1. PROTEINE PLASMATICE
Prof.CSI Dr. Cristiana TANASE
PROTEINE PLASMATICE
Consideratii generale
Functiile proteinelor plasmatice
Mentinerea presiunii coloidosmotice (albumina)
Transport (proteine carrier: transferina, ceruloplasmina, albumina)
Aparare a organismului (imunoglobuline, sistemul complementului, etc)
Enzime – informatii asupra afectarii de tesuturi sau organe (LDH, TGP, TGO), alte (MMP,
SOD)
Coagulare si fibrinoliza (protejare impotriva afectarii sistemului vascular)
Variatii fiziologice: in sarcina (primele luni scadere, ultimele luni crestere); modificari ale
volumului sanguin (caldura, frig, efort)
Variatii patologice:
- Hiperproteinemii (in special cresteri γ globuline): deshidratare; stari febrile, inflamatii
cronice, nefroza, tuberculoza, diabet insipid, crestere monoclonala – mielom
multiplu, macroglobulinemie, crestere policlonala – ciroza hepatica, sarcoidoza,
LES.
- Hipoproteinemii: inanitie, hiperhidratare, tulburari de absorbtie, biosinteza deficitara
(insuficienta hepatica), hipercatabolism, anemii, hemoragii acute, pierderi proteice
la nivelul rinichiului, tractului digestiv, tegumentului, sechestrare-ascita, afectiuni
hepatice cronice, tumori maligne.
Semnificatie clinica
raport albumina/globuline (A/G): 1,2-1,5.
cresterea raportului – fara semnificatie
scaderea raportului A/G < 1 – patologii cu scaderea sintezei de albumina / patologii care
cresc sinteza de globuline.
modificarea raportului A/G plasmatice induce aparitia disproteinemiei din inflamatia acuta
caracterizata prin reducerea concentratiei plasmatice de albumina si cresterea α1
si α2 globulinelor, evidentiate prin electroforeza proteinelor plasmatice.
ALBUMINA
Consideratii generale
Reprezinta 55-60% din totalul proteinelor plasmatice;
Principalul agent al presiunii coloidosmotice plasmatice;
Rol important ca molecula carrier pentru o serie de elemente endogene si exogene;
Valori de referinta: 3,5-5,2 g/dL.
Semnificatie clinica
Semnificatie clinica
2. TRANSFERINA / SIDEROFILINA
- β-globulina sintetizata in ficat cu rol in transportul Fe;
- rata de sinteza este invers proportionala cu depozitele de Fe;
Valori de referinta: 2-3,6 g/L
Indicatii de testare:
diagnostic diferential intre anemia feripiriva si cea din bolile cronice;
diagnosticul supraincarcarii cu Fe (hemocromatoza)
Semnificatie clinica:
Valori crescute: anemia feripriva, sarcina;
Valori scazute: anemia din bolile cronice, inflamatii acute, hemocromatoza
CERULOPLASMINA
PROTEINE DE FAZA ACUTA
PROTEINE DE FAZA ACUTA
Raspunsul proteinelor la faza acuta
PROTEINA C-REACTIVA
hs-CRP
AMILOIDUL A SERIC /SAA
Semnificatie clinica
OROSOMUCOIDUL / α1 glicoproteina acida
FIBRINOGENUL
Semnificatie clinica
HAPTOGLOBINA
α1-ANTITRIPSINA
Semnificatie clinica
α2-MACROGLOBULINA
3. SISTEMUL COMPLEMENTULUI
IMUNOGLOBULINELE
IMUNOGLOBULINA G (IgG)
IMUNOGLOBULINA A (IgA)
IMUNOGLOBULINA M (IgM)
IMUNOGLOBULINA D (IgD)
METODE DE DETERMINARE A PROTEINELOR
ELECTROFOREZA PROTEINELOR
Electroforegrama serului uman
Valori de referinta electroforeza
de proteine
ASPECTE PATOLOGICE ALE ELECTROFOREZEI
ALTE TEHNOLOGII PROTEOMICE
ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)
conceptul care stă la baza metodei ELISA este interacţia specifica antigen-anticorp (Ag-
Ac);
Western Blot
metoda analitica pentru detectarea si identificarea proteinelor din probe biologice,
inclusiv biofluide (ser, plasma sau LCR).
Electroforeza probei care contine proteina de interes
Transfer electroforetic pe o membrana (blotare)
Imunomarcarea proteinei de interes cu anticorpi specifici (primari si secundari)
Vizualizarea proteinei tinta (reactie antigen-anticorp)
Electroforeza bidimensionala 2D
metodă de analiza utilizata in cercetarea proteomica prin care se realizeaza separarea si
analiza amestecurilor complexe de proteine;
separarea proteinele se realizeaza:
- în prima etapa în funcţie de punctul izoelectric;
- în a doua etapa greutatea moleculara;
cea mai răspândită metodă de realizare a profilului proteic şi de cuantificare a proteinelor.
proteine provenite din diferite surse: biofluide, etc;
Rezultate 2D
Tehnologia de multiplexare
Multiplexarea xMAP array dezvoltată de corporația Luminex reprezintă o tehnologie
proteomică avansată ce permite identificarea şi cuantificarea simultană a biomarkeri
(paneluri – pana la 100 de analiti) dintr-un volum foarte mic de probă biologică într-
un timp relativ scurt, cu o înaltă acuratețe.
4. Această tehnologie ofera avantajul unei game impresionante de aplicații în sfera
cercetării ştiintifice şi în diagnosticul clinic.
EGF - factorul de crestere epidermal
FGF-2 - factorul de crestere al fibroblastelor
VEGF - factorul de crestere al endoteliului vascular
GM-CSF - factorul de stimulare a coloniilor de granulocite si macrofage
IFNY
IL-1α
IL-2
IL-4
IL-6
IL-8
IL-10
IL-12(p70)
MIP-1α - proteina de inhibare a macrofagelor
PDGF - factor de crestere derivat din trombocite
TNF α - factorul de necroza tumoral
Paneluri de biomarkeri
Paneluri de biomarkeri: cardiovascular, cancer, etc
Bibliografie