1. SEMINARI DE GENÈTICA
MOLECULAR
PCR i SEQÜENCIACIÓ
Luana Da Costa
Laia Traveset
Catalina Perelló
Saskia Bogaarts
2. PCR: Reacció en cadena de la polimerasa
Kary B. Mullis al 1986
Fabricar copies de fragments
de DNA sense límits
Tub d'assaig + font de calor
+ reactius
Limitacions: conèixer seqüència
de part del fragment
Procés cíclic : desnaturalització + hibridació + síntesi
6. Aplicacions de la PCR
Investigació: Medicina: eina de diagnòstic
La PCR permet controlar i detectar fragments d'ADN -determinar la càrrega vírica existent: l'estadi de la
d'interès. S'utilitza en moltes tècniques de laboratori per malaltia
la seva rapidesa.
-detectar infeccions perilloses en període d'incubació
Paleontologia, antropologia biològica i -diagnòstic de malalties hereditàries
ciències forenses:
augmenta la quantitat de material recuperat a partir de
mostres escasses; esdevé possible caracteritzar
cadàvers, fòssils o altres restes
7. Seqüenciació de DNA.
Mètodes i tècniques bioquímiques amb la finalitat de
determinar l’ordre dels nucleòtids (A, C, G i T) en un
oligonucleòtid de ADN.
•Aplicacions:
-La seqüència nucleotídica exacta d'un fragment de DNA permet un
coneixement més complet de l'estructura i funció d'un gen.
-La base molecular de mutacions específiques en un gen poden
investigar.
-Les seqüències del DNA han revelat regions reguladores comuns a
tots els gens.
La comparació de seqüències de diferents espècies proveeix estimes
de les taxes d'evolució molecular. -Seqüenciació de genomes:
estructura del genoma.
-
8. L’any 1977 es varen publicar independentment dos
mètodes per la seqüenciació de DNA:
*mètode químic, pels investigadors Maxam i Gilbert
*mètode enzimàtic, per Sanger
Els dos varen rebre per això el Nobel de Químca l’any
1980.
Els dos mètodes es basaven en reaccions
que es preparaven“manualment”,
i els resultats es “llegien” en gels d’
electroforesi.
