1. REZUMATUL TEZEI DE DOCTORAT
‘Utilizarea markerilor ADN în analiza genetică a glomerulosclerozei focale
segmantale şi susceptibilităţii la TB‘
Autor: Asist. univ. dr. GEORGIANA DUŢĂ CORNESCU
În lucrarea de faţă, importanţa markerilor ADN în genetica medicală este exemplificată prin
analizarea glomerulosclerozei focale segmentale, forma autozomal dominantă (FSGS), pe de o
parte şi a susceptibilităţii organismului uman la TB, pe de altă parte.
Teza de doctorat e structurată pe patru capitole, la care se adaugă concluziile generale,
lista lucrărilor bibliografice (163) folosite în această lucrare pecum şi lista lucărilor ştiinţifice
personale. Primele două capitole, de teorie, cuprind o prezentare generală a aspectelor privind
cuantificarea variaţiei genetice în populaţiile umane şi, repectiv, analiza polimorfismelor ADN
asociate cu glomeruloscleroza focala segmentală şi susceptibilitatea la TB. Capitolul III cuprinde o
descriere a tehnicilor de genetică moleculară şi de analiză statistică folosite pentru realizarea părţii
practice a acestei lucrări, iar ultimul capitol prezintă pe larg rezultatele şi discuţiile activităţilor de
cercetare care au urmărit o serie întreagă de aspecte legate de utilizarea markerilor ADN în
identificarea variaţiei genetice umane, asociate pe de o parte cu un caracter mendelian şi anume
forma cu transmitere autozomal dominanta a FSGS şi, respectiv
susceptibilitatea la tuberculoză.
Primul obiectiv major al acestei cercetări a urmărit identificarea unui nou locus posibil
implicat în determinismul genetic al FSGS cu transmitere autozomal dominantă, analizând doua
familii italiene afectate de aceasta maladie. Pentru aceasta, am selectat patru gene candidate
care pot să determine forma autzomal dominantă de FSGS (ACTN4, CD2AP, ZO1 şi ITGA3),
precum şi markerii STR cei mai potriviţi pentru realizarea analizelor de linkage. Am aplicat tehnici
de genetică moleculară (PCR, PAGE-silver staining, secvenţiere) pentru identificarea variantelor
alelice individuale şi am utilizat programe de calculator specifice pentru identificarea unui linkage
pozitiv între o anumită regiune cromozomala şi forma de FSGS care afectează cele două familii.
Rezultatele obţinute în urma experimentelor efectuate au arătat pentru prima dată că regiunea
17q12 – q23.3, regiune delimitată de markerii STR D17S588 – D17S1853, este implicată în
determinismul genetic al FSGS cu transmitere autozomal dominată. Această regiune,
determinată prin metoda genelor candidate, cuprinde şi gena ITGA3 care codifică pentru o
proteină esenţială în medierea aderarii podocitelor la membrana bazală glomerulară şi la
matrixul extracelular.
A doua parte a cercetarii noastre a presupus analiza implicării polimorfismelor Taq I şi Apa I
ale genei VDR în determinarea susceptibilităţii organismului uman la dezvoltarea TB utilizând
markeri ADN. Acest studiu este unul de tip caz control, fiind analizate două loturi, lotul martor,
format din 110 indivizi sanatoși si lotul de pacienţi, alcătuit din 68 de persoane infectate cu M.
tuberculosis care au dezvoltat TB. Acest studiu, raportează pentru prima dată posibila corelatie
între genotipul "aa" corespunzător polimorfismului Apa I şi rezistenţa la TB (p=0,006). De
asemenea, studiul nostru de tip caz-control, asupra implicării polimorfismelor ApaI şi TaqI
în determinismul susceptibilităţii organismului uman la TB, este primul de acest tip din
ţară, el putând fi extins la alte polimorfisme de tip SNP ale genei VDR.
Studiile realizate, fie analize de linkage, fie de tip caz control, au dovedit eficienţa
utilizării markerilor ADN în genetica medicală (pentru identificarea factorilor genetici ai
unor maladii sau a susceptibilităţi umane la o serie de boli infectioase) şi în genetica
populaţiilor (pentru stabilirea relatiilor genetice între populatiile umane).