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飛入尋常百姓家的分生技術PCR
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宋 唐
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PCR的臨床應用:傳染病診斷, 遺傳病篩檢, 個人化醫療.
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飛入尋常百姓家的分生技術PCR
1.
飛入尋常百姓家的分生技術 PCR 主講者:吳重進 學歷:中山醫學院醫技系理學士 中山醫學院醫研所醫學研究所理學碩士 台灣大學法律系司法組法學士 經歷:阮綜合醫院血清組醫檢師 行政院公平交易委員會助理 看見醫事檢驗所負責人 現職:優品醫事檢驗所 分生室主任
2.
Polymerase Chain Reaction
3.
1G PCR
4.
2G PCR
5.
3G PCR
6.
PCR 在臨床上的應用 • 傳染病檢測 –
病毒:HBV, HCV, HDV, HIV, HPV, HSV, EBV, JCV – 細菌:Chlamydia, Gono – 原蟲:Trichomonas
7.
PCR 在臨床上的應用 • 遺傳疾病篩檢: –
HLA-B27
8.
PCR 在臨床上的應用 • 個人化醫療: –
HLA-B*1502 – HLA-B*5801 – CYP2C19
9.
HBV DNA • 臨床用途 –
診斷:GPT>參考值上限之兩倍,HBV DNA>10,000 copies/mL – 治療:每三個月監控一次,以病毒量下降十倍為有療效。 – 停藥:血中測不到病毒。 – 監控:停藥後每半年監控一次。 – 復發:病毒量上升。
10.
HBV DNA • HBsAg
(+), HBV DNA (-) ? – 經過治療。 – HBsAg弱陽性。 • HBsAg (-), HBV DNA (+) ? 驗錯 Occult infection of HBV
11.
HBV YMDD • HBV抗藥性突變株 •
口服抗病毒藥: – Lamivudine 肝安能 – Adefovir 肝適能 – Telbivudine 喜必福 (孕婦適用) – Entecavir 貝樂克 (最常用) – Tenofovir 惠立妥 (抗藥性最低)
12.
HCV RNA • Anti-HCV
(+), HCV RNA (-) ? • Anti-HCV (-), HCV RNA (+) ? 曾經感染但已自然痊癒 經過治療 Anti-HCV弱陽性 洗腎病患 免疫不全
13.
HCV genotype • HCV共分6型:Genotype
1 ~ 6 。 • 亞型:1b, 2a, 2b, 6a, 1a, … • 干擾素對Genotype 1療效不佳,亦復發。 • Daclatasvir (坦克干) 只對1b有效。
14.
EBV DNA • 主要疾病:
Infectious mononucleosis • 一般用途: Nasopharyngeal carcinoma marker
15.
HLA-B27
16.
案例 • 兒子HLA-B27帶原,雙親卻無帶原? • HLA-B27是否會隔代遺傳?
17.
HLA-B27 • 僵直性脊椎炎診斷與預防 • 更適合用在女性、青春期青少年 •
一人陽性,二等親以內建議篩檢 • 親子鑑定?
18.
19.
史蒂文生症
20.
HLA-B*1502 • Carbamazepine藥害基因 • Carbamazepine –
精神科 – 神經內科 – 腎臟科 • 健保代碼: 12196B
21.
HLA-B*5801 • Allopurinol 藥害基因,自費。 •
Allopurinol可降低尿酸合成 – 第二線用藥 – 腎臟功能差 – 泌尿道結石
22.
CYP2C19 • 藥物代謝基因: clopidogrel、proton
pump inhibitors等。
23.
• HIV RT-PCR
:縮短空窗期 • HPV DNA :不再是女性的專利 • Chlamydia DNA :減少陽性率 • Gono DNA :提高檢出率 • Trichomonas DNA :取代鏡檢法 • HSV DNA :病灶的確認 二十一世紀性病套檢
24.
HIV RT-PCR
25.
突破空窗期
26.
HPV DNA
27.
28.
可能的問題 • 為什麼沒有病毒量? – Ans:
病毒量不具臨床意義,且是人工判讀,主觀性強。 • 棉棒和抹片刷,採檢上有何差別? – Ans :根據文獻,沒有差別。 • 男性的檢體是什麼? – Ans :切片;棉棒加尿液。 • 肛門、口腔可以驗HPV嗎? – 肛門採檢方式同生殖器;口腔以漱口方式。
29.
可能的問題 • 報告簡陋 – 醫院檢驗科的要求。 •
有無認證(衛署許可、查驗登記)? – 因無健保給付,並不要求查驗登記。
30.
Chlamydia/Gono DNA • Chlamydia是不孕症必驗項目;Gono是精卵 捐贈必驗項目。
31.
32.
Chlamydia/Gono DNA
33.
Trichomonas vaginalis
34.
男性尿道炎病原菌 • Gono • Chlamydia •
Trichomonas • Ureaplasma urealyticum • Ureaplasma parvum • Mycoplasma hominis • Mycoplasma genitalium
35.
36.
HSV DNA IgG IgM HSV-I
+ - HSV-II - +
37.
HSV DNA
38.
HSV DNA in
CSF
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