project

1. Зерттеудің мақсаты мен міндеттері
Мақсаты: Иммун тапшылығы жағдайындағы фитопрепараттардың иммун модульдеуші
әсерін анықтау.
Міндеттері:
1. Азатиоприн мен фитопрепараттардың иммундық жүйенің функционалды жағдайына
әсерін зерттеу.
2. Азатиоприн мен фитопрепараттардың гематологиялық көрсеткіштерге әсерін
анықтау.
3. Азатиоприн мен фитопрепараттардың тимустағы гистоморфологиялық жағдайына
әсерін зерттеу.

2. Зерттеудің өзектілігі
Ағзаның иммундық жүйесінің бұзылуымен бірге жүретін жағдайлардың пайда болуы, дамуы және
түзетілуі қазіргі заманның маңызды мәселелерінің бірі болып табылады. Қазіргі уақытта иммун
тапшылығы жағдайларын зерттеуге көп көңіл бөлінуде, оның қатысуымен организм шетелдік антигендерге
тиісті түрде жауап бере алмайды және иммундық жауаптың осы немесе басқа байланысын жүзеге асырады.
"Иммун тапшылығы" немесе "иммун тапшылығы жағдайлары" (IDS) термині иммундық жауаптың бір
немесе бірнеше механизмінің ақауына байланысты қалыпты иммундық жағдайдың бұзылуын білдіреді.
Әдеби деректер клиникалық практикада кортикостероидтарды, эстрогендерді, цитостатиктерді, кейбір
бактерияға қарсы препараттарды ұзақ қабылдаумен байланысты иммун тапшылығы жиі байқалатынын
көрсетеді.
Біздің елімізде және шетелде жүргізілген көптеген ғылыми зерттеулер көрсеткендей, иммундық жүйенің
функционалды белсенділігін қалпына келтіру әртүрлі патологиялық жағдайларды кешенді емдеудің
сәттілігінің міндетті шарты болып табылады.

3. Зерттеудің жаңалығы
• 1.Кешенді өсімдік құралы азатиоприннің жасушалық иммундық реакцияларға,
антиденогенезге және макрофагтардың функционалды белсенділігіне агрессивті әсерін
жоюға қабілетті, бұл иммунологиялық көрсеткіштерді бұзылмаған жануарлардың
деңгейіне дейін қалпына келтіруде көрінеді. Ең жоғары белсенділік in vivo және 0,3
мг/мл - in vitro зерттеулерінде 300 мг/кг дозасын енгізу кезінде байқалды.
• 2.Азатиоприн қан элементтерінің қайта бөлінуіне себеп болды: лимфоциттер
құрамының төмендеуі (лимфопения) және сегменттелген нейтрофилдер құрамының
жоғарылауы. Қанның басқа нысандық элементтерінің саны айтарлықтай өзгерген жоқ.
Кешенді МС енгізу тышқандардың лейкоциттік қан формуласын қалыпқа келтірді.
• 3.Азатиоприннің зақымдаушы әсері жағдайында өсімдік дәрісін енгізу иммунитеттің
орталық органы — тимустың құрылымдық жай-күйін және цитоархитектоникасын
қалпына келтіреді.

4. Теориялық маңызы
Теориялық және клиникалық иммунология саласындағы қарқынды
зерттеулер иммунитеттің әртүрлі буындарының дисфункциясынан туындаған
және иммунокорригациялық терапияны қажет ететін аурулардың кең
ауқымын анықтауға ықпал ету.

5. Практикалық маңызы
Кешенді өсімдік дәрілерінің тиімділігін клиникалық бағалау үшін қоспаға іріңді-қабыну
аурулары (фурункулез, карбункулез, стрептодермия, стафилодермия, трофикалық жаралар)
бар республикалық тері-венерологиялық диспансердің тері бөлімшесінде емделіп жатқан 34
науқас тамақтану рационына енгізілді. Науқастар тетрациклинді және цефалоспоринді
антибиотиктерді, детоксикациялық препараттарды және антибиотиктермен қабынуға қарсы
жақпа қолдануды қамтитын стандартты терапия аясында 21 күн ішінде күніне 2 рет "Байкал
-11" фитошайын алды. Иммундық жағдай бірыңғай әдістермен бағаланды: лимфоциттердің
субпопуляциясын анықтау (моноклоналды антиденелермен жанама иммунофлюоресценция
реакциясы); нейтрофилдердің фагоцитарлық белсенділігі; А, М және G класты
иммуноглобулиндерді анықтау; айналымдағы иммундық кешендерді анықтау

6. Зерттелетін объектілердің сипаттамасы және оларды
тәжірибелер сериясы бойынша бөлу
Эксперименттік зертеулер Нур-Султан каласының Назарбаев Университетінің ғылыми зертеу
зертханасында 10.01-27.03.22 аралығында жүргізілді.
Тәжірибелік зерттеулер екі жыныстағы SVA және F гибридтерінің жетілген 60 тышқандарында 6 серия
ретінде жүргізілді. Cалмағы 20-22г, зертханалық жануарлар питомнигінен алынды. Жануарлар суға еркін
қол жеткізе отырып, бірдей күтім мен тамақтану кезінде виварий жағдайында стандартты пластикалық
торларда ұсталды. Эксперименттік зерттеулер бұйрықтарда тұжырымдалған ережелер сақталған кезде
жүргізілді.
Классикалық иммуносупрессант - цитостатик азатиоприн және гербицид 2,4-дихлорфеноксиацет
қышқылы (2,4-Д).
Азатиопринді in vivo реакцияларында және 50 мкг/мл - in vitro - ға тең концентрацияда (экспозиция-1
сағат) дене салмағына 50 мг/кг дозада 6 серия ретінде (күн сайын, ауызша 5 күн ішінде) енгізді.

7. Кесте 1: Эксперименттік зерттеулерді тәжірибелер сериясы бойынша
бөлу
NN Серия атаулары Жануарлар саны
1 Бүтін жануарлар (интакты) 10
2. Бүтін жануарлар+азатиоприн 10
3. Азатиоприн+тікенекті элеутерококк 10
4. Азатиоприн+фитопрепарат (100 мгкг) 10
5 Азатиоприн+фитопрепарат (300 мгкг) 10
6. Азатиоприн+фитопрепарат (500 мгкг) 10

8. Қолданылған фитопрепараттар
1. Батпақты каламус тамырынан [Acorns calamus L.],
2. Дәрілік одуванчика тамырынан [tarafacum officinale Wigg ]
3. Күрделі өсімдік құралы қолданылды.[Matricaria chamomilla L.],
4. Дәрілік түймедақ гүлдері, раушан жамбастары [Rosa L.],
5. Кызыл-қызыл долана жемістері[ Crataegus sanguinea Rail],
6. Кара жапырақты ладан жапырақтары [Bergenia crassifolia L.].
7. Таулы құс шөптері [Poligonum aviculare L.] қатынасында 3:3:2:6:4:1:1
Фитоэкстрактілер 7 күн бойы тәулігіне 1 рет бір жануарға 0,2 мл көлемінде ауызша енгізілді.
Жануарлардың бақылау тобы сол жастағы және жыныстағы бұзылмаған тышқандардан тұрды
және тиісті көлемде ұқсас схема бойынша су алды.
Бақылау фитопрепарат – элеутерококк тікенекті

9. Зерттеу материалдары мен әдістері
 Ағзаның иммундық жүйесінің функционалдық жағдайын бағалау әдістері
 Гистоморфологиялық талдау әдістері
 Тимустың морфофункционалды аймақтарының жасушалық құрамын талдау
С.Б.Стефанов әдісі бойынша
 Нәтижелерді статистикалық өңдеу

10. Тәжірибе нұсқасы Тимус Көкбауыр
Салыстырмалы масса,
%
Клеткалық х 106 Салыстырмалы масса,
%
Клеткалық х 106
Бұзылмаған
жануарлар
0,100±0, 007 32,1±1,4 0,440*0,023 38,1*2,8
Азатиоприн, Аз, 50
мг/кг
0,070*0,004*' 20,7*1,9*' 0,350*0,008*' 22,6*1,1*'
Кешенді РС, 300 мг/кг 0,11*0,01*2 31,5*1,З*2 0,430*0,032*2 37,3±2,4*2
Кесте 3
Азатиоприннің әсері және кешенді МС түзету кезінде тышқандардың иммундық органдарының массасы мен жасушалық
өзгерісі:
Ескертпе: * - р<0,05 жануарлардың интактілік тобына қатысты;
- p < 0,05 азатиоприн алған жануарлар тобына қатысты.

11. 11
10
11
32.1
20.7
31.5
0
5
10
15
20
25
30
35
Бұзылмаған жануарлар Азатиоприн Кешенді РС
Тимус
Салыстырмалы масса Клеткалық

12. 10
28
44
106
24.86
37.3
0
20
40
60
80
100
120
Бұзылмаған жануарлар Азатиоприн Кешенді РС
Көкбауыр
Салыстырмалы масса Клеткалық

13. Азатиоприннің әсері және кешенді МС түзету кезінде тышқандардың
иммундық органдарының массасы мен жасушалық өзгерісі:
Азатиопринді енгізу тимус пен көкбауыр массасының 33% - ға және 22% - ға төмендеуіне әкелді.
Бұзылмаған жануарлармен салыстырғанда; тимус пен көкбауыр жасушаларының орташа есеппен
26% және 41% - ға төмендеуі байқалды {кесте. 3). Жүргізілген эксперименттер көрсеткендей,
азатиопринді иммунодепрессия жағдайындағы тышқандарға 300 мг/кг оңтайлы эксперименттік -
терапиялық дозада кешенді өсімдік дәрісін (МС) енгізу жоғарыда аталған барлық көрсеткіштерді
қалыпқа келтірді.

14. Тәжірибе нұсқасы Сегменттелген
нейтрофилдер
Эозино-
филдер
Моноциттер Лимфоциттер Таяқша ядролық
нейтрофилдер
Бұзылмаған
жануарлар
42,0±2,2 0,3 ±0,1 3,3 ± 0,2 52,3±2,2 2,1 ±0,1
Аз, 50 мг/кг 53,5±1,9*1 0,2 ±0,1 3,9 ±0,2 40,3±1,6*1 2,1 ±0,2
Комплексті. РС,
300 мг/кг
41,1±2,4*2 0,3 ±0,1 3,4 ±0,6 53,3±1,8*2 2,1 ±0,2
Кесте 4
Азатиопринді иммуносупрессия және кешенді МС түзету жағдайларында тышқандар қанының
лейкоциттік формуласының өзгеруі:
Ескертпе: * - р<0,05 жануарлардың интактілік тобына қатысты;
* 2-p<0,05 азатиоприн алған жануарлар тобына қатысты.

15. 0
10
20
30
40
50
60
Бұзылмаған жануарлар АЗ 50 мг/кг Комплексті РС
Сегменттелген нейтрофилдер Лимфоциттер

16. Азатиопринді иммуносупрессия және кешенді МС түзету жағдайларында
тышқандар қанының лейкоциттік формуласының өзгеруі:
4-кестедегі мәліметтерден көрініп тұрғандай, азатиоприн қан
элементтерінің қайта бөлінуіне себеп болды: лимфоциттер құрамының
төмендеуі (лимфопения) және сегменттелген нейтрофилдер құрамының
жоғарылауы. Қанның басқа нысандық элементтерінің саны
айтарлықтай өзгерген жоқ. Кешенді МС енгізу тышқандардың
лейкоциттік қан формуласын қалыпқа келтірді.

17. Кесте 5. Кешенді МС әсерінен тышқандардың көкбауыры АОК
санының және қан сарысуындағы гемагглютининдер
типтерінің деңгейлерінің өсуі.
Тәжірибе нұсқасы Салыстырмалы
Көкбауыр
массасы, %
АОК саны Титр
гемагглютининдар
көкбауырға 106 спленоциттарға
Бұзылмаған жануарлар аа 0,48 ± 0,03 14212±1738 89 ±6 160 ±39
Азатиоприн, Аз, 50 мг/кг аа 0,29 ± 0,01 *' 4746 ± 631*1 51 + 6*1 70 ±19*1
Аз + РС, 100 мг/кг 0,37 + 0,02*2 9880 ± 726*2 66 ±5 92±21
Аз + РС, 300 мг/кг аа 0,44 ± 0,02*2 13873 ±839*2 93 ± 4*2 156±24*2
Аз + РС, 500 мг/кг 0,44 ± 0,02*2 8223 ±1119*2 73 + 10 150±24*2
РС, 300 мг/кг 0,47 ± 0,03 13951±1477 87 ±9 152 ±30
Аз+ Элеутерококк
сығындысы ЭК, 5 мл/кг
0,44±0,02*2 13770 ±932*2 83 ±7 150±34*2

18. 0
2
4
6
8
10
12
14
16
Бұзылмаған жануарлар Азатриопин,50 мг/кг АЗ+РС,300 мг/кг
Chart Title
Салыстырмалы көкбауыр массасы АОК саны көкбауырға Спленоциттарға

19. Кешенді МС әсерінен тышқандардың көкбауыры АОК
санының және қан сарысуындағы гемагглютининдер
титрлерінің деңгейінің өзгеруі:
Зерттелетін дозадағы азатиоприннің лимфа түйіндерінің ұлғаю
индексімен көрсетілген жергілікті ӨСБ дамуына әсері реакция
индексінің 55,2% - ға төмендеуіне себеп болды. 100, 300 және 500
мг/кг дозаларда кешенді МС түзету үшін пайдалану осы көрсеткіштің
қалпына келуіне себеп болды. Оңтайлы доза 300 мг/кг болды, оның
түзету әсері салыстыру препаратымен салыстырылды - тікенді
элеутерококк сығындысы.

20. Сурет. 1. Тышқандардың тимусының құрылымы:
1-капсула, 2 - кортикальды зат, 3 - медулла, 4-қан тамырлары.
Микрофотография. Бекіту-10% бейтарап формалин. Гематоксилиннің түсі-эозин.

21. ИММУН ТАПШЫЛЫҒЫ ЖАҒДАЙЫНДА ТИМУС
МИКРОАНАТОМИЯСЫНЫҢ ӨЗГЕРУІ ЖӘНЕ ӨСІМДІК
АГЕНТІМЕН ТҮЗЕТУ
• Тимустың медулласында тимикалық денелердің саны мен мөлшері артты,
олардың мазмұны бұзылмаған жануарларға жақындады. Бұл деректер
азатиоприннің әрекеті нәтижесінде пайда болған органда деструктивті
өзгертілген және жойылған лимфоидты жасушалардың реутилизациясын
қамтамасыз ететін ГАССАЛЬ денелерінің функционалды белсенділігіне
МС-ның оң әсерін көрсетеді (Одинокова В.А., Смирнов В. Б., 1980).
• МС ретикулярлы жасушалар мен фибробластикалық қатардағы
жасушалардың құрамын түзетті, олардың көрсеткіштері тимустың
зерттелген аймақтарында іс жүзінде бұзылмаған жануарлардан
ерекшеленбеді. Сонымен қатар, субкапсулярлық аймақта және кортикальды
затта жасушалардың тығыздығы артып, ми затында төмендеді.

22. Қорытынды
1.Кешенді өсімдік құралы азатиоприннің жасушалық иммундық реакцияларға, антиденогенезге және
макрофагтардың функционалды белсенділігіне агрессивті әсерін жоюға қабілетті, бұл иммунологиялық
көрсеткіштерді бұзылмаған жануарлардың деңгейіне дейін қалпына келтіруде көрінеді. Ең жоғары
белсенділік in vivo және 0,3 мг/мл - in vitro зерттеулерінде 300 мг/кг дозасын енгізу кезінде байқалды.
2.Азатиоприн қан элементтерінің қайта бөлінуіне себеп болды: лимфоциттер құрамының төмендеуі
(лимфопения) және сегменттелген нейтрофилдер құрамының жоғарылауы. Қанның басқа нысандық
элементтерінің саны айтарлықтай өзгерген жоқ. Кешенді МС енгізу тышқандардың лейкоциттік қан
формуласын қалыпқа келтірді.
3. Азатиоприннің зақымдаушы әсері жағдайында өсімдік дәрісін енгізу иммунитеттің орталық органы —
тимустың құрылымдық жай-күйін және цитоархитектоникасын қалпына келтіреді.

23. Назарларыңызға рахмет!