Presentazione della ricerca

1. “Progetto Amici di Duccio 2017:
quando l’ingegneria genetica aiuta il
sistema immunitario a combattere le
leucemie"
Dr.ssa Chiara F Magnani
Centro di Ricerca M. Tettamanti
Clinica Pediatrica Università Milano-Bicocca
Nuovo Centro Maria Letizia Verga
Ospedale S.Gerardo, Monza, Italy
Milano, 29 settembre 2017,
Piccolo Teatro Studio Melato

2. Le Terapie Avanzate nella Leucemia Pediatrica:
una lunga storia… che comincia adesso

3. I CAR sono molecole prodotte in laboratorio mediante tecniche di ingegneria genetica che vengono
“montate” sui linfociti e funzionano come un RADAR: sono in grado di riconoscere la cellula leucemica come
un bersaglio e di uccidere il tumore.
Come rafforzare le nostre difese?
I recettori chimerici artificiali (CAR)
CARLinfocita T Super Linfocita CAR-T

4. Le “Super Cellule T”: grazie al CAR i linfociti
diventano Killers contro il tumore
Linfocita T CAR+ riconosce la cellula leucemica
Uccisione ed eliminazione della cellula leucemica
Linfocita T CAR+ Cellula leucemica
Flusso sanguigno

5. Biondi et al. (2017); J Autoimmun.
Attraverso il progetto degli Amici di Duccio,
abbiamo in questi 5 anni sviluppato un sistema
innovativo per “montare” I CAR sulle cellule T
Il sistema non-virale Sleeping Beauty è in
grado di tagliare il DNA della cellula T e
inserire il gene CAR al suo interno
Questo sistema utilizza l’Electroporation per inserire
DNA dei CAR nella cellula attraverso la formazione di
pori

6. A che punto eravamo l’anno scorso…
Sottomissione della
documentazione
all’Istituto Superiore
della Sanità
Pre-submission meeting all’Istituto Superiore della Sanità

7. 305.4 MB di documentazione
Quanta documentazione per l’autorizzazione

8. A che punto siamo oggi!
Obbiettivo
raggiunto:
Approvazione
dell’Istituto
Superiore della
Sanità del protocollo
clinico
Grazie al lavoro di: Magnani CF, Dastoli G, Biagi E, Mezzanotte C, Capuzzello C, Gaipa G, Belotti
D, Cabiati D, Cesana S, Matera G, Cazzaniga G, Fazio G, Rigamonti S

9. CARCIK-CD19 per la leucemia linfoblastica acuta:
lo studio clinico parte !!
Obiettivo: verificare la sicurezza e l’efficacia delle cellule allogeniche CARCIK-CD19 in
pazienti pediatricie adulti con leucemia linfoblastica acuta a cellule B recidivante dopo
trapianto di midollo.
Obiettivi primari
• Sicurezza
Dose Limiting Toxicities (DLT)
• Efficacia
Overall Remission Rate (ORR) at 1 month
Obiettivi secondari
• Sicurezza
Incidence of adverse events, serious adverse events, vital signs.
• Efficacia
Duration of response (DOR)
Overall Remission Rate (ORR) at 6 months after CARCIKCD19 administration

10. L’officina dove vengono prodotte le “Super Cellule T”:
L’origine del laboratorio Verri (anno 1999)
Avere un laboratorio per fabbricare i farmaci di terapia avanzata e
trasferire i risultati della ricerca dal laboratorio al letto del paziente
Andrea Biondi
Giuseppe Gaipa
Martino Introna
Alessandro Rambaldi
2002: L’officina farmaceutica di Monza viene inaugurata
all’interno dell’Ospedale San Gerardo
Dal 2007 l’officina è autorizzato dall’AIFA per la
produzione dei farmaci di terapia avanzata
18/6/2015: AIFA approva l’adeguamento dell’officina
da terapia cellulare a terapia cellulare e genica
Slide cortesemente concessa da Gaipa G

11. La produzione del farmaco cellulare segue le regole
del farmaco tradizionale…….
Materiale di
partenza
Materiale di
partenza
Processo produttivo
Controllo di qualità
Prodotto FinaleProdotto Finale
Sicurezza, identità, qualità
Sistema di Assicurazione della qualità
Regole GMP
Preparare un farmaco di terapia avanzata richiede
l’osservanza di regole farmaceutiche
Slide cortesemente concessa da Gaipa G

12. modified from Koseki H. (2008), Riken Research, 3, 7
….. ma è molto piu’ complessa

13. ….. E deve essere condotta in assoluta sterilità
Slide cortesemente concessa da Gaipa G

14. A breve termine ci aspettiamo i
primi risultati di sicurezza e efficacia

15. Lo studio della distanza fra la
cellule T e la cellule del tumore
è fondamentale per l’efficacia
Guest et al. (2005)
T-CELL
TUMOR CELL
CAR anti-BAFFR per la
leucemia linfoblastica che non
risponde a CARCIK-CD19

16. TUMOR CELL
Grazie al lavoro di: Magnani CF, Turazzi N, Rossi V, Fazio G, Cazzaniga G

18. Le cellule CIK CD33 CAR: come appaiono e come funzionano
Cellule di LMA + CIK-CD33 CAR
Cellule morte
Cellule di LMA
Cellule vive
Cellule di LMA + CIK
Cellule morte
CAMPIONE LMA ESORDIO
79.6% CAR+
CIK-CD33 CARCIK NON MANIPOLATE
Cellule di LMA
Cellule sane
LMA: Leucemia Mieloide Acuta

20. Cellule di LMA
Cellule SANE

22. Riconoscimento bispecifico della cellula leucemica
Minima attivazione
in seguito al legame
del primo recettore
Nessuna attivazione
senza il legame del
primo recettore
Piena attivazione
CELLULA T
LMA LMA LMA
CELLULA T CELLULA T
LMA: Leucemia Mieloide Acuta

23. Centro di
Biostatistica
MolecularTherapy
CARCIK-CD19
Program
LA Cooper
Montini Eugenio
Benedicenti Fabrizio
Andrea Calabria
GLP HSR-TIGET
Cristofori Patrizia
Carriglio Nicola
Albertini Paola
Cecere Francesca
Pellegrini Giovanni
Bondanza Attilio
Naldini Luigi
Claudia
Capuzzello
Claudia
Brusadelli
Valentina
Rossi
Amici di Duccio
Prof A Biondi
Prof A Rambaldi
Dastoli Giuseppe
Gaipa Giuseppe
Introna Martino
Prof M ValsecchiMolecular Genetics
Gianni Cazzaniga
Grazia Fazio
Silvia Rigamonti
Michela Bardini
S. Verri GMP facility
Daniela Belotti
Benedetta Cabiati
Stefania Cesana
Giada Matera
Arianna Incontri
Giuseppe Gaipa
Prof. Andrea Biondi
Prof. Ettore Biagi
Chiara F. Magnani
Nice Turazzi
Claudia Mezzanotte
Sarah Tettamanti
Maria Caterina Rotiroti
Silvia Arcangeli
Prof. Dr.
AG Rolink