Современные требования к преаналитическому этапу лаб. исслед
1. Венопункция
Продезинфицировать место Выполнить венопункцию Снять жгут и взять кровь
венопункции и наложить жгут в необходимые пробирки
Аккуратно Снять иглу
перемешать кровь
Причины прекращения тока крови во время венопункции
оптимум Спадение вены Конец иглы прилегает игла проколола
к стенке вены вену насквозь
2. Клинический случай
• 55-и летний мужчина госпитализирован с уровнем К-
6,9 ммоль/л. Все остальные показатели в норме.
• При повторных анализах К- 3.9 - 4.5 ммоль/л
(N 3.5 - 5.0 ммоль/л).
• Причина – активная «работа кулаком» при наложении
жгута > 5 мин.
• Увеличение уровня К связано с уменьшением
внутриклеточного отрицательного заряда во время
деполяризации клеток, что привело к выходу калия в
кровь.
3. Флеботомия
Источники ошибок:
- «работа» кулаком
- длительное сдавление (жгут)
- слишком тонкая игла
- недостаточное перемешивание
- избыточное встряхивание
- взятие проб через катетер
- пробы разбавлены инфузионными растворами
- длительная транспортировка
- нет идентификации
- перепутанные пробы
4. Порядок взятия
Посев
Сыворотка
Цитрат Рекомендации:
„Samples: From the
Гепарин Patient to the
Laboratory‘
ЭДТА GIT VERLAG
Фторид
5. Сыворотка
• Для получения сыворотки используются гранулы с
активатором свертывания (в пластике кровь
сворачивается плохо)
• Кровь должна отстоятся 20-30 мин. при комнатной
температуре
• Центрифугирование 10 мин.
• Четкое разделение сгустка и сыворотки
• Наложение жгута не > 1 мин. Не «работать» кулаком
6.
7. S-Monovette®
Инструкция
Кровь должна Свертывание в
сворачиваться горизонтальном
в положении
вертикальном
положении
9. S-Monovette®
Центрифугирования
S-Monovette® Сыв-ка 10 мин. 1.500 x g 20oC
S-Monovette® Сыв-Гель 10 мин. 2.500 x g 20oC
S-Monovette® Гепарин 10 мин. 2.500 x g 20oC
S-Monovette® Геп.- Гель 10 мин. 3.000 x g 20oC
или 15 мин. 2.500 x g 20oC
S-Monovette® ЭДТА-Гель 10 мин. 2.500 x g 20oC
S-Monovette® Цитрат 10 мин. 1.500 x g 20oC
10. Хранение и транспортировка проб
Пробы крови должны доставлятся в лабораторию как
можно быстрее
Разделительные гели или диффузионные фильтры
препятствуют попаданию веществ из эритроцитов в
сывороткуплазму после центрифугирования.
Сыворотка или плазма, которые не
были отделены от форменных
элементов не должны замораживаться ни
при каких обстоятельствах, так как это
приведет к тотальному гемолизу.
11. Хранение и транспортировка проб
Максимальный промежуток межу взятием
крови и центрифугированием для получения
сыворотки/плазмы не должен превышать 2-3
часа
При не долгом хранении сыворотка должна
находится в закрытой пробирке при температуре
+2 to 40C.
Сыворотка и плазма могут храниться при –20°C
продолжительное время
Специальные контейнеры-холодильники
должны использоваться при длительной
транспортировке
12. Влияние температуры и времени
Glukose
Глюкоза
90
80
70
60
mg/dl
50
40
30
20
10 из:
0 „ Samples : From the Patient to the Laboratory“
0 2 4 6 8 24 48 GIT Verlag
Часы
Stunden
Температура хранения:
o = 30° C
o = 23° C
o = 4° C
13. Влияние температуры и времени
ALAT
35
30
25
20
U/l
15
10
5
из:
0 „ Samples : From the Patient to the Laboratory“
0 2 4 6 8 24 48 GIT Verlag
Часы
Stunden
Температура хранения:
o = 30° C
o = 23° C
o = 4° C
14. Влияние температуры и времени
Калий
Kalium
12
10
8
mmol/l
6
4
2
0 из:
„ Samples : From the Patient to the Laboratory“
0 2 4 6 8 24 48
GIT Verlag
Часы
Stunden
Температура хранения:
o = 30° C
o = 23° C
o = 4° C
15. Влияние гемолиза
Гемолизированные пробы не должны
исследоваться, так как они приводят к
ложным результата и влияют на
методики.
Fe 500-раз больше в эритроцитах
ЛДГ 250-раз больше в эритроцитах
GOT 40-раз больше в эритроцитах
Калий 25- раз больше в эритроцитах
16. Причины гемолиза
Продолжительное или сильное
наложение жгута и «работа» кулаком
Слишком быстрое взятие
Длительное хранение или
транспортировка
Слишком высокаянизкая температура
Центрифугирование (2,000 до 2,500xg)
Загрязнение (спирт, инфузионный
раствор)
Гемолиз становится видимым
при концентрации Hb в сыворотке/плазме ~ 20 mg/dl
17. Причины гемолиза (27.540 проб)
Причины гемолиза N %
Слишком быстрое взятие крови 155 30,7
Взятие через «бабочку» 101 20,0
Взятие из катетера 119 23,4
Взятие из инфузионной линии 58 11,5
Переливание в пробирку 26 5,1
Гемолиз in vivo 9 1,8
Искусственное кровообращение 7 1,4
Замороженные пробы 4 0,8
Ошибки в обработке 1 0,2
Причины неизвестны 26 5,1
Итог 505 100
18. Vacuette® основные группы
• Клиническая химия
• Специльного
• Иммунология применения
• Микробиология
• Коагуология
• Гематология
19. Vacuette® компоненты системы
Двусторонняя игла
Стерильная двусторонняя игла,
которую можно использовать, для
одной и более пробирок Другие решения:
+
Держатель
Держатель с резьбой для иглы.
Поставляется в многоразовом и
одноразовом вариантах. Является
направляющей для пробирок в
момент взятия крови
+
Пробирка
Стерильная вакуумная
пробирка, содержащая
реактивы и другие добавки
20. Vacuette® пробирки
Идентификационное кольцо
(Полипропилен)
Безопасная крышка (Полиэтилен)
1 Резиновая пробка
(Бромбутилкаучук)
2 Бумажная этикетка с цветовым кодом (в
соответствии с ISO 6710)
3 Пробирки (Полиэтилентэрфталат)
4 Реагент (Li гепарин, ЭДТА и т.п.)
21. Пробирки VACUETTE® для сыворотки / плазмы
Z - Сыворотка LH / NH / AH - Плазма
Определение в сыворотке различных параметров для
клинической химии, микробиологической серологии, Определение в плазме различных параметров для
иммунологии, лекарственного мониторинга клинической химии
Стандартные: активатор образования
сгустка SiO2 .. Внутренняя стенка
покрыта активатором образования Стандартные:
сгустка 12-30 МЕ гепарина Li/ Na/NH4
Гель:
Транспорт! Олефинолигомер Гель:
Транспорт! Олефинолигомер
Гранулы:
Пипетирование! Полистирол Гранулы:
Пипетирование! Полистирол
Педиатрия: малые объемы
Педиатрия: малые объемы
Определение совместимости
крови для переливания по
сыворотке
Определение микроэлементов
Определение в сыворотке гепаринизированной плазме
микроэлементов
22. Пробирки VACUETTE® для исследования гемостаза
Система факторов Фибринолитическая
Тромбоциты
коагуляции система
Скрининговые тесты Количество Скрининговые тесты
Протромбиновое время -ПТ (PT) Тест на разницу фибриногена
Частично активированное тромбопластиновое время -АЧТВ (aPTT) Фибринолитическая емкость
Тромбиновое время Факторы тромбоцитов Тест на лизис еуглобулина
Рептилаза (Батроксобин) время Тромбиновое время
Фактор тромбоцитов 3 Рептилаза (Батроксобин) время
Фактор тромбоцитов 4
Оценка факторов - тромбоглобулин
Единичные факторы
Активность
Концентрация Плазминоген
Фукнции Тканевый активатор плазмингогена (t-PA)
Маркеры активации Время кровотечения
Адгезия Фибринолитические
Фрагменты протромбина 1+2 Агрегация
Тромбин -антитромбин III комплекс (TAT) Ретракция сгустка
маркеры
Мономеры фибрина (FM) Плазмин- 2- антиплазмин комплекс (PAP)
Фибринопептиды Продукты деградации фибрина
D-димеры Продукты деградации фибриногена
Ингибиторы Ингибиторы
Антитромбин III
Протеин C 2- антиплазмин
Протеин S Активатор ингибитора плазминогена (PAI)
Патологические ингибиторы C1 ингибитор
24. Пробирки для мочи
Пробирки Аксессуары
Определение в моче параметров клинической
химии Контейнер для мочи:
Без добавок: красная завинчивающаяся
круглое дно крышка, стерильный
Определение в моче после осаждения Контейнер для мочи:
параметров микроскопии
белая завинчивающаяся крышка с
клапаном, стерильный
Без добавок:
коническое дно
Контейнер для мочи:
желтая завинчивающаяся крышка со
встроенным держателем,
стерильный
Определение в моче со стабилизаторами
нестабильных аналитов или микробиологических
параметров.
Держатель:
8 см длина
20 см длина
С консервантом:
круглое дно
коническое дно
25. Предельные сроки постановки тестов при использовании пробирок для мочи
транспортировка/
Сбор мочи хранение при 4°C
центрифугирование анализ
1 - 4 часа
Осаждение
400g - 5мин. мочи
До 12
часов
Клиническая химия
До 24
часов
Клиническая химия
27. Пробирки Характеристики пробирок:
Определение параметров в
капиллярной крови. • Лучшее перемешивание крови с реактивами.
Для сыворотки: активатор
образования сгустка
Для сыворотки +гель: Пробирка объемом 250µl-500µl
транспортировка Пробирка объемом 500µl-1000µl
ЭДТА:
1,2 - 2,0 мг К3 ЭДТА
• Пробирка изготовлена из полипропилена
Для плазмы: (ПП). Длительный срок хранения.
12- 30 МЕ лития гепарина
Р-р цитрата: • Легко устанавливается на
3.2% = 0.109 Моль/Л твердую поверхность, так как
3.8% = 0.129 Моль/л имеет плоское дно, размер
11мм x 40мм
Стабилизатор/антикоа- • Подходит для всех
гулянт: NaF/KO моделей микроцентрифуг
флуорид Na/оксалат К
28. Параметры
Параметры крышки: Параметры этикетки:
• Работа с закрытой пробиркой благодаря • Отметка уровня наполнения пробирки позволяет
крышке с крестообразным клапаном контролировать корректное соотношение
кровь/реагент
• Взятие крови может происходить либо • окрашивание в соответствии с цветовым
через капилляр. Либо через воронку, кодированием по стандарту ISO 6710
либо через наконечник пипетки
• Крышка предотвращает испарение • Указан номер лота и срока хранения
образца
• простая работа с пробиркой
Отметки уровня наполнения:
• окрашивание крышки в соответствии с
цветовым кодированием по стандарту ISO
6710
Крышка с крестообразным клапаном
экономит время без потери
Объем капиллярной крови устанавливается по уровню
безопасности работы с крови отметки на пробирки Миниколлект(R)
29. Аксессуары
Капилляры для пробирок
Когда конец капилляра касается капли крови, то
она под воздействием капиллярного эффекта
поступает в пробирку Миниколлект
Воронка
Универсальное устройство для взятия крови, кровь под воздействием силы
тяжести поступает в пробирку Миниколлект
Несущие пробирки
• стандартный размер пробирки 13/75 мм
• подходит для многих гематологических анализаторов как
первичная пробирка
•подходит для большинства центрифуг
•затемненные пробирки для определения билирубина
Ланцеты
Автоматические одноразовые ланцеты с глубиной
прокола кожи 1, 1,5 и 2 мм
30. Процедура взятия капилярной крови
Порядок взятия крови:
Перед пункцией кожи
1. ЭДТА
приготовить все Аккуратно перемешать
2. Пробирки с другими
необходимые материалы
добавками
3. Пробирки для сыворотки
a
b