crispr

1. L'editing genomico è una tecnologia che interviene in maniera
precisa per trovare e correggere gli errori genetici all'interno
dell'intero genoma, per fare questo ci sono vari metodi: la
tecnica ZFN, la tecnica TALEN e la tecnica CRISPR.

2. La tecnica ZFN
La prima tecnica scoperta fu la tecnica ZFN (Zinc-Finger
Nucleases).Il principio base del funzionamento di questa
tecnica è l’utilizzo delle nucleasi a dita di zinco, che sono
degli enzimi di restrizione che vengono progettati per
mirare sequenze di DNA.

4. La tecnica TALEN
 La seconda tecnica scoperta fu la tecnica TALEN (
Transcription Activator- Like Effector Nucleases ).
Questa tecnica sfrutta enzimi ( nucleasi effettrici)
che fossono essere programmate per trovare e
tagliare sequenze di DNA specifiche.

5. La tecnica CRISPR-cas
 La tecnica più recentemente scoperta e più usata è la tecnica
CRISPR ( Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic
Repeats ). Il principio base del funzionamento di questa
tecnica è che gli enzimi di restrizione Cas insieme alle
sequesnte CRISPR vengono utilizzati per modificare geni
all’interno degli organismi.
 Ci sono vari tipi di enzimi Cas: Cas9, CasX, Cas12a e Cas13.

7. CRISPR-cas9
 Il DNA viene tagliato dove è complimentare con
l’RNA guida
 L’HDR (Homology Directed Repair) lega la nuova
sequenza al posto del segmente toagliato.
CasX
 È l’evoluzione della Cas9 perche “risolve” i problemi
che aveva la Cas9: è più piccola ed è più
maneggevole

8. Cas12a
 è ancora più maneggevole della CasX, è più precina e
taglia in modo sfalsato (sticky ends) quindi è più
facile da ricucire.
Cas13
 Scinde solo l’RNA
 Rimane legata al bersaglio e quindi scinde altre molecole
di RNA virale.