Evolucija raka - vpliv naravne selekcije na evolucijo onkoloških obolenjNejc Draganjec
Rak je bolezen genoma. Klasični model karcinogeneze opisuje večkratno sosledno širjenje klonov, ki ga vodi nabiranje genetskih sprememb (mutacij) in pozitivna selekcija okolja v katerem se tumor pojavi. Toda z evolucijskimi metodami lahko raziskujemo onkološka obolenja tudi iz vidika makro in populacijske evolucije. Naravna selekcija je poskrbela za kompleksne in prepletene mehanizme regulacije in popravljanja genoma in abnormalne celične delitve. Toda, pogosto pride tudi do antagonistične koevolucije in posledičnih pleotropičnih učinkov genov, ki v določenem obdobju osebka njegov fitnes dvigujejo a imajo hkrati v kasnejših obdobjih življenja onkogeno vlogo. Na tak način mehanizmi Darwinove evolucije v populaciji ne izkoreninjajo bolezni kot je rak, ampak fiksirajo onkogene in gensko podlago za takšno delovanje senescence na sploh.
Endosimbiontski odnosi med gostitelji nevretenčarji in fotosimbiontom so že dolgo poznani. Precej dobro so raziskani primeri gostiteljev mehkužcev (npr. Elysia chlorotica) in členonožcev. Sedaj pa se prvič pojavlja primer endosimbiontskega odnosa, pri katerem je gostitelj vretenčar. Pisani aksolotel (Ambystoma maculatum) in njegov fotosimbiont zelena alga (Oophila amblystomatis) imata tesno mutualistično zvezo, ki se prične v samem začetku embrionalnega razvoja, določa potek le-tega in se nadaljuje v larvalni stadij ter ostaja pri odrasli živali, katere fitnes je v veliki meri odvisen tudi od uspeha simbiontske zveze.
Growth hacking-in-ecommerce. Zalando & ASOS casesHenri ISAAC
This presentation deals with the growth issue in e-commerce. It describes two different strategies implemented by two leading european fashion e-commerce company Zalando and Asos. Business model analysis, but also, internationalization, financial perspective included
One of the ways in which potential
environmental impact of pesticides can be minimized is biotical control. It is the use of living
organisms or their products in order to suppress plant pest populations.
dna,geni,genska sekvenca,gensko spremenjeni organizmi,gso,kontrola,koruza,koruzo,krma,med,mutacija,mutiranje,nk603xmon810,oznaČevanje,plodnost,poskus,poskusi,potomstvo,Živina,Življenska doba, SANJA LONČAR, JANA, NARAVNO IN ENOSTAVNO
SEMINAR - Dolgoživost, zaviranje staranja in kvaliteta življenja.Nejc Draganjec
V zadnjih nekaj letih smo bili pri\v ca vrtincu razvoja razumevanja osnovnih konceptov
biologije staranja. Med drugim so bili razviti kemi\v cni opona\k salci kalori\v cne restrikcije,
ki dokazano upo\v casni staranje pri sesalcih. Dose\v zen je bil velik napredek v kontroli-
ranju staranja pri sesalcih preko S6K1 in TOR poti. Po eni strani je bilo dokazano
upo\v casnjevanje staranja s TOR inhibitorjem rapamicinom, po drugi strani pa je nekaj
\k studij podalo rezultate, ki nasprotujejo ustaljeni resveratrol-sirtuin-kalori\v cna restrikcija-
staranje paradigmi (Anderson in Weindruch, 2013; Gems in Partridge, 2013; Martin,
2011; Selman in Withers, 2011).
Oksidativni stres ima v procesih staranja dvojno vlogo. Mo\v can oksidativni stres staranje
pospe\k suje, blag in ponavljajo\v c oksidativni stres pa \v zivljenjsko dobo organizmu podalj\k suje.
Inovativni pristop k zaviranju staranja predstavlja manipulacija endogenih celi\v cnih
obrambnih mehanizmov, kot je npr. antioksidativni odziv, preko planirane diete ali
preko farmakolo\k skih antioksidantov in/ali hormetinov. Pregled raziskav je razkril nekaj
klju\v cnih korakov in napotkov za zaviranje staranja:
1. Zmanj\k sevanje kalori\v cnega vnosa a hkrati skrb, da ne pride do podhranjenosti.
2. Prehrana s hormetini bogatimi \v zivili (sadje in zelenjava).
3. Uporaba prehrambenih dodatkov s hormetini (npr. resveratrolom).
4. Redna a zmerna fizi\v cna aktivnost in hkrati izogibanje naporni in iz\v crpavajo\v ci vadbi.
5. Izogibanje toksi\v cnim koncentracijam \k skodljivih snovi (npr. te\v zke kovine) (Anderson
in Weindruch, 2013; Gaman et al., 2011; Martin, 2011).
Evolucija raka - vpliv naravne selekcije na evolucijo onkoloških obolenjNejc Draganjec
Rak je bolezen genoma. Klasični model karcinogeneze opisuje večkratno sosledno širjenje klonov, ki ga vodi nabiranje genetskih sprememb (mutacij) in pozitivna selekcija okolja v katerem se tumor pojavi. Toda z evolucijskimi metodami lahko raziskujemo onkološka obolenja tudi iz vidika makro in populacijske evolucije. Naravna selekcija je poskrbela za kompleksne in prepletene mehanizme regulacije in popravljanja genoma in abnormalne celične delitve. Toda, pogosto pride tudi do antagonistične koevolucije in posledičnih pleotropičnih učinkov genov, ki v določenem obdobju osebka njegov fitnes dvigujejo a imajo hkrati v kasnejših obdobjih življenja onkogeno vlogo. Na tak način mehanizmi Darwinove evolucije v populaciji ne izkoreninjajo bolezni kot je rak, ampak fiksirajo onkogene in gensko podlago za takšno delovanje senescence na sploh.
Endosimbiontski odnosi med gostitelji nevretenčarji in fotosimbiontom so že dolgo poznani. Precej dobro so raziskani primeri gostiteljev mehkužcev (npr. Elysia chlorotica) in členonožcev. Sedaj pa se prvič pojavlja primer endosimbiontskega odnosa, pri katerem je gostitelj vretenčar. Pisani aksolotel (Ambystoma maculatum) in njegov fotosimbiont zelena alga (Oophila amblystomatis) imata tesno mutualistično zvezo, ki se prične v samem začetku embrionalnega razvoja, določa potek le-tega in se nadaljuje v larvalni stadij ter ostaja pri odrasli živali, katere fitnes je v veliki meri odvisen tudi od uspeha simbiontske zveze.
Growth hacking-in-ecommerce. Zalando & ASOS casesHenri ISAAC
This presentation deals with the growth issue in e-commerce. It describes two different strategies implemented by two leading european fashion e-commerce company Zalando and Asos. Business model analysis, but also, internationalization, financial perspective included
One of the ways in which potential
environmental impact of pesticides can be minimized is biotical control. It is the use of living
organisms or their products in order to suppress plant pest populations.
dna,geni,genska sekvenca,gensko spremenjeni organizmi,gso,kontrola,koruza,koruzo,krma,med,mutacija,mutiranje,nk603xmon810,oznaČevanje,plodnost,poskus,poskusi,potomstvo,Živina,Življenska doba, SANJA LONČAR, JANA, NARAVNO IN ENOSTAVNO
SEMINAR - Dolgoživost, zaviranje staranja in kvaliteta življenja.Nejc Draganjec
V zadnjih nekaj letih smo bili pri\v ca vrtincu razvoja razumevanja osnovnih konceptov
biologije staranja. Med drugim so bili razviti kemi\v cni opona\k salci kalori\v cne restrikcije,
ki dokazano upo\v casni staranje pri sesalcih. Dose\v zen je bil velik napredek v kontroli-
ranju staranja pri sesalcih preko S6K1 in TOR poti. Po eni strani je bilo dokazano
upo\v casnjevanje staranja s TOR inhibitorjem rapamicinom, po drugi strani pa je nekaj
\k studij podalo rezultate, ki nasprotujejo ustaljeni resveratrol-sirtuin-kalori\v cna restrikcija-
staranje paradigmi (Anderson in Weindruch, 2013; Gems in Partridge, 2013; Martin,
2011; Selman in Withers, 2011).
Oksidativni stres ima v procesih staranja dvojno vlogo. Mo\v can oksidativni stres staranje
pospe\k suje, blag in ponavljajo\v c oksidativni stres pa \v zivljenjsko dobo organizmu podalj\k suje.
Inovativni pristop k zaviranju staranja predstavlja manipulacija endogenih celi\v cnih
obrambnih mehanizmov, kot je npr. antioksidativni odziv, preko planirane diete ali
preko farmakolo\k skih antioksidantov in/ali hormetinov. Pregled raziskav je razkril nekaj
klju\v cnih korakov in napotkov za zaviranje staranja:
1. Zmanj\k sevanje kalori\v cnega vnosa a hkrati skrb, da ne pride do podhranjenosti.
2. Prehrana s hormetini bogatimi \v zivili (sadje in zelenjava).
3. Uporaba prehrambenih dodatkov s hormetini (npr. resveratrolom).
4. Redna a zmerna fizi\v cna aktivnost in hkrati izogibanje naporni in iz\v crpavajo\v ci vadbi.
5. Izogibanje toksi\v cnim koncentracijam \k skodljivih snovi (npr. te\v zke kovine) (Anderson
in Weindruch, 2013; Gaman et al., 2011; Martin, 2011).
Anton Komat - usodna napaka darwinove teorijeOpechancanough
Darvvinove zamisli, ka
ko se organizmi vedejo v naravi,
so posnetek idej Adama Smitha
o tem, kako se kupci in proda
jalci vedejo na trgu. Oboje, tako
naravo kot trg, vodi »nevidna ro
ka«. Pri Dan/vinu je »nevidna roka«
naravni izbor, pri Smithu je »nevi
dna roka« trg. Zgodovinar Osvvald
Spengler je sijajno povzel teorijo
evolucije: »Celotna Darvvinova te
orija je zgolj prenos ekonomije na
biologijo.« S knjigo »Razvoj vrst«
je kapitalizem vedno opravičil
svoje sebično vedenje, ker se je
skliceval na zakone narave.
Plant Protection Service of Slovenia. Prognostic tools, models, data and information system, used for plant disease and pest forecasting (in Slovenian).
Reference: Knapič, Vlasta, S. Gomboc (2007) Sistem agrometeoroloških postaj in napovedovanje pojava bolezni in škodljivcev kot enega od orodij pri ekološkem in integriranem kmetovanju.- Kmetijsko-živilski sejem Gornja Radona
Not only the principles of effectiveness and quality of biological control should be taken into consideration but also the rules and eventual risk for nature conservation and for biological diversity thereof. More detailed procedures for introduction, rearing and use of useful organisms are subject to the Rules on biological control of plant pests (Official Gazette RS, No 45/06), which came into force on 13 May 2006. Provisions of these Rules do not apply for the introduction and use of microorganisms, which are governed by regulations in the field of plant protection products and are subject to different risk assessment in the registration procedure. Useful organisms, which may be used for the purposes of biological control of plant pests may be indigenous or exotic species of organisms.
Sonogenetic Locale Specific Activation of Universal Vectors for Xenobiotics -...Nejc Draganjec
The final goal of the project is to develop “BioBrick” for liposome produced by means of synthetic biology, that
has a construct for disintegration embedded in its membrane. Xenobiotic packaged in a liposome is not part
of pharmacodynamics since it is biologically unavailable. Which makes liposomes interesting candidates for
universal drug delivery vectors. In our case, liposome disintegration is initiated by non-invasive sonic signal
and carried out by a construct of a sensor and an active part embedded in a membrane. Sensor part of a
construct is mechanoreceptor/mechanotransducer which activates protein representing the active part of a
construct. After activation, active part carries out the dissolution of a compartmentalization function by means
of total disintegration of vector or only membrane perforation. After an opening of a vector, previously packed
xenobiotic becomes locally available with a high concentration in locale and thus high effect and low systemic
concentration and thus smaller chance of side effect. This approach is very specific for both, time and space
factors and at the same time has a very broad area of potential biomedical applications. Vector would be, in
a hypothetical scenario of practical use in oncology, first packed with chemotherapeutics/biological drugs,
administered intravenously and then medical staff would have an option of drug activation in specific locations.
Activation is very precise and at the same time offers an option of easy switching among many different
targets, for example between dominant tumor to many potential metastasis. Since location of activation is
not tied to biomarker, but rather takes advantage of other rapidly developing medical technologies, vector
remains universally and directly applicable for any patient and for a broad spectrum of pathologies in fields of
oncology (chemotherapeutics/biological drugs and other payloads, like local immune response enhancers),
autoimmune diseases (local immune suppressors, diabetes), parasitology (malaria drugs and plasmodium
sporozoite), local pathologies (ulcer, trauma healing) . . .
Gene expression control - practicum reportNejc Draganjec
Preverjanje izražanja gena za β-aktin v embriju
cebrice (izolacija celotne RNA embrija cebrice →
spektrofotometrično preverjanje uspešnosti izolacije →
reverzna transkripcija mRNA za gen β-aktin →
pomnoževanje cDNA v PCR → preverjanje na gelu)
ELEKTRONSKA MIKROSKOPIJA MIKROGRAFIJE IN ULTRASTRUKTURENejc Draganjec
Ker je valovna dolžina elektronskega žarka 100.000-krat krajša od valovne dolžine vidne svetlobe, je teoretična ločljivost elektronske mikroskopije 0,001 nm. Toda zaradi napak magnetnih leč je dejanska maksimalna ločljivost osnovnih tehnik elektronske miroskopije okoli 0,1 nm oz 1 \r A. Praktično ločljivost pa določa tudi vrsta vzorca in njegove značilnosti. Praktično dosegljiva ločljivost bioloških vzorcev je zaradi njihovih lastnosti okoli 1 nm (Echin, 2009; Egerton, 2005; Goodhew et al., 2001; Khan, 212; Watt, 1997). Poznamo dve osnovni vrsti elektronskih mikroskopov (presevni elektronski mikroskop oz. TEM in vrstični elektronski mikroskop oz. SEM), ki se po svojih značilnostih
in principu delovanja precej razlikujeta. Konstrukcija TEM je v osnovi podobna svetlobnemu mikroskopu. Vir ``svetlobe'' nadomesti elektronska puška oz. linearni pospeševalnik iz katode in anode. Katoda poskrbi za vir elektronov in anoda za pospeševanje v smeri preparata. Snop elektronov nato potuje po koloni, v kateri moramo vzdrževati visoki vakum. Za fokusiranje in radialno pospeševanje snopa poskrbi sistem elektromagnetnih leč, ki delujejo kot kondenzor, objektiv in projektiv. Med snopom elektronov in preparatom pride do interakcij (odboj, elastično in neelastično sipanje), katerih frekvenca je odvisna od elektronske gostote preparata. Klasična priprava preparatov za TEM je postopek iz 6 korakov: fiksacija, dehidracija, vklapljanje, rezanje, prenos na nosilec in kontrastiranje s težkimi kovinami (Echin, 2009; Egerton, 2005; Goodhew et al., 2001; Khan, 212; Watt, 1997).
LOKALIZACIJA CELIČNIH STRUKTUR V BIOLOŠKIH VZORCIH Z MIKROSKOPSKIMI TEHNIKAMI...Nejc Draganjec
K izrednemu napredku mikroskopije ni prispeval le razvoj orodij, torej razvoj novih mikroskopov in izboljšava že obstoječih tehnik mikroskopiranja. Ključno je k razvoju
prispeval tudi napredek metodologije in pojav novih postopkov priprave mikroskopskih preparatov. Kadar biološki vzorec pripravljamo za mikroskopijo moramo biti še posebej pozorni na ohranjanje celične strukture in bioloških delov/molekul, ki so predmet preučevanja. Dobre metode priprav vzorcev za lokalizacijo omogočajo selektivnost
v postopku priprave, postopek mora biti natančen in občutljiv, ohranjati rekacijski produkt in omogoča enostavno in kontrastno vizualizacijo preučevane strukture. Med
pripravo ne smemo pozabiti na pozitivne in negativne kontrole (Žnidaršič, 2014).
Nekateri postopki priprave mikroskopskih preparatov so znani že zelo dolgo, takšna so predvsem nespecifična barvanja in kontrastiranje vzorcev. Mnogo tehnik, ki jih
uporabljamo danes, pa je povsem novih. Zelo pogosto se uporabljajo selektivna barvanja, dokazovanje encimske aktivnosti, imunolokalizacija, hibridizacija in situ, označevanje s fluorescenčnimi proteini (npr. GFP) (Chopra et al., 2012; Žnidaršič, 2014)...
Na vajah smo za lokalizacijo uporabili barvanja s sudan črno B (lipidi), DAPI (nukleinske kisline), hematoksilin-eozin (jedra, citoplazma in kolagen) in trikromatsko barvanje po
Massonu.
EKOPOIEZA MARSA – PRILOŽNOSTI IN OVIRE, KI JIH PREDSTAVLJA INŽENIRING NOVEGA ...Nejc Draganjec
Bistveni korak ustvarjanja novega okolja, primernega za poselitev ljudi, je načrtna vzpostavitev stabilnega ekosistema (ekopoieza). Odnosi med organizmi v stabilnem ekosistemu so kompleksni in težko predvidljivi, dodatno pa ekopoiezo otežujejo še ekstremni okoljski pogoji, ki ožijo nabor potencialnih kandidatov in s tem biološko pestrost. Ekstremna okolja na Zemlji ponujajo nekaj odgovorov in nakazujejo, da se tudi v ekstremnih razmerah spletejo trdne simbiotske naveze, ki simbiontom celo omogočajo preživetje. V nalogi je raziskan potencial lišajev za ekopoiezo v Marsovih okoljskih razmerah.
PREDSTAVITEV: EKOPOIEZA MARSA – PRILOŽNOSTI IN OVIRE, KI JIH PREDSTAVLJA INŽE...Nejc Draganjec
Bistveni korak ustvarjanja novega okolja, primernega za poselitev ljudi, je načrtna vzpostavitev stabilnega ekosistema (ekopoieza). Odnosi med organizmi v stabilnem ekosistemu so kompleksni in težko predvidljivi, dodatno pa ekopoiezo otežujejo še ekstremni okoljski pogoji, ki ožijo nabor potencialnih kandidatov in s tem biološko pestrost. Ekstremna okolja na Zemlji ponujajo nekaj odgovorov in nakazujejo, da se tudi v ekstremnih razmerah spletejo trdne simbiotske naveze, ki simbiontom celo omogočajo preživetje. V nalogi je raziskan potencial lišajev za ekopoiezo v Marsovih okoljskih razmerah.
Endosimbiontski odnosi med gostitelji nevretenčarji in fotosimbiontom so že dolgo poznani. Precej dobro so raziskani primeri gostiteljev mehkužcev (npr. Elysia chlorotica) in členonožcev. Sedaj pa se prvič pojavlja primer endosimbiontskega odnosa, pri katerem je gostitelj vretenčar. Pisani aksolotel (Ambystoma maculatum) in njegov fotosimbiont zelena alga (Oophila amblystomatis) imata tesno mutualistično zvezo, ki se prične v samem začetku embrionalnega razvoja, določa potek le-tega in se nadaljuje v larvalni stadij ter ostaja pri odrasli živali, katere fitnes je v veliki meri odvisen tudi od uspeha simbiontske zveze.
Puščave - seminarska naloga pri predmetu ekologijaNejc Draganjec
Sušna območja delimo v podkategorije na podlagi več faktorjev. Upošteva se indeks precipitacija in potencialne evapotranspiracije, povprečne temperature, geografske značilnosti … Na teh faktorjih temelji groba razdelitev puščav na vroče puščave, mrzle puščave, polsuhe puščave in priobalne puščave. Puščave nudijo zelo specifične okoljske pogoje. Značilno je pomanjkanje vode, visoke ali nizke temperature, velika dnevna nihanja temperature … Biomi puščavskih ekosistemov za spopadanje z okoljskimi omejitvami koristijo številne prilagoditve, kot so pospešen razvoj, anabioza, razni sistemi intenzivnega varčevanja z vodo. Zaradi specifičnih zahtev je biološka diverziteta v ekosistemih puščav praviloma nižja, kot v večini drugih ekosistemov. Zato intenzivno širjenje puščav (dezertifikacija) predstavlja precejšnji izziv v trenutnem, hitro spreminjajočem se podnebju.
Puščave- predstavitev seminarske naloge pri predmetu ekologijaNejc Draganjec
Sušna območja delimo v podkategorije na podlagi več faktorjev. Upošteva se indeks precipitacija in potencialne evapotranspiracije, povprečne temperature, geografske značilnosti … Na teh faktorjih temelji groba razdelitev puščav na vroče puščave, mrzle puščave, polsuhe puščave in priobalne puščave. Puščave nudijo zelo specifične okoljske pogoje. Značilno je pomanjkanje vode, visoke ali nizke temperature, velika dnevna nihanja temperature … Biomi puščavskih ekosistemov za spopadanje z okoljskimi omejitvami koristijo številne prilagoditve, kot so pospešen razvoj, anabioza, razni sistemi intenzivnega varčevanja z vodo. Zaradi specifičnih zahtev je biološka diverziteta v ekosistemih puščav praviloma nižja, kot v večini drugih ekosistemov. Zato intenzivno širjenje puščav (dezertifikacija) predstavlja precejšnji izziv v trenutnem, hitro spreminjajočem se podnebju.
One zoom - biološka podatkovna zbirka in predvsem orodje za vizualizacijoNejc Draganjec
One zoom je orodje za vizualizacijo po principu fraktalne periodične geometrije. Skupaj z orodjem pridejo tudi odlične biološke podatkovne zbirke filogenije sesalcev, dvoživk ...
More Related Content
Similar to Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja(nejc draganjec in kaja mivsek)
Anton Komat - usodna napaka darwinove teorijeOpechancanough
Darvvinove zamisli, ka
ko se organizmi vedejo v naravi,
so posnetek idej Adama Smitha
o tem, kako se kupci in proda
jalci vedejo na trgu. Oboje, tako
naravo kot trg, vodi »nevidna ro
ka«. Pri Dan/vinu je »nevidna roka«
naravni izbor, pri Smithu je »nevi
dna roka« trg. Zgodovinar Osvvald
Spengler je sijajno povzel teorijo
evolucije: »Celotna Darvvinova te
orija je zgolj prenos ekonomije na
biologijo.« S knjigo »Razvoj vrst«
je kapitalizem vedno opravičil
svoje sebično vedenje, ker se je
skliceval na zakone narave.
Plant Protection Service of Slovenia. Prognostic tools, models, data and information system, used for plant disease and pest forecasting (in Slovenian).
Reference: Knapič, Vlasta, S. Gomboc (2007) Sistem agrometeoroloških postaj in napovedovanje pojava bolezni in škodljivcev kot enega od orodij pri ekološkem in integriranem kmetovanju.- Kmetijsko-živilski sejem Gornja Radona
Not only the principles of effectiveness and quality of biological control should be taken into consideration but also the rules and eventual risk for nature conservation and for biological diversity thereof. More detailed procedures for introduction, rearing and use of useful organisms are subject to the Rules on biological control of plant pests (Official Gazette RS, No 45/06), which came into force on 13 May 2006. Provisions of these Rules do not apply for the introduction and use of microorganisms, which are governed by regulations in the field of plant protection products and are subject to different risk assessment in the registration procedure. Useful organisms, which may be used for the purposes of biological control of plant pests may be indigenous or exotic species of organisms.
Sonogenetic Locale Specific Activation of Universal Vectors for Xenobiotics -...Nejc Draganjec
The final goal of the project is to develop “BioBrick” for liposome produced by means of synthetic biology, that
has a construct for disintegration embedded in its membrane. Xenobiotic packaged in a liposome is not part
of pharmacodynamics since it is biologically unavailable. Which makes liposomes interesting candidates for
universal drug delivery vectors. In our case, liposome disintegration is initiated by non-invasive sonic signal
and carried out by a construct of a sensor and an active part embedded in a membrane. Sensor part of a
construct is mechanoreceptor/mechanotransducer which activates protein representing the active part of a
construct. After activation, active part carries out the dissolution of a compartmentalization function by means
of total disintegration of vector or only membrane perforation. After an opening of a vector, previously packed
xenobiotic becomes locally available with a high concentration in locale and thus high effect and low systemic
concentration and thus smaller chance of side effect. This approach is very specific for both, time and space
factors and at the same time has a very broad area of potential biomedical applications. Vector would be, in
a hypothetical scenario of practical use in oncology, first packed with chemotherapeutics/biological drugs,
administered intravenously and then medical staff would have an option of drug activation in specific locations.
Activation is very precise and at the same time offers an option of easy switching among many different
targets, for example between dominant tumor to many potential metastasis. Since location of activation is
not tied to biomarker, but rather takes advantage of other rapidly developing medical technologies, vector
remains universally and directly applicable for any patient and for a broad spectrum of pathologies in fields of
oncology (chemotherapeutics/biological drugs and other payloads, like local immune response enhancers),
autoimmune diseases (local immune suppressors, diabetes), parasitology (malaria drugs and plasmodium
sporozoite), local pathologies (ulcer, trauma healing) . . .
Gene expression control - practicum reportNejc Draganjec
Preverjanje izražanja gena za β-aktin v embriju
cebrice (izolacija celotne RNA embrija cebrice →
spektrofotometrično preverjanje uspešnosti izolacije →
reverzna transkripcija mRNA za gen β-aktin →
pomnoževanje cDNA v PCR → preverjanje na gelu)
ELEKTRONSKA MIKROSKOPIJA MIKROGRAFIJE IN ULTRASTRUKTURENejc Draganjec
Ker je valovna dolžina elektronskega žarka 100.000-krat krajša od valovne dolžine vidne svetlobe, je teoretična ločljivost elektronske mikroskopije 0,001 nm. Toda zaradi napak magnetnih leč je dejanska maksimalna ločljivost osnovnih tehnik elektronske miroskopije okoli 0,1 nm oz 1 \r A. Praktično ločljivost pa določa tudi vrsta vzorca in njegove značilnosti. Praktično dosegljiva ločljivost bioloških vzorcev je zaradi njihovih lastnosti okoli 1 nm (Echin, 2009; Egerton, 2005; Goodhew et al., 2001; Khan, 212; Watt, 1997). Poznamo dve osnovni vrsti elektronskih mikroskopov (presevni elektronski mikroskop oz. TEM in vrstični elektronski mikroskop oz. SEM), ki se po svojih značilnostih
in principu delovanja precej razlikujeta. Konstrukcija TEM je v osnovi podobna svetlobnemu mikroskopu. Vir ``svetlobe'' nadomesti elektronska puška oz. linearni pospeševalnik iz katode in anode. Katoda poskrbi za vir elektronov in anoda za pospeševanje v smeri preparata. Snop elektronov nato potuje po koloni, v kateri moramo vzdrževati visoki vakum. Za fokusiranje in radialno pospeševanje snopa poskrbi sistem elektromagnetnih leč, ki delujejo kot kondenzor, objektiv in projektiv. Med snopom elektronov in preparatom pride do interakcij (odboj, elastično in neelastično sipanje), katerih frekvenca je odvisna od elektronske gostote preparata. Klasična priprava preparatov za TEM je postopek iz 6 korakov: fiksacija, dehidracija, vklapljanje, rezanje, prenos na nosilec in kontrastiranje s težkimi kovinami (Echin, 2009; Egerton, 2005; Goodhew et al., 2001; Khan, 212; Watt, 1997).
LOKALIZACIJA CELIČNIH STRUKTUR V BIOLOŠKIH VZORCIH Z MIKROSKOPSKIMI TEHNIKAMI...Nejc Draganjec
K izrednemu napredku mikroskopije ni prispeval le razvoj orodij, torej razvoj novih mikroskopov in izboljšava že obstoječih tehnik mikroskopiranja. Ključno je k razvoju
prispeval tudi napredek metodologije in pojav novih postopkov priprave mikroskopskih preparatov. Kadar biološki vzorec pripravljamo za mikroskopijo moramo biti še posebej pozorni na ohranjanje celične strukture in bioloških delov/molekul, ki so predmet preučevanja. Dobre metode priprav vzorcev za lokalizacijo omogočajo selektivnost
v postopku priprave, postopek mora biti natančen in občutljiv, ohranjati rekacijski produkt in omogoča enostavno in kontrastno vizualizacijo preučevane strukture. Med
pripravo ne smemo pozabiti na pozitivne in negativne kontrole (Žnidaršič, 2014).
Nekateri postopki priprave mikroskopskih preparatov so znani že zelo dolgo, takšna so predvsem nespecifična barvanja in kontrastiranje vzorcev. Mnogo tehnik, ki jih
uporabljamo danes, pa je povsem novih. Zelo pogosto se uporabljajo selektivna barvanja, dokazovanje encimske aktivnosti, imunolokalizacija, hibridizacija in situ, označevanje s fluorescenčnimi proteini (npr. GFP) (Chopra et al., 2012; Žnidaršič, 2014)...
Na vajah smo za lokalizacijo uporabili barvanja s sudan črno B (lipidi), DAPI (nukleinske kisline), hematoksilin-eozin (jedra, citoplazma in kolagen) in trikromatsko barvanje po
Massonu.
EKOPOIEZA MARSA – PRILOŽNOSTI IN OVIRE, KI JIH PREDSTAVLJA INŽENIRING NOVEGA ...Nejc Draganjec
Bistveni korak ustvarjanja novega okolja, primernega za poselitev ljudi, je načrtna vzpostavitev stabilnega ekosistema (ekopoieza). Odnosi med organizmi v stabilnem ekosistemu so kompleksni in težko predvidljivi, dodatno pa ekopoiezo otežujejo še ekstremni okoljski pogoji, ki ožijo nabor potencialnih kandidatov in s tem biološko pestrost. Ekstremna okolja na Zemlji ponujajo nekaj odgovorov in nakazujejo, da se tudi v ekstremnih razmerah spletejo trdne simbiotske naveze, ki simbiontom celo omogočajo preživetje. V nalogi je raziskan potencial lišajev za ekopoiezo v Marsovih okoljskih razmerah.
PREDSTAVITEV: EKOPOIEZA MARSA – PRILOŽNOSTI IN OVIRE, KI JIH PREDSTAVLJA INŽE...Nejc Draganjec
Bistveni korak ustvarjanja novega okolja, primernega za poselitev ljudi, je načrtna vzpostavitev stabilnega ekosistema (ekopoieza). Odnosi med organizmi v stabilnem ekosistemu so kompleksni in težko predvidljivi, dodatno pa ekopoiezo otežujejo še ekstremni okoljski pogoji, ki ožijo nabor potencialnih kandidatov in s tem biološko pestrost. Ekstremna okolja na Zemlji ponujajo nekaj odgovorov in nakazujejo, da se tudi v ekstremnih razmerah spletejo trdne simbiotske naveze, ki simbiontom celo omogočajo preživetje. V nalogi je raziskan potencial lišajev za ekopoiezo v Marsovih okoljskih razmerah.
Endosimbiontski odnosi med gostitelji nevretenčarji in fotosimbiontom so že dolgo poznani. Precej dobro so raziskani primeri gostiteljev mehkužcev (npr. Elysia chlorotica) in členonožcev. Sedaj pa se prvič pojavlja primer endosimbiontskega odnosa, pri katerem je gostitelj vretenčar. Pisani aksolotel (Ambystoma maculatum) in njegov fotosimbiont zelena alga (Oophila amblystomatis) imata tesno mutualistično zvezo, ki se prične v samem začetku embrionalnega razvoja, določa potek le-tega in se nadaljuje v larvalni stadij ter ostaja pri odrasli živali, katere fitnes je v veliki meri odvisen tudi od uspeha simbiontske zveze.
Puščave - seminarska naloga pri predmetu ekologijaNejc Draganjec
Sušna območja delimo v podkategorije na podlagi več faktorjev. Upošteva se indeks precipitacija in potencialne evapotranspiracije, povprečne temperature, geografske značilnosti … Na teh faktorjih temelji groba razdelitev puščav na vroče puščave, mrzle puščave, polsuhe puščave in priobalne puščave. Puščave nudijo zelo specifične okoljske pogoje. Značilno je pomanjkanje vode, visoke ali nizke temperature, velika dnevna nihanja temperature … Biomi puščavskih ekosistemov za spopadanje z okoljskimi omejitvami koristijo številne prilagoditve, kot so pospešen razvoj, anabioza, razni sistemi intenzivnega varčevanja z vodo. Zaradi specifičnih zahtev je biološka diverziteta v ekosistemih puščav praviloma nižja, kot v večini drugih ekosistemov. Zato intenzivno širjenje puščav (dezertifikacija) predstavlja precejšnji izziv v trenutnem, hitro spreminjajočem se podnebju.
Puščave- predstavitev seminarske naloge pri predmetu ekologijaNejc Draganjec
Sušna območja delimo v podkategorije na podlagi več faktorjev. Upošteva se indeks precipitacija in potencialne evapotranspiracije, povprečne temperature, geografske značilnosti … Na teh faktorjih temelji groba razdelitev puščav na vroče puščave, mrzle puščave, polsuhe puščave in priobalne puščave. Puščave nudijo zelo specifične okoljske pogoje. Značilno je pomanjkanje vode, visoke ali nizke temperature, velika dnevna nihanja temperature … Biomi puščavskih ekosistemov za spopadanje z okoljskimi omejitvami koristijo številne prilagoditve, kot so pospešen razvoj, anabioza, razni sistemi intenzivnega varčevanja z vodo. Zaradi specifičnih zahtev je biološka diverziteta v ekosistemih puščav praviloma nižja, kot v večini drugih ekosistemov. Zato intenzivno širjenje puščav (dezertifikacija) predstavlja precejšnji izziv v trenutnem, hitro spreminjajočem se podnebju.
One zoom - biološka podatkovna zbirka in predvsem orodje za vizualizacijoNejc Draganjec
One zoom je orodje za vizualizacijo po principu fraktalne periodične geometrije. Skupaj z orodjem pridejo tudi odlične biološke podatkovne zbirke filogenije sesalcev, dvoživk ...
Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja (nejc draganjec in kaja ...
Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja(nejc draganjec in kaja mivsek)
1. UNIVERZA V LJUBLJANI
BIOTEHNIŠKA FAKULTETA
ODDELEK ZA BIOLOGIJO
Nejc DRAGANJEC in Kaja MIVŠEK
GENSKO SPREMENJENI ORGANIZMI IN POTENCIALNA
TVEGANJA
Seminarska naloga pri predmetu Bioterorizem
(Mentor: doc. dr. Martin Batič)
Ljubljana, 4. 1. 2013
2. 2
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
POVZETEK:
Moderne tehnologije genskega inženiringa imajo izreden potencial vplivanja na svet v
dobrobit družbe in okolja. Toda kot vsako močno orodje se lahko izkoristijo tudi za družbeno
nekoristne, ali celo vsesplošno škodljive namene. Takšna namerna ali nenamerna posledica
gensko spremenjenih organizmov (GSO) pa je lahko za svojo okolico katastrofalna. Tveganje
GSO je premo sorazmerno s kompleksnostjo interakcij in odnosov v okolju, kateremu bo
GSO izpostavljen, in obratno sorazmerno z znanjem in poznavanjem interakcij in odnosov v
katere bo GSO vpleten. Zato se ob izpustitvi GSO v okolje, uporabi v prehrambni verigi,
medicini ali bioindustriji priporoča previdnostni princip, z večletnim natančnim opazovanjem
in postopnim kontroliranim uvajanjem. Tak način omogoča statistično pridobivanje podatkov
in takojšen umik ob prvih znakih težav ali nepredvidenega vedenja.
KLJUČNE BESEDE:
GSO, tveganje, ekologija, alergija, prehrana, genski inženiring, cepiva, odpornost na
antibiotike, kompeticija, biotehnologija
VPRAŠANJA IZ SNOVI:
1. Na katerih področjih se uporablja GSO?
2. Katera so glavna tveganja na posameznih področjih?
3. Kaj je ključni element za varno uporabo GSO?
3. 3
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
Vsebina
1 UVOD................................................................................................................................. 4
2 OCENA TVEGANJA GSO V PREHRANI LJUDI........................................................... 5
2.1 ALERGIJE................................................................................................................... 5
2.2 DOLGOROČEN VPLIV IN ONKOLOŠKE SPREMEMBE..................................... 5
2.3 REZISTENCA NA ANTIBIOTIKE ........................................................................... 6
3 OCENA TVEGANJA GSO V BIOINDUSTRIJI............................................................... 7
4 OCENA TVEGANJA GSO V MEDICINI......................................................................... 9
5 OCENA TVEGANJA GSO ZA OKOLJE ....................................................................... 10
6 VIRI .................................................................................................................................. 13
4. 4
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
1 UVOD
Gensko spremenjeni organizmi (GSO) so živi organizmi, v katerih je bil genski material
(DNK) spremenjen s postopki biotehnologije, s pomočjo katere lahko izbrane gene prenašamo
iz enega organizma v drugega, četudi gre za organizme različnih vrst (Republika Slovenija,
Ministrstvo za kmetijstvo in okolje). Biotehnologija, poznana tudi kot genski inženiring ali
tehnologija rekombinantne DNK, se je prvič začela uporabljati leta 1970. Prva uradno
pridelana gensko spremenjena rastlina je bil paradižnik z odloženim dozorevanjem, ki se je
pred 18. leti prvič pojavil na ameriškem trgu, od takrat pa je šel razvoj v tej smeri strmo
navzgor. Če z restrikcijskim encimom (lat. restrikcija = omejitev, utesnitev) razrežemo DNK
celice in s segrevanjem razvijemo molekulo DNK druge celice, lahko v njo vstavimo
fragmente prve razrezane DNK. Na ta način dobimo nov genom, z novo kombinacijo
zaporedij genov. Če se vneseni gen tudi izrazi smo celici vnesli novo lastnost, če pa prevedeni
protein vpliva še na ostale proteine, smo ji spremenili lastnosti.
Zagovorniki uporabe genske tehnologije menijo, da gre tu le za bolj načrtovane in hitrejše
spremembe, kot sta jih narava in tudi človek skozi stoletja in tisočletja izvajala s križanjem,
selekcijo, mutacijami, rekombinacijami zarodnih celic in naravnim izborom. Nasprotniki pa
trdijo, da lahko z vnosom tujih genov vplivamo na organizmu lastne gene, ki bi lahko
spremenili način svojega izražanja. Posledice niso nujno takoj opazne, ampak bi se zaradi
spremenjenega razmerja proteinov lahko pokazale v obliki bolezni šele v prihodnjih
generacijah. Prav tako se bojijo škodljivega vpliva na okolje, saj bi transgeni organizmi,
zaščiteni proti škodljivcem, lahko začeli izpodrivati avtohtone vrste. Kličejo k previdnosti, saj
menijo, da s tem prehitevamo evolucijo, ki izvaja selekcijo vrst počasi in kontrolirano preko
interakcij z ostalimi vrstami in okoljem. Če želimo povečati pridelek, da bi zadostili potrebam
hitro rastočega prebivalstva našega planeta, ne da bi pri tem nadaljevali z brezumnim
krčenjem gozdov in pretirano uporabo pripravkov, se bomo morali verjetno sprijazniti z
uporabo transgenih organizmov. Boljša prehranjenost svetovnega prebivalstva bi namreč
pomenila tudi dvig splošnega blagostanja. Zato napredne države že sprejemajo zakonodaje, ki
dovoljujejo uporabo genske tehnologije (Komel, 2010).
Vidimo torej, da je znanje ključ, ki nam odpre vrata v svet gensko spremenjenih organizmov.
Brez njega se namreč ni mogoče strinjati ali ne strinjati z uporabo le teh. Prav tako nam
omogoča predvideti potencialna tveganja in nevarnosti in s tem pravočasno ukrepanje.
5. 5
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
V nadaljevanju seminarske naloge bodo predstavljena potencialna tveganja gensko
spremenjenih organizmov, ki so bila do sedaj odkrita ob uporabi v prehrambni verigi, v
okolju, biološki industriji in medicini.
2 OCENA TVEGANJA GSO V PREHRANI LJUDI
Ker svet hlasta za čim večjim in čim cenejšim pridelkom hrane in kmetijska industrija trosi po
poljih tone sredstev za zatiranje plesni, plevelov, žuželk in drugih škodljivcev, so se rastline
na te strupe prilagodile in postali za mnoge med njimi neobčutljive. Izhod iz tega začaranega
kroga je ponudila šele vzgoja transgenih rastlin, torej rastlin, ki so jim, zato da bi postale
odporne proti virusom, žuželkam, plesnim, herbicidom in podobnim nadlogam, spremenili
genome. Znanstveniki v genskem inženiringu uporabljajo tehnike, ki omogočajo prenašanje
genov tudi med različnimi vrstami, na način kot se to v naravi ne dogaja (npr. vstavljanje
genov goveda v genom mikroorganizmov) (Leighton Jones, 1999). Do sedaj je namreč veljajo
načelo: spolno se lahko razmnožujejo le osebki znotraj vrste, torej velja križanje enakega z
enakim. Narava je torej križanju postavila čvrste meje, katere pa biotehnolog danes lahko
preskoči. Drug problem pa predstavlja zelo težko predvidevanje, kako bo gen v novi verigi
DNK gostiteljske celice sodeloval z ostalimi geni. Nenadzorovan in nepredvidljiv način vnosa
lahko zmoti naravni genetski zapis, ki je kodiran v tej celici. Tako lahko pride do motenj v
naravnem delovanju DNK, posledice pa so nepredvidljivi in nepoznani učinki na človeško
zdravje (Miklavčič, 2000).
2.1 ALERGIJE
Semenska podružnica podjetja Du Pont je leta 1996 patentno zaščitila sojo, ki so jo gensko
spremenili tako, da so vanjo vnesli DNA iz brazilskega oreščka in soji s tem povečali količino
z žveplom bogatih aminokislin. Ker pa je brazilski orešček znan alergen, so imeli strokovnjaki
na voljo vzorce serumov alergikov. Tako so pravočasno, še preden so začeli z gensko
spremenjeno sojo trgovati, ugotovili, da bi lahko pri človeku povzročila smrtonosne alergije
(Leighton Jones, 1999).
2.2 DOLGOROČEN VPLIV IN ONKOLOŠKE SPREMEMBE
Bt-koruza vsebuje modificiran gen iz talne bakterije Bacillus thuringiensis. Omenjena
bakterija je naravno prisotna v zemlji. Različni sevi te bakterije so sposobni proizvajati
6. 6
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
proteine Cry (to je skupina flavoproteinov, ki rastlinam in živalim omogoča zaznavanje
magnetnega polja in uravnavanje dnevnega ritma), ali pa vsebujejo mitotoksine, ki so
selektivno učinkoviti proti različnim žuželkam. Raziskovalci so izolirali gen, ki proizvaja
mitotoksin, ga modificirali in vstavili v koruzo. Gen Bt omogoča rastlini sintezo proteina, ki
je toksičen za večino gosenic pri metuljih. Toksin Bt deluje na steno prebavnega trakta, kjer
povzroči razpad črevesnih sten in povzroči smrt gosenic koruzne vešče in drugih ličink
metuljev, ki se s tako koruzo hranijo. Ličinke koruzne vešče navadno poginejo v 48 urah po
zaužitju Bt-koruze.
Prvič so Bt-koruzo raziskali leta 1988 zaradi dveh pojavov, ki sta se zgodila na različnih delih
sveta. In sicer visok delež raka na požiralniku v Južni Afriki, ter visoka umrljivost svinj in
konjev v Združenih državah Amerike.
Leta 2000 so Američani Bt- koruzo odkrili v enem izmed njihovih glavnih živilskih izdelkov
in spoznali, da so veleblagovnice po državi polne vseh vrst ne testirane in neoznačene gensko
spremenjene hrane. Iz obtoka so vzeli 300 vrst čipsa in koruzne moke ter ustavili njen izvoz.
Raziskave so pokazale, da so vsebovani mitotoksini v Bt-koruzi potencialno karcinogeni (Wu,
2006).
2.3 REZISTENCA NA ANTIBIOTIKE
Uporaba gensko spremenjenih rastlin je sporna, ker lahko bakterije s transfernimi sistemi
(konjugacija, transformacija in transdukcija) prenesejo del genomov gensko spremenjenih
rastlin. Ta genska mobilnost tako lahko ogrozi klinično uporabo antibiotikov. Če se ti geni s
krmo ali hrano prenesejo na bakterije, postanejo te zanje imune, zdravljenje z antibiotiki pa
neučinkovito. Nič čudnega, da je odpor proti uporabi takšnih genov v Evropi in ZDA vse
večji. Znana je nesreča, kjer se je gen za produkcijo penicilina prenesel iz cvetnega prahu
gensko spremenjene koruze na bakterijo Neiseria meningitidis (Bennet et.al., 2004).
V zadnjih 40 letih se je število prebivalstva povečalo za 90 %, istočasno se je količina hrane
na prebivalca povečala le za 25 %. Lačni postajajo še bolj lačni zaradi vojn in zato, ker je
proizvodnja prehranskih surovin v rokah peščice velikih multinacionalk. Predvsem v
nerazvitih državah tretjega sveta propadajo majhna in srednje velika kmečka gospodarstva.
Kmetje morajo namreč za shranjevanje in sejanje požetih semen plačevati drage licence,
multinacionalke pa jim za malo denarja ponujajo GS semena, ki vzklijejo, odrasle rastline pa
7. 7
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
so sterilne in neuporabne za vnovično sejanje. Raziskave tudi ne potrjujejo, da bi genski
inženiring večal pridelek; tako rezultati omenjene ameriške univerzitetne raziskave z GS sojo
kažejo celo za 6,7 % manjši pridelek (Miklavčič, 2000).
Zaradi pritiska potrošniških in nevladnih organizacij za varstvo okolja so začeli skoraj vsi
večji proizvajalci in trgovske verige s hrano v Evropi, pa tudi drugod po svetu, prostovoljno
označevati GS živila, ali pa so jih izločili iz svoje ponudbe. Vendar pa samo bio-živila s
kontrolirano pridelavo in živila, ki so ustrezno označena zanesljivo ne vsebujejo GS sestavin.
Bio-živila po mednarodnih standardih ne smejo vsebovati GS sestavin in v primeru mesnih
izdelkov živali ne smejo biti krmljene z GS krmo.
Tudi Zveza potrošnikov Slovenije je že začela s podobnimi akcijami. Proizvajalec Žito-Šumi
je npr. zagotovil, da pri proizvodnji svojih izdelkov uporablja le še surovine (soja, koruza), za
katere je pridobil certifikat, da so gensko nespremenjene (Miklavčič, 2000).
3 OCENA TVEGANJA GSO V BIOINDUSTRIJI
Biološko industrijsko organizacijo delimo na tri področja. Prva, tako imenovana zelena
bioindustrija, se ukvarja z agrikulturno biotehnologijo, druga, rdeča bioindustrija, se nanaša
na farmacijsko in medicinsko biotehnologijo, tretja pa je bela in pomeni industrijsko
biotehnologijo. Ta se ukvarja s proizvodnjo biomaterialov in z izkoriščanjem alternativnih
virov energije (t.i. bioenergije). Industrijska biotehnologija vključuje uporabo encimov in
mikroorganizmov za produkcijo kemikalij iz obnovljivih virov energije. Zaradi zmanjšanja
porabe energije, toplogrednih emisij in nastajanja odpadkov, je to hitro rastoče področje
(Tang, Zhao, 2009).
Le 5 multinacionalnih korporacij ima v rokah biotehnološko industrijo. Gre za
agrosemenarska, agrokemična, farmacevtska in prehrambena podjetja, ki se ukvarjajo z
razvijanjem in nato distribucijo GS rastlin. To so AstraZeneca, DuPont, Monsanto, Novartis
in Aventis. Skupaj pokrivajo skoraj 60 % svetovnega tržnega deleža pesticidov, 23 % deleža
vseh semen in 100 % tržni delež GS semen.
Pomemben mednarodni sporazum na področju biotehnologije je Protokol o biološki varnosti,
ki je zdaj sestavni del mednarodne Konvencije o biološki raznovrstnosti. Oba dokumenta je
8. 8
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
podpisala tudi Slovenija. Protokol je pomemben, ker za čezmejni promet z GS semeni
uveljavlja načelo previdnosti in taka semena se ne smejo uvažati brez predhodnega soglasja
države uvoznice.
Največji problem GS izdelkov je v tem, da je njihovo označevanje nepopolno in neenotno
urejeno. Glavna nasprotja so med evropsko ureditvijo, ki je za potrošnika bolj zaščitna, kot je
severnoameriška ureditev, ki je zelo ohlapna. Različne ureditve povzročajo trgovinska
nesoglasja na ravni Svetovne trgovinske organizacije (WTO), zato je mednarodna
organizacija Codex Alimentarius Commission (lat. Knjiga hrane), ki v okviru Svetovne
zdravstvene organizacije (WHO) in Organizacije za prehrano in kmetijstvo (FAO) skrbi za
prehranske standarde, izdelala standarde za GS živila. Ti so strožji in naj bi med drugim
vsebovali tudi spremljanje dolgoročnih vplivov GS hrane na človeško zdravje, testiranje
stabilnosti tujih genov v živilih, prisotnosti morebitnih strupov, alergenov in drugih
nepričakovanih učinkov (Miklavčič, 2000).
Obstajajo tudi etični pomisleki in vprašanja, s katerimi se soočijo biotehnološka podjetja, v
postopku od raziskav do prihoda njihovega izdelka na trg:
- Kdo je lastnik genske informacije? Ali je socialno pravično, da si podjetja lastijo tuje
genske informacije?
- Ali je odgovorno razvijati genetske teste za bolezni, za katere še ni nobenega zdravila?
- Ali je pravično odkrivati biotehnološke produkte za korist celemu človeštvu, če pa si
jih države v razvoju ne morejo privoščiti?
- Poraba milijonov za raziskave in razvoj biotehnoloških podjetij.
- Razkritje človekovega genotipa, bi lahko privedlo do razlikovanja ljudi na podlagi
genskih informacij.
Da produkt pride iz laboratorija do trga traja desetletja. Zato ni presenetljivo, da podjetja
nimajo etičnih skrbi. Pomembnejše jim je preživeti in videti, če njihova tehnologija
prinaša dobiček, kot izgubljati čas z osredotočanjem na etiko (Finegold et.al., 2005).
9. 9
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
4 OCENA TVEGANJA GSO V MEDICINI
Uporaba tehnologij genskih sprememb je v medicini aplikativno zelo široka. Sega od GS na
vektorjih, ki tako niso več zmožni prenašati patogena, do produkcije zdravil biološkega
porekla (inzulin, faktor VIII ...) in celo direktne genske terapije na človeku. Potencialna
tveganja uporabe GSO zaradi tega segajo v mnoga področja, ki bodo opisana tudi v drugih
poglavjih. Potencialna ekološka tveganja pri izpustitvi GS komarjev, ki zaradi ekspresije
specifičnega gena in posledične produkcije proteina niso več vektor Plasmodium falciparum
(povzročitelj malarije), bodo opisana v naslednjem poglavju ''Ocena tveganja GSO za okolje''
in tveganja povezana z uporabo GSO kot producenti zdravil biološkega porekla so opisana v
ustreznem poglavju bioindustrije. V tem poglavju bodo opisana le neposredna tveganja za
človeško zdravje ob uporabi direktnih genskih tehnik (genska terapija) ali zdravljenju z GS
organizmi (npr. bakteriofagi).
Živa cepiva imajo prednost, da spodbudijo celično in protitelesno odpornost in s tem lahko
preprečijo ne le bolezen, ampak tudi infekcijo samo. Tradicionalno se je seve pripravljalo za
ceplenje z zaporednim gojenjem na medijih ali celičnih kulturah, s kemičnimi ali fizikalnimi
mutagenimi komoponentami. Kot posledica pa se je v sevu nabrala kopica naključnih mutacij,
ki so omilile ali celo odpravile faktorje patogenosti. Moderne genske tehnike omogočajo
načrtno gensko spremembo na ključnih genih, ki so povezani s faktorji patogenosti in ostalimi
nezaželjenimi lastnostmi seva. Vendar pa navkljub kontroliranem posegu, živa cepiva
predstavljajo kar nekaj z zdravjem in okoljem povezanih tveganj. V prvi vrsti so to
potencialne morfološke spremembe v gostitelju/pacientu. Ker gre za živi organizem je prav
tako mogoča ponovna pridobitev virulenčnih faktorjev s privzemom komplementarnih genov,
povsem tujih genov ali pa izmenjava lastnih GS informacij z divjimi sevi. Veliko tveganje
predstavlja nenamerni prenos odpornosti na antibiotike in ostala fizikalno-kemična zdravila
(Frey J., 2007).
Povsem enaka, a v drugačnih razmerjih, so tudi tveganja pri ostalih medicinskih aplikacijah
GSO. Pri uporabi ne-virulentnih GSO, za kompeticijo v okolju z virulentnimi patogeni, so
tveganja povezana predvsem z izmenjavo genetskih informacij z divjimi sevi in nepredvidene
ekološke posledice. Pri uporabi GSO za predatorstvo ali parazitizem na patogenih organizmih
pa tveganje predstavlja nepričakovano vedenje kot posledica genetskih sprememb. Tako je
npr. uporaba bakteriofagov, ki bi pri zdravljenju močno opečenih pacientov lahko preprečila
10. 10
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
tako pogoste zaplete s sekundarnimi bakteriološkimi okužbami, prepovedana. Prepovedana
zaradi možnosti prenosa genetskega materiala ne le v tarčni organizem (bakterije), ampak tudi
v človeško celico, kar lahko po eni strani sproži histološke spremembe (npr. lahko pride do
onkoloških sprememb) (Moolten in Cupples, 1992), po drugi strani pa je vnos genoma druge
vrste v človeški genom zelo sporen in tudi v večini primerov prepovedan (Cohen-Haguenauer,
1995).
Kar nas pripelje do zadnje, morda najbolj vznemirljive točke uporabe GSO v medicini. To je
uporaba genskega inženiringa na človeku samem. Bodisi na posameznih tkivih (imunske
celice pri HIV, kostni mozek in srpastocelična anemija… ) ali kar sistemske genske
spremembe pri dednih ali sistemskih obolenjih (ADA, koronarna obolenja... ). Zanimivo,
dosedanje raziskave kažejo zelo nizka tveganja pri tovrstnem zdravljenju (Isner et al, 2001).
Odvisno do postopka in tipa uporabljenih genskih tehnik, obstajajo različno verjetna tveganja
stranskih simptomov, kot so avtoimune bolezni, poškodbe povrhnjic, ožilja in histološke
spremembe. Odpira pa uporaba genskih tehnologij na človeku zelo pomembna družbeno-
etična vprašanja, ki ne omogočajo enostavnega odgovora in meja med zdravljenjem in
potencialno etično spornim početjem (oblikovano potomstvo, povečevanje ali celo dodajanje
naravnih sposobnosti, daljšanje življenja... ) je pogosto zabrisana. Zato je uporaba genskih
tehnik na človeku v večini držav po svetu v odvisnosti od trajnosti takega posega (npr. ali je
sprememba dedna ali ne) prepovedana ali vsaj močno regulirana (Cohen-Haguenauer, 1995).
5 OCENA TVEGANJA GSO ZA OKOLJE
Uvedba nekaterih GSO bi lahko imela zelo pozitiven učinek na okolje. Zmožnosti tehnologije
lahko precej prispevajo k ohranjanju obstoječega okolja, bioremediaciji in upravljanju z
naravnimi viri. Poleg očitnih GSO, ki so fenotipsko precej podobni konvencionalno
rejenim/vzgojenim organizmom, se v zadnjem času pojavlja precej novih smernic. Od
bakulovirusov (zasnovanih za bolj efektiven biološki nadzor) in mikroorganizmov
(zasnovanih za spodbujanje skladiščenja ogljika) do hitro rastočih rib in hitrorastočih rastlin,
ki prenašajo mraz, suše in slanost.
Toda hkrati z obljubami in velikim potencialom, nova tehnologija prinaša tudi precej tveganj.
11. 11
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
Namenska ali nenamenska uvedba GSO v okolje bi lahko povzročila prenos genov preko
hibridizacije z obstoječimi avtohtonimi vrstami in s tem razvoj novih super plevelov,
škodljivcev in patogenov (Snow et al., 2005).
GS organizmi, ki so spremenjeni za namen obrambe pred paraziti in ostalimi škodljivci, bi
lahko s svojo prisotnostjo in delovanjem škodovali tudi ne tarčnim avtohtonim vrstam, kot so
miko-združbe v zemlji ali opraševalci in s tem uničevali celotno nadaljnjo prehransko verigo
(Snow et al., 2005).
Pobegel GSO, ki bi bil zaradi svojih genskih sprememb (hitrejši prirast, razmnoževanje,
odpornost…) v prednosti pred ostalimi organizmi v ekosistemu, bi s svojo tekmovalnostjo in
invazivnostjo lahko podrl biotsko raznovrstnost ekosistema ali genetsko pestrost znotraj svoje
naravne populacije (Snow et al., 2005).
Katerikoli izmed zgoraj omenjenih scenarijev, bi zmotil stabilnost ekosistema. Uvedba GSO
bi lahko v najslabšem primeru privedla celo do popolnega podrtja ekosistema. Odločitev za
uvedbo GSO v okolje bi tako morala biti obravnavana iz vidika primerjave okoljske
pridobitve in nevarnosti zaradi uvedbe GSO v kontrastu z uvedbo konvencionalnih
organizmov (Snow et al., 2005).
Dolgoročni vpliv novega GSO na okolje je težko predvideti in raziskati predno je tak
organizem izpuščen v okolje. Toda študije, kjer so GSO že izkazali negativen vpliv na okolje,
so pokazale nekaj skupnih točk takih primerov:
- Ni predhodnih izkušenj s kombinacijo genske spremembe lastnosti in gostitelja.
- GSO bi se lahko širil samostojno, brez človeškega vektorja.
- Možna je izmenjava genskega materiala med GSO in avtohtono biosfero.
- GSO ima zaradi svoje genske spremembe izrazito prednost pred naravnimi vrstami v
okolju.
Tveganja so torej precejšnja, a se jih da s pravilnim nadzorom in načrtovanjem močno
zmanjšati. Najpogosteje se priporoča načrtovanje dodatnih GS, ki organizmu zmanjšajo
kompetivnost, morda celo povzročajo sterilnost. Ali pa načrtovanje zaželene GS, ki se jo da
priklicati po potrebi in ni konstantno izražena. Pred splošno uvedbo v okolje je potrebnih več
okoljskih študij v realnih razmerah a na manjšem merilu, kar omogoča natančno preučevanje
12. 12
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
in hiter odgovor ter sanacijo ob pojavu morebitnih težav. Po izpustitvi GSO v okolje je
potrebno natančno spremljati interakcijo z naravnim okoljem in prekiniti uvedbo ob prvem
znaku težav. Zelo pomembno pa je tudi bolj tesno interdisciplinarno sodelovanje
znanstvenikov iz razvojnih področij (biotehnologi, molekularni biologi, … ) in znanstvenikov
iz bolj sistemskih ved (ekologi, sistematiki, … ) (Snow et al., 2005).
13. 13
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
6 VIRI
Cohen-Haguenauer O. 1995. Overwiev of regulation of gene therapy in Europe: A current
statement including reference to US regulation. Human gene therapy, 6: 773–785
Isner J. M., Vale P. R., Symes J. F., Losordo D. W. 2001. Assessment of Risks Associated
With Cardiovascular Gene Therapy in Human Subjects. Circulation Research, 89: 389–400
Snow A. A., Andow D. A., Gepts P., Hallerman E. M., Power A., Tiedje J. M., Wolfenbarger
L. L. 2005. Genetically engineered organisms and the environment: current status and
recommendations. Ecological applications, 15, 2: 377–404
Frey J. 2007. Biological safety concepts of genetically modified live bacteial vaccines.
Vaccine, 25: 5598–5605
Moolten F. L. in Cupples L. A. 1992. A Model for Predicting the Risk of Cancer Consequent
to Retroviral Gene Therapy. Human Gene Therapy, 3, 5: 479–486
Codex Alimentarius: About codex (2012)
http://www.codexalimentarius.org/about-codex/en/ (20. dec. 2012)
Miklavčič B. 2000. Gensko spremenjena hrana. 1. Izdaja. Ljubljana, KVM Grafika d.o.o.
Republika Slovenija-ministrstvo za kmetijstvo in okolje. Delovna področja. Hrana in krma.
Gensko spremenjeni organizmi (gso) in soobstoj gensko spremenjenih rastlin (gsr) z ostalimi
kmetijskimi rastlinami.
http://www.mko.gov.si/si/delovna_podrocja/hrana_in_krma/gensko_spremenjeni_organizmi
_gso_in_soobstoj_gensko_spremenjenih_rastlin_gsr_z_ostalimi_kmetijskimi_rastlinami/
(20. dec. 2012)
Komel R. 2010. Genetika-od dvojne vijačnice do kloniranja. Izbor besedil za izbirni predmet.
Gensko inženirstvo in biotehnologija, 20–47
Wu F. 2006. Mycotoxin reduction in Bt corn: potential economic, health, and regulatory
impacts. Transgenic Research, 15: 277–289
Jones L. 1999. Genetically modified foods. Journal List BMJ, 27, 318 (7183): 581–584
14. 14
Draganjec N., Mivšek K. Gensko spremenjeni organizmi in potencialna tveganja.
Seminarska naloga. Ljubljana, Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Oddelek za biologijo, 2013
Bennet P. M., Livesey C.T., Nathwani D., Reeves D. S., Saunders J. R., Wise R. 2004. An
assessment of the risks associated with the use of antibiotic resistance genes in genetically
modified plants: report of the Working Party of the British Society for Antimicrobial
Chemotherapy. Journal of Antimicrobial Chemoterapy, 53: 418–431
Finegold D. L., Bensimon C.M., Daar A. S., Godart Margaret Eaton Beatrice, Knoppers
Bartha Maria, Mackie Jocelyn E., Singer P. A. 2005. Bioindustry Ethics. 2. izdaja. UK,
Elseiver Inc.: 2–12 str.
Weng T. L., Huimin Z. 2009. Industrial Biotechnology: Tools and applications.
Biotechnology Journal, 12: 1725–1739