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飛入尋常百姓家的分生技術
PCR
主講者:吳重進
學歷:中山醫學院醫技系理學士
中山醫學院醫研所醫學研究所理學碩士
台灣大學法律系司法組法學士
經歷:阮綜合醫院血清組醫檢師
行政院公平交易委員會助理
看見醫事檢驗所負責人
現職:優品醫事檢驗所 分生室主任
Polymerase Chain Reaction
1G PCR
2G PCR
3G PCR
PCR 在臨床上的應用
• 傳染病檢測
– 病毒:HBV, HCV, HDV, HIV, HPV, HSV, EBV, JCV
– 細菌:Chlamydia, Gono
– 原蟲:Trichomonas
PCR 在臨床上的應用
• 遺傳疾病篩檢:
– HLA-B27
PCR 在臨床上的應用
• 個人化醫療:
– HLA-B*1502
– HLA-B*5801
– CYP2C19
HBV DNA
• 臨床用途
– 診斷:GPT>參考值上限之兩倍,HBV DNA>10,000 copies/mL
– 治療:每三個月監控一次,以病毒量下降十倍為有療效。
– 停藥:血中測不到病毒。
– 監控:停藥後每半年監控一次。
– 復發:病毒量上升。
HBV DNA
• HBsAg (+), HBV DNA (-) ?
– 經過治療。
– HBsAg弱陽性。
• HBsAg (-), HBV DNA (+) ?
驗錯
Occult infection of HBV
HBV YMDD
• HBV抗藥性突變株
• 口服抗病毒藥:
– Lamivudine 肝安能
– Adefovir 肝適能
– Telbivudine 喜必福 (孕婦適用)
– Entecavir 貝樂克 (最常用)
– Tenofovir 惠立妥 (抗藥性最低)
HCV RNA
• Anti-HCV (+), HCV RNA (-) ?
• Anti-HCV (-), HCV RNA (+) ?
曾經感染但已自然痊癒
經過治療
Anti-HCV弱陽性
洗腎病患
免疫不全
HCV genotype
• HCV共分6型:Genotype 1 ~ 6 。
• 亞型:1b, 2a, 2b, 6a, 1a, …
• 干擾素對Genotype 1療效不佳,亦復發。
• Daclatasvir (坦克干) 只對1b有效。
EBV DNA
• 主要疾病: Infectious mononucleosis
• 一般用途: Nasopharyngeal carcinoma marker
HLA-B27
案例
• 兒子HLA-B27帶原,雙親卻無帶原?
• HLA-B27是否會隔代遺傳?
HLA-B27
• 僵直性脊椎炎診斷與預防
• 更適合用在女性、青春期青少年
• 一人陽性,二等親以內建議篩檢
• 親子鑑定?
史蒂文生症
HLA-B*1502
• Carbamazepine藥害基因
• Carbamazepine
– 精神科
– 神經內科
– 腎臟科
• 健保代碼: 12196B
HLA-B*5801
• Allopurinol 藥害基因,自費。
• Allopurinol可降低尿酸合成
– 第二線用藥
– 腎臟功能差
– 泌尿道結石
CYP2C19
• 藥物代謝基因: clopidogrel、proton pump
inhibitors等。
• HIV RT-PCR :縮短空窗期
• HPV DNA :不再是女性的專利
• Chlamydia DNA :減少陽性率
• Gono DNA :提高檢出率
• Trichomonas DNA :取代鏡檢法
• HSV DNA :病灶的確認
二十一世紀性病套檢
HIV RT-PCR
突破空窗期
HPV DNA
可能的問題
• 為什麼沒有病毒量?
– Ans: 病毒量不具臨床意義,且是人工判讀,主觀性強。
• 棉棒和抹片刷,採檢上有何差別?
– Ans :根據文獻,沒有差別。
• 男性的檢體是什麼?
– Ans :切片;棉棒加尿液。
• 肛門、口腔可以驗HPV嗎?
– 肛門採檢方式同生殖器;口腔以漱口方式。
可能的問題
• 報告簡陋
– 醫院檢驗科的要求。
• 有無認證(衛署許可、查驗登記)?
– 因無健保給付,並不要求查驗登記。
Chlamydia/Gono DNA
• Chlamydia是不孕症必驗項目;Gono是精卵
捐贈必驗項目。
Chlamydia/Gono DNA
Trichomonas vaginalis
男性尿道炎病原菌
• Gono
• Chlamydia
• Trichomonas
• Ureaplasma urealyticum
• Ureaplasma parvum
• Mycoplasma hominis
• Mycoplasma genitalium
HSV DNA
IgG IgM
HSV-I + -
HSV-II - +
HSV DNA
HSV DNA in CSF

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