-SWEDISH- Kromatografimetoder använda vid renframställning av proteiner. Redovisning i gymnasiekurs.

2. Alla kromatografiska metoder bygger på att en blandning
fördelas mellan en stationär fas och en mobil fas.
Exempel: Vid papperskromatografi är papperet den stationära
fasen medan lösningsmedlet, som papperet doppas i, är den
mobila fasen.

4. Vid gelfiltreringskromatografi utgörs den stationära fasen av
porösa polymerkulor medan den mobila fasen består av en
vattenlösning.
Blandningen separeras med avseende på storlek. Mindre
molekyler tränger längre in i polymerkulornas porer och rör sig
därför långsammare genom bädden, medan större molekyler
träder in mindre eller inte alls och tar sig på så sätt snabbare
genom bädden.

5. Vid jonbyteskromatografi utgörs den stationära fasen av
laddade polymerkulor medan den mobila fasen består av en
vattenlösning.
Blandningen separeras med avseende på
laddning. Föreningar som har samma laddning
som kulorna repelleras och färdas därför
ganska snabbt genom kolonnen. Föreningar
som har motsatt laddning skapar jonbindning
med kulorna och kommer ha svårare att
komma ut ur kolonnen.

6. Vid affinitetskromatografi utgörs den stationära fasen av en
agarosgel på vilken proteinets ligand är fastmonterad. Den
mobila består av en lösning vars innehåll beror på vilket protein
det är fråga om.
Blandningen
separeras med
avseende på
bindningsaffinitet.
Endast proteinet
själv kommer bindas
till sin egen ligand.

7. Gelfiltreringskromatografi - inte så effektiv men har den
enklaste mekanismen.
Jonbyteskromatografi - effektivare men omständigare.
Används mest.
“The ion-exchange technique is so common in biopharmaceutical purification
that any given separation process can be assumed to have at least one IEC
step. ” - BioPharm International Guide, 2003
Affinitetskromatografi - effektivast av de tre men går inte alltid
att använda, samt är väldigt dyr eftersom allt måste anpassas
efter proteinet i fråga.
Metoderna kombineras ofta med varandra och andra metoder,
både kromatografiska och icke-kromatografiska.

8. http://www.bio.davidson.edu/courses/molbio/molstudents/01gr
noland/affinchr.html
http://en.wikipedia.org/wiki/Size-exclusion_chromatography
http://www.separations.us.tosohbioscience.com/ServiceSuppo
rt/TechSupport/ResourceCenter/PrinciplesofChromatography/I
onExchange
http://www.lenntech.com/Data-sheets/Ion-Exchange-
for-Dummies-RH.pdf
http://www.biopharminternational.com/biopharm/data/articlesta
ndard//biopharm/522003/80026/article.pdf