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檳榔與香菸致癌成分(檳榔鹼arecoline與苯並芘
                            benzo[a]pyrene)對人類乳突狀病毒之long control
                                        region (LCR)活性的影響
                                                      長榮大學生物科技學系
                                            實習單位:高雄醫學大學醫學研究所
                                                      指導老師:林常申 博士
                                                       實習學生:盧星翰
Introduction
頭頸部鱗狀細胞癌發生在口腔、口咽、喉或下咽部,特
別在口咽中是由於高危險型人類乳突狀瘤病毒所造成的
感染有關;而檳榔與香菸致癌成分(檳榔鹼與苯並芘)與口
咽癌的造成有關。嚼食檳榔與吸菸從口咽部進入,所以
想知道檳榔中致癌成分檳榔鹼與香菸中致癌成分苯並芘
這兩種致癌因子與人類乳頭狀瘤病毒Long Control Region
之間的影響關係。

Methods
 Prepare plasmid and           Transfect the HPV16-
 cell line                     LCR and pRL-CMV to
                               the host cell



 Add lysis buffer and          Add arecoline or BaP
 collect cell lysis            for 24 hrs.



                                                                  Fig 1.將帶有HPV16-LCR的luciferase reporter plasmid及pRL-CMV (作為轉染效率
                                                                  的internal control)轉染到HEp-2細胞株與H1299細胞株中,分別以DMSO、0.5
  Luciferase Assay                                                μM BaP、5 μM BaP以及50 μM BaP不同濃度藥物處理細胞,24小時後加入lysis
                                                                  buffer將細胞收集起來並去測firefly及Renilla的冷光數值,將firefly除以Renilla
                                                                  數值去做計算並以圖顯示。
Results
                                                                  Discussion
                                                                  檳榔鹼對HPV16 LCR的影響
                                                                  從實驗所得現象可以看到不同濃度的arecoline在HEp-2細
                                                                  胞中HPV16-LCR的活性表現受到抑制下降 ,而在H1299
                                                                  細胞中HPV16-LCR的活性卻提高。 (Fig 1)

                                                                  苯並芘對HPV16 LCR的影響
                                                                  從實驗所得現象可以看到不同濃度的BaP在HEp-2細胞中
                                                                  HPV16-LCR的活性也受到抑制,而在H1299細胞中HPV16-
                                                                  LCR的活性卻提高。(Fig 2)

                                                                  致謝
                                                                  在這個來到高雄醫學大學短短兩個月的暑期專題實習中,
                                                                  很感謝林常申老師的指導,在這段時間中因為有林常申
                                                                  老師的教導,使得我有更多的收穫!這段期間也感謝林
                                                                  常申老師實驗室中的王瑀筑學姊以及王重盛學長,在實
                                                                  習期間對我的照顧,在實驗有不懂的地方也因為有學長
                                                                  姊的幫忙才能讓我進行的順利!最後要謝謝長榮大學黃
Fig 1. 將帶有HPV16-LCR的luciferase reporter plasmid及pRL-CMV (作為轉染效率   昭菱老師,因為有昭菱老師的推薦,才能讓我進入林常
的internal control)轉染到HEp-2細胞株與H1299細胞株中,分別以H2O、0.1、
0.3以及0.6 mM arecoline處理細胞,24小時後加入lysis buffer將細胞收集起來              申老師的實驗室中學習!
並測firefly及Renilla的冷光數值,將firefly除以Renilla數值做計算並以圖顯示。

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  • 1. 檳榔與香菸致癌成分(檳榔鹼arecoline與苯並芘 benzo[a]pyrene)對人類乳突狀病毒之long control region (LCR)活性的影響 長榮大學生物科技學系 實習單位:高雄醫學大學醫學研究所 指導老師:林常申 博士 實習學生:盧星翰 Introduction 頭頸部鱗狀細胞癌發生在口腔、口咽、喉或下咽部,特 別在口咽中是由於高危險型人類乳突狀瘤病毒所造成的 感染有關;而檳榔與香菸致癌成分(檳榔鹼與苯並芘)與口 咽癌的造成有關。嚼食檳榔與吸菸從口咽部進入,所以 想知道檳榔中致癌成分檳榔鹼與香菸中致癌成分苯並芘 這兩種致癌因子與人類乳頭狀瘤病毒Long Control Region 之間的影響關係。 Methods Prepare plasmid and Transfect the HPV16- cell line LCR and pRL-CMV to the host cell Add lysis buffer and Add arecoline or BaP collect cell lysis for 24 hrs. Fig 1.將帶有HPV16-LCR的luciferase reporter plasmid及pRL-CMV (作為轉染效率 的internal control)轉染到HEp-2細胞株與H1299細胞株中,分別以DMSO、0.5 Luciferase Assay μM BaP、5 μM BaP以及50 μM BaP不同濃度藥物處理細胞,24小時後加入lysis buffer將細胞收集起來並去測firefly及Renilla的冷光數值,將firefly除以Renilla 數值去做計算並以圖顯示。 Results Discussion 檳榔鹼對HPV16 LCR的影響 從實驗所得現象可以看到不同濃度的arecoline在HEp-2細 胞中HPV16-LCR的活性表現受到抑制下降 ,而在H1299 細胞中HPV16-LCR的活性卻提高。 (Fig 1) 苯並芘對HPV16 LCR的影響 從實驗所得現象可以看到不同濃度的BaP在HEp-2細胞中 HPV16-LCR的活性也受到抑制,而在H1299細胞中HPV16- LCR的活性卻提高。(Fig 2) 致謝 在這個來到高雄醫學大學短短兩個月的暑期專題實習中, 很感謝林常申老師的指導,在這段時間中因為有林常申 老師的教導,使得我有更多的收穫!這段期間也感謝林 常申老師實驗室中的王瑀筑學姊以及王重盛學長,在實 習期間對我的照顧,在實驗有不懂的地方也因為有學長 姊的幫忙才能讓我進行的順利!最後要謝謝長榮大學黃 Fig 1. 將帶有HPV16-LCR的luciferase reporter plasmid及pRL-CMV (作為轉染效率 昭菱老師,因為有昭菱老師的推薦,才能讓我進入林常 的internal control)轉染到HEp-2細胞株與H1299細胞株中,分別以H2O、0.1、 0.3以及0.6 mM arecoline處理細胞,24小時後加入lysis buffer將細胞收集起來 申老師的實驗室中學習! 並測firefly及Renilla的冷光數值,將firefly除以Renilla數值做計算並以圖顯示。