More Related Content
What's hot
What's hot (20)
Иммуногистохимийн арга
- 2. Эд дэх эсийн байрлал, тэдгээрийн гадаргуугийн байрлал болон эс доторх эрхтэнцэрүүдийн гадаргуугын антигенийг тэдгээрт өвөрмөц, флюорхром болон фермент зүйсэн эсрэг бие ашиглан тодорхойлох арга.
- 6. Үйлдлийн дараалал 1. Fixing and embedding the tissue 2. Cutting mounting the section 3. Deparaffinizing and rehydrate section 4. Antigen-ийг сэргээх 5. Иммугистохими будах 6. Угаан будаг шингэлэгчээр тогтворжуулах 7. Микроскопт харах
- 7. 1.Fixing and embedding the tissue Шинжлэх эдээ 10% neutral formalin, zinc formalin -р тогтворжуулж, парафинаар хучиж хөлдөөж бэлтгэнэ.
- 8. 2.Сutting mounting the section
- 9. Deparaffinizing rehydrate section • Парафингүйжүүлж угаана. 2-10min Ксилол 2min 100% ethanol 2min 95 % 2min 80 % 2min 70 % 5min урсгал ус 5min нэрмэл усаар тус тус угаана.
- 10. Rehydrate section • Эндоген пероксидазаг зогсоохын тулд (block) метанол ба 30% устөрөгчийн хэт ислийн уусмалд дэвтээнэ. Өрөөний температурт 10min • Дахин 5 min нэрмэл усанд, 5min PBS нд угаана.
- 11. Antigen retrival • Дулааны нөлөөгөөр эпитопийг сэргээх Бичил зууханд 2-5 min байлгаж stained dish авч өрөөний t° т хөргөөнө. 37°C т 30% ямааны серумтай PBS уусмалд байлгана.
- 12. Immunohistochemistry staining Антигентэй өвөрмөц эсрэг биеийг (primary antibody) нэмээд 4 °C т инкубатанд хийнэ. Гаргаж аваад PBS тэй слайдаа 3-5 min угаана.
- 13. Immunohistochemistry staining • Хоёрдогч эсрэг бие нэмж 37°C т 30мин байлгана. • PBS т 3 min угаана. • DAB AEC -г өнгө үүстэл нэмж ургсал усанд зөөлнөөр 1-2 min угаана.
- 14. Микроскопт харахад бэлдэх 2min 100 % ethanol , 2×5 min ксилол ор угааж өнгөгүй бальзам түрхэж микроскопт харахад бэлэн болно.
- 15. DAB 3,3 diaminobenzidine • Пероксидазаг исэлдүүлж устөрөгчийн хэт исэл үүсгэснээр бор өнгийг өгнө. Hematoxylin light green fast red methylin blue toliudine blue
- 16. AEC aminoehtylcarbazole Улаан өнгө үзүүлнэ.
- 17. IHC methods 1. Direct method 2. Indirect method 3. PAP method 4. ABC method 5. LSAB method
- 18. Direct and indirect method
- 19. Avidin Biotin Complex method
- 20. Peroxydase Anti Peroxydase method
- 21. Labeled StreptAvidin Biotin method