20081217_07袁國芳_食品所紅麴產業服務平台

1. 食品所紅麴產業服務平台 Bioresource Collection and Research Center Food Industry Research and Development Institute Dec. 16, 2008 The service plateform of Monascus in FIRDI

3. BCRC 客戶服務系統 生物資源 資料庫 http://www.bcrc.firdi.org.tw

4. 登入 BCRC 客戶服務系統 會員 身分 完成客戶 資料登錄 下載客戶 資料表 下載訂購單 或各類服務 申請表 受理 * 送件 第一次登錄的新客戶 舊客戶 新增會員 會員 登入 登入生物資源 資料庫查詢 紅麴菌資料 * 受理要件： 1. 客戶資料表 ( 新客戶 ) 2. 訂購單或各類服務的申請單 3. 生物安全委員會同意書 ( 購買或寄存感染性生物材料之客戶 ) 4. 費用 紅麴菌株提供

5. 1. 由 BCRC 首頁登入生物資源資料庫 2. 輸入「 Monascus purpureus 」查詢 3. 點入任一株，如 31497 閱讀資料 4. 由「 BCRC 客戶服務系統 」訂購菌株 31497

6. Morphological characteristics Molecular characteristics Sequences of partial  -tubulin gene Colonies:  growth rate and morphology on CYA (5  C , 25  C , 37  C ) 、 MEA ( 25  C ) 、 G25N (25  C ) Microscopic structures:  anamorph & teleomorph Identify on the species level 紅麴菌種鑑定

8. 生物資源中心業務現況 2008 年各類服務合計 924 件

12. 紅麴高產菌株 ☆ : 有 ○ : 實驗室規模 ◎ : 中間工廠規模 食品所機能性紅麴菌種及製程開發

16. a. The plasmid pMS-1.5hp was linearized by Fsp I restriction enzyme. b. The Fsp I-linearized pMS-1.5hp was mixed with 1 mM ATA and protoplasts. c. The Fsp I-linearized pMS-1.5hp was mixed with 10 units Fsp I restriction enzyme and protoplasts. d. The Hpa I-linearized pMS-1.5hp was mixed with 10 units Hpa I restriction enzyme and protoplasts. e. Number of transformants per 5 ug linear plasmid. The values were based on three determinations. Efficient transformation using aurintricarboxylic acid (ATA) Chen, Y.-P., Chen, I.-C., Hwang, I.-E., Yuan, G.-F., Liaw, L.-L., Tseng, C.-P. (2008). Selection of an effective red-pigment producing Monascus pilosus by efficient transformation with aurintricarboxylic acid. Biosci. Biotechnol. Biochem .72:3021-3024. 紅麴菌遺傳轉型技術 119 ± 11 48 ± 4 159 ± 24 17 ± 2 M. pilosus e Hpa I (10 units) d Fsp I (10 units) c REMI Treated by ATA (1mM) b Linear plasmid (non-REMI) a Transformation methods Experiment

17. 紅麴菌基因庫

21. 抗細菌 抗真菌試驗 活性篩選平台 Trichophyton mentagrophytes 32066 Malassezia furfur 22243 Scopulariopsis brevicaulis 31751 Cryptococcus neoformans var. neoformans 22241 Rhizopus oryzae 32880 Candida albicans 20512 Penicillium pinophilum 31621 Staphylococcus aureus subsp . aureus 10451 Paecilomyces variotii 33174 Pseudomonas aeruginosa 11633 Myrothecium verrucaria 32334 Klebsiella pneumoniae subsp . pneumoniae 16082 Glomerella cingulata 31564 Escherichia coli 11634 Cladosporium cladosporioides 32841 Bacillus subtilis subsp . subtilis 10255 Chaetomium globosum 31605 Trichoderma virens 31613 Aureobasidium pullulans 32842 Trichoderma viride 33129 Aspergillus brasiliensis 30506

22. 測試細胞 抑制腫瘤細胞試驗 胃癌細胞 (AGS) 乳癌細胞 ( MCF-7) 子宮頸癌細胞 ( HeLa) 肝癌細胞 ( HepG2) 人類肺纖維細胞 ( MRC-5) 利用微量色度分析法 （ MTT ） 以 ELISA Reader OD540nm 吸光值 測定細胞存活率。 篩選流程 活性篩選平台

23. 抗氧化活性測試 活性篩選平台 此原理是藉由提供氫來清除脂質過氧化物自由基，進而達到抑制氧化鏈鎖反應之進行。 DPPH 為一安定自由基， 因此可利用此自由基來評估樣品之供氫能力。 DPPH 自由基清除能力分析 (DPPH Radical Scavenging Assay) 在非酵素系統中，利用 phenazine methosulfate (PMS) 及 β-nicotinamide adenine dinucleotide (β-NADH) 作用生成超氧陰離子，而超氧陰離子會進一步將 nitro blue tetrazolium (NBT) 還原成 diformazan ，此化合物在 560 nm 下有最大的吸光值，故可藉由偵測 560 nm 的吸光值，即可得知樣品清除超氧陰離子的能力。 SOD 超氧陰離子清除能力分析 (Superoxide Radical Scavenging Assay) 其原理為利用化學氧化劑產生具有活性的陽離子自由基 (ABTS·+) ，與樣品反應後，以 734 nm 偵測吸光值，並以 Trolox 標準品換算抗氧化能力。此法的優點為可適用於測定脂溶性與水溶性物質，方法簡便迅速，適用多種測定樣品。 TEAC 總抗氧化力分析 (Trolox Equivalent Antioxidant Capacity, TEAC Assay) 抗氧化能力分析 總多酚類含量測定是利用標準品沒食子酸 (Gallic acid) 的標準曲線計算樣品之總多酚類化合物的含量。 總多酚含量檢測 (Determination of Total Phenolic Compounds) 類黃酮含量測定是利用標準品槲黃素 (Quercetin) 之標準曲線計算樣品中之類黃酮含量。 類黃酮含量檢測 (Determination of Flavonoid Content) 抗氧化活性成分分析 原理簡介 平台名稱 平台種類

24. 特定生理標的活性分析 活性篩選平台 與細胞增生、凋亡、分化、生殖、維持細胞正常功能相關。與其他類固醇受體協同作用，參與多種功能調控 維生素 A 酸受體 (Retinoid Acid Receptor) 調節活性分析 RAR 調控人體新陳代謝，與眾多慢性新陳代謝疾病相關 甲狀腺荷爾蒙受體 (Thyroid Hormone Receptor) 調節活性分析 TR 腎上腺皮質激素受體參與免疫反應、血糖利用、發炎反應、抗壓的調節等生理功能 腎上腺皮質素受體 (Glucocorticoid Receptor) 調節活性分析 GR 代謝性相之荷爾蒙篩選平台 雌性荷爾蒙受體與乳癌之治療及預防，停經後骨質疏鬆症及心血管疾病等防治有關 雌性荷爾蒙受體 (Estrogen Receptor) 調節活性分析 ER 調控子宮內膜發育、受精卵着床、乳房表皮細胞成熟等。為開發墮胎藥及治療子宮肌瘤、子宮內膜組織異位、乳癌等之標的 黃體素受體 (Progesterone Receptor) 調節活性分析 PR 雄性荷爾蒙受體，與前列腺癌的發生與移轉相關 雄性荷爾蒙受體 (Androgen Receptor) 調節活性分析 AR 性荷爾蒙篩選平台 β-catenin 為一控制細胞分裂的因子，活性與直腸癌、肝癌、腦癌、乳癌、食道癌等密切相關 β-catenin 癌症調控活性分析 抗癌活性分析 相關生理功能 平台名稱 平台種類