Presentació Power Point dels treball ELS CUCS INFINITS Versió pel site. Andrea Portero i Berta Torrents

1. ELS CUCS INFINITS. Regeneració en planàries
Andrea Portero i Martínez
Berta Torrents i Pérez
Departament de Biologia
INS La Llauna
13/01/2014

2. ÍNDEX
1. Resum i abstract
2. Introducció
2.1. Presentació o justificació del tema
2.2. Objectius del treball
3.
4.
5.
6.
7.
8.
2.3. Marc Teòric
2.3.1. Què són les planàries?
2.3.2. Què és la regeneració i com funciona?
2.3.3. Diferències entre regeneració i inflamació/cicatrització.
Material i Mètode
Resultats
Discussió
Conclusió
Agraïments i valoració personal
Annexos

3. RESUM I ABSTRACT
Blastema
Regeneració
Reproduir-se
Sobreviure
Planàries
NEOBLASTS
Matar per
irradiació
Senyalitzar amb
anticossos
Diferència quantitativa
Irradiades
No irradiades
Sistema nerviós
Percepció dolor

4. 2.1. Justificació del tema
Laboratori
BIOMEDICINA
Medicina
Regenerativa
Ciència
Guarir malalties
Investigació
Cèl·lules mare

5. 2.2. Objectius
• Estudiar la importància de les cèl·lules mare en la regeneració en planàries;
saber on es troben aquestes cèl·lules, si són o no necessàries per a la
supervivència de l'organisme i com influeix el seu nombre en la capacitat de
regeneració.
• Conèixer com funciona la regeneració.
HIPÒTESIS
-Si les planàries depenen de les cèl·lules mare per sobreviure, llavors, en
matar per irradiació totes les seves cèl·lules mare, no seran capaces de
sobreviure i moriran.
- Si les planàries depenen únicament de les cèl·lules mare per poder
regenerar-se, llavors, en matar per irradiació totes les seves cèl·lules mare, no
seran capaces de regenerar-se després de patir una lesió.

6. 2.3. Marc teòric
Història en la
investigació de la
regeneració
Malalties
degeneratives
Irradiació

7. 2.3. Marc teòric
PLANÀRIES
ulls
Reproducció
cervell
intestí
cordons
nerviosos
faringe
Schmidtea mediterranea
Asexual
Fissionant-se
boca
Sexual

8. 2.3. Marc teòric
REGENERACIÓ
Tipus
Les cèl·lules es
divideixen en
Epimòrfica similars
Per morfal·laxis
Fases
1. Curació
ferides
3. Nou
desenvolupament
2. Desdiferenciació
de cèl·lules del
voltant

9. 2.3. Marc teòric
DIFERÈNCIES ENTRE REGENERACIÓ I INFLAMACIÓ/CICATRITZACIÓ
Regeneració
Cicatrització
Cèl·lules indiferenciades
Proliferació del teixit
de la zona
Cèl·lules idèntiques
(estructuralment i
funcionalment) a les
originals
Creació teixit nou
Cicatriu
Creació teixit nou
Igual funció,
NO CANVIS

10. 3. Material i Mètode
PART 1
Distribució de cèl·lules mare.
• Senyalització amb anticossos .
• Observació al microscopi de
fluorescència.
PART 2
Afectació de la quantitat de cèl·lules
mare a la capacitat regenerativa.
• Irradiació de les cèl·lules mare:
 Estudi de la supervivència sense
elles.
 Lesió de les planàries i estudi de
la seva recuperació.

11. 3. Material i Mètode
PART 1
WASHES*
MeOH H2O2
Carnoy MeOH
HCl Carnoy
H2O2
2%
HCl
Tubs Falcon
5 min.
2h
1h
16-20 h
WASHES* (10’ each):
50% MeOH in PBTx
75% MeOH in PBTx
(PBS+0.3% triton X-100)
25% MeOH in PBTx
x2 PBTx
50 min.

12. PART 1
Departament de genètica
Facultat de Biologia

13. PART 1
Ab 1ary: antihistona H3 fosforilada
Incubate with 1ary Ab
Wash at RT in PBTx
in 1%BSA in PBTx
Do the last wash in
1%BSA in PBTx
Block 1% BSA in PBTx
2h
16-20 h
Ab 2ary: GαM 488 (Goat-anti-mouse 488)
Incubate with 2ary Ab
in 1%BSA in PBTx
14-16 h
Enllaç* (Feu clic a la imatge)
Wash in PBTx
6-8 h

14. PART 1

15. 3. Material i Mètode
PART 2
Irrad.
50pl
60’ a 100Gy
Fiss.
Ctl.
Amputació
Ctl.
Senyal.
Fiss.
Senyal.
Amputació

16. No irrad. i tallades
Irrad. i tallades
Fissionades
Ctl.
No irrad. i no tallades
Irrad. i no tallades
Tallades 27/11/13

17. 4. Resultats
PART 1
Cap ctl.:
Cap irrad.:
Prefaringe ctl.:
Prefaringe irrad.:
Cua ctl.:
Cua irrad.:

18. 4. Resultats
PART 2
PLANÀRIES IRRAD. I TALLADES
Cos que ha regenerat el cap
Cap que ha regenerat el cos
PLANÀRIES NO IRRAD. I TALLADES

19. 5. Discussió dels resultats
PART 1
Prefaringe ctl.
Prefaringe irrad.
Vídeo* (Feu clic sobre la imatge)
Vídeo* (Feu clic sobre la imatge)
Ctl.
Irrad.

20. 5. Discussió dels resultats
PART 2
Irradiades i tallades
Fissionades i
irradiades
Irradiades i no tallades

21. No irradiades i no tallades

22. No irradiades i tallades

23. 6. Conclusió
Les cèl·lules mare tenen una participació important en el procés de la
regeneració de manera que, quan es redueix el seu nombre, la velocitat de
regeneració disminueix.

24. 7. Agraïments i valoració personal
• CESIRE–CDEC. Sílvia Lope.
• Facultat Biologia, UB. Dr. Francesc Cebrià.
• PRBB–CMRB. Dra. Mercè Martí. Zoila Babot Riera.
• PCB.
• INS La Llauna. Margarida Asensio. Roser Bosch. Xavier Ferrer-Francesch

25. 7. Agraïments i valoració personal
Curiositat
Il·lusió
Dedicació
Oportunitat
Rellevància científica
Esforç
Experiència
Aprenentatge
Tema actual

26. 8. Annexos
ANNEX I. Senyalització del sistema nerviós amb anticossos.
ANNEX II. “3.2.1. Part 1. Com estan distribuïdes les cèl·lules mare” i “Mètode del 8.1.2.
Material i mètode“ Traduït al català.
ANNEX III. Informes diaris de tot el treball pràctic realitzat al laboratori del
Departament de Genètica de la Universitat de Barcelona.
ANNEX IV. Pàgina web addicional al treball.
https://sites.google.com/site/elscucsinfinits/

27. 8. Annexos
ANNEX I. Senyalització del sistema nerviós amb anticossos.
1ary Ab: Anticòs primari 3C11 (contra la sinapsina)
2ary Ab: Anticòs secundari Goat-anti-rabbit 568
Cervell ctl. 1
Cervell irrad. 1
Cervell ctl. 2
Cervell irrad. 2
LLEI 5/1995, de 21 de juny, de protecció dels animals
utilitzats per a experimentació i per a altres finalitats
científiques.
1. Als efectes d'aquesta Llei, s'entén per "animal“
qualsevol ésser viu vertebrat no humà, incloses les
formes de desenvolupament de vida pròpia i
autònoma, amb exclusió de les formes fetals i
embrionàries.

28. Vídeos* (Feu clic sobre les imatges)
vídeo
vídeo
Cervell
ctl. 1
Cervell
ctl. 2
vídeo
vídeo
Cervell
irrad. 1
Cervell
irrad. 2