2. Candidate cell sources for regenerative medicine include:
1. ES cells, 2. Fetal cells, and 3. Adult stem cells.

3. Generation of bone tissue of desired sizes and shapes
Sheet-style biodegradable polymer, Hybridization of the PLGA
PLGA (200 um thick) as a scaffold with collagen microsponge
Collagen
microsponge
overlay the interstices of
the fabricated web-like
PLGA sheets

4. The cell-seeded sheets were rolled up
around a silicone rod,and cultivated
them in vivo for 4 weeks at the
subcutaneous tissue.
Cylinder-shaped bone

5. Bone knots
bone of more complex shapes
We can control bone shape completely

6. Generation of phalanges by the PLGA hybrid sheet
with marrow-derived mesenchymal cells.
phalange-like bone
Thumb of
the graduate student

7. In vitro and in vivo
chondrogenesis
2W
H
E
4
W
8W
Toluidine
blue

8. HE
Toluidine
blue
2W 4W 8W
x 200
Implantation of Cell X in pelleted micromass culture into the
nude mice

9. (%) 100 E-MSC100 (%) 100 E-MSC214
80
E-GFP(+)
Trop-I(+)
80
E-GFP(+)
oxytocin
Trop-I(+)
60
oxytocin
5-azaC
5-azaC
oxytocin
60
5-azaC
oxytocin
5-azaC
non
non
40
non
non
40
20
Endometrium 20
0
Feeder (-) Feeder (+) 0
Feeder (-) Feeder (+)
Primary culture
Limiting dilution E-MSC100
DAPI a actinine Cx43 Merge
E-MSC214
E-MSC100 p E-MSC214p
DAPI a actinine Cx43 Merge

10. 最近の U7 の誘導率の増加
movie
QuickTime˛ Ç∆
DV/DVCPRO - NTSC êLí£ÉvÉçÉOÉâÉÄ
ǙDZÇÃÉsÉNÉ`ÉÉÇå©ÇÈÇΩÇflÇ…ÇÕïKóvÇ≈Ç∑ÅB

11. 0
A B C H
100
Pipette
d
200
a
300
2sec 400
E-MSC100 1sec
b c
0 100 200 300 400 500 600
D E F I
5% %FS
site-a
Pipette
site-b
site-c
E-MSC214 2 sec 1 sec
site-d
time 1s
J
G 10
APD90 MDP AMP Rate Pacemaker(+) E-MSC100 E-MSC214
8
msec mV mV s n
E-MSC100 326±12 -55±1 56±7 0.9±0.1 3/17 6
%FS
E-MSC214 185 ±16 -48±3 56±3 2.4±0.2 16/22
4 n=9 n=10
Mean ± SE
APD; action potential duration, 2
MDP; Maximum diastolic potential, AMP; amplitude 0
Mean ± SE

12. 移植細胞の体内動態追跡システム
ナノバイオトレースシステム
細胞治療において移植された細胞がどこに、どのように
存在しているかを知ることは治療評価において重要。
現在までに移植細胞の体外検出システムは存在しない。
【 目的 】
ドナー細胞およびレシピエントに影響を及ぼさない標識マーカ
ーで細胞をラベリングし、体外画像機器にて検出するシステム
を確立する。
マーカー；造影剤
画像機器； MRI

13. Super Paramagnetic Iron Oxide (SPIO)
超常磁性体酸化鉄
Feridex 150~250nm Resovist 57nm
T2 短縮効果強い
1mL 中にフェルカルボトラン 540mg （鉄 24.9mg ）
添加物： D- マンニトール、乳酸、水酸化ナトリウム

14. SPIO Labeling
Fe
Fe Fe
Fe Fe Fe
Fe Fe
Fe Fe
Fe Fe
Fe
Fe Fe Fe
Fe
Fe
Fe Fe Fe Fe Fe
Fe Fe
Phagocytosis SPIO labeled cell
or
Pinocytosis
SPIO 効果 ； T2 短縮（信号低下）
•正常肝細胞は鉄コロイド
を貪食するので信号が低下
する
•貪食能のない病変は信号
が低下しないので白く浮き
出て見える
T2 強調 SPIO 造影 T2 強調

15. Berlin Blue stain
10% FBS DMEM
0.1% Risovist

16. SPIO incubation for 2 days
TEM
Risovist particles
1500x
Pinocytotic vesicle

17. 3 hours 2 weeks 4 weeks
MRI
T2W
H-E
BB

18. 先天性代謝異常症 に対 する幹細胞治療法 の開発
リソソーム病とは ムコ多糖の分解酵素の欠損
グリコサミノグリカン分子（デルマタン硫
遺伝的要因によるリソソーム酵素活性の低下 酸・ヘパラン硫酸・ケラタン硫酸・コンドロ
イチン硫酸・ヒアルロン酸）がリソソーム内
リソソーム内に分解されない分子が発生 に蓄積することにより、細胞・組織・器官の
機能異常が生じる。
これがリソソーム外に排泄されず進行的に蓄積する。
細胞機能が低下し、臨床症状を呈する。 特異顔貌、骨形成異常、聴覚・視覚・気道・
de Duve (1966) 心血管・関節可動域の異常、精神発達遅滞
リソソームの電子顕微鏡写真
神経幹細胞と骨髄間葉系幹細胞の GUSB 活性値の比較
U/mg protein äeéÌç◊ñEÇÃGUSBäàê´ î|ó{è„ê¥ÇÃGUSB äàê´
U/mg protein
840.3
1000 45 34.2
900 40
800 35
700 30
600 25
500 13.7
400 20
300 141.8 126.1 15
70.6 61.6 2.5 3.9
200 24.8 0.0 10 1.3 1.0 0.0
100 5
0 0
DEC Th1 H162 H123 3521 DEC Th1
UET13 ‰`ë—ååcontrol
KUSA/A1 KUSA/A1
ê_åoä≤ç◊ñE ê_åoä≤ç◊ñE
福原康之 、奥山虎之 らによる

19. Distribution of GUSB GUSB-positive cells
activity in treated mouse brain
in the brain
2 or 8 wk after
Sakurai, Ohashi et al.
transplantation
Subventricl
e
Reduction of GAGs
contents after
transplantation
T-CS HA
600 * * 100 ** ** ** Cortex
90
500 80
400 * 70
60
300 50
40
200
nmol/hr/mg nmol/hr/mg
30
100 20
10
0 0
MPS VII
Normal Treated
VII
Normal Treated
Treated VII MPS MPS VII MPS MPS VII
MPS
VII
Normal
TreatedNormal TreatedNormal TreatedNormal Olfactory
Untreated Untreated Untreated MPS MPS VII MPS MPS VII MPS MPS VII
VII VII VII
4wk 8wk 16wk
Untreated Untreated Untreated
bulb
4wk 8wk 16wk Bar equals 200 mm

20. Improvement of cognitive function
Acquisition (d0-d5)
Target quadrant
Mean non-target
quadrants
Probe test
(d6)
Untreate Treated Normal
d MPS VII MPS VII

21. 平成 15 年 平成 16 年 平成 17 年
細胞 の調整（骨髄由来細胞）・培養法 の開発 と改良
疾病モデルマウスの SCID 化 バリデーション（移植、 Chip 、核型、表面マーカー、分化形
質）
大動物（ブタ）による移植実験
ヒト細胞 に関 する CPC の設立 臨床 プロトコールの作製・倫理委員会審査
倫理委員会審査中 間葉系細胞による「皮膚創傷治癒」に対する臨床研究
国立成育医療 センターにおけ
る Cell Processing
Center

22. National Research Institute
for Child and Health Development
Tsuchiya Mori
Takahashi
Terai
Matsumoto
Shibuya Takeda
Nasu

23. National Center for Child Health and Development