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第 29 卷 第 1 期                                                     作 物 学 报                                                                   V o l 29, N o. 1
                                                                                                                                               .
2003 年 1 月  105 110 页
              ~                                         A CTA A GRONOM ICA S I ICA
                                                                             N                                                  pp. 105 110  J an. , 2003
                                                                                                                                      ~



                                                                                                                        Ξ
根据 SSR 标记划分优质蛋白玉米自交系的杂种优势群

番兴明1  张世煌2  谭 静1  李明顺2  李新海2
( 1 云南省农业科学院粮食作物研究所, 云南 昆明 650205;                                2
                                                                      中国农业科学院作物育种栽培研究所, 北京 100081)

    摘 要 利用 SSR 标记技术对 18 个优质蛋白玉米 (Q PM ) 自交系和 4 个代表国内主要杂种优势群的普通玉米标准测验
    种进行杂种优势群划分, 研究热带、亚热带 Q PM 与温带玉米自交系之间的遗传关系。从 70 对引物中筛选出 39 对扩增
    谱带清晰且具有多态性的 SSR 引物, 在供试材料中检测到 134 个等位基因变异, 平均多态性信息量为 0. 55。根据扩增
    谱带建立 0、1 型数据, 计算 22 个自交系间的遗传相似值, 然后做聚类分析。结果表明, 供试的 18 个 Q PM 自交系可划
    分为 5 群: 第一群与旅大红骨种质的遗传距离较近, 包括 CM L 149、CA 339、CM L 154、长 631gÙ2、中系 096gÙ2、
                                                                 o         o
   CM L 166 和 CM L 164。第二群接近四平头种质, 包括 CM L 140、YM L 23、YM L 29 和 CM L 194。第三群接近瑞得种质,
    包括忻 9101gÙ2 和齐 205。第四群与兰卡斯特种质的距离较近, 包括 YM L 12 和 YM L 102。第五群与四个主要杂种优势
             o
    类群的距离都比较远, 包括 CM L 147、CM L 161 和 CM L 171。SSR 标记划群与田间产量配合力划分结果及系谱分析基
    本一致。

    关键词 SSR; 标记; 玉米自交系; 遗传相似系数; 杂种优势群
    中图分类号: S513. 035   文献标识码: A


Heterotic Group ing of Qua l ity Prote in M a ize Inbreds D iv ided by SSR M arkers
FAN X ing 2 ing  ZHAN G Sh i2 uang  TAN J ing  L IM ing 2Shun  L I X in 2 a i
               1                  2          1               2               2
          M                  H                                           H
( 1 Institu te of F ood C rop s, Y unnan A cad em y of A g ricu ltu ra l S ciences, K unm ing 650205, Y unnan P rov ince;   2
                                                                                                                                Institu te of C rop s B reed ing and
C u ltiva tion , CA A S , B eij ing 100081, C h ina )

Abstract H etero t ic g roup ing of 22 m a ize inb red lines, includ ing 18 qua lity p ro tein m a ize (Q PM ) lines and
4 dom est ic tem p era te comm on testers tha t rep resen t fou r hetero t ic g roup s u sed dom inan t ly in Ch ina, w ere
cla ssified by SSR m a rkers A set of 39 po lym o rp h ic SSR p ri ers w ere selected from 70 p ri ers, w h ich de2
                                 .                                          m                            m
tected 134 a lleles am ong the lines M ean po lym o rp h ism info rm a t ion con ten t w a s 0. 55. C lu ster ana ly sis
                                           .
w a s ba sed on the genet ic si ila rity coefficien t. F ive hetero t ic g roup s w ere determ ined am ong the 22 inb red
                                   m
lines: g roup 1 w a s of L uda R ed cob germ p la sm includ ing CM L 149, CA 339, CM L 154, Chang 631gÙ2,              o
Zhongx i096gÙ2, CM L 166 and CM L 164. G roup 2 w a s of Sip ing tou germ p la sm includ ing CM L 140,
                 o
YM L 23, YM L 29 and CM L 194. G roup 3 w a s of R eid germ p la sm includ ing X in 9101gÙ2 and Q i 205. o
YM L 12 and YM L 102 w ere included in L anca ster g roup. CM L 147, CM L 161 and CM L 171 can no t be in 2
cluded in the cu rren t g roup s T he resu lt s ba sica lly w ere ag reeab le w ith the p reviou s stud ies ba sed on com 2
                                    .
b in ing ab ility ana ly sis fo r y ield and ava ilab le p ed ig ree da ta.
Key words Si p le sequence rep ea t; M a rker; M a ize inb red line; Genet ic si ila rity; H etero t ic g roup
           m                                                                   m

  我国优质蛋白玉米 (Q PM ) 育种研究在解决优                                                        制了 Q PM 育种水平的进一步提高和种质创新研
质和高产的矛盾方面取得很大进展。目前所面临的                                                             究。番兴明等于 1999 年和 2000 年分别对 10 个白
关键问题是种质基础狭窄, 对 Q PM 自交系与国内                                                         粒 Q PM 自交系和 10 个黄粒 Q PM 自交系做部分双
普通玉米杂种优势群之间的遗传关系缺乏了解, 限                                                            列杂交分析, 将所研究的自交系分别划分为 4 个杂

    Ξ 基金项目: 云南省自然科学基金资助项目 (98C006Z) , 本研究在中国农科院作物所农业部作物遗传与育种重点开放实验室和 AM 2
      B I ET 2 ina L ab 进行。
        ON      Ch
      作者简介: 番兴明 (19632) , 男, 云南腾冲人, 研究员, 硕士, 主要从事玉米遗传育种研究。
                                      zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/
      R eceived on ( 收稿日期) : 2001207231, A ccep ted on ( 接受日期) : 2002202224
         © 1995-2004 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
zycnzj.com/ www.zycnzj.com
1                     作  物   学  报                    29 卷
 06


种优势群[ 1, 2 ]。本研究利用 SSR 标记对上述试验所                                             周后, 每个自交系混合收获 5g 叶片。按 Sagha i2
涉及的 18 个 Q PM 自交系和 4 个国内主要杂种优                                               M a roof CTAB 方法提取并纯化 DNA 。
                                                                                                                  [3]


势群的温带普通玉米测验种进行杂种优势群划分,                                                      1. 2. 2 SSR 反应及扩增产物检测方法  采用 10
进一步验证特殊配合力划群结果, 探索 Q PM 与普                                                  Λ PCR 反应体系, 包括 10 mm o lgÙ T ris2 l, 50
                                                                             L                                L       HC
通玉米杂种优势群之间的遗传关系。                                                            mm o lgÙ KC l, 2. 5 mm o lgÙ M gC l2 , 150 Λ o lgÙ
                                                                                   L                   L                m L
                                                                            dN T P , 0. 2 Λ o lgÙ SSR 引物, 0. 5 单位 T ag 酶和
                                                                                           m L
1 材料与方法
                                                                            20 ng DNA 模板。扩增程序为 94℃预变性 5 分钟;
1. 1 供试材料                                                                   再按 94℃ 1 分钟, 60℃ 2 分钟, 72℃ 2 分钟扩增
    包括 18 个 Q PM 自交系和 4 个国内普通玉米                                             35 个 循 环; 最 后 72℃延 伸 5 分 钟。 PCR 扩 增 在
杂种优势群的标准测验种 ( 黄早四、丹 340、 o 17 M                                             PTC 2200 型 PCR 仪上完成。 SSR 扩增产物在 4.
和 B 73 ) ( 表 1 ) 。供试自交系经多代自交, 遗传稳                                           5% 变性聚丙烯酰胺凝胶上分离, 银染检测 (H in f g¬
定。                                                                          酶切 Ф  X174 为分子量标准) 。本研究用 70 对 SSR
1. 2 SSR 分子标记分析                                                             引物对 22 个自交系进行分析, 选取其中扩增谱带
1. 2. 1  DNA 提取  玉米植株在温室生长 4~ 5                                             清晰且具有多态性的引物统计结果。


                                                     表 1  供试自交系及系谱来源
                                             Table 1   a ize inbreds L ines and ped igrees
                                                      M

  编号              自交系                                               系谱来源                                           适应区域
  N o.            Inb red s                                          Ped ig ree                                    Eco logy A dap tation
  Q1             CM L 149                                           G24Q PM                                        热带 ( T rop ical)
  Q2             CM L 140                                            Pop 62                                        热带 ( T rop ical)
  Q3             CM L 147                                            Pop 63                                        热带 ( T rop ical)
  Q4             CM L 154                                            Pop 62                                        热带 ( T rop ical)
                                                            南非温热互导 Q PM 种质
  Q5              YM L 23                                                                                          亚热带 ( Sub trop ical)
                                    ( S. A frica trop ical germ p lasm in trog ressing tem p erate germ p lasm )
  Q6              YM L 12                                           G31Q PM                                        亚热带 ( Sub trop ical)
                                                           南非温热互导 Q PM 种质
  Q7              YM L 29                                                                                          亚热带 ( Sub trop ical)
                                    ( S. A frica trop ical germ p lasm in trog ressing tem p erate germ p lasm )
  Q8             YM L 102                                           G31Q PM                                        亚热带 ( Sub trop ical)
  Q9             CM L 171                                           G25Q PM                                        热带 ( T rop ical)
  Q 10           CM L 194                                           S. A frica                                     亚热带 ( Sub trop ical)
  Q 11           CM L 166                                          Pop 66Q PM                                      热带 ( T rop ical)
  Q 12           CM L 161                                           G25Q PM                                        热带 ( T rop ical)
                长 631gÙ
                      o2
  Q 13                                                                  -                                          温带 ( T em p erate)
              (Chang631gÙ )
                        o2
  Q 14           CA 339                                             G33 Q PM                                       温带 ( T em p erate)
                中系 096gÙ  o2
  Q 15                                                                  -                                          温带 ( T em p erate)
             ( Zhongx i 096gÙ )
                            o2
  Q 16           CM L 164                                          Pop 65 Q PM                                     热带 ( T rop ical)
                忻 9101gÙ o2
  Q 17                                                                  -                                          温带 ( T em p erate)
               (X in9101gÙ )
                         o2
                                       亚热带种质 Pop 70Q PM 导入温带材料 ( 淮矮 141×中系 017)
  Q 18        齐 205 (Q i205)             ( Sub trop ical germ p lasm Pop 70Q PM in trog ress tem p erate           温带 ( T em p erate)
                                                         cro ss (W ei141×Zhongx i017) )
  T1               B 73                                             BSSS C5                                        温带 ( T em p erate)
  T2          丹 340 (D an340)                  白骨旅 9×有稃玉米 (Baigu L u9×Pob co rn )                                  温带 ( T em p erate)
  T3              M o17                                 C103×18722                                                 温带 ( T em p erate)
  T4        黄早四 (H uangzao 4)                 唐四平头杂株 ( T ang sip ing tou op en po llination )                      温带 ( T em p erate)



1. 3 数据分析                                                                   位 点的多态性信息量 ( Po lym o rp h ism info rm a t ion
    根据 PCR 扩增结果, 在相同迁移位置有带记                                                 con ten t, P IC ) 按公式
为 1, 无带记为 0, 缺失记为 9, zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/P IC = 1 -
                     建立数据库。标记
                                                                                                                   ∑f   2
                                                                                                                        i


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 1 期          番兴明等: 根据 SSR 标记划分优质蛋白玉米自交系的杂种优势群              
                                                         107


计算, 其中 f 2 表示 i 位点的基因频率[ 4 ]。遗传相似
              i                                                 与 M o 17 的遗传关系较近, 故划分在兰卡斯特群。
系数 ( Genet ic sim ila rity, GS ) 按公式 GS = m gÙ +
                                              (m                第五群包括 CM L 147、CM L 161 和 CM L 171, 距离
n ) 计算, 其中 m 表示基因型间共有的条带数目, n                                   国内的 4 个主要杂种优势群都很远。这一群自交系
表示基因型间有差异的条带数目[ 5 ]。聚类分析按                                       来自热带种质 G25 和 Pop 63, 具有不同的遗传背
U PGM A (U nw eigh ted p a ir g roup m ethod a rith 2           景。
m et ic averages) 方法进行。数据统计由 N T SYS 2 c          p                                表 2  SSR 分子标记结果
软件完成 。   [6]                                                                  Table 2  Results of SSRs Ana lysis

                                                                   编号       SSR 引物       位置          等位基因数 多态性信息量
2 结果与分析                                                            N o.    SSR p ri er
                                                                                  m      L oci      N o. of alleles   P IC
                                                                     1       Ph i056      1. 01            3          0.   43
2. 1 SSR 标记分析                                                        2       Ph i120      1. 11            3          0.   62
                                                                     3       Ph i127      2. 08            5          0.   63
     39 对 SSR 引物在 22 份自交系之间共检测到                                      4       Ph i029      3. 04            3          0.   52
134 个等位基因变异, 涉及 39 个 SSR 位点, 平均                                      5       Ph i053      3. 05            5          0.   59
                                                                     6       Ph i073      3. 05            4          0.   76
每个位点的等位基因数为 3. 44 个, 变化范围 2 7
                            ~                                        7       Ph i072        4              4          0.   71
个; 平均多态性信息量为 0. 55, 变化范围 0. 31~                                      8       Ph i092      4. 08            2          0.   42
                                                                     9       Ph i019      4. 11            4          0.   39
0. 77。详见表 2 和图 1。                                                   10       Ph i113       ~
                                                                                      5. 03 5. 04          2          0.   39
2. 2 遗传相似性分析                                                        11       Ph i048      5. 07            3          0.   53
                                                                    12       Ph i128      5. 07            3          0.   39
     根据 SSR 分析结果计算 22 个自交系间的遗传                                      13       Ph i085      5. 07            4          0.   64
相似系数 ( 表 3) , 其范围在 0. 48 0. 97 之间, 平均
                           ~                                        14       Ph i123      6. 07            3          0.   54
                                                                    15       Ph i057      7. 01            3          0.   51
0. 66。其中自交系 YM L 12 和 YM L 102 之间的遗传                                16       Ph i034      7. 02            4          0.   71
相似性最大 ( GS= 0. 97 ) , B 73 和 YM L 102 之间的                           17       Ph i116      7. 06            4          0.   44
                                                                    18       Ph i115      8. 03            2          0.   44
遗传相似性最小 ( GS= 0. 48) 。                                              19       Ph i080       ~
                                                                                      8. 08 8. 09          5          0.   69
     与产量配合力的分析结果比较发现 ( 表 4 ) , 特                                    20       Ph i065      9. 03            3          0.   58
                                                                    21       Ph i059     10. 02            4          0.   66
殊配合力效应较低的组合亲本间通常有较高的遗传                                              22                   10. 04            2          0.   40
                                                                             Ph i062
相似值[ 1, 2 ]。如白粒组试验中产量最低的杂交组合                                        23      um c1124      1. 05            2          0.   41
                                                                    24       Ph i031      6. 04            4          0.   71
YM L 12×YM L 102 具有最低的特殊配合力效应值。
                                                                    25     Ph i374118     3. 02            3          0.   61
在本研究中 YM L 12 和 YM L 102 之间的遗传相似                                    26      Bng l176      1. 03            4          0.   49
                                                                    27      Bng l439      1. 03            7          0.   77
系数 ( 0. 97 ) 最大; 黄粒组试验中产量最低的杂交组
                                                                    28       Ph i099      3. 02            4          0.   70
合长 631gÙ2 ×中系 096gÙ2 和忻 9101gÙ2 ×齐 205
          o         o        o                                      29       Ph i119      8. 02            3          0.   58
                                                                    30      um c1066      7. 01            3          0.   31
的特殊配合力在该试验中最低。在本研究中这两对
                                                                    31       Ph i014      8. 04            3          0.   44
自交系间的遗传相似系数 ( 分别为 0. 778 和 0. 775)                                  32       Ph i015       ~
                                                                                      8. 08 8. 09          4          0.   69
                                                                    33                    9. 01            3          0.   58
均较高。因此推断亲本自交系间的遗传相似系数与                                                       Ph i028
                                                                    34     Ph i109642       2              3          0.   41
它们之间的特殊配合力存在相关性。                                                    35       Ph i083      2. 04            4          0.   55
2. 3 聚类分析                                                           36       Ph i022      9. 03            4          0.   53
                                                                    37       Ph i024      5. 01            3          0.   57
     根据遗传相似值矩阵, 按 U PGM A 进行聚类                                      38       Ph i002      1. 08            2          0.   41
分析, 得到 22 个自交系的 SSR 分析聚类图 ( 图 2) 。                                  39       Ph i051      7. 06            3          0.   61

供 试 自 交 系 被 划 分 为 5 个 类 群: 第 一 群 包 括
CM L 149、CA 339、CM L 154、长 631gÙ2、中系 096gÙ
                               o                                  分析表明, 大多数自交系的划分结果与产量配
o 2、CM L 166 和 CM L 164, 这些系与丹 340 的遗传                          合力分析的结果及系谱分析一致[ 1, 2 ]。在 Q PM 自
关 系 最 近, 故 划 分 在 旅 大 红 骨 群。第 二 群 包 括                            交系白粒组的产量配合力分析中, 自交系 YM L 12
CM L 140、YM L 23、YM L 29 和 CM L 194, 与黄早四                       和 YM L 102 为优势群 A ; YM L 23 和 YM L 29 为优
的遗传关系较近, 故划分在四平头群。第三群包括                                         势群 B , 选自南非 Q PM 杂交种; CM L 147 为优势
忻 9101gÙ2 和齐 205, 与 B 73 的遗传关系较近, 故
       o                                                        群 C , 选自 Pop 63; CM L 149 选自 G24, CM L 140 和
                                                                CM L 154 选 自 Pop 62, 划 为 优 势 群D 。 本 研 究
                                                                                                   与
                                                                                               [1]
划分在瑞得群。第四群包括 YM L 12 和 YM L 102,
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1                     作  物   学  报                    29 卷
 08

                                    表 3  根据 SSR 分析结果得到的 22 个自交系间的遗传相似系数
                                  Table 3  Genetic si ilar ity am ong 22 inbreeds ba sed on SSR ana lysis
                                                    m

 自交系名称 Inb red s      CM L 149 CM L 140 CM L 147 CM L 154             YM L 23 YM L 12       YM L 29    YM L 102 CM L 171      CM L 194 CM L 166
      CM L 149         1.   000
      CM L 140         0.   718     1.   000
      CM L 147         0.   688     0.   652   1.   000
      CM L 154         0.   694     0.   611   0.   625    1.   000
       YM L 23         0.   672     0.   714   0.   600    0.   579   1.   000
       YM L 12         0.   627     0.   595   0.   640    0.   634   0.   551   1.   000
       YM L 29         0.   635     0.   692   0.   562    0.   591   0.   768   0.   578   1.   000
      YM L 102         0.   643     0.   588   0.   631    0.   686   0.   534   0.   973   0.   577    1.   000
      CM L 171         0.   661     0.   691   0.   688    0.   685   0.   693   0.   583   0.   643    0.   566   1.   000
      CM L 194         0.   688     0.   658   0.   622    0.   650   0.   826   0.   585   0.   861    0.   575   0.   744    1.   000
      CM L 166         0.   669     0.   636   0.   684    0.   691   0.   658   0.   642   0.   661    0.   636   0.   700    0.   675   1.   000
      CM L 161         0.   702     0.   700   0.   726    0.   624   0.   675   0.   611   0.   653    0.   588   0.   719    0.   692   0.   643
    Chang 631gÙ o2     0.   650     0.   611   0.   607    0.   727   0.   702   0.   650   0.   713    0.   663   0.   682    0.   701   0.   687
       CA 339          0.   795     0.   667   0.   678    0.   675   0.   703   0.   606   0.   647    0.   590   0.   684    0.   711   0.   693
   Zhongx i 096gÙo2    0.   689     0.   596   0.   612    0.   730   0.   722   0.   629   0.   776    0.   602   0.   667    0.   763   0.   712
      CM L 164         0.   697     0.   672   0.   699    0.   722   0.   675   0.   621   0.   627    0.   631   0.   661    0.   711   0.   748
    X in 9101gÙo2      0.   706     0.   592   0.   573    0.   592   0.   776   0.   559   0.   705    0.   554   0.   596    0.   685   0.   641
        Q i205         0.   663     0.   607   0.   623    0.   577   0.   679   0.   625   0.   631    0.   575   0.   679    0.   682   0.   667
         B 73          0.   626     0.   611   0.   615    0.   615   0.   636   0.   530   0.   658    0.   484   0.   645    0.   640   0.   654
       D an340         0.   699     0.   607   0.   645    0.   717   0.   667   0.   643   0.   716    0.   688   0.   632    0.   696   0.   725
        M o17          0.   550     0.   610   0.   607    0.   625   0.   629   0.   722   0.   640    0.   743   0.   598    0.   677   0.   692
     H uangzao4        0.   637     0.   700   0.   610    0.   558   0.   744   0.   611   0.   754    0.   627   0.   646    0.   683   0.   664
                                    Chang                 Zhongx i          X in9101gÙ                                                    H uang
 自交系名称 Inb red s      CM L 161                 CA 339              CM L 164            Q i205            B 73      D an340     M o17
                                    631gÙ
                                        o2                096 gÙ
                                                               o2               o2                                                         zao4
      CM L 149
      CM L 140
      CM L 147
      CM L 154
       YM L 23
       YM L 12
       YM L 29
      YM L 102
      CM L 171
      CM L 194
      CM L 166
      CM L 161         1.   000
    Chang 631gÙ o2     0.   664     1.   000
       CA 339          0.   650     0.   672   1.   000
   Zhongx i 096gÙo2    0.   649     0.   778   0.   780    1.   000
      CM L 164         0.   712     0.   640   0.   678    0.   670   1.   000
    X in 9101gÙo2      0.   663     0.   679   0.   661    0.   676   0.   634   1.   000
        Q i205         0.   646     0.   551   0.   711    0.   696   0.   628   0.   775   1.   000
         B 73          0.   604     0.   607   0.   721    0.   685   0.   645   0.   720   0.   695    1.   000
       D an340         0.   596     0.   771   0.   761    0.   745   0.   714   0.   712   0.   679    0.   624   1. 000
        M o17          0.   610     0.   617   0.   629    0.   628   0.   636   0.   630   0.   765    0.   649   0. 696      1. 000
     H uangzao4        0.   667     0.   621   0.   625    0.   607   0.   641   0.   712   0.   720    0.   649   0. 712      0. 610     1. 000


结果进行比较, 除了自交系 CM L 140 的结果不同                                                然利用分子标记将在特殊配合力分析结果中属于同
外, 其余都一致。在黄粒 Q PM 自交系的产量配合                                                  一 优 势 群 的 CM L 171、 CM L 166、 CM L 161 和
力分析中, 来自 G25 的自交系 CM L 171、CM L 161                                         CM L 164 分别划在了旅大红骨群和其他类群里, 但
和来自 Pop 66 的 CM L 166、来自 Pop 65 的 CM L 164                                  它们所属的旅大红骨群和其他类群间的遗传相似值
划为优势群 A , 属于黄色硬粒型自交系; 来自南非                                                  相比较与其他类群是最高的。
种质的 CM L 194 为优势群 B; 长 631gÙ2、CA 339、
                               o                                                造成这些差异的原因一方面与田间试验易受环
中系 096gÙ2 为优势群 C; 齐 205 和忻 9101gÙ2 为优
         o                      o                                           境的影响, 导致用特殊配合力划分杂种优势群可能
势群 D 。该结果与分子标记划分的结果基本一
     [2]
                                                                            有一定的偏差; 另一方面是因为本研究所选的标记
致; 与各自交系的系谱对照, 系谱来源一致的自交                                                    位点可能未充分覆盖整个玉米基因组中与产量性状
系基本都划在同一优势群中。进一步分析发现, 虽                                                     相关的位点, 从而造成划分结果不一致。
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1 期          番兴明等: 根据 SSR 标记划分优质蛋白玉米自交系的杂种优势群              
                                                        109




                                   “ 表示分子量标准 5 X174gÙ in f g¬ ,  
                               ( 图中 M ”             H            “×”
                                                                   表示非本研究所包括的其他自交系)

                                                  图 1  SSR 引物对 Ph i053 对 22 个自交系的分析结果
                           F ig. 1  SSR analysis fo r 22 inb red lines by p ri er Ph i053 ( M ”
                                                                             m            “ refers to m o lecu lar w eigh t
                                      m arker 5 X174gÙ in f g¬ , “×”
                                                     H              refers to the lines no t included in th is research. )


                                            表 4  几个代表性组合的产量及产量 SCA 效应值与 GS 间的比较
                                          Table 4  Com par ison of y ields, SCA in severa l crosses w ith the ir GS

                                       CM L 140×YM L 102       YM L 12×YM L 29       CM L 149×YM L 29         YM L 23×YM L 29   YM L 12×YM L 102
   白粒组           Y ield ( kg gÙ 2 )
                              hm              6819. 45              6315. 45                 5220                   5830. 5           2229
  Group of             SCA                     95. 95                 76. 67               - 91. 71               - 106. 72         - 178. 19
W h ite g rain          GS                     0. 588                 0. 578                0. 635                  0. 768           0. 973
                                            CM L 166 ×            CM L 171×              CM L 171×             Chang631gÙ ×
                                                                                                                         o2      X in9101gÙ ×
                                                                                                                                          o2
                                              Q i205             Zhongx i096gÙ
                                                                             o2           CM L 166             Zhongx i096gÙ
                                                                                                                           o2        Q i205
   黄粒组           Y ield ( kg gÙ 2 )
                              hm               10880                  9156                   8787                    5496             6074
  Group of             SCA                      1272                 1205. 2              - 1230. 88              - 1479. 8        - 1670. 96
yellow g rain           GS                     0. 667                 0. 667                0. 744                  0. 778           0. 775




                                                                                     根据聚类结果, 分别计算杂种优势群内自交系
                                                                                   间的平均遗传相似系数和优势群间自交系的平均遗
                                                                                   传相似系数, 分别为 0. 73 和 0. 59。这与其他研究
                                                                                   结果一致, 即同一杂种优势群的自交系间的遗传相
                                                                                   似系数大于不同优势群的自交系间的遗传相似系
                                                                                   数[ 7 ]。
                                                                                       对 田 间 试 验 结 果 进 行 分 析 发 现, 除 了 组 合
                                                                                   CM L 166×长 631gÙ2 外, 两组试验的 5 个高产组合
                                                                                                  o
                                                                                   的亲本都来自不同的杂种优势群[ 1, 2 ]。白粒组试验
                                                                                   中产量最高的组合 CM L 147 ×YM L 23 亲本分别来
                                                                                   自含有热带 T uxp eno 种质的 Pop 63 和类似四平头
                                                                                   群的种质。产量居第二的 CM L 149 ×YM L 23 和居
                                                                                   第三的 CM L 154 ×YM L 23 的亲本组合类似旅大红
                                                                                   骨 群 和 四 平 头 群。 产 量 居 第 四 的 YM L 23 ×
                                                                                   YM L 102 的亲本组合类似四平头群和兰卡斯特群。
                                                                    产量居第五的 CM L 149×CM L 147 亲本组合类似旅
                                                                    大红骨群和 T uxp       群。黄粒组试验中产量最高
             图 2  22 个自交系的 SSR 标记聚类结果        zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/ eno
   F ig.   2  C lu stering analysis of 22 inb red s by SSR m arkers 的 CM L 166×齐 205 亲本组合类似旅大红骨群和瑞
           © 1995-2004 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
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1                     作  物   学  报                    29 卷
 10


得群。第二位的 CM L 194 ×CM L 166 亲本组合类似                              合奠定基础。
四 平 头 群 和 旅 大 红 骨 群; CM L 161 × CA 339 和
                                                               References
CM L 171 × CA 339 的 亲 本 组 合 属 于 热 带 硬 粒 型
(G25) 和旅大红骨群。                                                   [ 1 ]  Fan X 2 ( 番兴明) , T an J ( 谭静 ) , H uang B 2H ( 黄必华) et
                                                                             M
                                                                      a l. A nalysis of com b in ing ab ility and hetero tic p attern s of
3 讨论                                                                  quality p ro tein m aize inb red s. A cta A g ronom ica S in ica ( 作物
                                                                      学报) , 2001 (6) : 986 992
                                                                                          ~
  吴景锋[ 8 ] 根据系谱推测, 将我国玉米种质划分                                    [ 2 ]  Fan X 2 ( 番兴明) , T an J ( 谭静 ) , H uang B 2 ( 黄必华) et
                                                                             M                                    H
为国内系和国外系; 曾三省 [ 9 ] 也曾将我国种质划分                                         a l. A nalysis of com b in ing ab ility and hetero tic g roup s of yel2

为国内系和国外系两大类。但这只是一个粗略的模                                                low g rain quality p ro tein m aize inb red s. H ered itas (Beijing )
                                                                      ( 遗传) , 2001 (6)
式。在本研究中, 南非的温带和热带导入种质与国
                                                                [ 3 ]  Saghai M aroof M A et a l. Ex trao rd inarily po lym o rp h ic m i2
内 的 四 平 头 种 质 划 在 同 一 个 杂 种 优 势 群; 部 分
                                                                      cro satellite DNA in barley: sp ecies d iversity, ch rom o som e
C I M YT 的热带、亚热带种质与旅大红骨群划在
  M                                                                   location and pop u lation dynam ics.       P roc N a tl A cad S ci.
同一群。分析其原因有三: 第一是以往的划分方法                                                                      ~
                                                                      U SA , 1984 (91) : 5466 5470
主要是根据杂交种的表现进行划分, 并未做广泛的                                         [ 4 ]  Sm ith J S C et a l. A n evaluation of the u tility of SSR loci as

特殊配合力分析和分子标记分析, 有一定的局限                                                m o lecu lar m arkers in m aize: Com p arison w ith data from
                                                                      R FL P s and p ed ig ree. T heor A pp l Genet, 1997 ( 95) : 163~
性。地域远的自交系间不一定存在杂种优势, 种质
                                                                      173
的地理远缘并不完全代表遗传远缘; 第二, 分析的                                        [ 5 ]  Sneah P H A , Sokal R R. N um erica l T ax onom y. F reem an,
材料有限, 不能代表整个热带、亚热带玉米种质;                                               San F rancisco. 1973.
第三, 本研究所采用的这些热带、亚热带 Q PM 自                                      [ 6 ]  Roh lf F J. N T S YS 2p c N um erica l T ax onom y and M u ltiva ri2

交系经过多年的适应性改良, 已经基本适应了温带                                               a te A na ly sis S y stem , version 1. 80. N ew Yo rk: Exeter Pub li2
                                                                      cation, 1990.
地区的生态条件。
                                                                [ 7 ]   M elch inger A E. T he Genetic and E xp loita tion of H eterosis
  本研究将 22 个玉米自交系划分为 5 群, 除了                                           in C rop s. A SA 2CSSA 2SSSA M ad ison, 1999, W I 53711: 99
已确定的 4 个杂种优势群外, 还增加一个新群, 这                                           ~ 118
与许多研究结果一致。陈彦惠等[ 10 ] 根据杂种优势和                                    [ 8 ]   u J 2F ( 吴 景 锋 ). Comm en tary on germ p lasm sou rces of
                                                                       W

配合力表现将我国玉米种质划分为四平头、旅大红                                                m aize hyb rid s in Ch ina. S cien tia A g ricu ltu ra S in ica ( 中国农
                                                                      业科学) , 1983, (2) : 1 8
                                                                                          ~
骨、兰卡斯特、瑞得和难以分群的其他类型共五
                                                                [ 9 ]  Zeng S 2Sh ( 曾三省). T he m aize germ p lasm base of hyb rid s in
群; 王懿波等[ 11 ] 根据系谱来源、杂种优势和配合力
                                                                      Ch ina. S cien tia A g ricu ltu ra S in ica ( 中国农业科学 ) , 1990,
表现把我国主要玉米自交系分为 5 群; 袁力行等[ 13 ]                                                  ~
                                                                      23 (4) : 1 9
利用 R FL P 和 SSR 标记将 29 个广泛应用的骨干系                               [ 10 ]  Chen Y 2 ( 陈彦惠) , L iu X 2Z ( 刘新芝) , Peng Z2 ( 彭泽斌).
                                                                               H                                   B
划分为四平头、旅大红骨、兰卡斯特、瑞得和 PA                                               C lassification of hetero sis pop u lation s and the con struction of
                                                                      hetero sis m odels fo r m aize inb red lines. J ou rna l of H enan A 2
群共 5 类。但这并不等于说所有玉米种质就只有 5
                                                                      g ri U n iversity ( 河南农业大学学报) , 1995, 29 (4) : 56 61
                                                                                                                       ~
个杂种优势群, 随着研究材料的增加, 有可能会发
                                                               [ 11 ]   ang Y 2 ( 王懿波) , W ang Z2 ( 王振华) , W ang Y 2P ( 王永
                                                                       W       B                 H
现新的杂种优势群。                                                             普) et a l. Stud ies on the hetero sis u tilizing m odels of m ain
  本研究结果对 Q PM 种质改良和创新具有指导                                             m aize germ p lasm in Ch ina. S cien tia A g ricu ltu ra S in ica ( 中国
意义, 我们可用同一优势群内的热带、亚热带系来                                               农业科学) , 1997, 30 (4) : 16 24
                                                                                               ~
                                                               [ 12 ]  Zhao J 2 ( 赵久然) , Guo J 2 ( 郭景伦) , Guo Q ( 郭强) et a l.
改良温带自交系。因为热带、亚热带玉米种质中蕴                                                         R               L
                                                                      H etero tic g roup ing of 25 m aize inb red s w ith RA PD m arkers.
藏着丰富的遗传多样性, 具有温带玉米种质所不具
                                                                      A cta A g ricu ltu rae B orea li2 in ica ( 华 北 农 学 报 ) , 1999, 14
                                                                                                       S
备的许多抗逆性, 把热带、亚热带种质导入温带种                                                       ~
                                                                      (1) : 32 37
质中合成既有温带种质的适应性、又具有热带、亚                                         [ 13 ]  Yuan L 2 ( 袁力行) , Fu J 2 ( 傅骏骅) , Zhang SH 2 ( 张世
                                                                               X               H                   H
热带种质抗逆性的新种质, 这样既改良了温带系的                                               煌 ) et a l. H etero tic g roup ing of m aize inb red lines u sing

若干缺点、拓宽了温带种质的遗传基础、提高了品                                                R FL P and SSR m arkers. A cta A g ronom ica S in ica ( 作 物 学
                                                                      报) , 2001, 27 (2) : 149 156
                                                                                             ~
种的生态适应性, 又保持了原有的杂种优势群和杂
种优势模式, 为育成优质、高产、多抗杂交种新组
                                   zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/
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根据Ssr 标记划分优质蛋白玉米自交系的杂种优势群ξ

  • 1. zycnzj.com/ www.zycnzj.com 第 29 卷 第 1 期 作 物 学 报 V o l 29, N o. 1 . 2003 年 1 月  105 110 页 ~ A CTA A GRONOM ICA S I ICA N pp. 105 110  J an. , 2003 ~ Ξ 根据 SSR 标记划分优质蛋白玉米自交系的杂种优势群 番兴明1  张世煌2  谭 静1  李明顺2  李新海2 ( 1 云南省农业科学院粮食作物研究所, 云南 昆明 650205; 2 中国农业科学院作物育种栽培研究所, 北京 100081) 摘 要 利用 SSR 标记技术对 18 个优质蛋白玉米 (Q PM ) 自交系和 4 个代表国内主要杂种优势群的普通玉米标准测验 种进行杂种优势群划分, 研究热带、亚热带 Q PM 与温带玉米自交系之间的遗传关系。从 70 对引物中筛选出 39 对扩增 谱带清晰且具有多态性的 SSR 引物, 在供试材料中检测到 134 个等位基因变异, 平均多态性信息量为 0. 55。根据扩增 谱带建立 0、1 型数据, 计算 22 个自交系间的遗传相似值, 然后做聚类分析。结果表明, 供试的 18 个 Q PM 自交系可划 分为 5 群: 第一群与旅大红骨种质的遗传距离较近, 包括 CM L 149、CA 339、CM L 154、长 631gÙ2、中系 096gÙ2、 o o CM L 166 和 CM L 164。第二群接近四平头种质, 包括 CM L 140、YM L 23、YM L 29 和 CM L 194。第三群接近瑞得种质, 包括忻 9101gÙ2 和齐 205。第四群与兰卡斯特种质的距离较近, 包括 YM L 12 和 YM L 102。第五群与四个主要杂种优势 o 类群的距离都比较远, 包括 CM L 147、CM L 161 和 CM L 171。SSR 标记划群与田间产量配合力划分结果及系谱分析基 本一致。 关键词 SSR; 标记; 玉米自交系; 遗传相似系数; 杂种优势群 中图分类号: S513. 035   文献标识码: A Heterotic Group ing of Qua l ity Prote in M a ize Inbreds D iv ided by SSR M arkers FAN X ing 2 ing  ZHAN G Sh i2 uang  TAN J ing  L IM ing 2Shun  L I X in 2 a i 1 2 1 2 2 M H H ( 1 Institu te of F ood C rop s, Y unnan A cad em y of A g ricu ltu ra l S ciences, K unm ing 650205, Y unnan P rov ince; 2 Institu te of C rop s B reed ing and C u ltiva tion , CA A S , B eij ing 100081, C h ina ) Abstract H etero t ic g roup ing of 22 m a ize inb red lines, includ ing 18 qua lity p ro tein m a ize (Q PM ) lines and 4 dom est ic tem p era te comm on testers tha t rep resen t fou r hetero t ic g roup s u sed dom inan t ly in Ch ina, w ere cla ssified by SSR m a rkers A set of 39 po lym o rp h ic SSR p ri ers w ere selected from 70 p ri ers, w h ich de2 . m m tected 134 a lleles am ong the lines M ean po lym o rp h ism info rm a t ion con ten t w a s 0. 55. C lu ster ana ly sis . w a s ba sed on the genet ic si ila rity coefficien t. F ive hetero t ic g roup s w ere determ ined am ong the 22 inb red m lines: g roup 1 w a s of L uda R ed cob germ p la sm includ ing CM L 149, CA 339, CM L 154, Chang 631gÙ2, o Zhongx i096gÙ2, CM L 166 and CM L 164. G roup 2 w a s of Sip ing tou germ p la sm includ ing CM L 140, o YM L 23, YM L 29 and CM L 194. G roup 3 w a s of R eid germ p la sm includ ing X in 9101gÙ2 and Q i 205. o YM L 12 and YM L 102 w ere included in L anca ster g roup. CM L 147, CM L 161 and CM L 171 can no t be in 2 cluded in the cu rren t g roup s T he resu lt s ba sica lly w ere ag reeab le w ith the p reviou s stud ies ba sed on com 2 . b in ing ab ility ana ly sis fo r y ield and ava ilab le p ed ig ree da ta. Key words Si p le sequence rep ea t; M a rker; M a ize inb red line; Genet ic si ila rity; H etero t ic g roup m m   我国优质蛋白玉米 (Q PM ) 育种研究在解决优 制了 Q PM 育种水平的进一步提高和种质创新研 质和高产的矛盾方面取得很大进展。目前所面临的 究。番兴明等于 1999 年和 2000 年分别对 10 个白 关键问题是种质基础狭窄, 对 Q PM 自交系与国内 粒 Q PM 自交系和 10 个黄粒 Q PM 自交系做部分双 普通玉米杂种优势群之间的遗传关系缺乏了解, 限 列杂交分析, 将所研究的自交系分别划分为 4 个杂 Ξ 基金项目: 云南省自然科学基金资助项目 (98C006Z) , 本研究在中国农科院作物所农业部作物遗传与育种重点开放实验室和 AM 2 B I ET 2 ina L ab 进行。 ON Ch 作者简介: 番兴明 (19632) , 男, 云南腾冲人, 研究员, 硕士, 主要从事玉米遗传育种研究。 zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/ R eceived on ( 收稿日期) : 2001207231, A ccep ted on ( 接受日期) : 2002202224 © 1995-2004 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
  • 2. zycnzj.com/ www.zycnzj.com 1                     作  物   学  报                    29 卷 06 种优势群[ 1, 2 ]。本研究利用 SSR 标记对上述试验所 周后, 每个自交系混合收获 5g 叶片。按 Sagha i2 涉及的 18 个 Q PM 自交系和 4 个国内主要杂种优 M a roof CTAB 方法提取并纯化 DNA 。 [3] 势群的温带普通玉米测验种进行杂种优势群划分, 1. 2. 2 SSR 反应及扩增产物检测方法  采用 10 进一步验证特殊配合力划群结果, 探索 Q PM 与普 Λ PCR 反应体系, 包括 10 mm o lgÙ T ris2 l, 50 L L HC 通玉米杂种优势群之间的遗传关系。 mm o lgÙ KC l, 2. 5 mm o lgÙ M gC l2 , 150 Λ o lgÙ L L m L dN T P , 0. 2 Λ o lgÙ SSR 引物, 0. 5 单位 T ag 酶和 m L 1 材料与方法 20 ng DNA 模板。扩增程序为 94℃预变性 5 分钟; 1. 1 供试材料 再按 94℃ 1 分钟, 60℃ 2 分钟, 72℃ 2 分钟扩增 包括 18 个 Q PM 自交系和 4 个国内普通玉米 35 个 循 环; 最 后 72℃延 伸 5 分 钟。 PCR 扩 增 在 杂种优势群的标准测验种 ( 黄早四、丹 340、 o 17 M PTC 2200 型 PCR 仪上完成。 SSR 扩增产物在 4. 和 B 73 ) ( 表 1 ) 。供试自交系经多代自交, 遗传稳 5% 变性聚丙烯酰胺凝胶上分离, 银染检测 (H in f g¬ 定。 酶切 Ф X174 为分子量标准) 。本研究用 70 对 SSR 1. 2 SSR 分子标记分析 引物对 22 个自交系进行分析, 选取其中扩增谱带 1. 2. 1  DNA 提取  玉米植株在温室生长 4~ 5 清晰且具有多态性的引物统计结果。 表 1  供试自交系及系谱来源 Table 1   a ize inbreds L ines and ped igrees M 编号 自交系 系谱来源 适应区域 N o. Inb red s Ped ig ree Eco logy A dap tation Q1 CM L 149 G24Q PM 热带 ( T rop ical) Q2 CM L 140 Pop 62 热带 ( T rop ical) Q3 CM L 147 Pop 63 热带 ( T rop ical) Q4 CM L 154 Pop 62 热带 ( T rop ical) 南非温热互导 Q PM 种质 Q5 YM L 23 亚热带 ( Sub trop ical) ( S. A frica trop ical germ p lasm in trog ressing tem p erate germ p lasm ) Q6 YM L 12 G31Q PM 亚热带 ( Sub trop ical) 南非温热互导 Q PM 种质 Q7 YM L 29 亚热带 ( Sub trop ical) ( S. A frica trop ical germ p lasm in trog ressing tem p erate germ p lasm ) Q8 YM L 102 G31Q PM 亚热带 ( Sub trop ical) Q9 CM L 171 G25Q PM 热带 ( T rop ical) Q 10 CM L 194 S. A frica 亚热带 ( Sub trop ical) Q 11 CM L 166 Pop 66Q PM 热带 ( T rop ical) Q 12 CM L 161 G25Q PM 热带 ( T rop ical) 长 631gÙ o2 Q 13 - 温带 ( T em p erate) (Chang631gÙ ) o2 Q 14 CA 339 G33 Q PM 温带 ( T em p erate) 中系 096gÙ o2 Q 15 - 温带 ( T em p erate) ( Zhongx i 096gÙ ) o2 Q 16 CM L 164 Pop 65 Q PM 热带 ( T rop ical) 忻 9101gÙ o2 Q 17 - 温带 ( T em p erate) (X in9101gÙ ) o2 亚热带种质 Pop 70Q PM 导入温带材料 ( 淮矮 141×中系 017) Q 18 齐 205 (Q i205) ( Sub trop ical germ p lasm Pop 70Q PM in trog ress tem p erate 温带 ( T em p erate) cro ss (W ei141×Zhongx i017) ) T1 B 73 BSSS C5 温带 ( T em p erate) T2 丹 340 (D an340) 白骨旅 9×有稃玉米 (Baigu L u9×Pob co rn ) 温带 ( T em p erate) T3 M o17 C103×18722 温带 ( T em p erate) T4 黄早四 (H uangzao 4) 唐四平头杂株 ( T ang sip ing tou op en po llination ) 温带 ( T em p erate) 1. 3 数据分析 位 点的多态性信息量 ( Po lym o rp h ism info rm a t ion 根据 PCR 扩增结果, 在相同迁移位置有带记 con ten t, P IC ) 按公式 为 1, 无带记为 0, 缺失记为 9, zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/P IC = 1 - 建立数据库。标记 ∑f 2 i © 1995-2004 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
  • 3. zycnzj.com/ www.zycnzj.com 1 期          番兴明等: 根据 SSR 标记划分优质蛋白玉米自交系的杂种优势群               107 计算, 其中 f 2 表示 i 位点的基因频率[ 4 ]。遗传相似 i 与 M o 17 的遗传关系较近, 故划分在兰卡斯特群。 系数 ( Genet ic sim ila rity, GS ) 按公式 GS = m gÙ + (m 第五群包括 CM L 147、CM L 161 和 CM L 171, 距离 n ) 计算, 其中 m 表示基因型间共有的条带数目, n 国内的 4 个主要杂种优势群都很远。这一群自交系 表示基因型间有差异的条带数目[ 5 ]。聚类分析按 来自热带种质 G25 和 Pop 63, 具有不同的遗传背 U PGM A (U nw eigh ted p a ir g roup m ethod a rith 2 景。 m et ic averages) 方法进行。数据统计由 N T SYS 2 c p 表 2  SSR 分子标记结果 软件完成 。 [6] Table 2  Results of SSRs Ana lysis 编号 SSR 引物 位置 等位基因数 多态性信息量 2 结果与分析 N o. SSR p ri er m L oci N o. of alleles P IC 1 Ph i056 1. 01 3 0. 43 2. 1 SSR 标记分析 2 Ph i120 1. 11 3 0. 62 3 Ph i127 2. 08 5 0. 63 39 对 SSR 引物在 22 份自交系之间共检测到 4 Ph i029 3. 04 3 0. 52 134 个等位基因变异, 涉及 39 个 SSR 位点, 平均 5 Ph i053 3. 05 5 0. 59 6 Ph i073 3. 05 4 0. 76 每个位点的等位基因数为 3. 44 个, 变化范围 2 7 ~ 7 Ph i072 4 4 0. 71 个; 平均多态性信息量为 0. 55, 变化范围 0. 31~ 8 Ph i092 4. 08 2 0. 42 9 Ph i019 4. 11 4 0. 39 0. 77。详见表 2 和图 1。 10 Ph i113 ~ 5. 03 5. 04 2 0. 39 2. 2 遗传相似性分析 11 Ph i048 5. 07 3 0. 53 12 Ph i128 5. 07 3 0. 39 根据 SSR 分析结果计算 22 个自交系间的遗传 13 Ph i085 5. 07 4 0. 64 相似系数 ( 表 3) , 其范围在 0. 48 0. 97 之间, 平均 ~ 14 Ph i123 6. 07 3 0. 54 15 Ph i057 7. 01 3 0. 51 0. 66。其中自交系 YM L 12 和 YM L 102 之间的遗传 16 Ph i034 7. 02 4 0. 71 相似性最大 ( GS= 0. 97 ) , B 73 和 YM L 102 之间的 17 Ph i116 7. 06 4 0. 44 18 Ph i115 8. 03 2 0. 44 遗传相似性最小 ( GS= 0. 48) 。 19 Ph i080 ~ 8. 08 8. 09 5 0. 69 与产量配合力的分析结果比较发现 ( 表 4 ) , 特 20 Ph i065 9. 03 3 0. 58 21 Ph i059 10. 02 4 0. 66 殊配合力效应较低的组合亲本间通常有较高的遗传 22 10. 04 2 0. 40 Ph i062 相似值[ 1, 2 ]。如白粒组试验中产量最低的杂交组合 23 um c1124 1. 05 2 0. 41 24 Ph i031 6. 04 4 0. 71 YM L 12×YM L 102 具有最低的特殊配合力效应值。 25 Ph i374118 3. 02 3 0. 61 在本研究中 YM L 12 和 YM L 102 之间的遗传相似 26 Bng l176 1. 03 4 0. 49 27 Bng l439 1. 03 7 0. 77 系数 ( 0. 97 ) 最大; 黄粒组试验中产量最低的杂交组 28 Ph i099 3. 02 4 0. 70 合长 631gÙ2 ×中系 096gÙ2 和忻 9101gÙ2 ×齐 205 o o o 29 Ph i119 8. 02 3 0. 58 30 um c1066 7. 01 3 0. 31 的特殊配合力在该试验中最低。在本研究中这两对 31 Ph i014 8. 04 3 0. 44 自交系间的遗传相似系数 ( 分别为 0. 778 和 0. 775) 32 Ph i015 ~ 8. 08 8. 09 4 0. 69 33 9. 01 3 0. 58 均较高。因此推断亲本自交系间的遗传相似系数与 Ph i028 34 Ph i109642 2 3 0. 41 它们之间的特殊配合力存在相关性。 35 Ph i083 2. 04 4 0. 55 2. 3 聚类分析 36 Ph i022 9. 03 4 0. 53 37 Ph i024 5. 01 3 0. 57 根据遗传相似值矩阵, 按 U PGM A 进行聚类 38 Ph i002 1. 08 2 0. 41 分析, 得到 22 个自交系的 SSR 分析聚类图 ( 图 2) 。 39 Ph i051 7. 06 3 0. 61 供 试 自 交 系 被 划 分 为 5 个 类 群: 第 一 群 包 括 CM L 149、CA 339、CM L 154、长 631gÙ2、中系 096gÙ o   分析表明, 大多数自交系的划分结果与产量配 o 2、CM L 166 和 CM L 164, 这些系与丹 340 的遗传 合力分析的结果及系谱分析一致[ 1, 2 ]。在 Q PM 自 关 系 最 近, 故 划 分 在 旅 大 红 骨 群。第 二 群 包 括 交系白粒组的产量配合力分析中, 自交系 YM L 12 CM L 140、YM L 23、YM L 29 和 CM L 194, 与黄早四 和 YM L 102 为优势群 A ; YM L 23 和 YM L 29 为优 的遗传关系较近, 故划分在四平头群。第三群包括 势群 B , 选自南非 Q PM 杂交种; CM L 147 为优势 忻 9101gÙ2 和齐 205, 与 B 73 的遗传关系较近, 故 o 群 C , 选自 Pop 63; CM L 149 选自 G24, CM L 140 和 CM L 154 选 自 Pop 62, 划 为 优 势 群D 。 本 研 究 与 [1] 划分在瑞得群。第四群包括 YM L 12 和 YM L 102, zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/ © 1995-2004 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
  • 4. zycnzj.com/ www.zycnzj.com 1                     作  物   学  报                    29 卷 08 表 3  根据 SSR 分析结果得到的 22 个自交系间的遗传相似系数 Table 3  Genetic si ilar ity am ong 22 inbreeds ba sed on SSR ana lysis m 自交系名称 Inb red s CM L 149 CM L 140 CM L 147 CM L 154 YM L 23 YM L 12 YM L 29 YM L 102 CM L 171 CM L 194 CM L 166 CM L 149 1. 000 CM L 140 0. 718 1. 000 CM L 147 0. 688 0. 652 1. 000 CM L 154 0. 694 0. 611 0. 625 1. 000 YM L 23 0. 672 0. 714 0. 600 0. 579 1. 000 YM L 12 0. 627 0. 595 0. 640 0. 634 0. 551 1. 000 YM L 29 0. 635 0. 692 0. 562 0. 591 0. 768 0. 578 1. 000 YM L 102 0. 643 0. 588 0. 631 0. 686 0. 534 0. 973 0. 577 1. 000 CM L 171 0. 661 0. 691 0. 688 0. 685 0. 693 0. 583 0. 643 0. 566 1. 000 CM L 194 0. 688 0. 658 0. 622 0. 650 0. 826 0. 585 0. 861 0. 575 0. 744 1. 000 CM L 166 0. 669 0. 636 0. 684 0. 691 0. 658 0. 642 0. 661 0. 636 0. 700 0. 675 1. 000 CM L 161 0. 702 0. 700 0. 726 0. 624 0. 675 0. 611 0. 653 0. 588 0. 719 0. 692 0. 643 Chang 631gÙ o2 0. 650 0. 611 0. 607 0. 727 0. 702 0. 650 0. 713 0. 663 0. 682 0. 701 0. 687 CA 339 0. 795 0. 667 0. 678 0. 675 0. 703 0. 606 0. 647 0. 590 0. 684 0. 711 0. 693 Zhongx i 096gÙo2 0. 689 0. 596 0. 612 0. 730 0. 722 0. 629 0. 776 0. 602 0. 667 0. 763 0. 712 CM L 164 0. 697 0. 672 0. 699 0. 722 0. 675 0. 621 0. 627 0. 631 0. 661 0. 711 0. 748 X in 9101gÙo2 0. 706 0. 592 0. 573 0. 592 0. 776 0. 559 0. 705 0. 554 0. 596 0. 685 0. 641 Q i205 0. 663 0. 607 0. 623 0. 577 0. 679 0. 625 0. 631 0. 575 0. 679 0. 682 0. 667 B 73 0. 626 0. 611 0. 615 0. 615 0. 636 0. 530 0. 658 0. 484 0. 645 0. 640 0. 654 D an340 0. 699 0. 607 0. 645 0. 717 0. 667 0. 643 0. 716 0. 688 0. 632 0. 696 0. 725 M o17 0. 550 0. 610 0. 607 0. 625 0. 629 0. 722 0. 640 0. 743 0. 598 0. 677 0. 692 H uangzao4 0. 637 0. 700 0. 610 0. 558 0. 744 0. 611 0. 754 0. 627 0. 646 0. 683 0. 664 Chang Zhongx i X in9101gÙ H uang 自交系名称 Inb red s CM L 161 CA 339 CM L 164 Q i205 B 73 D an340 M o17 631gÙ o2 096 gÙ o2 o2 zao4 CM L 149 CM L 140 CM L 147 CM L 154 YM L 23 YM L 12 YM L 29 YM L 102 CM L 171 CM L 194 CM L 166 CM L 161 1. 000 Chang 631gÙ o2 0. 664 1. 000 CA 339 0. 650 0. 672 1. 000 Zhongx i 096gÙo2 0. 649 0. 778 0. 780 1. 000 CM L 164 0. 712 0. 640 0. 678 0. 670 1. 000 X in 9101gÙo2 0. 663 0. 679 0. 661 0. 676 0. 634 1. 000 Q i205 0. 646 0. 551 0. 711 0. 696 0. 628 0. 775 1. 000 B 73 0. 604 0. 607 0. 721 0. 685 0. 645 0. 720 0. 695 1. 000 D an340 0. 596 0. 771 0. 761 0. 745 0. 714 0. 712 0. 679 0. 624 1. 000 M o17 0. 610 0. 617 0. 629 0. 628 0. 636 0. 630 0. 765 0. 649 0. 696 1. 000 H uangzao4 0. 667 0. 621 0. 625 0. 607 0. 641 0. 712 0. 720 0. 649 0. 712 0. 610 1. 000 结果进行比较, 除了自交系 CM L 140 的结果不同 然利用分子标记将在特殊配合力分析结果中属于同 外, 其余都一致。在黄粒 Q PM 自交系的产量配合 一 优 势 群 的 CM L 171、 CM L 166、 CM L 161 和 力分析中, 来自 G25 的自交系 CM L 171、CM L 161 CM L 164 分别划在了旅大红骨群和其他类群里, 但 和来自 Pop 66 的 CM L 166、来自 Pop 65 的 CM L 164 它们所属的旅大红骨群和其他类群间的遗传相似值 划为优势群 A , 属于黄色硬粒型自交系; 来自南非 相比较与其他类群是最高的。 种质的 CM L 194 为优势群 B; 长 631gÙ2、CA 339、 o 造成这些差异的原因一方面与田间试验易受环 中系 096gÙ2 为优势群 C; 齐 205 和忻 9101gÙ2 为优 o o 境的影响, 导致用特殊配合力划分杂种优势群可能 势群 D 。该结果与分子标记划分的结果基本一 [2] 有一定的偏差; 另一方面是因为本研究所选的标记 致; 与各自交系的系谱对照, 系谱来源一致的自交 位点可能未充分覆盖整个玉米基因组中与产量性状 系基本都划在同一优势群中。进一步分析发现, 虽 相关的位点, 从而造成划分结果不一致。 zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/ © 1995-2004 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
  • 5. zycnzj.com/ www.zycnzj.com 1 期          番兴明等: 根据 SSR 标记划分优质蛋白玉米自交系的杂种优势群               109 “ 表示分子量标准 5 X174gÙ in f g¬ ,   ( 图中 M ” H “×” 表示非本研究所包括的其他自交系) 图 1  SSR 引物对 Ph i053 对 22 个自交系的分析结果 F ig. 1  SSR analysis fo r 22 inb red lines by p ri er Ph i053 ( M ” m “ refers to m o lecu lar w eigh t m arker 5 X174gÙ in f g¬ , “×” H refers to the lines no t included in th is research. ) 表 4  几个代表性组合的产量及产量 SCA 效应值与 GS 间的比较 Table 4  Com par ison of y ields, SCA in severa l crosses w ith the ir GS CM L 140×YM L 102 YM L 12×YM L 29 CM L 149×YM L 29 YM L 23×YM L 29 YM L 12×YM L 102 白粒组 Y ield ( kg gÙ 2 ) hm 6819. 45 6315. 45 5220 5830. 5 2229 Group of SCA 95. 95 76. 67 - 91. 71 - 106. 72 - 178. 19 W h ite g rain GS 0. 588 0. 578 0. 635 0. 768 0. 973 CM L 166 × CM L 171× CM L 171× Chang631gÙ × o2 X in9101gÙ × o2 Q i205 Zhongx i096gÙ o2 CM L 166 Zhongx i096gÙ o2 Q i205 黄粒组 Y ield ( kg gÙ 2 ) hm 10880 9156 8787 5496 6074 Group of SCA 1272 1205. 2 - 1230. 88 - 1479. 8 - 1670. 96 yellow g rain GS 0. 667 0. 667 0. 744 0. 778 0. 775   根据聚类结果, 分别计算杂种优势群内自交系 间的平均遗传相似系数和优势群间自交系的平均遗 传相似系数, 分别为 0. 73 和 0. 59。这与其他研究 结果一致, 即同一杂种优势群的自交系间的遗传相 似系数大于不同优势群的自交系间的遗传相似系 数[ 7 ]。 对 田 间 试 验 结 果 进 行 分 析 发 现, 除 了 组 合 CM L 166×长 631gÙ2 外, 两组试验的 5 个高产组合 o 的亲本都来自不同的杂种优势群[ 1, 2 ]。白粒组试验 中产量最高的组合 CM L 147 ×YM L 23 亲本分别来 自含有热带 T uxp eno 种质的 Pop 63 和类似四平头 群的种质。产量居第二的 CM L 149 ×YM L 23 和居 第三的 CM L 154 ×YM L 23 的亲本组合类似旅大红 骨 群 和 四 平 头 群。 产 量 居 第 四 的 YM L 23 × YM L 102 的亲本组合类似四平头群和兰卡斯特群。 产量居第五的 CM L 149×CM L 147 亲本组合类似旅 大红骨群和 T uxp 群。黄粒组试验中产量最高 图 2  22 个自交系的 SSR 标记聚类结果 zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/ eno F ig. 2  C lu stering analysis of 22 inb red s by SSR m arkers 的 CM L 166×齐 205 亲本组合类似旅大红骨群和瑞 © 1995-2004 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
  • 6. zycnzj.com/ www.zycnzj.com 1                     作  物   学  报                    29 卷 10 得群。第二位的 CM L 194 ×CM L 166 亲本组合类似 合奠定基础。 四 平 头 群 和 旅 大 红 骨 群; CM L 161 × CA 339 和 References CM L 171 × CA 339 的 亲 本 组 合 属 于 热 带 硬 粒 型 (G25) 和旅大红骨群。 [ 1 ]  Fan X 2 ( 番兴明) , T an J ( 谭静 ) , H uang B 2H ( 黄必华) et M a l. A nalysis of com b in ing ab ility and hetero tic p attern s of 3 讨论 quality p ro tein m aize inb red s. A cta A g ronom ica S in ica ( 作物 学报) , 2001 (6) : 986 992 ~ 吴景锋[ 8 ] 根据系谱推测, 将我国玉米种质划分 [ 2 ]  Fan X 2 ( 番兴明) , T an J ( 谭静 ) , H uang B 2 ( 黄必华) et M H 为国内系和国外系; 曾三省 [ 9 ] 也曾将我国种质划分 a l. A nalysis of com b in ing ab ility and hetero tic g roup s of yel2 为国内系和国外系两大类。但这只是一个粗略的模 low g rain quality p ro tein m aize inb red s. H ered itas (Beijing ) ( 遗传) , 2001 (6) 式。在本研究中, 南非的温带和热带导入种质与国 [ 3 ]  Saghai M aroof M A et a l. Ex trao rd inarily po lym o rp h ic m i2 内 的 四 平 头 种 质 划 在 同 一 个 杂 种 优 势 群; 部 分 cro satellite DNA in barley: sp ecies d iversity, ch rom o som e C I M YT 的热带、亚热带种质与旅大红骨群划在 M location and pop u lation dynam ics. P roc N a tl A cad S ci. 同一群。分析其原因有三: 第一是以往的划分方法 ~ U SA , 1984 (91) : 5466 5470 主要是根据杂交种的表现进行划分, 并未做广泛的 [ 4 ]  Sm ith J S C et a l. A n evaluation of the u tility of SSR loci as 特殊配合力分析和分子标记分析, 有一定的局限 m o lecu lar m arkers in m aize: Com p arison w ith data from R FL P s and p ed ig ree. T heor A pp l Genet, 1997 ( 95) : 163~ 性。地域远的自交系间不一定存在杂种优势, 种质 173 的地理远缘并不完全代表遗传远缘; 第二, 分析的 [ 5 ]  Sneah P H A , Sokal R R. N um erica l T ax onom y. F reem an, 材料有限, 不能代表整个热带、亚热带玉米种质; San F rancisco. 1973. 第三, 本研究所采用的这些热带、亚热带 Q PM 自 [ 6 ]  Roh lf F J. N T S YS 2p c N um erica l T ax onom y and M u ltiva ri2 交系经过多年的适应性改良, 已经基本适应了温带 a te A na ly sis S y stem , version 1. 80. N ew Yo rk: Exeter Pub li2 cation, 1990. 地区的生态条件。 [ 7 ]   M elch inger A E. T he Genetic and E xp loita tion of H eterosis 本研究将 22 个玉米自交系划分为 5 群, 除了 in C rop s. A SA 2CSSA 2SSSA M ad ison, 1999, W I 53711: 99 已确定的 4 个杂种优势群外, 还增加一个新群, 这 ~ 118 与许多研究结果一致。陈彦惠等[ 10 ] 根据杂种优势和 [ 8 ]   u J 2F ( 吴 景 锋 ). Comm en tary on germ p lasm sou rces of W 配合力表现将我国玉米种质划分为四平头、旅大红 m aize hyb rid s in Ch ina. S cien tia A g ricu ltu ra S in ica ( 中国农 业科学) , 1983, (2) : 1 8 ~ 骨、兰卡斯特、瑞得和难以分群的其他类型共五 [ 9 ]  Zeng S 2Sh ( 曾三省). T he m aize germ p lasm base of hyb rid s in 群; 王懿波等[ 11 ] 根据系谱来源、杂种优势和配合力 Ch ina. S cien tia A g ricu ltu ra S in ica ( 中国农业科学 ) , 1990, 表现把我国主要玉米自交系分为 5 群; 袁力行等[ 13 ] ~ 23 (4) : 1 9 利用 R FL P 和 SSR 标记将 29 个广泛应用的骨干系 [ 10 ]  Chen Y 2 ( 陈彦惠) , L iu X 2Z ( 刘新芝) , Peng Z2 ( 彭泽斌). H B 划分为四平头、旅大红骨、兰卡斯特、瑞得和 PA C lassification of hetero sis pop u lation s and the con struction of hetero sis m odels fo r m aize inb red lines. J ou rna l of H enan A 2 群共 5 类。但这并不等于说所有玉米种质就只有 5 g ri U n iversity ( 河南农业大学学报) , 1995, 29 (4) : 56 61 ~ 个杂种优势群, 随着研究材料的增加, 有可能会发 [ 11 ]   ang Y 2 ( 王懿波) , W ang Z2 ( 王振华) , W ang Y 2P ( 王永 W B H 现新的杂种优势群。 普) et a l. Stud ies on the hetero sis u tilizing m odels of m ain 本研究结果对 Q PM 种质改良和创新具有指导 m aize germ p lasm in Ch ina. S cien tia A g ricu ltu ra S in ica ( 中国 意义, 我们可用同一优势群内的热带、亚热带系来 农业科学) , 1997, 30 (4) : 16 24 ~ [ 12 ]  Zhao J 2 ( 赵久然) , Guo J 2 ( 郭景伦) , Guo Q ( 郭强) et a l. 改良温带自交系。因为热带、亚热带玉米种质中蕴 R L H etero tic g roup ing of 25 m aize inb red s w ith RA PD m arkers. 藏着丰富的遗传多样性, 具有温带玉米种质所不具 A cta A g ricu ltu rae B orea li2 in ica ( 华 北 农 学 报 ) , 1999, 14 S 备的许多抗逆性, 把热带、亚热带种质导入温带种 ~ (1) : 32 37 质中合成既有温带种质的适应性、又具有热带、亚 [ 13 ]  Yuan L 2 ( 袁力行) , Fu J 2 ( 傅骏骅) , Zhang SH 2 ( 张世 X H H 热带种质抗逆性的新种质, 这样既改良了温带系的 煌 ) et a l. H etero tic g roup ing of m aize inb red lines u sing 若干缺点、拓宽了温带种质的遗传基础、提高了品 R FL P and SSR m arkers. A cta A g ronom ica S in ica ( 作 物 学 报) , 2001, 27 (2) : 149 156 ~ 种的生态适应性, 又保持了原有的杂种优势群和杂 种优势模式, 为育成优质、高产、多抗杂交种新组 zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/ © 1995-2004 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.