В НЦРМ проводится полное комплексное исследование спермы. В центре работает врач эндокринолог-андролог Епанчинцева Елена Александровна

1. Исследование спермы

2. Епанчинцева Елена Александровна-
эндокринолог, андролог Новосибирского
центра репродуктивной медицины, к.м.н

3. • Спермограмма —
анализ эякулята (спермы), используемый в
медицине для
установления фертильности мужчины и
выявления возможных заболеваний
половой системы. Спермограмму
назначают при жалобах супружеской пары
на бесплодие, также спермограмма
показана донорам спермы и людям,
планирующим криоконсервацию спермы.

4. • Условия получения эякулята
• Мужчинам перед сдачей спермы для анализа
рекомендовано воздержание от половой
жизни и мастурбации в течение 2-7 дней. Этот
период рекомендован для стандартизации условий
проведения анализа, для того чтобы можно было
сравнивать результаты, полученные в
разных лабораториях. Также обычно рекомендуют
за 2-5 дней избегать чрезмерного употребления
крепких спиртных напитков (хотя
влияние алкоголя на качество спермы в этот период
не показано). Также в течение нескольких дней до
анализа следует избегать посещения саун, парных,
термальных ванн и прочих помещений с очень
высокой температурой, так как высокая
температура снижает подвижность
сперматозоидов.

5. • Наиболее распространенным способом
получения спермы для анализа
является мастурбация. Этот метод
рекомендован ВОЗ. Эякулят получают в
посуду, предложенную соответствующим
медицинским учреждением. Как правило,
используют специальные стерильные
стаканчики для сбора жидких биологических
жидкостей. Возможно получение эякулята вне
медицинского учреждения с последующей
транспортировкой.
• Для подсчета сперматозоидов используют
счетную камеру для спермы («Камера
Маклера»)

6. • Основной составляющей частью спермограммы
является микроскопический анализ эякулята, при
котором определяют характеристики клеточных
элементов спермы, а именно:
• количество сперматозоидов по группам (прогрессивно-
подижные, слабо-подвижные, неподвижные)
• Подвижность сперматозоидов
• Морфологические характеристики сперматозоидов
• Содержание лейкоцитов
• Содержание эритроцитов
• Количество незрелых клеток сперматогенеза
• Количество круглых клеток
• Кроме того, обязательно фиксируются
макроскопические параметры эякулята: объем спермы,
цвет, запах, время разжижения и вязкость эякулята, pH,
липоидные тельца, наличие слизи.

7. • Методика исследования спермальной морфологии по строгим
критериям Крюгера
•
Для оценки необходимо использовать окрашенный препарат эякулята
(мазок эякулята на стекле). Авторами строгих критериев
рекомендуется использовать окраску по Papanicolaou, однако также
могут применяться другие красители, способные окрашивать части
сперматозоида в разные цвета. Используется световая микроскопия,
увеличение 1000, с масляной иммерсией и окуляром-микрометром.
Должно быть подсчитано, по крайней мере, 200 сперматозоидов.
Подсчет выполняется дважды, таким образом, всего оценивается 400
сперматозоидов. Двойная оценка является простейшим и
эффективным элементом системы внутреннего контроля качества
исследования. В счет принимается только целый сперматозоид, т.е. с
головкой и хвостом. Если имеется много свободных головок или
хвостов (>20% от общего числа сперматозоидов), это отмечается
отдельно. Сперматозоид, не имеющий морфологических дефектов,
определяется как нормальный. Все отклонения от нормальной
морфологии определяются как дефекты. Все пограничные случаи
также должны быть отнесены к дефектам. Сперматозоид считается
нормальным, когда головка имеет ровный овальный контур с хорошо
определяемой акросомой, занимающей 40—70% головки. Не должно
быть дефектов шейки, средней части, хвоста.

8. • Выделяются следующие категории дефектов:
• дефекты головки (большая; вытянутая; грушевидная;
аморфная; круглая, маленькая, с акросомой или без;
вакуолизированная (более 20% головки содержит
вакуоли); малая акросома; любые комбинации)
• дефекты шейки и средней ("согнутая" шейка (шейка и
хвост расположены под углом более чем 90° к
продольной оси головки); асимметричное прикрепление
средней части к головке; утолщенная или с неровным
контуром средняя часть; тонкая средняя часть; любые
комбинации)
• дефекты хвоста (короткий; согнутый (более 90°);
свернутый; двойной (хвост-шпилька); любые
комбинации)
• цитоплазматические капли (остатки цитоплазмы у
основания головки)— допускается не более 30% размера
нормальной головки.

9. • МАР - Тест
• Иммунологическое бесплодие обусловлено образованием
антиспермальной оболочки на поверхности сперматозоида, которая
разрушает мембраны отдельных его частей. В результате этого
процесса, даже активные сперматозоиды, фактически, перестают
участвовать в процессе оплодотворения женской яйцеклетки.
• MAR-тест – метод исследования спермы, который показывает какая
доля подвижных сперматозоидов покрыта антиспермальными
антителами. Кроме того, данное исследование позволяет установить
локализацию прикрепления антиспермальных антител: головка,
шейка, хвост. Таким образом, MAR тест позволяет выявить
сперматозоиды, которые "выключены" из оплодотворения, несмотря
на их сохранную подвижность и нормальную морфологию.
С помощью MAR-теста определяют долю активных сперматозоидов,
покрытых антиспермальными антителам, которые невозможно
выявить методом спермограммы.

10. • НВА-тест (анализ связываемости сперматозоидов с гиалуроновой кислотой),
который можно проводить параллельно со спермограммой, позволяет
определить индекс зрелости сперматозоидов.
• Гиалуроновая кислота - глюкозамингликан, широко распространённый в
эпителиальной, соединительной и нервной тканях. Она является главным
компонентом ооциткумулюсного комплекса. Мембрана зрелого
сперматозоида обязательно несёт рецепторы связывания с гиалуронатом.
Формирование сайтов связывания с гиалуроновой кислотой происходит на
этапе созревания удлинённых сперматид одновременно с другими
важными событиями: компактизацией ДНК, заменой гистонов на протамины,
формированием участков связывания с зоной пеллюцида, экструзией
избыточной цитоплазмы.
• Экспериментально было подтверждено, что сперматозоиды, способные к
связыванию с гиалуроновой кислотой (ГК), характеризуются:
• низким уровнем фрагментации ДНК
• низкой частотой анеуплоидии
• отсутствием апоптотических маркеров
• способностью к связыванию с зоной пеллюцида
• нормальным количеством цитоплазмы

11. • HALO-тест (исследование хроматина
сперматозоидов) предлагает возможность
определить индекс фрагментации. Дополнительное
знание индекса фрагментации в сперме может быть
полезным для того, чтобы изначально проводить
соответствующее лечение бесплодия. Это позволит
избежать (возможной ретроспективной
малоэффективной) терапии, проводимой в течение
нескольких месяцев. Причиной этого является
возникновение нарушений в наследственном
материале сперматозоидов, так называемой
фрагментации.
• У 25% мужчин с нормальными результатами
спермограммы выявляется высокая доля
сперматозоидов с фрагментацией ДНК.

12. В нашем центре проводится
комплексное обследование спермы
• Новосибирский центр репродуктивной
медицины ГК Мать и Дитя
• Г.Новосибирск, ул.Героев Революции,3
• 8(383)319-03-12
• Сайт www.artmedgroup.ru