Monoclonal Training Project

1. โครงการศึกษาดูงาน วิธีการสร้างเซลล์สายพันธุ์ในงานการผลิต Monoclonal Antibody ที่
Tokyo Metropolitan Blood Centre, Japanese Red Cross Society
1. หน่วยงานที่รับผิดชอบโครงการ
ฝ่ายผลิตน้ายาแอนติซีรัมและผลิตภัณฑ์เซลล์ ศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติ สภากาชาดไทย
2. ผู้รับผิดชอบโครงการ
นางสาว กัลยา เกิดแก้วงาม นักวิทยาศาสตร์การแพทย์ 5
3. หลักการและเหตุผล
สืบเนื่องจากการไปฝึกอบรม Blood Service Training Course 2010 ที่ประเทศญี่ปุ่น ของนางสาว กัลยา
เกิดแก้วงาม เมื่อวันที่ 19 กรกฎาคม ถึง 10 สิงหาคม 2553 นั้น นางสาวกัลยา
มีความสนใจอย่างยิ่งในงานวิธีการสร้างเซลล์สายพันธุ์ในงานการผลิต monoclonal rare antibody
ซึ่งประเทศไทยยังล้าหลังญี่ปุ่นเป็นอย่างมาก โดยญี่ปุ่นมีเซลล์สายพันธุ์ ของ monoclonal rare antibody
ซึ่งมีความสาคัญทางคลินิก ได้แก่ anti-C, anti-E, anti-c, anti-e, anti-P1, anti-Lea, anti-Leb, anti-Jka และ
anti-Mia ซึ่งเป็นแอนติบอดีซึ่งมีความสาคัญมากในคนไทย
โดยเฉพาะอย่างยิ่ง anti-Mia
เป็นแอนติบอดีซึ่งยังไม่มีการผลิตเป็นการค้าเพราะเป็นแอนติบอดีที่ไม่มีความสาคัญในคนตะวันตก
แต่มีความสาคัญมากในคนไทย และมีการร้องขอจากโรงพยาบาลต่าง ๆ
ให้ฝ่ายผลิตน้ายาแอนติซีรัมและผลิตภัณฑ์เซลล์ ศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติ
มีแอนติบอดีชนิดนี้ไว้จาหน่ายในราคาถูก ซึ่งที่ประเทศญี่ปุ่นมีเซลล์สายพันธุ์ของแอนติบอดีชนิดนี้
แต่เนื่องจากระยะเวลาในการดูงานในครั้งนั้นสั้นมาก
ไม่สามารถจะเรียนรู้ในรายละเอียดของงานการสร้างเซลล์พันธุ์ได้ ทาง Dr.Uchikawa หัวหน้าฝ่าย Blood
group และ Dr. Nakagima ผู้อานวยการฯ ที่ Tokyo Metropolitan Blood Centre, Japanese Red Cross
Society กรุงโตเกียว ได้เสนอให้ไปดูงานอีกครั้ง
โดยต้องใช้เวลาหลายเดือนจึงจะสามารถศึกษาในรายละเอียดของงานการสร้างเซลล์สายพันธุ์ได้ทั้งหมด
และเนื่องจากศูนย์บริการโลหิต มีโครงการจะพัฒนาการตรวจ minor blood group อื่น ๆ
เพิ่มเติมในผู้บริจาคโลหิต โดยใช้เครื่อง PK7300 เพื่อให้งานด้าน red cell serology
เจริญทัดเทียมกับประเทศญี่ปุ่น ซึ่งสามารถตรวจ minor blood group
ที่มีความสาคัญทางคลินิกในผู้บริจาคโลหิตได้อย่างสมบูรณ์ ครบถ้วนทุกราย
ดังนั้นจาเป็นอย่างยิ่งที่ต้องมีเซลล์สายพันธุ์ monoclonal rare antibody เป็นของตัวเอง
จึงมีความจาเป็นต้องส่งบุคลากร ไปดูงานเพื่อให้สามารถนาความรู้มาพัฒนาการสร้างเซลล์สายพันธุ์
monoclonal rare antibody ต่าง ๆได้

3. 4. วัตถุประสงค์และเป้ าหมาย
4.1 เพื่อพัฒนางานการสร้างเซลล์สายพันธุ์ Monoclonal rare antibody ในประเทศไทยให้
เจริญทัดเทียมกับประเทศญี่ปุ่น
4.2 เพื่อพัฒนางาน Red cell serology ของประเทศไทย ให้สามารถตรวจ minor blood
group อื่น ๆในผู้บริจาคโลหิตได้เพิ่มขึ้น ซึ่งเป็นประโยชน์ในงานการผลิตเซลล์มาตรฐาน
และเป็นประโยชน์แก่ผู้ป่วยที่สร้าง Multiple antibodies ทาให้สามารถหาโลหิตที่เข้ากัน
ได้ให้ผู้ป่วยได้ง่าย และรวดเร็วทันเวลาขึ้นโดยมีต้นทุนที่ถูกลงกว่าเดิม
4.3 เพื่อกระชับความสัมพันธ์ในการร่วมมือและความช่วยเหลือกันทางวิชาการ ของศูนย์บริการ
โลหิตแห่งชาติ สภากาชาดไทย และ Tokyo Metropolitan Blood Centre, Japanese
Red Cross Society
5. วิธีการดาเนินการ
เดินทางไปศึกษาวิธีการสร้างสายพันธุ์ของแอนติบอดีต่าง ๆ อย่างละเอียด ที่ ฝ่าย Blood Group,
Tokyo Metropolitan Blood Centre, Japanese Red Cross Society, Tutsumi, กรุงโตเกียว
ประเทศญี่ปุ่นเป็นนานเวลา 3เดือน
6. แผนปฏิบัติงาน
6.1 การสร้างเซลล์สายพันธุ์ Mouse Monoclonal Antibodies
6.1.1 ฉีดกระตุ้นหนูใช้เวลาประมาณ 3 สัปดาห์
6.1.2 การทาฟิวชั่น B lymphocyte ของหนูกับเซลล์มะเร็งหนูประมาณ 1 สัปดาห์
6.1.3 การทดสอบทาง Serology กับ red blood cell ประมาณ 2สัปดาห์
6.2 การสร้างเซลล์สายพันธุ์ Human Monoclonal Antibodies
6.2.1 การแยก B lymphocyte ในผู้บริจาคโลหิตที่สร้างแอนติบอดีและการ infect B
lymphocyte ของคนด้วย EB virus ใช้เวลาประมาณ 2 สัปดาห์
6..2.2 การทาฟิวชั่น B lymphocyte ของคนกับเซลล์ B lymphocyte ที่เป็นมะเร็ง
ประมาณ 2สัปดาห์
6.2.3 การทดสอบทาง Serology กับ red blood cell ประมาณ 2สัปดาห์
7. การติดตามและประเมินผลโครงการ
7.1 สามารถนาความรู้ที่ได้มาสร้างเซลล์สายพันธุ์ Monoclonal rare antibody ชนิดต่าง ๆ ทั้ง
Mouse monoclonal antibodies และ Human monoclonal antibodies
7.2 สามารถกระชับความสัมพันธ์ในความร่วมมือและช่วยเหลือกันทางวิชาการของศูนย์บริการ
โลหิตแห่งชาติ สภากาชาดไทย และ Tokyo Metropolitan Blood Centre, Japanese
Red Cross Society

4. Training project of Monoclonal Antibody Cell Line Production Method
At Tokyo Metropolitan Blood Centre, Japanese Red Cross Society
1. Training project responsibility
Antiserum and Standard Cell Preparation Section of National Blood Centre, Thai Red
Cross Society.
2. Trainee
Miss Kallaya Kerdkaewngam (Medical Scientist Level 5)
3. Cause and Principles
Since Miss Kallaya Kerdkaewngam attended Blood Service Training Course 2010 in
Japan during 18 July to 10 August 2010, she expresses strong interest in monoclonal rare
antibody cell line production method. This field in Japan is extremely advanced comparing to
underdeveloped practices at Thai Red Cross Society, especially some species of monoclonal
rare antibodies available in Japan such as anti-C, anti-E, anti-c, anti-e, anti-P1, anti-Lea, anti-
Leb, anti-Jka, and anti-Mia. These antibodies are playing greater important roles in Thais as
well as Japaneses.
Prime study will be focused on anti-Mia which is not commercialized antibody as it is not
clinical significant antibody in Caucasians but very important in Thais. Recently, there are
growing requests from hospitals forcing National Blood Centre of Thai Red Cross Society to
produce this anti-Mia at low cost. At the moment, National Blood Centre of Thai Red Cross
Society cannot produce anti-Mia cell line clone but there is the production of this cell line
clone in Tokyo Metropolitan Blood Centre of Japanese Red Cross Society. As Blood Service
Training Course 2010 in Japan was not long enough to cover in-depth detail of Monoclonal
cell line production, Dr.Uchikawa (Head of Blood Group Section) and Dr.Nakagima
(Director) of Tokyo Metropolitan Blood Centre, Japanese Red Cross Society introduced Dr.
Soisaang Phikulsod (Director) of National Blood Centre, Thai Red Cross Society to sponsor a
trainee for specific purpose of Monoclonal Cell Line Production as soon as possible.
In the meantime, National Blood Centre of Thai Red Cross Society issues project to
improve testing of rare blood groups among donors utilizing PK7300 for upper level red cell
serology in Thailand in order to be in similar standard of Japan that provides PK7300 test for
every donor antigen profile clinically significant blood group antigen.

5. Therefore, it is necessary to sponsor our staff to attend this training, especially whose
capability in learning method of monoclonal cell line production is excellent as well as will be
the key person in developing monoclonal rare antibodies cell line clone in Thailand.
4. Objectives and Goals
4.1 To develop monoclonal rare antibodies cell line clone production in Thailand up to the
standard practice currently offer in Japan.
4.2 To develop Red cell serology in Thailand for minor blood group tying in donors by
PK7300 which is not only valuable in standard cell production but also for multiple-
antibody patients which blood bank can easier supply suitable blood for them in time at
improved economical budget.
4.3 To strengthen relationships of helping and pooling knowledge in blood transfusion
services between National Blood Centre of Thai Red Cross Society and Tokyo
Metropolitan Blood Centre of Japanese Red Cross Society.
5. Method
National Blood Centre of Thai Red Cross Society sponsors a staff for training at Tokyo
Metropolitan Blood Centre of Japanese Red Cross Society situates at Tutsumi in Tokyo, Japan
for the period of three months.
6. Planning
6.1 Production cell line clone of mouse monoclonal antibodies.
6.1.1 Mouse immunization: 3 weeks.
6.1.2 Fusion mouse B-lymphocyte with mouse myeloma: 1 week.
6.1.3 Red blood cell serology testing: 2 weeks.
6.2 Production cell line clone of human monoclonal antibodies.
6.2.1 Separation B-lymphocyte from donor that produces rare antibody and test infection
of EB virus: 2 weeks.
6.2.2 Fusion human B-lymphocyte with human myeloma: 1 week.
6.2.3 Red blood cell serology testing: 2 weeks.
7. Follow up result
7.1 Trainee earns knowledge that capable to produce new cell line clone of mouse
monoclonal rare antibodies and human rare monoclonal antibodies.
7.2 Trainee develops stronger relationship in helping and pooling knowledge in blood
transfusion services between National Blood Centre of Thai Red Cross Society and Tokyo
Metropolitan Blood Centre of Japanese Red Cross Society.