tulathromycin against PRRSV

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Tina

2. 土拉黴素的免疫調節特性於感染豬生殖與呼吸綜合症的豬單核球衍
生巨噬細胞
• 土拉黴素(Tulathromycin)已被發現在牛和豬動物體中具有抗發炎及免疫調
節特性
• 實驗目的:
觀察土拉黴素於PRRS感染的單核球衍生巨噬細胞的抗病毒及免疫調節特性
• 總結:
1. 土拉黴素可預防單核球衍生巨噬細胞因PRRS感染造成的型態改變
2. 土拉黴素可抑制PRRS病毒誘導單核球衍生巨噬細胞CXCL-8的分泌
3. 土拉黴素可抑制PRRS病毒誘導單核球衍生巨噬細胞內粒線體ROS的生成
4. 土拉黴素可抑制PRRS病毒引起的單核球衍生巨噬細胞壞死
5. 土拉黴素可恢復PRRS感染的單核球衍生巨噬細胞的非調理吞噬作用

3. 土拉黴素可預防單核球衍生巨噬細胞因PRRS感染造成的型態改變
• 由上圖可知，經過PRRSV感染的單核球衍生巨噬細
胞型態變為纖維細胞樣且有偽足，然而經過土拉
黴素前處理再感染PRRSV的巨噬細胞形態正常。
• 經過土拉黴素前處理，可顯著抑制因PRRS感染後
誘導的型態改變。
Control: 使用HBSS緩衝溶液處理，為控制組。
Virus:感染PRRSV 0.1 m.o.i. 12hr
TUL: 僅使用0.5 mg/ml土拉黴素進行處理 1 hr
TUL+Virus: 先用0.5 mg/ml土拉黴素前處理後再感染PRRSV 0.1 m.o.i. 12hr

4. 土拉黴素可抑制PRRS病毒誘導單核球衍生巨噬細胞CXCL-8的分
泌
Control: 使用HBSS緩衝溶液處理，為控制組。
Virus:感染PRRSV 0.1 m.o.i. 24hr
TUL: 僅使用0.5 mg/ml土拉黴素進行處理 1 hr
TUL+Virus: 先用0.5 mg/ml土拉黴素前處理後再感染PRRSV 0.1 m.o.i. 24hr
LPS: 使用 1 microg/ml脂多醣處理，為陽性對照組。
CXCL-8:又稱白三烯B4，為巨噬細胞及其他細
胞分泌的嗜中性球趨化物，一種前發炎細胞
激素，最終會造成嚴重的肺臟組織損傷及死
亡。
• PRRS感染後24小時，會引起6倍以上的CXCL-8分泌
• 經過土拉黴素前處理，可顯著抑制因PRRS感染後
巨噬細胞CXCL-8的分泌。

5. 土拉黴素可抑制PRRS病毒誘導單核球衍生巨噬細胞內粒線體ROS
的生成
Control: 使用HBSS緩衝溶液處理，為控制組。
Virus:感染PRRSV 0.1 m.o.i. 24hr
TUL: 僅使用0.5 mg/ml土拉黴素進行處理 1 hr
TUL+Virus: 先用0.5 mg/ml土拉黴素前處理後再感染PRRSV 0.1 m.o.i. 24hr
LPS :使用 1 microg/ml脂多醣(LPS)培養巨噬細胞 1 hr
粒線體ROS:可做為評估發炎組織中病理性氧
化損傷的標誌
• PRRS感染可顯著的增加細胞內ROS的生成，
而經過土拉黴素前處理的巨噬細胞可顯
著降低ROS的產生。

6. 土拉黴素可抑制PRRS病毒引起的早期單核球衍生巨噬細胞壞死
Control: 使用HBSS緩衝溶液處理，為控制組。
Virus:感染PRRSV 0.5 m.o.i. 2hr 、 12hr 、 24hr
TUL: 僅使用1 mg/ml土拉黴素進行處理 1 hr
TUL+Virus: 先用1 mg/ml土拉黴素前處理後再感染PRRSV 0.5 m.o.i. 2hr、12hr、24hr
Triton-X :用其誘導巨噬細胞的壞死，作為陽性對照組。
• 使用乳酸脫氫酶測定巨噬細胞的壞死
• PRRS感染後12及24小時顯著的增加乳酸
脫氫酶含量。使用土拉黴素前處理的組
別在PRRS感染後12小時可顯著地降低巨
噬細胞的壞死。

7. 土拉黴素可恢復PRRS感染的單核球衍生巨噬細胞的非調理吞噬作
用
• PRRS感染後顯著減少具吞噬作用的巨噬細胞數量(吞噬1個螢光標記的酵母聚醣顆粒)
• PRRS感染後顯著減少具高吞噬指數的巨噬細胞數量(至少吞噬5個螢光標記的酵母聚醣顆粒)
• 土拉黴素前處理後，顯著降低因PRRS感染引發抑制巨噬細胞的吞噬作用
Control: 使用HBSS緩衝溶液處理，為控制組。
Virus:感染PRRSV 0.5 m.o.i. 12hr
TUL: 僅使用1 mg/ml土拉黴素進行處理 1 hr
TUL+Virus: 先用1 mg/ml土拉黴素前處理後再感染PRRSV 0.5 m.o.i. 12hr