1. BAB II
PERENCANAAN
1. Jenis bahan pangan yang akan dianalisis adalah cumi-cumi bakar
2. Standar mutu mikrobiologi cumi-cumi berdasarkan SNI.
Acuan SNI : Cumi-cumi ,
No SNI : SNI 2719.3:2011
Tabel 1. Data SNI batas cemaran mikroba cumi-cumi bakar.
No Kriteria Uji Satuan Persyaratan
1 ALT Koloni/g Maksimal 1 x 10 5
2 Escherichia coli APM/g <3
3 Salmonella * Per 25 g Negatif
4 Vibrio Cholerae* Per 25 g Negatif
5 Staphylococcus aureus* Koloni/g Maksimal 1,0 x 10 3
6 Kapang Koloni 0
7 Air % Maksimal 20
8 Garam % Maksimal 15
9 Abu total % 17
10 Abu tak larut asam % 0,3

2. 11 Merkuri (Hg)* Mg/kg Maksimal 0,5
12 Kadmium (Cd)* Mg/kg Maksimal 0,1
13 Timbal (Pb) * Mg/kg Maksimal 0,3
Catatan : * bila diperlukan
3. Lokasi pengambilan contoh
NO Lokasi Waktu tempuh Penanganan
antara lokasi dan
laboratorium
1 Mie Yogya 10 Menit Dikemas dengan
steroform
2 Mbah Jingkrak 10 Menit Dikemas dengan
steroform
3 Dapur geulis 5 Menit Dikemas dengan
steroform
4 Sea Food Taken 15 Menit Dikemas dengan
steroform
5 Bumbu desa 15 menit Dikemas dengan
steroform
4. Analisis kualitatif dan kuantitatif yang dilakukan.
Tabel 3. Data uji kuantitatif
NO UJI
1 Uji total mikroba
2 Uji koliform
3 Uji kapang khamir

3. Tabel.3.1 Uji kualitatif
NO Uji
1 Uji Proteolitik
2 Uji Lipolitik
3 Uji salmonella
Prosedur
pembuatan Ekstrak Cumi
Cumi di potong-potong dimasukan kedalam blender ,kemudian di blender hingga
halus. Setelah halus ekstrak disaring dengan menggunakan kain saring , agar sisa
sisa cumi yang berukuran besar dapat tersaring. Karena dapat mengganggu proses
pengenceran. Setelah proses penyaringan maka ekstrak pun dapat digunakan
untuk uji lebih lanjut.

4. 4.1 Uji total mikroba :
1 ml
1 ml 1 ml
20 ml sampel
80 ml larutan pengencer 9 ml 9 ml
9 ml 9 ml
10-2
100 0,1 ml
10-1 10-2 10-3 10-4
10-5
1 ml
PCA {
SMA
APDA {
VJA
{
Inkubasi selama 2 hari 37o C dalam keadaan terbalik
Analisis Jumlah koloni

5. Tabel 5. Data hasil analisis hitung cawan
Tingkat 10 -1 10 -2 10 -3 10-4 10-5
pengenceran
Tabel 6. Alat dan bahan yang dibutuhkan untuk uji total mikroba .
No Nama alat Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ulangan 4 Jumlah
1 Cawan Petri Total Total Total Total 300 Buah
mikroba : mikroba : mikroba : mikroba :
15 x 5 = 15 x 5 = 15 x 5 = 15 x 5 =
75 total 75 total 75 total 75 total 300 Buah
kapang kapang kapang kapang
khamir : khamir : khamir : khamir :
15 x 5 = 15 x 5 = 15 x 5 = 15 x 5 =
75 Total 75 Total 75 Total 75 Total 300 Buah
S.aureus : S.aureus : S.aureus : S.aureus :
15 x 5 = 15 x 5 = 15 x 5 = 15 x 5 =
75 75 75 75
2 Erlenmeyer Total Total Total Total 20 Buah
larutan mikroba : mikroba : mikroba : mikroba :
pengenceran 1x5=5 1x5=5 1x5=5 1x5=5
(100 ml). total total total total 20 Buah
kapang kapang kapang kapang
khamir : 1 khamir : 1 khamir : 1 khamir : 1
x5=5 x5=5 x5=5 x5=5
Total Total Total Total 20 Buah
S.aureus : S.aureus : S.aureus : S.aureus :
1 x 5=5 1 x 5=5 1 x 5=5 1 x 5=5
3 Gelas Ukur Total Total Total Total 20 Buah

6. 100 ml mikroba : mikroba : mikroba : mikroba :
1x5=5 1x5=5 1x5=5 1x5=5
Total Total Total Total 20 Buah
kapang kapang kapang kapang
khamir : khamir : khamir : khamir :
1x5 1x5 1x5 1x5
Total Total Total Total 20 Buah
E.coli : E.coli : E.coli : E.coli :
1x5 1x5 1x5 1x5
4 Tabung reaksi Total Total Total Total 80 buah
* Mikroba : Mikroba : Mikroba : Mikroba :
4 x 5 = 20 4 x 5 = 20 4 x 5 = 20 4 x 5 = 20
Total Total Total Total 80 buah
kapang kapang kapang kapang
khamir ; khamir ; khamir ; khamir ;
4 x 5 =20 4 x 5 =20 4 x 5 =20 4 x 5 =20
Total Total Total Total 80 buah
E.coli : E.coli : E.coli : E.coli :
4 x 5 = 20 4 x 5 = 20 4 x 5 = 20 4 x 5 = 20
5 Pipet mohr Total Total Total Total 4 buah
1ml * Mikroba : Mikroba : Mikroba : Mikroba :
1 1 1 1
Total Total Total Total 4 buah
kapang kapang kapang kapang
khamir ; khamir ; khamir ; khamir ;
1 1 1 1
Total Total Total Total 4 buah
E.coli : E.coli : E.coli : E.coli :
1 1 1 1
6 Pipet mohr 10 3 ulangan x 5 produk = 15 buah 15 buah
ml *

7. 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
9 ml 9 ml 9 ml 9 ml 9 ml
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5
Na +1 % + 1 tetes NR
Inkubasi 30o C, 2 hari
Amati dan hitung (jika atas putih bawah merah =
ditumbuhi bakteri lipolitik)

8. Tabel 6.1 Kebutuhan Alat pada Uji Kualitatif
No Alat Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah
1 2 3 4
1 Cawan 2 x 5 =10 2 x 5 =10 2 x 5 =10 2 x 5 =10 40 buah
Tabel 6.2 Kebutuhan bahan Uji kualitatif
No Bahan Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah
1 2 3 4
1 SMA 15 x 2 x 15 x 2 x 15 x 2 x 15 x 2 x 600 ml
5 = 150 5 = 150 5 = 150 5 = 150
ml ml ml ml

9. 4.2 Uji Coliform :
50 ml sampel
100 ml
larutan
pengencer
1 ml
1 ml
1 ml 0,1 ml
1 ml
1 ml
100 10-1 10-2
1 ml 1 ml 1 ml
Uji Penduga
Media : BGLBB
Positif (gas) Negatif

10. Gores 1 ose dari tabung positif
pada media EMBA beku
Uji Penguat
Inkubasi selama 24 Jam dengan suhu 37o C
negatif
positif
Uji Lengkap
Gores radian pada
Inokulasi media NA
dalam LB
Inkubasi 24 jam suhu 37o C
Pewarnaan Gram
Tabel 7. Alat dan Bahan Uji Penduga Koliform
1. Alat
No Nama Alat Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah
1 2 3 4
1 Tabung 9 tabung 9 tabung 9 tabung 9 tabung 135
reaksi * x 5 x 5 x 5 x 5 Buah

11. sampel = sampel = sampel = sampel =
45 45 45 45
2 Erlenmeyer 1x5=5 1x5=5 1x5=5 1x5=5 20 buah
larutan
pengencer
(100 ml)
3 Gelas Ukur 1 x 5 = 5 1x5=5 1x5=5 1x5=5 20 buah
100 ml
4 Pipet mohr 1 x 5 = 5 1x5=5 1x5=5 1x5=5 20 buah
1 ml *
5 Tabung 9 tabung 9 tabung 9 tabung 9 tabung 135
durham x 5 x 5 x 5 x 5 Buah
sampel = sampel = sampel = sampel =
45 45 45 45
6 Pipet mohr 4 ulangan x 5 produk : 20 20 buah
10 ml
7 Bunsen 1 buah 1 buah
8 Autoclave 1 buah 1 buah
9 Inkubator 1 buah 1 buah
2. Bahan
N Nama Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ulangan 4 Jumla
o Bahan h
1 LB 9 tabung x 9 9 tabung x 9 9 tabung x 9 9 tabung x 9 1620
ml x 5 ml x 5 ml x 5 ml x 5 ml
sampel : sampel : sampel : sampel :
405 ml 405 ml 405 ml 405 ml
2 Larutan 100 x 5 = 100 x 5 = 100 x 5 = 100 x 5 = 2000
Pengenc 500 ml 500 ml 500 ml 500 ml ml
er

12. 3 NaCl 17 gr
Tabel 8. Data hasil uji penguat
Koliform Fekal Koliform non fekal
Tabel 9. Alat dan bahan uji penguat
1. Alat
No Nama Alat Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah
1 2 3 4
1 Cawan 2 buah 2 buah 2 buah 2 buah 8 buah
Petri
2 Jarum ose 1 1 1 1 4 buah
3 Bunsen 1 1 1 1 4 buah
4 Autoclave 1 buah 1 buah
5 Inkubator 1 buah 1 buah
Bahan
No Nama Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah
Bahan 1 2 3 4
1 EMBA 2 buah x 2 buah x 2 buah x 2 buah x 40
5 sampel : 5 sampel : 5 sampel : 5 sampel :
10 10 10 10

13. Tabel 10. Tabel Alat Uji Pelengkap
No Nama Alat Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah
1 2 3 4
1 Cawan 5 sampel 5 sampel 5 sampel 5 sampel 20 buah
Petri
2 Jarum ose 1 1 1 1 4 buah
3 Bunsen 1 1 1 1 4 buah
4 Tabung 1 buah x 1 buah x 1 buah x 1 buah x
reaksi 5 sampel 5 sampel 5 sampel 5 sampel 20 buah
= 5 buah = 5 buah = 5 buah = 5 buah
5 Tabung 1 buah x 1 buah x 1 buah x 1 buah x
Durham 5 sampel 5 sampel 5 sampel 5 sampel 20 buah
= 5 buah = 5 buah = 5 buah = 5 buah
6 Autoclave 1 buah 1 buah
7 Inkubator 1 buah 1 buah
Tabel 11. Tabel bahan uji pelengkap
No Nama Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ulangan 4 Jumlah
Bahan
1 NA 1 cawan x 1 cawan x 1 cawan x 1 cawan x 300 ml
15 ml x 5 15 ml x 5 15 ml x 5 15 ml x 5
= 75 ml = 75 ml = 75 ml = 75 ml
2 LB 1 tabung 1 tabung 1 tabung 1 tabung 180 ml
x 5 x 5 x 5 x 5
sampel x sampel x sampel x sampel x
9 ml : 45 9 ml : 45 9 ml : 45 9 ml : 45
ml ml ml ml

14. Kendala yang dihadapi dan alternatif solusinya
Kendala kendala yang mungkin dihadapi pada praktikum ini adalah
keterbatasan alat. Keterbatasan alat ini dikarenakan penggunaan alat dilakukan
secara bersamaan dengan Program Keahlian lain yang melakukan pengamatan
terhadap mikroba. Hal ini dapat diatasi dengan cara meminimalkan penggunaan
alat-alat tersebut , dengan cara merinci peralatan pada setiap metode praktikum
yang dilakukan. Selain itu keterbatasan alat pun bisa terjadi karena penggunaan
nya bersamaan dengan kelompok yang lain sehingga harus saling tunggu untuk
menggunakan alat tersebut. Hal ini tidak efektif dikarenakan waktu yang terbuang
cukup lama. Jenis sampel yang digunakan oleh kelompok 3 adalah cumi cumi
bakar , dimana penanganannya cukup terbilang sederhana karena jarak
pengambilan sampel ini dari ruang laboratorium ke restaurant tidak memakan
waktu terlalu lama. Pembagian waktu kerja juga menjadi salah satu kendala
dikarenakan banyak nya analisis yang dilakukan pada satu hari tersebut. Selain itu
kemampuan praktikan pun menjadi salah satu kendala lainnya. Untuk itu sebelum
praktikum praktikan harus mengerti tentang metode praktikum yang akan
dilakukan.

15. UJI IMVIC
Koloni fekal Sebagai kontrol
Kultur murni E. coli
1 koloni
10 ml 10 ml 10
ml
2 ml larfis TB Koser sitrat MRVP
10 ml 10 ml 10 ml
TB Koser Sitrat MRVP
Uji IMVIC
Uji Medium Pereaksi Reduksi Positif
Indol Tryptone Broth Konvacs Merah
Merah metil MRVP Merah metal Merah
Voges proskauer MRVP 5% naftol dan Warna merah tua
40% KOH
Sitrat Koser sitrat - Timbulnya
kekeruhan

16. Tabel 12 . Kebutuhan Bahan Uji IMVIC
No Nama Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ulangan 4 Jumlah
Bahan
1 Tryothone 9 x 5 = 45 9 x 5 = 45 9 x 5 = 45 9 x 5 = 45 2g
broth
2 MRVP 9 x 4 x 5 = 9 x 4 x 5 9 x 4 x 5 9 x 4 x 5 13.6 g
180 ~200 = 180 = 180 = 180
~200 ~200 ~200
3 Koser 1x5=5 1x5=5 1x5=5 1x5=5 20 ml
sitrat
4 Reagen 1 Botol 1 Botol
kovacks
5 Merah 1 Botol 1 Botol
metil
6 40 % 1 Botol 1 Botol
KOH
7 5 % 1 Botol 1 Botol
Naftol
Kebutuhan Alat Uji IMVIC
No Nama Alat Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah

17. 1 2 3 4
1 Tabung 8 x 5 8 x 5 8 x 5 8 x 5 160
reaksi untuk sampel : sampel : sampel : sampel :
sampel 40 40 40 40
2 Tabung 1 1 1 1 4 buah
reaksi untuk
pengenceran
sampel
3 Tabung 1 1 1 1 4 buah
reaksi untuk
Kontrol
4 Jarum Ose 1 1 1 1 4 buah
5 Bunsen 1 1 1 1 4 buah
6 Autoclave 1 buah 1 buah
7 Inkubator 1 buah 1 buah

18. Uji Salmonnella
PRA ENRICHMEN
Homogenisasi
25 g/25 ml contoh dalam 225 ml Lactose Broth
Inkubasi 24 jam 2 jam, 35o C 1o C
ENRICHMEN
1 ml 1 ml
Inkubasi 24
9 ml 9 ml
jam 2 jam,
SCB
TTB 35o C 1o C
HE XLD BSA HE XLD BSA
Inkubasi 24 jam 2 jam, 35o C 1o C
Ambil 2 atau lebih koloni terduga pada media agar selektif, gores
dan tusuk kedalam media agar miring.
Inkubasi 24
TSI jam 2 jam, LIA
35o C 1o C
Identifikasi

19. Tabel 6.3 Kebutuhan alat uji Salmonella
No Nama Alat Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah
1 2 3 4
1 Tabung 4 x 5 = 4 x 5 = 4 x 5 = 4 x 5 = 80 buah
Reaksi 20 20 20 20
2 Cawan 6 x 5 = 6 x 5 = 6 x 5 = 6 x 5 = 120 buah
Petri 30 30 30 30
3 Erlenmeyer 1 1 1 1 5 buah
Tabel 6.4 Kebutuhan bahan uji Salmonella
No Nama Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah
bahan 1 2 3 4
1 TTB 1 x 5 x 9 1 x 5 x 9 1 x 5 x 9 1 x 5 x 9 2g
= 45 ml ~ = 45 ml ~ = 45 ml ~ = 45 ml ~
50 50 50 50
2 SCB 5 x 9 = 5 x 9 = 5 x 9 = 5 x 9 = 200 ml
45 ~50 45 ~50 45 ~50 45 ~50
ml ml ml ml
3 HE 5 x 15 = 5 x 15 = 5 x 15 = 5 x 15 = 300 ml
75 75 75 75
4 XLD 5 x 15 = 5 x 15 = 5 x 15 = 5 x 15 = 300 ml
75 75 75 75
5 BSA 5 x 15 = 5 x 15 = 5 x 15 = 5 x 15 = 300 ml
75 75 75 75
6 TSI 5 x 15 = 5 x 15 = 5 x 15 = 5 x 15 = 300 ml
75 75 75 75

20. TTB : Tetrathionat broth
BSA : Bismuth Sulfite Agar
HE :Hecton Enterik
SCB : Selenity Cystine Broth
XLD : Xylose Lysine Desoxycholate
TSI : Triple Sugar Iron