1. РЕСПУБЛИКА КАЗАХСТАН
(19) KZ (13) A4 (11) 29235
(51) A61K 9/127 (2006.01)
A61K 31/00 (2006.01)
A61P 31/06 (2006.01)
МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ
(21) 2013/1839.1
(22) 06.12.2013
(45) 15.12.2014, бюл. №12
(72) Карабалин Арман Балтабаевич; Туткышбаев
Серик Оспанович; Аманжолова Лайла Кусайыновна;
Гильманов Мурат Курмашевич; Абилдаев Тлеухан
Шилдебаевич; Бегзат Аскар Нагиулы
(73) Республиканскoе государственное казенное
предприятие "Национальный центр проблем
туберкулеза" Министерства здравоохранения
Республики Казахстан
(56) Предварительный патент РК№17043,
15.03.2006г
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ
ТРАНСДЕРМАЛЬНОГО ЛИПОСОМАЛЬНОГО
ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ
ЛЕЧЕНИЯ ТУБЕРКУЛЕЗА
(57) Изобретение относится к медицине, а именно к
фармакологии и может быть использовано для
получения трансдермального липосомального
лекарственного препарата для лечения туберкулеза.
Способ получения трансдермального
липосомального лекарственного препарата,
включает загрузку липосом, при этом используют
липосомы фосфатидилинозитола размером менее 1
мкм, в концентрации от 0,05% до 0,2%,
изготовленные из полярного, заряженного
фосфолипида, оболочка которых укреплена
глютаматдегидрогеназой, взятой в концентрации от
1 мг/мл до 4 мг/мл и скваленом, взятым в
концентрации 0,01%. Липосомы загружают
противотуберкулезными химиотерапевтическими
средствами первого ряда с помощью
ультразвуковой интрузии, затем загруженные
липосомы смешивают с мазевой основой.
Получение трансдермального липосомального
лекарственного препарата по предлагаемому
способу позволяет добиться полноты и точности
концентрации загрузки лекарственного средства,
способ технологически прост, не требует
значительных затрат, а получаемый препарат
стабилен и может храниться длительно.
(19)KZ(13)A4(11)29235

2. 29235
2
Изобретение относится к медицине, а именно к
фармакологии и может быть использовано для
получения трансдермального липосомального
лекарственного препарата для лечения туберкулеза.
Туберкулез на сегодняшний день является одним
из распространенных, и наиболее социально
значимых инфекционных заболеваний, поражающих
все органы и системы человека. При этом костно-
суставной туберкулез (КСТ) является основной
причиной инвалидности пациентов.
Противотуберкулезные препараты (ПТП), вводимые
перорально, с задержкой достигают очага
поражения, частично инактивируются в желудочно-
кишечном тракте, обладают множеством побочных
эффектов. Поэтому разработка новой,
трансдермальной формы противотуберкулезного
препарата на основе липосом позволит повысить
эффективность комплексной терапии КСТ и
избежать побочных эффектов ПТП.
Известен способ получения липосомального
лекарственного препарата, включающий загрузку
липосом (мицелл) веществами при смене
гидрофобной фазы на гидрофильную с помощью
колоночной гель-хроматографии.
(Предварительный патент КZ №17043, МПК
А61K 9/127, В01D 15/02, Опубл. 15.03.2006,
бюллетень №3)
Недостатками данного способа является: 1. то,
что при загрузке лекарственного средства с
помощью колоночной гель-хроматографии имеет
место неконтролируемое разведение препарата; 2 -
гель используемый в данном способе является
дорогостоящим, кроме того его необходимо менять
не менее одного раза в месяц; 3 - липосомы легко
агрегируют, что может привести к нежелательным
эффектам; 4 - короткий срок хранения - при
комнатной температуре всего один месяц.
Задачей изобретения является разработка
способа получения трансдермального
липосомального лекарственного препарата для
лечения туберкулеза.
Технический результат - получение
липосомального лекарственного препарата по
предлагаемому способу позволяет добиться
полноты и точности концентрации загрузки
лекарственного средства, способ технологически
проще прототипа, значительно дешевле,
получаемый препарат стабилен, может храниться
длительно.
Технический результат достигается тем, что в
способе получения липосомального лекарственного
препарата, включающем загрузку липосом
отличительной особенностью, согласно
изобретению, является то, что используют
липосомы фосфатидилинозитола размером менее
1 мкм, в концентрации от 0,05% до 0,2%,
изготовленные из полярного, заряженного
фосфолипида, оболочка которых укреплена
глютаматдегидрогеназой, взятой в концентрации от
1 мг/мл до 4 мг/мл и скваленом в концентрации
0,01%, липосомы загружают
противотуберкулезными химиотерапевтическими
средствами первого ряда с помощью ультразвуковой
интрузии, а для получения его трансдермальной
формы загруженные липосомы смешивают с
мазевой основой.
Основу липосом составляет фосфатидилинозитол
(ФИ), представляющий собой шестиатомный спирт -
инозитол, соединенный с 3-м атомом глицерола, к 1
и 2 углеродному атому которого присоединены две
жирные кислоты с четным числом углеродных
атомов от С12 до С22. Так как ФИ имеет
отрицательный заряд, получаемые липосомы
заряжены отрицательно. Вследствие наличия
отрицательного заряда они отталкиваются друг от
друга и поэтому не способны к агрегации. Для
придания гидрофильности, прочности и
стабильности липосом в ФИ мембраны встраивают
молекулы глютаматдегидрогеназы по методу,
описанному в книге (Гильманов М.К., Фурсов О.В.,
Францев А.П. // Методы очистки и изучения
ферментов растений // Алма-Ата: Изд-во “Наука”,
1981, с.91).
Кроме того, для придания липосомам прочности,
добавляют сквален - углеводород тритерпенового
ряда, принадлежащий к группе каротиноидов.
Сквален - это природный ненасыщенный
углеводород, которому не хватает 12-ти атомов
водорода до стабильного состояния, при соединении
с карбоксильной группой он осуществляет захват
водорода, между несколькими молекулами
фосфолипида, таким образом, скрепляя ламелярные
слои липосом между собой, что оказывает
стабилизирующее и скрепляющее действие на
структуру капсул. Сквален легко проникает через
кожу внутрь организма, воздействует на весь
организм и является мощным иммуностимулятором.
Раствор таких липосом может храниться в
стерильных условиях более 3-х лет.
Способ осуществляют следующим образом.
Для получения липосом используют
суспендирование фосфатидилинозитола в буферном
растворе с последующим ультразвуковым
диспергированием. Конечная концентрация
фосфатидилинозитола в растворе составляет от
0,05% до 0,2%, с оптимумом 0,1%. Затем липосомы
инкубируют с гомогенной глютаматдегидрогеназой,
взятой в концентрации от 1 мг/мл до 4 мг/мл, с
оптимумом 2 мг/мл не менее 12 часов.
Несвязавшиеся молекулы глютаматдегидрогеназы
удаляют гель - хроматографией на колонке с
сорбентом Сефароза - 2В или Сефароза - 4В.
Расчеты показали, что с
фосфатидилинозитольными липосомами
связывается 0,2% глютаматдегидрогеназы от всего
объема полученных липосом. Далее липосомы
загружают противотуберкулезными препаратами
первого ряда: изониазидом, пиразинамидом,
этамбутолом с помощью ультразвукового
диспергирования со скваленом.
Пример 1.
При концентрации ФИ в растворе менее 0,05% -
концентрация липосом недостаточна для получения
липосомального лекарственного средства.
Пример 2.

3. 29235
3
При концентрации ФИ в растворе более 0,2%
наблюдался перерасход дорогостоящего ФИ. Эта
концентрация ФИ не увеличивала эффективности
липосомального лекарственного средства.
Пример 3.
Концентрация глютаматдегидрогеназы менее
1 мг/мл оказалась недостаточна для полного
покрытия ФИ липосом.
Пример 4.
При концентрации глютаматдегидрогеназы более
4 мг/мл не увеличивалась эффективность
липосомального лекарственного средства, а лишь
происходила лишняя трата дорогостоящего
препарата.
Пример 5.
Раствор фосфатидилинозитола, взятый в
концентрации 0,1% суспендируют в буферном
растворе, подвергают ультразвуковому
диспергированию при средней силе тока в течение
нескольких минут и получают липосомы размером
менее 1 мкм. Их инкубируют с гомогенной
глютаматдегидрогеназой, взятой в концентрации
2 мг/мл, не менее 12 часов. Несвязавшиеся
молекулы глютаматдегидрогеназы удаляют гель -
хроматографией на колонке с сорбентом Сефароза -
2В или Сефароза - 4В.
Пример 6.
Загрузка ФИ липосом скваленом и
противотуберкулезными препаратами первого ряда.
Для получения липосомальной формы
лекарственного препарата липосомы перемешивали
с скваленом и с противотуберкулезными
препаратами первого ряда - изониазидом,
пиразинамидом, этамбутолом с конечной
концентрацией в липосомах:
сквален - 0,01%
Изониазид - 8 мг/мл
Пиразинамид - 5 мг/мл
Этамбутол - 3 мг/мл
путем ультразвукового диспергирования.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ получения липосомального
лекарственного препарата, включающий загрузку
липосом, отличающийся тем, что используют
липосомы фосфатидилинозитола размером менее
1 мкм, в концентрации от 0,05% до 0,2%,
изготовленные из полярного, заряженного
фосфолипида, оболочка которых укреплена
глютаматдегидрогеназой, взятой в концентрации от
1 мг/мл до 4 мг/мл и скваленом, взятым в
концентрации 0,01%, затем липосомы загружают
противотуберкулезными химиотерапевтическими
средствами первого ряда с помощью
ультразвуковой интрузии, а для получения его
трансдермальной формы загруженные липосомы
смешивают с мазевой основой.
Верстка Ж. Жомартбек
Корректор К. Нгметжанова