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暑期實習之心得報告
                    實習單位:行政院農業委員會畜產試驗所 種原中心 遺傳育種組
                     指導老師:林秀蓮、陳若菁、王芬敏、王玉雪、陳美如 學姐
                               系級:長榮大學生物科技學系四年級
                                        姓名:高郁淇

           摘要                  實驗名稱:RFLP-ESR                  材料與方法
行政院農業委員會畜產試驗所,為本
土畜牧資源之種原基因保存、繁衍與               前言
                                                              [RFLP-ESR]
利用,值此農業結構轉變時機,期望                                              <限制酶切>
能給各界人士認識本土家畜禽生產特               近年來母豬的年產量逐漸減少,顯然
性與農民新的畜牧經營理念。因此,               地種豬繁殖性能正逐漸下降。種豬的
在實習單位中,學習如何檢驗豬隻的               ESR 基因可以增加生產量,因此用多             拿有做成功的 PCR 產物繼續做接下來
PSS基因和ESR基因,這兩大基因會使            產基因的篩檢技術進而改善繁殖性能               的實驗,由於 PCR 的濃度不一,所以
豬隻產生疾病而死亡,進而造成豬農               的問題。                           PCR 的取量有所不同。
的損失,所以藉由基因檢測將沒有疾                                              製做3.5 % Agarose,再取1.5 μl dye
病的豬隻進行育種,以免有更多的遺               材料與方法                          和 5 μl PCR 產 物 混 合 , 用 3.5%
傳疾病產生。                                                        Agarose進行電泳。使用100V電流,
                               [RFLP-ESR]                     約跑50~60分鐘後,把3.5% Agarose
                               <PCR部分>                        拿去Ethidiam Bromide染色,約15分
         實驗介紹                                                 鐘後即可拍照。
                 取 種 豬 血 液 DNA 1 μl , 利 用 ESR
實驗名稱:種豬PSS基因檢測   primer 進行PCR。
                 製做3 % Agarose,再取1.5 μl dye和
                 5 μl PCR產物混合,用3.5% Agarose 結果
前言               進 行 電 泳 。 使 用 100V 電 流 , 約 跑
豬的緊迫綜合症候群是豬隻受外界環 50~60分鐘後,把3.5% Agarose拿去
境緊迫而導致猝死的一種症狀,帶有 Ethidiam Bromide染色,約15分鐘
緊迫基因之豬隻其屠體容易發生蒼白、後即可拍照。
柔軟與滲水的水樣肉,進而影響屠肉
品質,另外緊迫基因對豬隻生長及繁
殖性能亦有負面之影響,會造成養豬 結果
業極大之經濟損失。                                     NN: 120 bp
                                              MM: 55.65 bp
材料與方法                                         MN: 120.55.65 bp

取 種 豬 血 液 DNA 1 μl , 利 用 PSS                                     952(MN).954(MN)
primer 進行PCR。
                                                                 955(MN).956(MN)
製做3.5 % Agarose,再取1.5 μl dye
                                                                 957(MN).958(MN)
和 5 μl PCR 產 物 混 合 , 用 3.5%    Lane 23:MM 對照組
Agarose進行電泳。使用100V電流,          Lane 24:NN 對照組                    959(NN).960(MN)
約跑50~60分鐘後,把3.5% Agarose       Lane 25:MN 對照組                    961(MN).962(MN)
拿去Ethidiam Bromide染色,約15       Lane 9.22:50 ~ 500 bp Marker      963(MN).964(MM)
分鐘後即可拍照。                                                         965(MN).966(MN)
                               此次實驗共做20支樣品,3支對照組。
                                                                 967(NN).968(NN)
結果                             此次實驗Lane 4有呈現,皆為MM型。
                               此次實驗Lane 7.8.12.15.16.17.18有      969(NN).970(NN)
                               呈現,皆為NN型。                         971(MN).972(MN)
                               此次實驗Lane
                               1.2.3.5.6.9.10.11.13.14.19.20有呈現,
                               皆為MN型。


Lane 6.12:50 ~ 500 bp Marker   誌謝
Lane 13:983對照組 (BB)            感謝畜產所種原中心遺傳育種組,願意給我機會來到貴單位實習,我從中學習
Lane 14:984對照組 (AA)            到了好多寶貴的知識,還有很不一樣的體驗。謝謝你們的傾囊相授,讓我有這
此次實驗Lane 3.5.6.8.10 有呈現,皆      個榮幸在這裡跟著學習,讓我滿載而歸,真的很謝謝你們,萬分感謝。
為AA型。

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