی‬
‫به‬ ‫یا‬ ‫مستقیم‬ ‫صورت‬
‫نوری‬ ‫فیبر‬ ‫کمک‬
‫الکتریک‬ ‫های‬ ‫پالس‬ ‫به‬ ‫جرقه‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫نوری‬ ‫ی‬ ‫ها‬ ‫پالس‬ ‫تبدیل‬
‫ی‬
‫جرقه‬ ‫شمارنده‬ ‫توسط‬
(
SCINTILLATION COUNTER
)
‫جرقه‬ ‫شمارنده‬
‫کریستالی‬ ‫سینتیالسیون‬
‫تالیوم‬ ‫درصد‬ ‫یک‬ ‫حاوی‬ ‫که‬ ‫یدید‬ ‫سدیم‬ ‫های‬ ‫کریستال‬ ‫با‬ ‫گاما‬ ‫اشعه‬ ، ‫میرود‬ ‫کار‬ ‫به‬ ‫گاما‬ ‫اشعه‬ ‫تشخیص‬ ‫برای‬
‫برخورد‬ ‫است‬
‫انرژی‬ ‫پایه‬ ‫حالت‬ ‫به‬ ‫برگشت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫رفته‬ ‫باالتر‬ ‫های‬ ‫الیه‬ ‫به‬ ‫ید‬ ‫های‬ ‫الکترون‬ ‫میشود‬ ‫جذب‬ ‫ید‬ ‫توسط‬ ‫و‬ ‫میکند‬
‫صورت‬ ‫به‬
‫امواج‬
UV
‫نزد‬ ‫یا‬ ‫مرئی‬ ‫محدوده‬ ‫در‬ ‫هایی‬ ‫فوتون‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫جذب‬ ‫تالیوم‬ ‫های‬ ‫اتم‬ ‫توسط‬ ‫که‬ ‫میشود‬ ‫منتشر‬
‫یک‬
UV
‫میش‬ ‫آشکار‬ ‫پالیر‬ ‫فتومولتی‬ ‫لوله‬ ‫یک‬ ‫توسط‬ ‫و‬ ‫کرده‬ ‫عبور‬ ‫ها‬ ‫کریستال‬ ‫درون‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫فوتون‬ ‫این‬ ‫میشود‬ ‫منتشر‬
‫وند‬
.
‫ط‬ ‫به‬ ‫تنها‬ ‫و‬ ‫کند‬ ‫مرتب‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫ارتفاع‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫پالس‬ ‫های‬ ‫سیگنال‬ ‫دارد‬ ‫وظیفه‬ ‫پالس‬ ‫ارتفاع‬ ‫آنالیزور‬ ‫یک‬
‫محدودی‬ ‫یف‬
‫دهد‬ ‫شدن‬ ‫شمارش‬ ‫اجازه‬
‫است‬ ‫موجود‬ ‫زنی‬ ‫جرقه‬ ‫تکنیک‬ ‫برای‬ ‫متد‬ ‫نوع‬ ‫دو‬
‫کریستالی‬ ‫زنی‬ ‫جرقه‬
‫و‬
‫مایع‬ ‫زنی‬ ‫جرقه‬
‫سینتیالسیون‬
‫مایع‬
‫میشد‬ ‫استفاده‬ ‫میکردند‬ ‫آزاد‬ ‫بتا‬ ‫ذرات‬ ‫که‬ ‫هایی‬ ‫رادیونوکلئوتید‬ ‫شمارش‬ ‫برای‬ ‫قبال‬
‫یا‬ ‫محلول‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫معلق‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫نمونه‬ ‫یک‬
“cocktail”
‫ماده‬ ‫یک‬ ‫و‬ ‫تلوئن‬ ‫مثل‬ ‫حالل‬ ‫یک‬ ‫شامل‬
‫مثل‬ ‫اولیه‬ ‫سینتیالتور‬
2,5-diphenyloxazole (DPO)
‫مثل‬ ‫ثانویه‬ ‫سینتیالتور‬ ‫یک‬ ‫یا‬
2,2′-p-phenylenebis (5-phenyloxazole) (POPOP)
‫میگیرد‬ ‫قرار‬
‫آ‬ ‫فوتون‬ ‫و‬ ‫میکنند‬ ‫یونیزه‬ ‫را‬ ‫اولیه‬ ‫سینتیالتور‬ ‫محلول‬ ‫اکتیو‬ ‫رادیو‬ ‫نمونه‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫بتای‬ ‫ذرات‬
‫که‬ ‫میکنند‬ ‫زاد‬
‫میکند‬ ‫منتشر‬ ‫بیشتری‬ ‫موج‬ ‫طول‬ ‫با‬ ‫و‬ ‫جذب‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫ثانویه‬ ‫سینتیالتور‬
‫زمان‬ ‫خصوص‬ ‫به‬ ‫میشود‬ ‫سبب‬ ‫را‬ ‫موثرتر‬ ‫انقال‬ ‫و‬ ‫بیشتر‬ ‫بازده‬ ‫سینتیالتور‬ ‫دو‬ ‫با‬ ‫فرآیند‬ ‫این‬
‫زیادی‬ ‫مقدار‬ ‫که‬ ‫ی‬
‫فرونشانی‬
(
quenching
)
‫دارد‬ ‫وجود‬
‫رنگی‬ ‫مواد‬ ‫یا‬ ‫نمونه‬ ‫ناخالصی‬ ‫ذرات‬ ‫با‬ ‫جذب‬ ‫برای‬ ‫سینتیالتور‬ ‫رقابت‬ ‫یعنی‬ ‫فرونشانی‬
(
‫فرونش‬
‫رنگی‬ ‫انی‬
)
‫در‬ ‫و‬
‫میشود‬ ‫سبب‬ ‫را‬ ‫خروجی‬ ‫های‬ ‫فوتون‬ ‫کاهش‬ ‫نتیجه‬
، ‫کریستال‬ ‫جرقه‬ ‫شمارش‬ ‫روش‬ ‫همان‬ ‫به‬ ‫پالیر‬ ‫مالتی‬ ‫فتو‬ ‫های‬ ‫لوله‬ ‫توسط‬ ‫نوری‬ ‫های‬ ‫فوتون‬ ‫آخر‬ ‫در‬
‫و‬ ‫تقویت‬
‫میشوند‬ ‫شناسایی‬
‫سینتیالسیون‬
‫مایع‬
‫مویینه‬ ‫الکتروفورز‬
(CE)
CAPILLARY ELECTROPHORESIS
‫لوله‬ ‫یک‬ ‫شامل‬ ‫و‬ ‫است‬ ‫جداسازی‬ ‫جهت‬ ‫روشی‬
‫بافرالکترو‬ ‫مخزن‬ ‫دو‬ ، ‫سیلیکایی‬ ‫موئینه‬
‫یک‬ ،‫لیت‬
‫سا‬ ‫آشکار‬ ‫یک‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫ولتاژ‬ ‫با‬ ‫تغذیه‬ ‫منبع‬
‫است‬ ‫ز‬
‫متص‬ ‫ها‬ ‫داده‬ ‫پردازش‬ ‫برای‬ ‫سیستم‬ ‫یک‬ ‫به‬ ‫که‬
‫ل‬
‫است‬
‫زمان‬ ‫میشود‬ ‫وارد‬ ‫مویینه‬ ‫لوله‬ ‫ورودی‬ ‫به‬ ‫نمونه‬
‫ی‬
‫ع‬ ‫مویینه‬ ‫ی‬ ‫لوله‬ ‫انتهای‬ ‫از‬ ‫ولتاژقوی‬ ‫یک‬ ‫که‬
‫بور‬
‫مولکو‬ ‫میکند‬
‫ل‬
‫جریان‬ ‫توسط‬ ‫نمونه‬ ‫های‬
‫ش‬ ‫جریان‬ ‫یک‬ ‫که‬ ‫میشوند‬ ‫جدا‬ ‫الکترواسموزی‬
‫دید‬
‫در‬ ‫منفی‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫حد‬ ‫از‬ ‫بیش‬ ‫تعداد‬ ‫از‬ ‫ناشی‬
‫است‬ ‫مویینه‬ ‫لوله‬ ‫داخلی‬ ‫سطح‬
(
‫افزایش‬ ‫با‬
PH
‫یابد‬ ‫می‬ ‫افزایش‬ ‫مقدار‬ ‫این‬
)
‫کات‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫که‬
‫د‬
‫میکنند‬ ‫حرکت‬
.
‫مویینه‬ ‫الکتروفورز‬
•
‫خارجی‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫زودتر‬ ‫نمونه‬ ‫در‬ ‫مثبت‬ ‫های‬ ‫یون‬
‫جریان‬ ‫که‬ ‫این‬ ‫علت‬ ‫به‬ ‫میرسند‬ ‫مویینه‬ ‫لوله‬
‫اند‬ ‫جهت‬ ‫هم‬ ‫یونی‬ ‫حرکات‬ ‫و‬ ‫الکترواسمزی‬
.
‫یو‬
‫ن‬
‫ام‬ ‫میروند‬ ‫خروجی‬ ‫انتهای‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫هم‬ ‫منفی‬ ‫های‬
‫ا‬
‫کمتر‬ ‫سرعت‬ ‫با‬
•
‫های‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫مثل‬ ‫ها‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫مختلف‬ ‫انواع‬
‫طیف‬ ‫الکتروشیمیایی‬ ‫رسانایی‬ ‫نوری‬
‫جرمی‬ ‫سنجی‬
‫گیر‬ ‫اندازه‬ ‫و‬ ‫تشخیص‬ ‫جهت‬ ‫رادیواکتیوی‬ ‫یا‬
‫آنها‬ ‫ی‬
‫میروند‬ ‫کار‬ ‫به‬
‫مویینه‬ ‫الکتروفورز‬
•
‫و‬ ‫ها‬ ‫التروفورز‬ ‫سایر‬ ‫بر‬ ‫الکتروفورز‬ ‫نوع‬ ‫این‬ ‫مزیت‬
HPLC
‫این‬
‫ب‬ ‫نیاز‬ ‫و‬ ‫اند‬ ‫باالتر‬ ‫تفکیک‬ ‫قدرت‬ ‫با‬ ‫و‬ ‫تر‬ ‫سریع‬ ‫که‬ ‫است‬
‫کم‬ ‫حجم‬ ‫ه‬
‫دارند‬ ‫نمونه‬
‫مخ‬ ‫که‬ ‫ای‬ ‫نمونه‬ ‫از‬ ‫نانولیتر‬ ‫چند‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬ ‫مثال‬
‫لوط‬
‫و‬ ‫باال‬ ‫بسیار‬ ‫دقت‬ ‫با‬ ‫میتوان‬ ‫است‬ ‫مولکول‬ ‫چند‬ ‫از‬ ‫ای‬ ‫پیچیده‬
‫تفکیک‬
‫پذیری‬
(
theoretical plates number
‫تئوری‬ ‫سینی‬ ‫یا‬
)
‫کرد‬ ‫جدا‬ ‫هم‬ ‫از‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫نمونه‬ ‫میلیون‬ ‫یک‬
•
‫است‬ ‫ممکن‬ ‫ترکیب‬ ‫کامل‬ ‫شدن‬ ‫جدا‬ ‫باال‬ ‫بسیار‬ ‫ولتاژ‬ ‫اعمال‬ ‫با‬
‫از‬ ‫کمتر‬
‫م‬ ‫ی‬ ‫لوله‬ ‫سطح‬ ‫باالی‬ ‫نسبت‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫گیرد‬ ‫صورت‬ ‫دقیقه‬ ‫ده‬
‫به‬ ‫ویینه‬
‫انت‬ ‫و‬ ‫میشود‬ ‫پذیر‬ ‫امکان‬ ‫شده‬ ‫برده‬ ‫بکار‬ ‫ولتاژ‬ ‫میزان‬ ‫آن‬ ‫حجم‬
‫قال‬
‫سازد‬ ‫می‬ ‫ممکن‬ ‫را‬ ‫مویینه‬ ‫لوله‬ ‫دیواره‬ ‫طریق‬ ‫از‬ ‫حرارت‬
•
‫کاربرد‬
:
‫ها‬ ‫هموگلوبین‬ ‫انواع‬ ‫و‬ ‫سرم‬ ‫های‬ ‫پروتئین‬ ‫جداسازی‬

More Related Content

Similar to Mass spectrometry

Evaluation of the Importance of Multi-objective Particle Swarm Algorithm Para...
Evaluation of the Importance of Multi-objective Particle Swarm Algorithm Para...Evaluation of the Importance of Multi-objective Particle Swarm Algorithm Para...
Evaluation of the Importance of Multi-objective Particle Swarm Algorithm Para...
Iranian Food Science and Technology Research Journal
 
Review of the optical properties of carbon and graphene quantum dots
Review of the optical properties of carbon and graphene quantum dotsReview of the optical properties of carbon and graphene quantum dots
Review of the optical properties of carbon and graphene quantum dots
mohamadamiri5
 

Similar to Mass spectrometry (20)

UV/Vis SPECTROSCOPY
UV/Vis SPECTROSCOPYUV/Vis SPECTROSCOPY
UV/Vis SPECTROSCOPY
 
Detectors & radiation
Detectors & radiationDetectors & radiation
Detectors & radiation
 
Pet
PetPet
Pet
 
Evaluation of the Importance of Multi-objective Particle Swarm Algorithm Para...
Evaluation of the Importance of Multi-objective Particle Swarm Algorithm Para...Evaluation of the Importance of Multi-objective Particle Swarm Algorithm Para...
Evaluation of the Importance of Multi-objective Particle Swarm Algorithm Para...
 
gamma camera
gamma cameragamma camera
gamma camera
 
Laser in dentistry
Laser in dentistry Laser in dentistry
Laser in dentistry
 
Gama
GamaGama
Gama
 
الگوریتم های طراحی درمان
الگوریتم های طراحی درمانالگوریتم های طراحی درمان
الگوریتم های طراحی درمان
 
Gas Chromatography
Gas ChromatographyGas Chromatography
Gas Chromatography
 
Laser in dentistry 2
Laser in dentistry 2Laser in dentistry 2
Laser in dentistry 2
 
Synthesis of nano materials (20 May 2020)
Synthesis of nano materials (20 May 2020)Synthesis of nano materials (20 May 2020)
Synthesis of nano materials (20 May 2020)
 
Review of the optical properties of carbon and graphene quantum dots
Review of the optical properties of carbon and graphene quantum dotsReview of the optical properties of carbon and graphene quantum dots
Review of the optical properties of carbon and graphene quantum dots
 
Disclinations and strain hardening in nanocrystalline materials
Disclinations and strain hardening in nanocrystalline materialsDisclinations and strain hardening in nanocrystalline materials
Disclinations and strain hardening in nanocrystalline materials
 
Radioisotps in medicine
Radioisotps in medicineRadioisotps in medicine
Radioisotps in medicine
 
Best PCR protocol
Best PCR protocolBest PCR protocol
Best PCR protocol
 
Mamography
MamographyMamography
Mamography
 
PP2 S4
PP2 S4PP2 S4
PP2 S4
 
Bioinformatic
BioinformaticBioinformatic
Bioinformatic
 
Bioimpedance
BioimpedanceBioimpedance
Bioimpedance
 
نوسانگرهای پارامتریک نوری
نوسانگرهای پارامتریک نورینوسانگرهای پارامتریک نوری
نوسانگرهای پارامتریک نوری
 

Mass spectrometry

  • 1. ‫لی‬‫ا‬‫تع‬‫باسمه‬ ‫آزمایشگاهی‬ ‫های‬ ‫دستگاه‬ ‫کار‬ ‫اصول‬ ‫بذری‬ ‫فرزاد‬ ‫محمد‬ ‫نیا‬ ‫حسن‬ ‫دکتر‬ ‫از‬ ‫تشکر‬ ‫با‬ ‫زمستان‬ ۹۹
  • 2. ‫مطالب‬ ‫فهرست‬ .1 ‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫کاربرد‬ .2 ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اصول‬ .3 ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬ .4 ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫انواع‬ .5 ‫جرقه‬ ‫شمارنده‬ .6 ‫مویینه‬ ‫الکتروفورز‬
  • 4. ‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫کاربرد‬ ‫زیستی‬ ‫حوزه‬ ‫در‬ ‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫اطالعات‬ ‫مولکولی‬ ‫وزن‬ ‫توالی‬ ‫تعیین‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫واحد‬ ‫زیر‬ ‫بعدی‬ ‫سه‬ ‫ساختار‬ ( ‫ای‬ ‫رایانه‬ ‫تحلیل‬ ‫تجزیه‬ ‫بعد‬ ) ‫ترکیبات‬ ‫شناسایی‬ ‫نمونه‬ ‫یک‬ ‫دهنده‬ ‫تشکیل‬ ‫مواد‬ ‫درصد‬ ‫ها‬ ‫بیومولکول‬ ‫کمی‬ ‫شمارش‬ ‫استیالسیون‬، ‫فسفریالسیون‬ ‫مثل‬ ‫ترجمه‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫تغییرات‬ ‫میزان‬
  • 5. ‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫بالینی‬ ‫کاربرد‬ • ‫مس‬ ‫روی‬ ‫پالتین‬ ‫مثل‬ ‫بافت‬ ‫در‬ ‫پایین‬ ‫غلظت‬ ‫با‬ ‫فلزات‬ ‫دقیق‬ ‫مقدار‬ (Endogenous Metal Ions) • ‫پروتئینی‬ ‫ارتباطات‬ ‫نقشه‬ ‫اوردن‬ ‫بدست‬ (protein interaction map) ‫دارویی‬ ‫اهداف‬ ‫برای‬ ‫مواردی‬ ‫در‬ • ‫ها‬ ‫میکروارگانیسم‬ ‫شناسایی‬ • ‫بیمار‬ ‫بدن‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫دارویی‬ ‫دوز‬ ‫و‬ ‫شناسی‬ ‫سم‬ ( ‫با‬ ‫نداشته‬ ‫وجود‬ ‫ایمونواسی‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫ان‬ ‫برای‬ ‫که‬ ‫مواردی‬ ‫در‬ ‫شد‬ ) • ‫شناسی‬ ‫هورمون‬ ( ‫بعد‬ ‫صفحه‬ ‫جدول‬ ) • ‫امینواسید‬ ‫و‬ ‫چرب‬، ‫آلی‬ ‫های‬ ‫اسید‬ ‫متابولیسم‬ ‫مثل‬ ‫نوزادان‬ ‫متابولیتی‬ ‫اختالالت‬ ‫غربالگری‬ ‫و‬ ‫سنجش‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫پورین‬، ‫ها‬ ‫ها‬ ‫پیرمیدین‬ • ‫و‬ .....
  • 6. ‫جای‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫آن‬ ‫های‬ ‫متابولیت‬ ‫و‬ ‫استروئیدی‬ ‫های‬ ‫هورمون‬ ‫برای‬ ‫غالبا‬ ‫ی‬ ‫دارند‬ ‫کاذب‬ ‫های‬ ‫جواب‬ ‫موارد‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫ایمونواسی‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫که‬ . Clinical Applications of Mass Spectrometry in Biomolecular Analysis Methods and Protocols Edited by Uttam Garg
  • 7. ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اصول‬ • ‫نمونه‬ ‫ابتدا‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫در‬ ( ‫آنالیت‬ ) ‫ام‬ ‫میشکند‬ ‫گازی‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫خال‬ ‫تحت‬ ‫گاهی‬ ‫ا‬ ‫الکتریکی‬ ‫میدان‬ ‫معرض‬ ‫در‬ ‫گازی‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫این‬ ‫سپس‬ ‫ندهد‬ ‫رخ‬ ‫میتواند‬ ‫شدن‬ ‫شکسته‬ ‫این‬ ‫یا‬ ‫بارشان‬ ‫به‬ ‫جرم‬ ‫نسبت‬ ‫از‬ ‫تابعی‬ ‫حرکتشان‬ ‫مسیر‬ ‫که‬ ‫میگیرند‬ ‫قرار‬ ‫مغناطیسی‬ m/z ‫است‬ ( ‫چون‬ ‫غالبا‬ ‫میشوند‬ ‫تفکیک‬ ‫جرمشان‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫میگوییم‬ ‫است‬ ‫یک‬ ‫بار‬ ) ‫ش‬ ‫شمارش‬ ‫ذرات‬ ‫این‬ ‫سپس‬ ‫از‬ ‫و‬ ‫ده‬ ‫ط‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫آورد‬ ‫بدست‬ ‫را‬ ‫مولکول‬ ‫ویژه‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ‫میتوان‬ ‫گیری‬ ‫اندازه‬ ‫قابل‬ ‫خصوصیت‬ ‫این‬ ‫جرمی‬ ‫یف‬ ‫کنیم‬ ‫شناسایی‬ ‫را‬ ‫نمونه‬ ‫تا‬ ‫مقایسه‬ ‫موجود‬ ‫اطالعاتی‬ ‫بانک‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫مجهول‬ ‫نمونه‬ • ‫تناوب‬ ‫جدول‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫عناصر‬ ‫تمام‬ ‫شناسایی‬ ‫برای‬ ‫تقریبا‬ ‫ای‬ ‫گسترده‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫کاربرد‬ ‫ی‬ ‫دارد‬ . ‫ب‬ ‫داشته‬ ‫را‬ ‫گازی‬ ‫فاز‬ ‫به‬ ‫انتقال‬ ‫و‬ ‫شدن‬ ‫یونیزه‬ ‫توانایی‬ ‫که‬ ‫مولکولی‬ ‫یا‬ ‫اتم‬ ‫هر‬ ‫اساسا‬ ‫میتواند‬ ،‫اشد‬ ‫گیرد‬ ‫قرار‬ ‫تجزیه‬ ‫مورد‬ ‫تکنیک‬ ‫این‬ ‫توسط‬ .
  • 8. ‫جرمی‬ ‫سنج‬‫طیف‬ ‫اصلی‬ ‫اجزای‬ • ،‫نمونه‬ ‫ورودی‬ ‫شامل‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬‫طیف‬ ‫اصلی‬ ‫اجزای‬ ‫یون‬ ‫منبع‬ ، ‫گیری‬‫اندازه‬ ‫سیستم‬ ‫و‬ ‫یون‬ ‫آشکارساز‬ ‫ی‬ ‫تحت‬ ‫است‬ ‫خالء‬ . ‫دهد‬‫می‬ ‫انجام‬ ‫را‬ ‫اساسی‬ ‫عمل‬ ‫سه‬ ‫جرمی‬ ‫طیفسنج‬ ،‫ساده‬ ‫بیان‬ ‫به‬ : • ‫یونی‬ ‫منبع‬ : ‫مولکول‬ ‫از‬ ‫بعضی‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫بمباران‬ ‫پرانرژی‬ ‫الکترونهای‬ ‫از‬ ‫جرایاناتی‬ ‫توسط‬ ‫مولکولها‬ ‫یونهای‬ ‫به‬ ‫ها‬ ‫گردند‬‫می‬ ‫تبدیل‬ ‫مربوطه‬ . • ‫ا‬ ‫نالیزور‬ ‫جرمی‬ : ‫سپس‬ ‫شوند‬‫می‬ ‫داده‬ ‫شتاب‬ ‫الکتریکی‬ ‫میدان‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫یونها‬ . ‫شده‬ ‫داده‬ ‫شتاب‬ ‫یونهای‬ ‫به‬ ‫بسته‬ ‫بار‬ ‫نسبت‬ / ‫گردند‬‫می‬ ‫جدا‬ ‫الکتریکی‬ ‫یا‬ ‫مغناطیسی‬ ‫میدان‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫آنها‬ ‫جرم‬ . • ‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ : ‫یونهای‬ ‫بار‬ ‫نسبت‬ ‫دارای‬ / ‫ا‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫دستگاه‬ ‫از‬ ‫بخشی‬ ‫توسط‬ ‫معین‬ ‫و‬ ‫مشخص‬ ‫جرم‬ ‫برخورد‬ ‫ثر‬ ‫گردند‬‫می‬ ‫آشکار‬ ،‫است‬ ‫آنها‬ ‫شمارش‬ ‫به‬ ‫قادر‬ ،‫آن‬ ‫به‬ ‫یونها‬ . ‫نتایج‬ ‫آشکارکنند‬ ‫توسط‬ ‫خروجی‬ ‫شده‬ ‫داده‬ ‫بزرگ‬ ‫ه‬ ‫شوند‬‫می‬ ‫داده‬ ‫ثبات‬ ‫به‬ ‫و‬ ‫شده‬ . • ‫ش‬ ‫آشکار‬ ‫ذرات‬ ‫تعداد‬ ‫از‬ ‫نموداری‬ ،‫است‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ‫یک‬ ‫گردد‬‫می‬ ‫حاصل‬ ‫ثبات‬ ‫از‬ ‫که‬ ‫نقشی‬ ‫یا‬ ‫عالمت‬ ‫بر‬ ‫ده‬ ‫بار‬ ‫نسبت‬ ‫از‬ ‫تابعی‬ ‫حسب‬ / ‫جرم‬ m/z). )
  • 9. ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬ ‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬ ۳ ‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬ ( ۲ ‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬ ) ‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬ ‫یونی‬ ‫منبع‬ ‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬ ‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫نهایی‬ ‫نمودار‬ ۱ ۲ ۳ Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector Mass spectrum System
  • 10. ‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬ • ‫کلیاتی‬ ‫اما‬ ‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫جدا‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫منبع‬ ‫به‬ ‫بستگی‬ ‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬ ‫گفته‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫شود‬ ‫می‬ : ‫ایمن‬ ‫رسوبات‬ ، ‫محلول‬ ‫درون‬ ‫های‬ ‫پروتئین‬ ، ‫شده‬ ‫رنگ‬ ‫ژل‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫های‬ ‫باند‬ ‫میتوانند‬ ‫ما‬ ‫های‬ ‫نمونه‬ ‫اوال‬ ‫ی‬ ‫و‬ ‫کشت‬ ‫محیط‬ ‫ترکیبات‬ ، ‫بیولوژیکی‬ ‫مایعات‬ ، ‫بافتی‬ ‫نمونه‬ ، ‫شناسی‬ ... ‫باشند‬ ‫مح‬ ‫یا‬ ‫ماتریکس‬ ‫در‬ ‫است‬ ‫قرار‬ ‫اگر‬ ‫و‬ ‫باشد‬ ‫داشته‬ ‫را‬ ‫تخلیص‬ ‫حداکثر‬ ‫ما‬ ‫ی‬ ‫نمونه‬ ‫باید‬ ‫کلی‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫شود‬ ‫حل‬ ‫لولی‬ ‫شود‬ ‫حل‬ ‫آن‬ ‫در‬ ‫یا‬ ‫ندهد‬ ‫واکنش‬ ‫آن‬ ‫با‬، ‫شود‬ ‫ترکیب‬ ‫گازی‬ ‫با‬ ‫یا‬ ‫دن‬ ‫موارد‬ ‫بیشتر‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫آلودگی‬ ‫پاکسازی‬ ‫عامل‬ ‫دومین‬ ‫میباشد‬ ‫نمونه‬ ‫فیزیکی‬ ‫حالت‬ ‫عامل‬ ‫مهمترین‬ ‫کردن‬ ‫اتوره‬ ‫گ‬ ‫سایر‬ ‫حذف‬ ‫ترجمه‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫تغییرات‬ ‫برسسی‬ ‫برای‬ ‫یا‬ ‫سولفیدی‬ ‫دی‬ ‫های‬ ‫پیوند‬ ‫حذف‬ ‫ها‬ ‫پروتئین‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫روه‬ ‫دترجنت‬ ‫باید‬ ‫بعد‬ ‫و‬ ‫داد‬ ‫واکنش‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫باید‬ ‫پروتئاز‬ ‫چند‬ ‫یا‬ ‫یک‬ ‫با‬ ‫بعد‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫کردن‬ ‫متیله‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫گذاشت‬ ‫نظر‬ ‫مورد‬ ‫پروب‬ ‫روی‬ ‫بررسی‬ ‫برای‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫پپتید‬ ‫و‬ ‫نمود‬ ‫حذف‬ ‫را‬ ‫مواد‬ ‫سایر‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫پروتئاز‬ ‫است‬ ‫مهم‬ ‫بسیار‬ ‫نیز‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫های‬ ‫واکنش‬ ‫و‬ ‫ماتریکس‬ ‫یا‬ ‫حالل‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫مقدار‬ ‫و‬ ‫انحالل‬ ‫میزان‬ • ‫جر‬ ‫اسپکترومتری‬ ‫دستگاه‬ ‫با‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫دستگاه‬ ‫یک‬ ‫کردن‬ ‫جفت‬ ‫توسط‬ ‫اکثرا‬ ‫اکنون‬ ‫هم‬ ‫بسیار‬ ‫دقت‬ ‫می‬ ‫است‬ ‫رفته‬ ‫باالتر‬
  • 11. ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬ ‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬ ۳ ‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬ ( ۲ ‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬ ) ‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬ ‫یونی‬ ‫منبع‬ ‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬ ‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ۱ ۲ ۳ Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector Mass spectrum System
  • 12. ‫یونیزاسیون‬ ‫مولد‬ ‫واحد‬ ( ‫یونی‬ ‫منبع‬ ) ‫دارد‬ ‫خال‬ ‫شرایط‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫دمای‬ ‫بخش‬ ‫این‬ ‫اجزای‬ ‫الکترون‬ ‫توسط‬ ‫بمباران‬ ‫با‬ ‫نمونه‬ ‫فوتون‬ ،‫ها‬ ‫یون‬ ،‫ها‬ ‫یون‬ ‫به‬ ‫ها‬‫مولکول‬ ‫یا‬ ‫ها‬ ‫می‬ ‫تبدیل‬ ‫گازی‬ ‫های‬ ‫انرژی‬ ‫وسیله‬ ‫به‬ ‫یونش‬ ‫اینکه‬ ‫یا‬ ‫شود‬ ‫میشود‬ ‫تامین‬ ‫الکتریکی‬ ‫یا‬ ‫گرمایی‬ . ‫مثبت‬ ‫گازی‬ ‫یونهای‬ ‫از‬ ‫جریانی‬ ‫یون‬ ‫منبع‬ ‫خروجی‬ ( ‫اوقات‬ ‫اکثر‬ ) ‫ج‬ ‫انرژی‬ ‫با‬ ‫منفی‬ ‫یا‬ ‫است‬ ‫متفاوت‬ ‫نبشی‬ ‫میشود‬ ‫داده‬ ‫شتاب‬ ‫جرمی‬ ‫گر‬ ‫تجزیه‬ ‫درون‬ ‫به‬ ‫سپس‬ ‫که‬ . ‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫آنالیت‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫برای‬ ‫روش‬ ‫چندین‬ ‫دارد‬ ‫آن‬ ‫حالت‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بستگی‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫برای‬ ‫مناسب‬ ‫روش‬ ‫انتخاب‬ ‫آخر‬ ‫حالت‬ ‫سه‬ ‫مایع‬ ‫و‬ ‫جامد‬ ‫حالت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫اول‬ ‫روش‬ ‫سه‬ ‫گازی‬ ‫حالت‬ ‫در‬ ‫مثال‬ ‫اولویت‬ ‫دارند‬ EI ‫الکترون‬ ‫تاثیر‬ ‫تحت‬ ‫یونیزاسیون‬ electron-impact ionization CI ‫شیمیایی‬ ‫یونیزاسیون‬ Chemical Ionization FAB ‫سریع‬ ‫اتمی‬ ‫بمباران‬ Fast Atom Bombardment ICP ‫القایی‬ ‫شده‬‫جفت‬ ‫پالسمای‬ Inductively Coupled Plasma ESI ‫الکترواسپری‬ ‫یونیزاسیون‬ Electro Spray Ionization MALDI ‫ماتریکس‬ ‫کمک‬ ‫به‬ ‫لیزری‬ ‫دفع‬ ‫یونیزاسیون‬ Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization SELDI ‫یونیزاسیون‬ ‫سطح‬ ‫تقویت‬ ‫با‬ ‫لیزری‬ ‫دفع‬ Surface-Enhanced Laser Desorption Ionization
  • 13. ‫گازی‬ ‫حالت‬ ‫به‬ ‫باال‬ ‫دمای‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫خال‬ ‫محفظه‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫ابتدا‬ ‫با‬ ‫باید‬ ‫ماده‬ ‫پایداری‬ ‫به‬ ‫این‬ ‫بنابر‬ ، ‫آید‬ ‫می‬ ‫در‬ ‫باال‬ ‫فشار‬ ‫توجه‬ ‫کرد‬ . ‫انرژی‬ ‫با‬ ‫الکترونی‬ ‫اگر‬ 70eV ‫حالت‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫به‬ ‫الکت‬ ‫شدن‬ ‫برانگیخته‬ ‫به‬ ‫منجر‬ ‫انرژی‬ ‫این‬ ‫برسد‬ ‫گازی‬ ‫های‬ ‫رون‬ ‫ر‬ ‫الکترون‬ ‫فرد‬ ‫تعداد‬ ‫با‬ ‫مثبت‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫آنالیت‬ ‫ایجاد‬ ‫ا‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫گویند‬ ‫می‬ ‫کاتیون‬ ‫رادیکال‬ ‫آن‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫کند‬ ‫می‬ ‫می‬ ‫نمونه‬ ‫فراوان‬ ‫شدن‬ ‫قطعه‬ ‫قطعه‬ ‫به‬ ‫منجر‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫شود‬ ‫باشد‬ ‫می‬ ‫سخت‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫از‬ ‫بنابراین‬ . ‫نمونه‬ ‫در‬ ‫پایدار‬ ، ‫فرار‬ ،‫کوچک‬ ‫مولکولی‬ ‫باید‬ ‫نظر‬ ‫مورد‬ ‫دمای‬ ‫حالت‬ ‫به‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫گازی‬ ‫باشد‬ Electron-Impact Ionization ( EI ) ‫میشود‬ ‫جفت‬ ‫گازی‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫با‬ ‫معموال‬ GC-EI-MS
  • 14. ‫ح‬ ‫ترین‬ ‫پایدار‬ ، ‫پیک‬ ‫بلندترین‬ ‫معموال‬ ‫الت‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫و‬ ‫میدهد‬ ‫نشان‬ ‫را‬ ‫مولکول‬ ۱۰۰ ‫نظر‬ ‫در‬ ‫میگیرند‬ ‫آ‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫قطعات‬ ‫بقیه‬ ‫فراوانی‬ ‫و‬ ‫ن‬ ‫میکنند‬ ‫مقایسه‬ ‫نزد‬ ‫های‬ ‫پیک‬ ‫تا‬ ‫پیک‬ ‫یک‬ ‫بین‬ ‫فاصله‬ ‫یک‬ ‫بدهد‬ ‫را‬ ‫شکست‬ ‫های‬ ‫الگو‬ ‫میتواند‬
  • 15. • ‫با‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫پیک‬ ‫بین‬ ‫فاصله‬ ΔM ‫میدهند‬ ‫نشان‬ ‫اعداد‬ ‫معموال‬ ‫آلی‬ ‫ترکیبات‬ ‫مورد‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫ب‬ ‫شده‬ ‫جدا‬ ‫ترکیب‬ ‫دهنده‬ ‫نشان‬ ‫میتواند‬ ‫اشد‬ • ‫شکست‬ ‫های‬ ‫الگو‬
  • 16. Chemical Ionization ( CI ) ‫روش‬ ‫که‬ ‫جایی‬ ‫آن‬ ‫از‬ EI ‫م‬ ‫اصلی‬ ‫مولکول‬ ‫یون‬ ‫از‬ ‫اثری‬ ‫و‬ ، ‫میشد‬ ‫نمونه‬ ‫شدید‬ ‫شدن‬ ‫قطعه‬ ‫قطعه‬ ‫به‬ ‫منجر‬ ‫که‬ ‫بود‬ ‫روشی‬ ‫شاهده‬ ‫نی‬ ‫نمونه‬ ‫گازی‬ ‫فرم‬ ‫به‬ ‫همچنان‬ ‫اما‬ ‫میشود‬ ‫محسوب‬ ‫نرم‬ ‫های‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫جزو‬ ‫که‬ ‫شد‬ ‫آن‬ ‫جایگزین‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫شد‬ ‫نمی‬ ‫دارد‬ ‫از‬ ‫الکتر‬ ‫جفت‬ ‫گذاشتن‬ ‫اختیار‬ ‫در‬ ‫با‬ ‫آنالیت‬ ‫و‬ ‫داده‬ ‫رخ‬ ‫گازی‬ ‫فاز‬ ‫در‬ ‫برونستد‬ ‫باز‬ ‫و‬ ‫اسید‬ ‫واکنش‬ ‫یک‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫به‬ ‫خود‬ ‫ون‬ ‫شناساگر‬ ‫گاز‬ ‫الکتروفیل‬ ‫قسمت‬ ( ‫گازی‬ ‫حالت‬ ‫در‬ ‫برونستد‬ ‫اسید‬ ) ‫میگردد‬ ‫ترکیب‬ ‫داتیو‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫با‬ . ‫کرد‬ ‫ایجاد‬ ‫را‬ ‫شناساگر‬ ‫گاز‬ ‫باید‬ ‫ابتدا‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫مثال‬ : ‫الکترون‬ ‫تاثیر‬ ‫تحت‬ ‫را‬ ‫متان‬ (EI) ‫برانگیخته‬ ‫حالت‬ ‫به‬ ‫تا‬ ‫داده‬ ‫قرار‬ ‫گاز‬ ‫تا‬ ‫کرده‬ ‫ترکیب‬ ‫اولیه‬ ‫متان‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫سپس‬ ‫درآمده‬ CH5 + ‫یا‬ ‫معرف‬ ‫گاز‬ ‫عنوان‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫گاز‬ ‫این‬ ‫کنیم‬ ‫ایجاد‬ ‫را‬ Reagent Gase ‫میشناسیم‬ . ‫ایزوبو‬ ‫متان‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫ترین‬ ‫رایج‬ ‫اما‬ ‫دارند‬ ‫را‬ ‫خود‬ ‫خاص‬ ‫کارایی‬ ‫کدام‬ ‫هر‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫شناساگر‬ ‫های‬ ‫گاز‬ ‫از‬ ‫مختلفی‬ ‫انواع‬ ‫و‬ ‫تان‬ ‫باشند‬ ‫می‬ ‫آمونیاک‬ . ‫دارد‬ ‫بر‬ ‫در‬ ‫را‬ ‫آنالیت‬ ‫کمتر‬ ‫شکنندگی‬ ‫امونیاک‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫ها‬ ‫مثال‬ ‫همین‬ ‫در‬ ‫مثال‬
  • 18. Chemical Ionization ( CI ) ‫برخالف‬ ‫نمونه‬ EI ‫میتواند‬ ‫همچنا‬ ‫اما‬ ‫باشد‬ ‫بزرگ‬ ‫مولکولی‬ ‫ن‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫دمای‬ ‫در‬ ‫پایدار‬ ‫فرار‬ ‫باید‬ ‫به‬ ‫باشد‬ ‫گازی‬ ‫حالت‬ ‫میشود‬ ‫جفت‬ ‫گازی‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫با‬ ‫معموال‬ GC-CI-MS
  • 19. Fast Atom Bombardment ( FAB ) ‫میشو‬ ‫استفاده‬ ‫ارگون‬ ‫یا‬ ‫زنون‬ ‫از‬ ‫معموال‬ ‫باال‬ ‫جنبشی‬ ‫انرژی‬ ‫دارای‬ ‫اما‬ ‫خنثی‬ ‫نجیب‬ ‫گاز‬ ‫با‬ ‫اتمی‬ ‫بمباران‬ ‫د‬ ‫گلیسرول‬ ‫مثل‬ ، ‫شود‬ ‫حل‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫مایع‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫باید‬ ‫نمونه‬ ‫ابتدا‬ ۱ ‫میگذاریم‬ ‫پروب‬ ‫روی‬ ‫الندا‬ ‫متوسط‬ ‫تا‬ ‫کم‬ ‫مولکولی‬ ‫وزن‬ ‫با‬ ‫دما‬ ‫به‬ ‫حساس‬ ‫و‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫قطبی‬ ‫ترکیبات‬ ‫برای‬ ‫مناسب‬ ( ‫بر‬ ‫بیشتر‬ ‫جامد‬ ‫اجسام‬ ‫ای‬ ) ‫میشود‬ ‫محسوب‬ ‫نرم‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫از‬
  • 20. ‫نمونه‬ ‫مورد‬ ‫در‬ ‫نکاتی‬ : ‫اگ‬ ‫چون‬ ‫شود‬ ‫حل‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫حالل‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫باید‬ ‫نمونه‬ ‫ر‬ ‫نمیگی‬ ‫صورت‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫شود‬ ‫تبخیر‬ ‫حالل‬ ‫اگر‬ ، ‫رد‬ ‫مثل‬ ‫موایدی‬ ‫از‬ ‫باید‬ ‫نمیگیرد‬ ‫صورت‬ ‫انحالل‬ Triton- x100 ‫کرد‬ ‫استفاده‬ ‫نظر‬ ‫در‬ ‫باید‬ ‫میدهد‬ ‫اگر‬ ‫یا‬ ‫ندهد‬ ‫واکنش‬ ‫آن‬ ‫با‬ ‫دوما‬ ‫شود‬ ‫گرفته‬ ‫واکنش‬ ‫عدم‬ ‫و‬ ‫انحالل‬ ‫بر‬ ‫عالوه‬ ‫حالت‬ ‫بهترین‬ ‫در‬ ‫معرض‬ ‫در‬ ‫تا‬ ‫آمده‬ ‫حالل‬ ‫سطح‬ ‫روی‬ ‫به‬ ‫پذیری‬ ‫بگیرد‬ ‫قرار‬ ‫نجیب‬ ‫گاز‬ ‫های‬ ‫اتم‬ ‫با‬ ‫برخورد‬ Fast Atom Bombardment ( FAB )
  • 21. Inductively Coupled Plasma ( ICP ) • ‫در‬ ICP-MS ‫تا‬ ‫باال‬ ‫دماهای‬ ‫با‬ ‫آرگون‬ ‫پالسمای‬ ،‫یون‬ ‫تولید‬ ‫منبع‬ ۸۰۰۰ ‫است‬ ‫کلوین‬ . ‫کوره‬ ‫در‬ ‫پالسما‬ ،‫نخست‬ ‫ب‬ ‫نتیجه‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫شود‬‫می‬ ‫مهپاشی‬ ‫پالسما‬ ‫داخل‬ ‫به‬ ‫نمونه‬ ‫سپس‬ ‫و‬ ‫تشکیل‬ ‫کوارتز‬ ‫جنس‬ ‫از‬ ‫مشعلی‬ ‫یا‬ ‫دمای‬ ‫اثر‬ ‫ر‬ ‫شود‬‫می‬ ‫یونیزه‬ ‫و‬ ‫تبخیر‬ ،‫پالسما‬ ‫باالی‬ .. ‫کوآدروپول‬ ‫با‬ ‫معموال‬
  • 22. • ‫در‬ ‫بخش‬ ‫اندکی‬ ‫به‬ ‫هایی‬‫غلظت‬ ‫تا‬ ‫نافلزها‬ ‫برخی‬ ‫و‬ ‫فلزها‬ ‫شناسایی‬ ‫و‬ ‫ارزیابی‬ ‫برای‬ ۱۰۱۵ ‫پالسما‬ ‫دمای‬ ‫چون‬ ‫کند‬ ‫می‬ ‫یونیزه‬ ‫را‬ ‫تناوبی‬ ‫جدول‬ ‫عناصر‬ ‫تمام‬ ‫تقریبا‬ • ‫ه‬ ‫میدهد‬ ‫را‬ ‫بدن‬ ‫در‬ ‫خاص‬ ‫عنصر‬ ‫یک‬ ‫تشخیص‬ ‫درخواست‬ ‫پزشک‬ ‫که‬ ‫مواردی‬ ‫در‬ ‫بیشتر‬ ‫پزشکی‬ ‫در‬ ‫مانند‬ ، ‫سرم‬ ، ‫ادرار‬ ‫از‬ ‫میتواند‬ ‫نمونه‬ ‫شود‬ ‫می‬ ‫استفاده‬ ‫کبدی‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫متابولیسمی‬ ‫مشکالت‬ ‫شناسی‬ ‫سم‬ ‫و‬ ‫پالسما‬ ... • ‫فلوسایتومتری‬ ‫در‬ ‫جدیدا‬ ‫به‬ ‫ال‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫بادی‬ ‫انتی‬ ‫لیبلینگ‬ ‫برای‬ ‫ها‬ ‫فلئوروکروم‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫جای‬ ‫های‬ ‫نتانید‬ ‫توسط‬ ‫باالیی‬ ‫بسیار‬ ‫دقت‬ ‫با‬ ‫تا‬ ‫میشود‬ ‫استفاده‬ ‫بادی‬ ‫آنتی‬ ‫به‬ ‫یافته‬ ‫اتصال‬ ICP-MS ‫شوند‬ ‫گیری‬ ‫اندازه‬ • ‫سال‬ ‫در‬ ۲۰۰۷ ‫سی‬ ‫یک‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫ها‬ ‫وپپتید‬ ‫ها‬ ‫پروتئین‬ ‫شناسایی‬ ‫برای‬ ‫جدید‬ ‫ابدائی‬ ‫روش‬ ‫یک‬ ‫ستم‬ ‫رو‬ ‫با‬ ‫آن‬ ‫کمیت‬ ‫تعیین‬ ‫سپس‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫النتانید‬ ‫با‬ ‫ها‬ ‫پپتید‬ ‫سیستئین‬ ‫پیوند‬ ‫میزان‬ ‫کدگذاری‬ ‫ش‬ ICP-MS ‫ابدا‬ ‫دقت‬ ‫با‬ ‫میتواند‬ ‫که‬ ‫گردید‬ ۳ ‫دهد‬ ‫انجام‬ ‫را‬ ‫شناسایی‬ ‫دیگر‬ ‫روش‬ ‫هر‬ ‫برابر‬ • Metal-Coded Affinity Tags (MeCAT) Inductively Coupled Plasma ( ICP )
  • 23. Electrospray Ionization ( ESI ) ‫فرار‬ ‫حالل‬ ‫میا‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫آنالیت‬ ‫حاوی‬ ‫اسید‬ ‫استیک‬ ‫یا‬ ‫اسید‬ ‫فرمیک‬ ‫مثل‬ ‫ضعیف‬ ‫اسید‬ ‫یک‬ ‫و‬ ‫استونیتریل‬ ‫یا‬ ‫متانول‬ ‫مثل‬ ‫سوزن‬ ‫سر‬ ‫یک‬ ‫ن‬ ‫بخاری‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫محلول‬ ‫که‬ ‫طوری‬ ‫به‬ ، ‫کرده‬ ‫عبور‬ ‫دارد‬ ‫باالیی‬ ‫الکتریکی‬ ‫پتانسیل‬ ‫که‬ ‫باردار‬ ( ‫آیروسول‬ ) ‫م‬ ‫قطرات‬ ‫از‬ ‫باردار‬ ‫یکرونی‬ ‫میشود‬ ‫پخش‬ . ‫ب‬ ‫گازی‬ ‫فاز‬ ‫داخل‬ ‫در‬ ‫میشوند‬ ‫ایجاد‬ ‫که‬ ‫بارداری‬ ‫بسیار‬ ‫ماکرومولکولی‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫بخار‬ ‫مرور‬ ‫به‬ ‫حالل‬ ‫می‬ ‫اقی‬ ‫میشود‬ ‫محسوب‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫نرم‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫جمله‬ ‫از‬ ‫مانند‬ ‫ندارد‬ ‫خال‬ ‫به‬ ‫نیاز‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫از‬ ‫معموال‬ ‫آن‬ ‫ورودی‬ LC ‫یا‬ HPLC ‫است‬ ‫روش‬ ‫همراه‬ ‫به‬ MALDI ‫اند‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫باب‬ ‫در‬ ‫پزشکی‬ ‫و‬ ‫بیولوژی‬ ‫در‬ ‫کاربرد‬ ‫پر‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫جمله‬ ‫از‬
  • 24. Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization ( MALDI ) ‫در‬ ‫که‬ ‫جاذب‬ ‫ی‬ ‫ماده‬ ‫یک‬ ‫سپس‬، ‫کرده‬ ‫حل‬ ‫مناسب‬ ‫حالل‬ ‫کمی‬ ‫مقدار‬ ‫در‬ ‫را‬ ‫نمونه‬ ‫ابتدا‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫موج‬ ‫طول‬ UV ( ‫حدود‬ ۳۴۰ ‫نانومتر‬ ) ‫حدودی‬ ‫نسبت‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫دارد‬ ‫حداکثری‬ ‫جذب‬ ۵۰۰۰ ‫به‬ ۱ ‫استفاده‬ ‫کرده‬ . ‫اند‬ ‫متفاوت‬ ‫نمونه‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بسته‬ ‫که‬ ‫اند‬ ‫آروماتیک‬ ‫های‬ ‫اسید‬ ‫غالبا‬ ‫ها‬ ‫ماتریکس‬ ( ‫صف‬ ‫جدول‬ ‫حه‬ ۲۲ ) ۱ ‫ت‬ ‫حالل‬ ‫خال‬ ‫محفظه‬ ‫داخل‬ ‫بعد‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫گذاشته‬ ‫نمونه‬ ‫پلیت‬ ‫روی‬ ‫را‬ ‫نهایی‬ ‫مخلوط‬ ‫از‬ ‫الندا‬ ‫بخیر‬ ‫میگیرد‬ ‫بلوری‬ ‫و‬ ‫جامد‬ ‫حالت‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫پراکنده‬ ‫جاذب‬ ‫ماده‬ ‫از‬ ‫ماریکسی‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫فقط‬ ‫و‬ ‫میشود‬ ‫ب‬ ‫تمایل‬ ‫عادی‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫پلیمری‬ ‫خال‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫فرابنفش‬ ‫لیزر‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬ ‫سپس‬ ‫نداشت‬ ‫تبخیر‬ ‫ه‬ ‫ماتریکس‬ ‫های‬ ‫مولکول‬ ‫همراه‬ ‫به‬ ‫اجرام‬ ‫از‬ ‫طیفی‬ ‫در‬ ‫انرژی‬ ‫جذب‬ ‫از‬ ‫بعد‬، ‫گردد‬ ‫می‬ ‫دفع‬ ‫یا‬ ‫تبخیر‬ ‫باردار‬ ‫ذراتی‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫بعد‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫و‬ ( ‫است‬ ‫ناشناخته‬ ‫ذرات‬ ‫شدن‬ ‫باردار‬ ‫مکانیسم‬ ) ‫آ‬ ‫می‬ ‫در‬ ‫ید‬ ‫پروتئین‬ ‫ها‬ ‫اولیگومر‬ ‫ها‬ ‫پلیمر‬ ‫مثل‬ ‫دما‬ ‫به‬ ‫حساس‬ ‫و‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫ترکیباتی‬ ‫برای‬ ‫مناسب‬ ‫ها‬
  • 25. Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization ( MALDI ) ‫های‬ ‫کاربرد‬ ‫از‬ ‫دیگر‬ ‫یکی‬ MALDI/MS ‫شناسایی‬ ‫چ‬ ‫هاست‬ ‫میکروارگانیسم‬ ‫ون‬ ‫طیف‬ ‫میکروارگانیسم‬ ‫هر‬ ‫میکن‬ ‫تولید‬ ‫را‬ ‫خود‬ ‫ویژه‬ ‫د‬
  • 26. ‫نمونه‬ ‫کردن‬ ‫آماده‬ : ‫در‬ ، ‫باشد‬ ‫فرار‬ ‫غیر‬ ‫نباید‬ ‫اولیه‬ ‫حالل‬ ‫در‬ ‫مثال‬ ‫شود‬ ‫دقت‬ ‫باید‬ ‫ماتریکس‬ ‫انتخاب‬ ‫باز‬ ‫ماتریکس‬ ‫از‬ ‫باید‬ ‫اسیدی‬ ‫های‬ ‫پپتید‬ ‫ی‬ ‫ماتریکس‬ ‫از‬ ‫بازی‬ ‫های‬ ‫پپتید‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫شود‬ ‫استفاده‬ ‫اسیدی‬ ‫هم‬ ‫با‬ ‫خوب‬ ‫نمونه‬ ‫و‬ ‫ماتریکس‬ ‫اگر‬ ‫و‬ ‫بلوری‬ ‫رو‬ ‫دو‬ ‫هر‬ ‫باید‬ ‫نمیشوند‬ ‫ترکیب‬ ‫نمود‬ ‫ترکیب‬ ‫یکنواخت‬ ‫طور‬ ‫به‬
  • 27.
  • 28. Surface-Enhanced Laser Desorption Ionization ( SELDI ) ‫سطح‬ ‫تقویت‬ ‫با‬ ‫لیزری‬ ‫دفع‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫روش‬ ‫مشابه‬ ‫کامال‬ MALDI ‫که‬ ‫تفاوت‬ ‫این‬ ‫با‬ ‫است‬ : ‫س‬ ‫یا‬ ‫ادرار‬ ‫یا‬ ‫سرم‬ ‫مثل‬ ‫است‬ ‫دیگر‬ ‫مواد‬ ‫یا‬ ‫پروتئین‬ ‫نوع‬ ‫چند‬ ‫از‬ ‫ترکیبی‬ ‫که‬ ‫بیولوژیکی‬ ‫مایع‬ ‫یک‬ ‫اول‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫لیز‬ ‫های‬ ‫لول‬ ‫روی‬ ‫بر‬ ‫شده‬ ۸ ‫ویژگ‬ ‫که‬ ‫اند‬ ‫شده‬ ‫طراحی‬ ‫طوری‬ ‫کدام‬ ‫هر‬ ‫ها‬ ‫پلیت‬ ‫این‬ ‫که‬ ‫میشود‬ ‫ریخته‬ ‫ستون‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫مختلف‬ ‫پلیت‬ ‫اتصال‬ ‫ی‬ ‫خ‬ ‫های‬ ‫واحد‬ ‫زیر‬ ‫با‬ ‫پیوند‬ ‫ایجاد‬ ‫به‬ ‫تمایل‬ ‫و‬ ‫اند‬ ‫شده‬ ‫کوت‬ ‫ای‬ ‫ویژه‬ ‫شیمیایی‬ ‫ماده‬ ‫با‬ ‫یعنی‬ ‫دارند‬ ‫مجزایی‬ ‫پیوند‬ ‫و‬ ‫دارند‬ ‫را‬ ‫اصی‬ ‫اتصال‬ ‫های‬ ‫قسمت‬ ‫تا‬ ‫داد‬ ‫شستشو‬ ‫بار‬ ‫چند‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫میتوان‬ ‫کردن‬ ‫انکوبه‬ ‫و‬ ‫پیپتاژ‬ ‫و‬ ‫آن‬ ‫روی‬ ‫نمونه‬ ‫ریختن‬ ‫از‬ ‫بعد‬ ‫آلودگی‬ ‫و‬ ‫نیافته‬ ‫برا‬ ‫و‬ ‫نمود‬ ‫اضافه‬ ‫شد‬ ‫بحث‬ ‫قبل‬ ‫مبحث‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫اند‬ ‫فرابنفش‬ ‫پرتو‬ ‫جاذب‬ ‫که‬ ‫هایی‬ ‫ماترکس‬ ‫با‬ ‫بعد‬ ‫و‬ ‫شوند‬ ‫جدا‬ ‫ها‬ ‫یونیزاسیون‬ ‫ی‬ ‫کامپیو‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫را‬ ‫خود‬ ‫خاص‬ ‫اسپکت‬ ‫پلیت‬ ‫هشت‬ ‫هر‬ ‫شوند‬ ‫یونیزه‬ ‫و‬ ‫دفع‬ ‫لیزر‬ ‫نور‬ ‫با‬ ‫تا‬ ‫داد‬ ‫قرار‬ ‫دستگاه‬ ‫درون‬ ‫تحلیل‬ ‫تر‬ ‫میشود‬ ‫ج‬ ‫است‬ ‫موجود‬ ‫شده‬ ‫خریداری‬ ‫بسته‬ ‫در‬ ‫مخصوصی‬ ‫های‬ ‫بافر‬ ‫از‬ ‫توان‬ ‫می‬ ‫مصرف‬ ‫بار‬ ‫هر‬ ‫از‬ ‫بعد‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫ذکر‬ ‫به‬ ‫الزم‬ ‫هت‬ ‫نمود‬ ‫استفاده‬ ‫شستشو‬ ‫تعدا‬ ‫در‬ ‫محدودیت‬ ‫همچون‬ ‫معایبی‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫ما‬ ‫کرد‬ ‫اشاره‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫به‬ ‫نیاز‬ ‫عدم‬ ‫به‬ ‫میتوان‬ ‫آن‬ ‫های‬ ‫ویژگی‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫د‬ ‫دارد‬ ‫کیت‬ ‫کننده‬ ‫تولید‬ ‫شرکت‬ ‫در‬ ‫تفاوت‬ ‫علت‬ ‫به‬ ‫متفاوت‬ ‫اعداد‬ ‫و‬ ‫مجدد‬
  • 29.
  • 30.
  • 31.
  • 32. ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬ ‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬ ۳ ‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬ ( ۲ ‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬ ) ‫نمونه‬ ‫تهیه‬ ‫یونی‬ ‫منبع‬ ‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬ ‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫نهایی‬ ‫نمودار‬ ۱ ۲ ۳ Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector Mass spectrum System
  • 33. ‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬ ‫انواع‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫میخواهیم‬ ‫حال‬ ‫شدیم‬ ‫اشنا‬ ‫ها‬ ‫روش‬ ‫انواع‬ ‫با‬ ‫منفی‬ ‫و‬ ‫مثبت‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫ایجاد‬ ‫با‬ ‫ما‬ ‫اول‬ ‫قسمت‬ ‫در‬ ‫بر‬ ‫را‬ ‫کنیم‬ ‫جدا‬ ‫است‬ ‫بار‬ ‫به‬ ‫جرم‬ ‫نسبت‬ ‫همان‬ ‫که‬ ‫دسترسشان‬ ‫در‬ ‫ویژگی‬ ‫اساس‬ ‫پرواز‬ ‫زمان‬ Time of flight (TOF) ‫جنبشی‬ ‫انرژی‬ ‫چهار‬ ‫قطبی‬ Quadrupole (Q) ‫تکانه‬ ‫به‬ ‫یونی‬ ‫اندازنده‬ ‫دام‬ Ion trap (IT) ‫جرم‬ ‫مغناطیسی‬ ‫قطاع‬ Magnetic sector (B) ‫جرم‬
  • 34. ‫شوند‬ ‫می‬ ‫داده‬ ‫شتاب‬ ‫الکتریکی‬ ‫میدان‬ ‫یک‬ ‫ی‬ ‫وسیله‬ ‫به‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬ . ‫میشوند‬ ‫تفکیک‬ ‫شدن‬ ‫شناسایی‬ ‫زمان‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫و‬ ‫ا‬ ‫بار‬ ‫موارد‬ ‫اکثر‬ ‫در‬ ‫دانیم‬ ‫می‬ ‫برد‬ ‫باال‬ ‫را‬ ‫کار‬ ‫رزولوشن‬ ‫میتوان‬ ‫مسیر‬ ‫طول‬ ‫افزایش‬ ‫با‬ ‫رفلکتور‬ ‫دادن‬ ‫قرار‬ ‫با‬ ‫البته‬ ‫لکتریکی‬ ۱ ‫است‬ ‫گیرد‬ ‫می‬ ‫صورت‬ ‫جرم‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫فقط‬ ‫غالبا‬ ‫تفکیک‬ ‫پس‬ E=qV V1 = V2 E1 = E2 E=1/2 Mv2 M 1/v2 Time of flight ( TOF ) MALDI-TOF MS
  • 36. • ‫ب‬ ‫دو‬ ‫که‬ ‫میله‬ ‫چهار‬ ‫از‬ ‫سیستم‬ ‫این‬ ‫ه‬ ‫ش‬ ‫تشکیل‬ ‫هستند‬ ‫جفت‬ ‫هم‬ ‫با‬ ‫دو‬ ‫ده‬ • ‫امواج‬ ‫فرکانس‬ ‫در‬ ‫متغیر‬ ‫ولتاژی‬ ‫و‬ ‫میشود‬ ‫ایجاد‬ ‫آن‬ ‫در‬ ‫رادیویی‬ ‫الکتریکی‬ ‫یا‬ ‫مغناطیسی‬ ‫میدان‬ ‫موجب‬ ‫میتواند‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫تنظ‬ ‫با‬ ‫شود‬ ‫باردار‬ ‫ذرات‬ ‫انحراف‬ ‫یم‬ ‫بازه‬ ‫در‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫میتوان‬ ‫ولتاژ‬ ‫مرک‬ ‫از‬ ‫تا‬ ‫کرد‬ ‫فیلتر‬ ‫خاص‬ ‫جرمی‬ ‫ز‬ ‫بر‬ ‫با‬ ‫مابقی‬ ‫و‬ ‫بیایند‬ ‫بیرون‬ ‫به‬ ‫خورد‬ ‫میشوند‬ ‫حذف‬ ‫حاشیه‬ Quadrupole ( Q )
  • 37. Ion trap ‫بین‬ ‫در‬ ‫میدان‬ ۳ ‫و‬ ‫مرکز‬ ‫در‬ ‫حلقوی‬ ‫الکترود‬ ‫یک‬ ‫میشود‬ ‫ایجاد‬ ‫الکترود‬ ۲ ‫هایپربولیک‬ ‫الکترود‬ ‫جریان‬ ‫وجود‬ ‫علت‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫سر‬ ‫دو‬ ‫هر‬ ‫انتهای‬ ‫در‬ ‫کالهک‬ ‫دو‬ ‫با‬ ‫پایین‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫در‬ RF ‫الکترود‬ ‫در‬ ‫ب‬ ‫سمت‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫عبور‬ ‫مسئول‬ ‫الکترود‬ ‫این‬ ‫و‬ ‫افتند‬ ‫می‬ ‫دام‬ ‫به‬ ‫مدتی‬ ‫برای‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫مرکزی‬ ‫و‬ ‫اال‬ ‫و‬ ‫است‬ ‫پایین‬ ۲ ‫ی‬ ‫در‬ ‫برابر‬ ‫جرم‬ ‫با‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫خروج‬ ‫باعث‬ ‫مستقیم‬ ‫جریان‬ ‫با‬ ‫دیگر‬ ‫الکترود‬ ‫ک‬ ‫میشوند‬ ‫افقی‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫خط‬ . ‫هر‬ ‫های‬ ‫جریان‬ ‫ای‬ ‫رایانه‬ ‫تنظیمات‬ ‫با‬ ۳ ‫یون‬ ‫فقط‬ ‫میتوان‬ ‫الکترود‬ ‫های‬ ‫مزیت‬ ‫از‬ ‫کرد‬ ‫هدایت‬ ‫دکتور‬ ‫یا‬ ‫دیگر‬ ‫آنالیزور‬ ‫یک‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫دستگاه‬ ‫از‬ ‫را‬ ‫خاصی‬ ‫های‬ ‫این‬ ‫دستگاه‬ : ‫من‬ ‫عنوان‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫کم‬ ‫غلظت‬ ‫در‬ ‫حتی‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ‫گیری‬ ‫اندازه‬ ‫بع‬ ‫است‬ ‫یون‬ . ‫است‬ ‫مشاهده‬ ‫قابل‬ ‫بعدی‬ ‫اسالید‬ ‫در‬ ‫آن‬ ‫تکاملی‬ ‫سیر‬
  • 38.
  • 39. • ‫به‬ ‫شده‬ ‫هدایت‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫مغناطیسی‬ ‫میدان‬ ‫یک‬ ‫سمت‬ ‫میزان‬ ‫شوند‬ ‫می‬ ‫هدایت‬ ‫قوی‬ ‫به‬ ‫باردار‬ ‫ذره‬ ‫یک‬ ‫انحنای‬ ‫اندازه‬ ‫و‬ ‫بار‬ ‫و‬ ‫جرم‬ ‫میدان‬ ( ‫ولتاژ‬ ) ‫دارد‬ ‫بستگی‬ ‫که‬ ‫معن‬ ‫به‬ ‫خود‬ ‫انحنا‬ ‫میزان‬ ‫این‬ ‫ای‬ ‫از‬ ‫خاص‬ ‫جرم‬ ‫با‬ ‫عبور‬ ‫اجازه‬ ‫است‬ ‫مرحله‬ ‫این‬ Magnetic sector
  • 40. Orbitrap • ‫بین‬ ‫در‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫های‬ ‫آنالیزور‬ ‫ترین‬ ‫پرقدرت‬ ‫و‬ ‫ترین‬ ‫جدید‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ۲ ‫می‬ ‫دام‬ ‫به‬ ‫الکترود‬ ‫اس‬ ‫مرکزی‬ ‫الکترود‬ ‫دور‬ ‫و‬ ‫الکترود‬ ‫دو‬ ‫بین‬ ‫در‬ ‫ها‬ ‫الکترون‬ ‫گردش‬ ‫واسطه‬ ‫به‬ ‫جریانی‬ ‫تولید‬ ‫آن‬ ‫اساس‬ ‫و‬ ‫اندازد‬ ‫ت‬ • ‫شود‬ ‫می‬ ‫تحلیل‬ ‫کامپیوتر‬ ‫توسط‬ ‫بعدا‬ ‫جریان‬ ‫این‬ • ‫میشوند‬ ‫خارج‬ ‫آنالیزور‬ ‫داخل‬ ‫از‬ ‫میدان‬ ‫اندازه‬ ‫تغییر‬ ‫با‬ ‫خودکار‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫ها‬ ‫الکترون‬
  • 41. ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬ ‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬ ۳ ‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬ ( ۲ ‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬ ) ‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬ ‫یونی‬ ‫منبع‬ ‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬ ‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ۱ ۲ ۳ Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector Mass spectrum System
  • 42. ‫آشکار‬ ‫انواع‬ ‫ساز‬ ‫یونی‬ ‫ا‬ ‫بنابر‬ ‫میکنند‬ ‫ضعیفی‬ ‫جریان‬ ‫ایجاد‬ ‫تنهایی‬ ‫به‬ ‫میرسند‬ ‫شناساگر‬ ‫به‬ ‫یه‬ ‫هایی‬ ‫یون‬ ‫مناسب‬ ‫ین‬ ‫نیستند‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫حساس‬ ‫دستگاه‬ ‫ک‬ ‫تقویت‬ ‫فرم‬ ‫دو‬ ‫دارند‬ ‫تقویت‬ ‫به‬ ‫نیاز‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫جریان‬ ‫و‬ ‫ها‬ ‫یون‬ ‫ها‬ ‫دستگاه‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫ننده‬ ‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫غالبا‬ ‫ها‬ ‫دستگاه‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫جریان‬ ۱ . ‫تکثیرگر‬ ‫الکترون‬ Electron multiplier ۲ . ‫فوتون‬ ‫یون‬ ‫تبدیل‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ion–photon conversion detector
  • 43. Electron multiplier ‫میکند‬ ‫تکثیر‬ ‫الکترون‬ ‫ها‬ ‫میلیون‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫الکترون‬ ‫هر‬ ‫و‬ ‫افتد‬ ‫می‬ ‫اتفاق‬ ‫لوله‬ ‫یک‬ ‫در‬
  • 44. ion–photon conversion detector (IPD) ‫آ‬ ‫ترکیبات‬ ‫آن‬ ‫روی‬ ‫که‬ ‫شده‬ ‫تشکیل‬ ‫دستگاه‬ ‫انتهای‬ ‫در‬ ‫کننده‬ ‫تبدیل‬ ‫سطح‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫شناساگر‬ ‫فلوئورسنت‬ ‫لی‬ ‫ش‬ ‫تقویت‬ ‫نور‬ ‫تکثیرگر‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫سپس‬ ‫نور‬ ‫این‬ ‫و‬ ‫میکند‬ ‫آزاد‬ ‫فوتون‬ ‫یک‬ ‫یون‬ ‫هر‬ ‫ازای‬ ‫به‬ ‫دارد‬ ‫قرار‬ ‫و‬ ‫ده‬ ‫شود‬ ‫می‬ ‫منتقل‬ ‫رایانه‬ ‫به‬ ‫اطالعات‬
  • 45. ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دستگاه‬ ‫اجزا‬ ‫جرمی‬ ‫های‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫تمام‬ ۳ ‫دارند‬ ‫اساسی‬ ‫جز‬ ( ۲ ‫میشود‬ ‫بررسی‬ ‫نیز‬ ‫فرعی‬ ‫قسمت‬ ) ‫نمونه‬ ‫سازی‬ ‫آماده‬ ‫یونی‬ ‫منبع‬ ‫جرمی‬ ‫آنالیزور‬ ‫یونی‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫جرمی‬ ‫طیف‬ ۱ ۲ ۳ Sample Ion Source Mass Analyzer Ion Detector Mass spectrum System
  • 46. • ‫آن‬ ‫روی‬ ‫از‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫جرمی‬ ‫ویژه‬ ‫طیف‬ ‫یک‬ ‫مولکول‬ ‫هر‬ ‫را‬ ‫نمونه‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫های‬ ‫مولکول‬ ‫نوع‬ ‫توان‬ ‫می‬ ‫ه‬ ‫جایگاه‬ ‫در‬ ‫غالبا‬ ‫ها‬ ‫شکست‬ ‫چون‬ ‫بدهیم‬ ‫تشخیص‬ ‫ای‬ ‫میدهد‬ ‫رخ‬ ‫مشخص‬ • ‫تشخیص‬ ‫اتومات‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫غالبا‬ ‫دستگاه‬ ‫که‬ ‫میدهد‬ • ‫ط‬ ‫میتوان‬ ‫زیر‬ ‫عنوان‬ ‫تحت‬ ‫گوگل‬ ‫سرچ‬ ‫با‬ ‫همچنین‬ ‫یف‬ ‫آورد‬ ‫بدست‬ ‫را‬ ‫ترکیبات‬ ‫اکثر‬ “[chemical name] NIST EI Spectra” ‫جرمی‬ ‫طیف‬ Peptide Mass Fingerprint (PMF) ‫پپت‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫تبدیل‬ ‫و‬ ‫پروتثین‬ ‫انزیمی‬ ‫هضم‬ ‫از‬ ‫بعد‬ ‫استفاده‬ ‫و‬ ‫ید‬ ‫غالبا‬ ‫که‬ ‫معمول‬ ‫های‬ ‫روش‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ‫از‬ MALDI-TOF ‫به‬ ‫پپتید‬ ‫خالص‬ ‫جرم‬ ‫داشتن‬ ‫با‬ ‫تنها‬ ‫میتوان‬ ، ‫است‬ ‫بانک‬ ‫اطالعاتی‬ PMF ‫اطالعات‬ ‫وجود‬ ‫صورت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫شد‬ ‫متصل‬ ‫آورد‬ ‫بدست‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫توالی‬ ‫آن‬ ‫در‬ ‫ا‬ ‫بر‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫دسترسی‬ ‫نیز‬ ‫ژنومی‬ ‫اطالعات‬ ‫به‬ ‫بانک‬ ‫این‬ ‫ساس‬ ‫نی‬ ‫ترجمه‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫تغییرات‬ ‫یا‬ ‫گرفته‬ ‫صورت‬ ‫ترجمه‬ ‫توالی‬ ‫ز‬ ‫میدهد‬ ‫را‬ ‫پپتید‬ ‫ی‬ ‫توالی‬ ‫روش‬ ‫از‬ ‫باید‬ ‫نشد‬ ‫پیدا‬ ‫نظر‬ ‫مورد‬ ‫توالی‬ ‫اگر‬ ‫دنوو‬ ‫ابی‬ De NOVO ‫میش‬ ‫داده‬ ‫توضیح‬ ‫که‬ ‫کرد‬ ‫استفاده‬ ‫باید‬ ‫ود‬
  • 47. Tendem MS (MS/MS) ‫نی‬ ‫ما‬ ‫ترکیبات‬ ‫تر‬ ‫دقیق‬ ‫بررسی‬ ‫یا‬ ‫پروتئین‬ ‫ساختار‬ ‫یابی‬ ‫توالی‬ ‫برای‬ ‫مخصوصا‬ ‫اوقات‬ ‫گاهی‬ ‫مراحل‬ ‫که‬ ‫داریم‬ ‫از‬ ‫د‬ ‫را‬ ‫جرم‬ ‫آنالیزوری‬ ‫مرحله‬ ‫تا‬ ‫است‬ ‫نیاز‬ ‫کار‬ ‫این‬ ‫برای‬ ‫دهیم‬ ‫انجام‬ ‫متوالی‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫طیف‬ ‫مرتبه‬ ‫و‬ ‫آن‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫کنیم‬ ‫تکرار‬ MS1 ‫و‬ MS2 ‫آنالیزور‬ ‫از‬ ‫اول‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫اگر‬ ‫مثال‬ ‫میگویند‬ TOF ‫ار‬ ‫دوم‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫آنالیزور‬ Quadrpole ‫آن‬ ‫به‬ ‫کنیم‬ ‫استفاده‬ Quadrpole-TOF MS ‫میگویند‬ • ‫مثال‬ : • TOF-TOF MS • Triple Quadrupole MS • Quadupole-TOF MS • ‫بیشتر‬ ‫توضیح‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫کاربرد‬ ‫حال‬ Triple Quadrupole MS ‫یا‬ QqQ/MS ‫خواهیم‬ ‫متوجه‬ ‫شد‬
  • 48. Triple Quadrupole MS ‫میوگ‬ ‫توالی‬ ‫تعیین‬ ‫میخواهیم‬ ‫ما‬ ‫کنید‬ ‫فرض‬ ‫را‬ ‫لوبین‬ ‫دهیم‬ ‫انجام‬ ) ‫روش‬ ( De novo ‫ابتدا‬ ‫در‬ ‫سپس‬ ‫و‬ ‫میکنیم‬ ‫جدا‬ ‫ژل‬ ‫روی‬ ‫از‬ ‫را‬ ‫میوگلوبین‬ ‫سازی‬ ‫خطی‬ ‫مراحل‬ ( SDS ) ‫های‬ ‫پیوند‬ ‫حذف‬ ‫و‬ ‫سولفیدی‬ ‫دی‬ ( ‫احیاء‬ ) ‫میدهیم‬ ‫انجام‬ ‫را‬ ‫دترجنت‬ ‫مثل‬ ‫اضافی‬ ‫ترکیبات‬ ‫بعد‬ ‫مرحله‬ ‫در‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫ریورس‬ ‫مثل‬ ‫هایی‬ ‫روش‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫دیگر‬ ‫عوامل‬ ‫کروماتوگرافی‬ C18 ‫میکنیم‬ ‫حذف‬ ‫پروتئاز‬ ‫تاثیر‬ ‫تحت‬ ‫را‬ ‫پروتئین‬ ۱۲ ‫قرار‬ ‫ساعت‬ ‫ک‬ ‫میشود‬ ‫استفاده‬ ‫تریپسین‬ ‫از‬ ‫قالبا‬ ‫میدهیم‬ ‫توالی‬ ‫ه‬ ‫آمینواسی‬ ‫نواحی‬ ‫در‬ ‫اسیدی‬ ‫آمینو‬ ‫ده‬ ‫کوتاه‬ ‫های‬ ‫د‬ ‫میکند‬ ‫ایجاد‬ ‫آرژنین‬ ‫و‬ ‫الیزین‬
  • 49. ‫دستگاه‬ ‫یک‬ ‫نمونه‬ ‫پروب‬ ‫در‬ ‫حاصل‬ ‫مخلوط‬ ‫سپس‬ MS/MS ‫غالبا‬ ‫میدهیم‬ ‫قرار‬ ESI ‫پپتی‬ ‫مخلوط‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫اولین‬ ‫در‬ ‫دی‬ ‫گر‬ ‫کار‬ ‫به‬ ‫طوری‬ ‫شده‬ ‫یونیزه‬ ‫قطعات‬ ‫و‬ ‫میشود‬ ‫بندی‬ ‫طبقه‬ ‫فته‬ ‫خ‬ ‫اول‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫پپتید‬ ‫انواع‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ‫تنها‬ ‫که‬ ‫میشوند‬ ‫ارج‬ ‫از‬ ‫پپتید‬ ‫ترین‬ ‫سبک‬ ‫کنیم‬ ‫فرض‬ ‫میشود‬ ۵۰ ‫سپس‬ ‫موجود‬ ‫پپتید‬ ‫خال‬ ‫اتاقک‬ ‫از‬ ‫منتخب‬ ‫پپتید‬ ‫باردار‬ ‫های‬ ‫مولکول‬ ‫حاوی‬ ‫نمونه‬ ‫بین‬ ‫میکند‬ ‫عبور‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬ ‫طیف‬ ‫دو‬ . ‫در‬ ، ‫تصادم‬ ‫محفظه‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫اثر‬ ‫غالب‬ ‫پپتید‬ ‫محفظه‬ ‫دراین‬ ‫موجود‬ ‫گاز‬ ‫با‬ ‫انرژی‬ ‫پر‬ ‫برخورد‬ ‫در‬ ‫ا‬ ‫سن‬ ‫طیف‬ ‫سپس‬ ‫میشود‬ ‫شکسته‬ ‫پپتیدی‬ ‫پیوند‬ ‫قسمت‬ ‫دوم‬ ‫جرمی‬ ‫ج‬ ‫نسبت‬ M/Z ‫میک‬ ‫رسم‬ ‫هایی‬ ‫پیک‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫قطعات‬ ‫تمامی‬ ‫ند‬ ‫مورد‬ ‫پپتید‬ ‫میتوان‬ ‫متوالی‬ ‫پیک‬ ‫دو‬ ‫جرم‬ ‫تفاوت‬ ‫از‬ ‫سپس‬ ‫را‬ ‫نظر‬ ‫کرد‬ ‫توالی‬ ‫تععین‬ ‫میک‬ ‫توال‬ ‫تعیین‬ ‫را‬ ‫پپتید‬ ‫دومین‬ ‫اتومات‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫دستگاه‬ ‫پپتید‬ ‫تا‬ ‫ند‬ ‫پنجاهم‬ ‫پوش‬ ‫هم‬ ‫از‬ ‫و‬ ‫تکرار‬ ‫دیگر‬ ‫پروتئاز‬ ‫چند‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫فوق‬ ‫مراحل‬ ‫تمام‬ ‫انی‬ ‫یافت‬ ‫دست‬ ‫میوگلوبین‬ ‫اول‬ ‫ساختار‬ ‫به‬ ‫میتوان‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫میگی‬ ‫کمک‬ ‫اطالعات‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫بعدی‬ ‫سه‬ ‫ساختار‬ ‫برای‬ ‫بعدا‬ ‫که‬ ‫رند‬ Triple Quadrupole MS
  • 50. ‫جرقه‬ ‫شمارنده‬ • ‫دستگاه‬ ‫این‬ ‫کاربرد‬ ‫وجود‬ ‫بررسی‬ ‫از‬ ‫خاصی‬ ‫طیف‬ ‫باردار‬ ‫ذرات‬ ‫و‬ ‫الکترومغناطیس‬ ‫امواج‬ ‫یا‬ ‫مرئی‬ ‫نور‬ ‫به‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫تبدیل‬ ‫با‬ ‫و‬ ‫فرابنفش‬ ‫است‬ ‫شناسایی‬ ‫برای‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫الکتریکی‬ ‫جریان‬ ‫ایجاد‬ ‫و‬ ‫نور‬ ‫این‬ ‫تقویت‬ ‫سپس‬ . • ، ‫پروتئین‬ ‫های‬ ‫بررسی‬ ‫در‬ ‫دستگاه‬ ‫این‬ ‫های‬ ‫کاربرد‬ ‫ازجمله‬ DNA ‫اند‬ ‫شده‬ ‫گذاری‬ ‫نشانه‬ ‫رادیواکتیو‬ ‫مواد‬ ‫با‬ ‫که‬ ‫هایی‬ ‫بیومولکول‬ ‫و‬ ‫ایمونواسی‬ ‫رادیو‬ ‫مثل‬ (RIA) ‫استفاد‬ ‫حساس‬ ‫فیلم‬ ‫از‬ ‫ژل‬ ‫در‬ ‫پخش‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫چون‬ ‫باشند‬ ‫محلول‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫وقتی‬ ‫میباشد‬ ‫میشود‬ ‫ه‬ ‫گاما‬ + ‫باردار‬ ‫ذرات‬ ‫جاذب‬ ‫ماده‬ ( ‫سینتیالتور‬ ) ‫نور‬ ‫جرقه‬ ‫ایجاد‬ ( ‫سینتیالسیون‬ ) ‫ب‬ ‫جذبی‬ ‫انرژی‬ ‫از‬ ‫بخشی‬ ‫صورت‬ ‫ه‬ ‫میشود‬ ‫آزاد‬ ‫فرابنفش‬ ‫نزدیک‬ ‫یا‬ ‫مرئی‬ ‫نور‬ ‫از‬ ‫پالسی‬ ‫نورتوسط‬ ‫دریافت‬ ‫به‬ ‫پالیر‬ ‫فتومالتی‬ ‫به‬ ‫یا‬ ‫مستقیم‬ ‫صورت‬ ‫نوری‬ ‫فیبر‬ ‫کمک‬ ‫الکتریک‬ ‫های‬ ‫پالس‬ ‫به‬ ‫جرقه‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫نوری‬ ‫ی‬ ‫ها‬ ‫پالس‬ ‫تبدیل‬ ‫ی‬ ‫جرقه‬ ‫شمارنده‬ ‫توسط‬ ( SCINTILLATION COUNTER )
  • 52. ‫کریستالی‬ ‫سینتیالسیون‬ ‫تالیوم‬ ‫درصد‬ ‫یک‬ ‫حاوی‬ ‫که‬ ‫یدید‬ ‫سدیم‬ ‫های‬ ‫کریستال‬ ‫با‬ ‫گاما‬ ‫اشعه‬ ، ‫میرود‬ ‫کار‬ ‫به‬ ‫گاما‬ ‫اشعه‬ ‫تشخیص‬ ‫برای‬ ‫برخورد‬ ‫است‬ ‫انرژی‬ ‫پایه‬ ‫حالت‬ ‫به‬ ‫برگشت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫رفته‬ ‫باالتر‬ ‫های‬ ‫الیه‬ ‫به‬ ‫ید‬ ‫های‬ ‫الکترون‬ ‫میشود‬ ‫جذب‬ ‫ید‬ ‫توسط‬ ‫و‬ ‫میکند‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫امواج‬ UV ‫نزد‬ ‫یا‬ ‫مرئی‬ ‫محدوده‬ ‫در‬ ‫هایی‬ ‫فوتون‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫جذب‬ ‫تالیوم‬ ‫های‬ ‫اتم‬ ‫توسط‬ ‫که‬ ‫میشود‬ ‫منتشر‬ ‫یک‬ UV ‫میش‬ ‫آشکار‬ ‫پالیر‬ ‫فتومولتی‬ ‫لوله‬ ‫یک‬ ‫توسط‬ ‫و‬ ‫کرده‬ ‫عبور‬ ‫ها‬ ‫کریستال‬ ‫درون‬ ‫از‬ ‫ها‬ ‫فوتون‬ ‫این‬ ‫میشود‬ ‫منتشر‬ ‫وند‬ . ‫ط‬ ‫به‬ ‫تنها‬ ‫و‬ ‫کند‬ ‫مرتب‬ ‫ها‬ ‫آن‬ ‫ارتفاع‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫پالس‬ ‫های‬ ‫سیگنال‬ ‫دارد‬ ‫وظیفه‬ ‫پالس‬ ‫ارتفاع‬ ‫آنالیزور‬ ‫یک‬ ‫محدودی‬ ‫یف‬ ‫دهد‬ ‫شدن‬ ‫شمارش‬ ‫اجازه‬ ‫است‬ ‫موجود‬ ‫زنی‬ ‫جرقه‬ ‫تکنیک‬ ‫برای‬ ‫متد‬ ‫نوع‬ ‫دو‬ ‫کریستالی‬ ‫زنی‬ ‫جرقه‬ ‫و‬ ‫مایع‬ ‫زنی‬ ‫جرقه‬
  • 53. ‫سینتیالسیون‬ ‫مایع‬ ‫میشد‬ ‫استفاده‬ ‫میکردند‬ ‫آزاد‬ ‫بتا‬ ‫ذرات‬ ‫که‬ ‫هایی‬ ‫رادیونوکلئوتید‬ ‫شمارش‬ ‫برای‬ ‫قبال‬ ‫یا‬ ‫محلول‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫معلق‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫نمونه‬ ‫یک‬ “cocktail” ‫ماده‬ ‫یک‬ ‫و‬ ‫تلوئن‬ ‫مثل‬ ‫حالل‬ ‫یک‬ ‫شامل‬ ‫مثل‬ ‫اولیه‬ ‫سینتیالتور‬ 2,5-diphenyloxazole (DPO) ‫مثل‬ ‫ثانویه‬ ‫سینتیالتور‬ ‫یک‬ ‫یا‬ 2,2′-p-phenylenebis (5-phenyloxazole) (POPOP) ‫میگیرد‬ ‫قرار‬ ‫آ‬ ‫فوتون‬ ‫و‬ ‫میکنند‬ ‫یونیزه‬ ‫را‬ ‫اولیه‬ ‫سینتیالتور‬ ‫محلول‬ ‫اکتیو‬ ‫رادیو‬ ‫نمونه‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫بتای‬ ‫ذرات‬ ‫که‬ ‫میکنند‬ ‫زاد‬ ‫میکند‬ ‫منتشر‬ ‫بیشتری‬ ‫موج‬ ‫طول‬ ‫با‬ ‫و‬ ‫جذب‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫ثانویه‬ ‫سینتیالتور‬ ‫زمان‬ ‫خصوص‬ ‫به‬ ‫میشود‬ ‫سبب‬ ‫را‬ ‫موثرتر‬ ‫انقال‬ ‫و‬ ‫بیشتر‬ ‫بازده‬ ‫سینتیالتور‬ ‫دو‬ ‫با‬ ‫فرآیند‬ ‫این‬ ‫زیادی‬ ‫مقدار‬ ‫که‬ ‫ی‬ ‫فرونشانی‬ ( quenching ) ‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫رنگی‬ ‫مواد‬ ‫یا‬ ‫نمونه‬ ‫ناخالصی‬ ‫ذرات‬ ‫با‬ ‫جذب‬ ‫برای‬ ‫سینتیالتور‬ ‫رقابت‬ ‫یعنی‬ ‫فرونشانی‬ ( ‫فرونش‬ ‫رنگی‬ ‫انی‬ ) ‫در‬ ‫و‬ ‫میشود‬ ‫سبب‬ ‫را‬ ‫خروجی‬ ‫های‬ ‫فوتون‬ ‫کاهش‬ ‫نتیجه‬ ، ‫کریستال‬ ‫جرقه‬ ‫شمارش‬ ‫روش‬ ‫همان‬ ‫به‬ ‫پالیر‬ ‫مالتی‬ ‫فتو‬ ‫های‬ ‫لوله‬ ‫توسط‬ ‫نوری‬ ‫های‬ ‫فوتون‬ ‫آخر‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫تقویت‬ ‫میشوند‬ ‫شناسایی‬
  • 55. ‫مویینه‬ ‫الکتروفورز‬ (CE) CAPILLARY ELECTROPHORESIS ‫لوله‬ ‫یک‬ ‫شامل‬ ‫و‬ ‫است‬ ‫جداسازی‬ ‫جهت‬ ‫روشی‬ ‫بافرالکترو‬ ‫مخزن‬ ‫دو‬ ، ‫سیلیکایی‬ ‫موئینه‬ ‫یک‬ ،‫لیت‬ ‫سا‬ ‫آشکار‬ ‫یک‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫ولتاژ‬ ‫با‬ ‫تغذیه‬ ‫منبع‬ ‫است‬ ‫ز‬ ‫متص‬ ‫ها‬ ‫داده‬ ‫پردازش‬ ‫برای‬ ‫سیستم‬ ‫یک‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫ل‬ ‫است‬ ‫زمان‬ ‫میشود‬ ‫وارد‬ ‫مویینه‬ ‫لوله‬ ‫ورودی‬ ‫به‬ ‫نمونه‬ ‫ی‬ ‫ع‬ ‫مویینه‬ ‫ی‬ ‫لوله‬ ‫انتهای‬ ‫از‬ ‫ولتاژقوی‬ ‫یک‬ ‫که‬ ‫بور‬ ‫مولکو‬ ‫میکند‬ ‫ل‬ ‫جریان‬ ‫توسط‬ ‫نمونه‬ ‫های‬ ‫ش‬ ‫جریان‬ ‫یک‬ ‫که‬ ‫میشوند‬ ‫جدا‬ ‫الکترواسموزی‬ ‫دید‬ ‫در‬ ‫منفی‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫حد‬ ‫از‬ ‫بیش‬ ‫تعداد‬ ‫از‬ ‫ناشی‬ ‫است‬ ‫مویینه‬ ‫لوله‬ ‫داخلی‬ ‫سطح‬ ( ‫افزایش‬ ‫با‬ PH ‫یابد‬ ‫می‬ ‫افزایش‬ ‫مقدار‬ ‫این‬ ) ‫کات‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫د‬ ‫میکنند‬ ‫حرکت‬ .
  • 56. ‫مویینه‬ ‫الکتروفورز‬ • ‫خارجی‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫زودتر‬ ‫نمونه‬ ‫در‬ ‫مثبت‬ ‫های‬ ‫یون‬ ‫جریان‬ ‫که‬ ‫این‬ ‫علت‬ ‫به‬ ‫میرسند‬ ‫مویینه‬ ‫لوله‬ ‫اند‬ ‫جهت‬ ‫هم‬ ‫یونی‬ ‫حرکات‬ ‫و‬ ‫الکترواسمزی‬ . ‫یو‬ ‫ن‬ ‫ام‬ ‫میروند‬ ‫خروجی‬ ‫انتهای‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫هم‬ ‫منفی‬ ‫های‬ ‫ا‬ ‫کمتر‬ ‫سرعت‬ ‫با‬ • ‫های‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫مثل‬ ‫ها‬ ‫ساز‬ ‫آشکار‬ ‫مختلف‬ ‫انواع‬ ‫طیف‬ ‫الکتروشیمیایی‬ ‫رسانایی‬ ‫نوری‬ ‫جرمی‬ ‫سنجی‬ ‫گیر‬ ‫اندازه‬ ‫و‬ ‫تشخیص‬ ‫جهت‬ ‫رادیواکتیوی‬ ‫یا‬ ‫آنها‬ ‫ی‬ ‫میروند‬ ‫کار‬ ‫به‬
  • 57. ‫مویینه‬ ‫الکتروفورز‬ • ‫و‬ ‫ها‬ ‫التروفورز‬ ‫سایر‬ ‫بر‬ ‫الکتروفورز‬ ‫نوع‬ ‫این‬ ‫مزیت‬ HPLC ‫این‬ ‫ب‬ ‫نیاز‬ ‫و‬ ‫اند‬ ‫باالتر‬ ‫تفکیک‬ ‫قدرت‬ ‫با‬ ‫و‬ ‫تر‬ ‫سریع‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫کم‬ ‫حجم‬ ‫ه‬ ‫دارند‬ ‫نمونه‬ ‫مخ‬ ‫که‬ ‫ای‬ ‫نمونه‬ ‫از‬ ‫نانولیتر‬ ‫چند‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬ ‫مثال‬ ‫لوط‬ ‫و‬ ‫باال‬ ‫بسیار‬ ‫دقت‬ ‫با‬ ‫میتوان‬ ‫است‬ ‫مولکول‬ ‫چند‬ ‫از‬ ‫ای‬ ‫پیچیده‬ ‫تفکیک‬ ‫پذیری‬ ( theoretical plates number ‫تئوری‬ ‫سینی‬ ‫یا‬ ) ‫کرد‬ ‫جدا‬ ‫هم‬ ‫از‬ ‫را‬ ‫ها‬ ‫نمونه‬ ‫میلیون‬ ‫یک‬ • ‫است‬ ‫ممکن‬ ‫ترکیب‬ ‫کامل‬ ‫شدن‬ ‫جدا‬ ‫باال‬ ‫بسیار‬ ‫ولتاژ‬ ‫اعمال‬ ‫با‬ ‫از‬ ‫کمتر‬ ‫م‬ ‫ی‬ ‫لوله‬ ‫سطح‬ ‫باالی‬ ‫نسبت‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫گیرد‬ ‫صورت‬ ‫دقیقه‬ ‫ده‬ ‫به‬ ‫ویینه‬ ‫انت‬ ‫و‬ ‫میشود‬ ‫پذیر‬ ‫امکان‬ ‫شده‬ ‫برده‬ ‫بکار‬ ‫ولتاژ‬ ‫میزان‬ ‫آن‬ ‫حجم‬ ‫قال‬ ‫سازد‬ ‫می‬ ‫ممکن‬ ‫را‬ ‫مویینه‬ ‫لوله‬ ‫دیواره‬ ‫طریق‬ ‫از‬ ‫حرارت‬ • ‫کاربرد‬ : ‫ها‬ ‫هموگلوبین‬ ‫انواع‬ ‫و‬ ‫سرم‬ ‫های‬ ‫پروتئین‬ ‫جداسازی‬