3. • Ciljano sustav za primjenu lijeka je poseban oblik sustava za primjenu
lijeka, gdje je terapijsko sredstvo selektivno usmjerena ili dostaviti samo
na svom mjestu djelovanja ili apsorpcije, a ne na ne-ciljnim organima ili
tkivima ili stanice,
Izvor: https: //www.dalton.com/conjugation
4. Ciljanje na asialoglycoprotein receptor (ASGP-R) je najviše univerzalno koristiti metoda koja se
koristi kao ciljni receptor za primjenu lijeka u hepatocitima,
Izvor: https: //www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168365915002345
7. Orosomucoid priprema
• Svježe humani serum (oko 1,2 L) je prijenosed za cijev za dijalizu i usljed dijalized preko noći na 4 ℃ protiv 20 litara 0,05 M natrijevog
acetata, pH 4.5.
• dializiran plazma je centrifugad na 14000 rpm tijekom 10 minuta pri 4 ℃.
• Pellet je odbačena i supernatant je filtared kroz 0.45u filter.
• Dijalizira i filtrira serum je prošlo kroz stupac DEAE-celuloze, kolona ispere s 0,05 M NaAc pH 4.5 dok eluat imao absorbanciju pri 280
nm, manja od 0,10, Kolona se zatim ispere s 0,1 M NaAc pH 4 do apsorpcije ispiranje, manji od 0.1,
• Orosomucoid eluat će dovesti do 50% zasićenja s amonijum sulfat. dopustiti to je da se miješa preko noći na 4 ℃.
• Centrifugiranjem pri 14000 rpm, 15 minuta, 4 stupnjeva. i supernatanta su uzete.
• Prema supernatant je dodatied polako Krutina amonij-sulfat da se dovesti otopine na 92% zasićenja,
• Centrifugi na 14000 rpm tijekom 30 minuta na 4 ℃. Odvoji se supernatant.
• Pellet se sprema i otopitid u minimalna količina vode i prenese u cijev za dijalizu, usljed dijalized to protiv 20 L vode za 2 dana pri 4 ℃.
• Pohranjeni na -20 ℃,
8. Asialoorosomucoid (AsOR) - brz desialyation
od glikoproteini
• Izolirani ili otopi u vodi.
• Isti volumen 0,1 N H2S04 se dodaje OR otopina.
• Smjesa zagrijava na 80 ℃ tijekom 1 h u voda.
• smjesa acidolizom je uklonjena iz vodene kupelji, neutralizirana s NaOH.
• Dijalizira nasuprot vodi s 2 promjenama roku od 48 sati, i zatim se liofilizira.
• Provjerite učinkovitost desialyation Warren testa
9. Postupak: EDC Reakcija se dobije
PL (Poli-L-lizina)
• 1. uravnoteže EDC do sobne temperature.
• 2. Priprema:
• 2 mg AsOR u 200 konjugacije puferu (MES 0.1 M, PH4.5).
• Do 2 mg PL u 500 ul konjugacije pufera.
• 3. Izmiješati dva rješenja.
• 4. Otopiti 10 mg EDC u 1 ml najčišćom vodom i odmah dodati 100 ul na nosač
• peptid riješenje.
• 5. Rad tijekom 2 sata na sobnoj temperaturi.
• 6, Pročišćavanje konjugata pomoću desalinizirajuće kolone.
• 7. U slučaju da se za pohranjivanje više od nekoliko dana, sterilni filter konjugata i očuvati u
sterilnu posudu na 4 ° C ili 20 ° C.
11. Ribavirin monofosfat konjugacija do AsOR
• Za kemijsku vezanje na RMP AsOR je korišten EDC!
• 1 mM RMP se obrađuje s 0,1 M EDC u 0.5 M MES pufer pH 6.0.
• Je zatim 0,01 mM AsOR u ukupnom volumenu od 2 ml.
• Smjesa AsOR-RMP reagira na 25 ℃ jedan dan.
• Konačna reakcijska smjesa je pročišćena dijalizom kroz membranu sa 12-14
k da nasuprot 4 litre destilirane vode i hladnog sa 6 do 10 razmjene.
• kvantitativnog određivanja prinosa konjugacije je procijenjena promjene
smjene AsOR i AsOR-RMP konjugata na denaturiranju SDS stranica
elektroforeza
